（药剂学专业论文）褪黑素缓释制剂的研究.pdf

j鼬崩d月“ 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进 行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何 其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡 献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人 承担。 论文作者签名：邀 e t 期：包：主2 关于学位论文使用授权的声明 本人同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的印刷件和电子 版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部 或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手 段保存论文和汇编本学位论文。 ( 保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名：豳亟重导师签名：e t 期：迎f 芝：上，曼l - 、 中文摘要1 a b s t r a c t 5 符号说明1 0 前言1 1月u 百ll 1 褪黑素的功能及应用1 1 1 1 褪黑素的生物学效应及应用现状1 1 1 2 褪黑素应用存在的不足：1 2 2 植入型药物释放系统及其应用一1 2 3 可降解型注射式植入型药物释放系统1 3 3 1 脂质体制剂及其特点1 3 3 2 微球制剂及其特点1 3 3 3 原位凝胶制剂及其特点1 4 3 4 脂质体、微球制剂与原位凝胶结合的优势1 4 4 本课题的设计思路及研究内容15 第一章褪黑素脂质体的研究1 6 第一节褪黑素脂质体的制备及理化性质研究1 6 一、实验材料16 l 主要仪器16 2 药品与试剂1 6 二、方法与结果17 1m l t 药物含量及包封率测定方法的建立1 7 1 1 检测波长的确定1 7 1 2 含量测定方法学考察1 7 1 3m l t 脂质体包封率测定方法的建立2 0 2m l t 理化性质研究2 l 2 1m l t 溶解性能研究2 1 2 2m l t 表观油水分配系数的测定2 2 3m l t 脂质体的制各2 2 3 1 制备方法2 2 3 2 单因素考察m l t 脂质体的处方与工艺2 2 3 3 均匀设计优化处方和工艺2 4 3 4 优化处方和工艺的重现性考察2 5 4 脂质体的理化性质研究2 6 4 1 脂质体的外观形态观察2 6 4 2 粒度分布及z e t a 电势的测定2 6 4 3p h 值的测定2 6 4 4 包封率2 7 三、讨论2 7 第二节褪黑素脂质体体外释药性及初步稳定性研究2 8 山东人学硕士学位论义 一、实验材料2 8 l 主要仪器2 8 2 药品与试剂2 8 二、方法与结果2 8 1 体外释放性研究2 8 1 1 释放介质的选择2 8 1 2 体外释放试验方法学考察2 8 1 3 体外释放度的测定3 1 1 4 体外释药动力学模型的拟合3 3 2 脂质体初步稳定性研究3 3 三三、讨论3 4 本章小结3 4 第二章褪黑素p l g a 微球的研究3 5 第一节褪黑素p l g a 微球的制备及理化性质研究3 5 一、实验材料3 5 1 主要仪器3 5 2 药品与试剂3 6 二、方法与结果3 6 lm l t - p l g a m s 药物含量及包封率测定方法的建立3 6 1 1 检测波长的选择3 6 1 2 含量测定方法学考察3 7 1 3m l t - p l g a m s 包封率及载药量测定方法的建立4 0 2m l t - p l g a m s 的制备4 1 2 1m l t - p l g a m s 的制备方法4 1 2 2 单因素考察m l t - p l g a m s 的处方与工艺4 l 2 3 正交设计优化m l t - p l g a m s 处方和工艺4 7 2 4 包封率及优化处方和工艺的重现性考察4 8 2 5 干燥m l t p l g a m s 的制备4 9 2 6m l t - p l g a m sd s c 分析4 9 3m l t - p l g a m s 理化性质研究5 0 3 1 微球的外观形态及粒度分布5 0 3 2 微球的再分散性5 1 三三、讨论5 2 1 乳化溶剂挥发法5 2 2m l t - p l g a m s 的制备5 2 2 1p l g a 的选择5 2 2 2 搅拌对微球制备的影响5 2 2 3 溶剂的选择5 3 2 4 乳化剂浓度对微球制备的影响5 3 2 5p l g a 浓度5 3 第二节褪黑素p l g a 微球体外释药性及初步稳定性研究5 3 2 山东大学硕士学位论文 一、实验材料5 3 1 主要仪器5 3 2 药品与试剂5 3 二、方法与结果5 4 1m l l p l g a m s 体外释药性研究5 4 1 1 释放介质的选择5 4 1 2 体外释放度试验方法学考察5 4 1 3 体外释放度的测定5 5 1 4 体外释药动力学模型的拟合与数据分析5 7 2 初步稳定性研究5 7 2 1 影响因素试验5 7 2 2 加速试验6 1 2 3 长期试验6 2 三、讨论6 3 1m l t - p l g a m s 释 孜6 4 2 初步稳定性考察6 4 本章小结6 4 第三章褪黑素脂质体、微球原位凝胶的制备及体外释药性研究6 5 第一节褪黑素脂质体原位凝胶与微球原位凝胶的制备6 5 一、实验材料6 5 1 主要仪器6 5 2 药品与试剂6 5 二、方法与结果6 5 l 原位凝胶的制备方法6 5 1 1 空白原位凝胶的制备6 5 1 2m l t 原位凝胶及脂质体、微球原位凝胶的制备6 6 2 胶凝温度的测定6 6 3p f l 2 7 浓度的筛选6 6 3 1p f l 2 7 浓度对胶凝温度的影响6 6 3 2p f l 2 7 浓度对凝胶通针性的影响6 7 三、讨论6 8 1 胶凝温度的测定方法6 8 2p f l 2 7 浓度的筛选6 8 第二节褪黑素脂质体原位凝胶及微球原位凝胶的体外释药性研究6 8 一、实验材料6 8 l 主要仪器6 8 2 药品与试剂6 8 二、方法与结果6 9 1 体外释放度的测定方法6 9 2m l t 原位凝胶体外释药性研究6 9 2 1m l t 原位凝胶体外释放度的测定6 9 2 2m l t 原位凝胶体外释药动力学模型的拟合7 0 山东人学硕十学位论义 3m l t 脂质体原位凝胶体外释药性研究7 0 3 1m l t 脂质体原位凝胶体外释放度的测定7 0 3 2m l t 脂质体凝胶体外释药动力学模型的拟合7 2 4m l t 微球原位凝胶体外释药性研究7 2 4 1m l t 微球原位凝胶体外释放度的测定7 2 4 2m l t 微球原位凝胶体外释药动力学模型的拟合7 4 三、讨论7 4 本章小结7 4 第四章褪黑素微球凝胶药代动力学研究7 5 一、实验材料7 5 l 主要仪器7 5 2 药品与试剂7 5 3 动物7 5 二、方法与结果7 6 1 血浆中褪黑素含量测定方法的建立7 6 1 1 大鼠血浆样品预处理方法7 6 1 2 体内分析方法的建立7 6 2 大鼠体内药代动力学实验8 0 2 1 实验方法8 0 2 2 血药浓度测定8 2 2 3 药物动力学参数的计算8 3 三、讨论8 4 1 测定方法的选择8 4 2 体内释药性8 4 3 微球凝胶植入剂与市售埋植剂的比较8 5 本章小结8 5 总结与展望一8 6 参考文献。9 0 致谢9 5 攻读学位期间发表的学术论文9 6 文献综述9 7 4 山东大学硕上学位论义 c a t a l o g c h i n e s ea b s t r a c t 1 e n g l i s ha b s t r a c t 5 s y m b o l i cd e s c r i p t i o n l ( ) p r e f a c e 11 1f u n c t i o n sa n da p p l i c a t i o n so fm l t 11 1 1b i o l o g i c a le f f e c t sa n da p p l i c a t i o n so fm l t 11 1 2p r o b l e m so f t h ea p p l i c a t i o no f m l t 1 ：1 2i n t r o d u c t i o n so f t h ei m p l a n t a b l ed r u gd e l i v e r ys y s t e m s 1 2 3b i o d e g r a d a b l ei n j e c t a b l ei m p l a n t a b l ed r u gd e l i v e r ys y s t e m s 13 ：；1i n t r o d u c t i o n so fl i p o s o m e s 13 ：；2i n t r o d u c t i o n so f m i c r o s p h e r e s 1 3 ：；3i n t r o d u c t i o n so f i n s i t ug e l 1 4 3 4a d v a n t a g e so f c o m b i n i n gt h el i p o s o m e sa n dm i c r o s p h e r e sw i t hg e l s 1 4 4d e s i g ni d e a sa n dc o n t e n t so ft h es t u d y 11 ； c h a p t e ro n e ：t h es t u d yo f m l r - l o a d e dl i p o s o m e s 1 6 s e c t i o no n e ：t h ep r e p a r a t i o na n dp h y s i c o c h e m i c a lc h a r a c t e r s t i c so fm l t - l o a d e d l i p o s o m e s 16 im a t e r i a l s 16 1i n s t r u m e n t s 16 ：! c h e m i c a l sa n dr e a g e n t s 16 i im e t h o d sa n dr e s u l t s 17 1d e t e r m i n a t i o nm e t h o do fd r u gc o n t e n ta n de n t r a p m e n te 币c i e n c y 17 1 1d e t e c t i o nw a v e l e n g t hf o rm l t 17 1 2m e t h o d o l o g i c a ls t u d yo fd e t e r m i n a t i o no fd r u gc o n t e n t 一17 1 3d e t e r m i n a t i o no fe n t r a p m e n te f f i c i e n c y 2 0 2s t u d i e so np h y s i c o c h e m c i a lp r o p e r i e so f m l t 2 1 2 1t h es t u d yo f s o l u b i l i t yo f m l t 2 l 2 2d e t e r m i n a t i o no f o i l w a t e rp a r t i t i o nc o e f j f i c i e n to f m l t 2 2 3p r e p a r a t i o no f m l ，r - l o a d e dl i p o s o m e s 2 2 3 1p r e p a r a t i o no fm l r - l o a d e dl i p o s o m e s 2 2 3 2t h es i n g l e f a c t o rr e s e a r c hf o rp r e p a r a t i o no f m l t - l o a d e dl i p o s o m e s 2 2 3 3u n i f o r me x p e r i m e n td e s i g nf o rp r e p a r a t i o no fm l t 1 0 a d e dl i p o s o m e s 一2 4 3 4r e p r o d u c i b i l i t ye x p e r i m e n t s 2 5 4s t u d i e so np h y s i c o c h e m i c a lp r o p e r i e s ：1 6 4 1m o r p h o l o g y 2 6 4 2d e t e r m i n a t i o no fs i z ed i s t r u b u t i o na n dz e t ap o t e n t i a l 2 6 4 3d e t e r m i n a t i o no f p h 2 6 4 4e n t r a p m e n te 壤c i e n c y 2 7 i i id i s c u s s i o n 2 7 s e c t i o nt w o ：i nv i t r od r u gr e l e a s ea n ds t a b l i l i t yo fm l t - l o a d e dl i p o s o m e s 2 8 im a t e r i a l s 2 8 1i n s t r u m e n t s 2 8 2c h e m i c a l sa n dr e a g e n t s 2 8 山东火学硕l 学位论义 i im e t h o d sa n dr e s u l t s ：1 8 1i nv i t r od r u gr e l e a s e 2 8 1 1t h ec h o i c eo f m e d i ar e l e a s e 2 8 1 2m e t h o d o l o g i c a ls t u d yo fi nv i t r od r u gr e l e a s e 2 8 1 3d e t e r m i n a t i o no fi nv i t r od r u gr e l e a s e 31 1 4t h ed y n a m i cm o d e lf i t t i n ga n dd a t aa n a l y s i s 3 3 2s t a b i l i t ys t u d i e s ：；： i i id i s c u s s i o n 3 4 c o n c l u s i o n ：；4 c h a p t e rt w o ：t h es t u d yo fm l t - p l g a - m s 3 5 s e c t i o no n e ：t h ep r e p a r a t i o na n dp h y s i c o c h e m i c a lc h a r a c t e r s t i c so f m l t - p l g a m s 3 5 im a t e r i a l s ：；5 1i n s t r u m e n t s ：；! ； ：! c h e m i c a l sa n dr e a g e n t s ：；6 i im e t h o d sa n dr e s u l t s ：；6 ld e t e r m i n a t i o nm e t h o do fd r u gc o n t e n ta n de n t r a p m e n te f f i c i e n c y 3 6 1 1d e t e c t i o nw a v e l e n g t hf o rm l t 3 6 1 2m e t h o d o l o g i c a ls t u d yo fd e t e r m i n a t i o no fd r u gc o n t e n t 3 7 1 3d e t e r m i n a t i o no f e n t r a p m e n te f f i c i e n c y 4 0 2p r e p a r a t i o no f m l ，r - p l g a m s 4 1 2 1p r e p a r a t i o no f m l r - p l g a m s 4 1 2 2t h es i n g l e f a c t o rr e s e a r c hf o rp r e p a r a t i o no f m l t - p l g a m s 4 1 2 30 n h o g o n a le x p e r i m e n td e s i g nf o rp r e p a r a t i o no f m l r - p l g a m s 4 7 2 4e n t r a p m e n te f f i c i e n c ya n dr e p r o d u c i b i l i t ye x p e r i m e n t s 4 8 2 5p r e p a r a t i o no fd r y i n gm l r - p l g a m s 4 9 2 6d i f f e r e n t i a ls c a n n i n gc a l o r i m e t r y ( d s c ) 4 9 3s t u d i e so np h y s i c o c h e m i c a lp r o p e r i e s ! ；( ) 3 1m o r p h o l o g ya n ds i z ed i s t r i b u t i o n 5 0 ：；2r e d i s p e r s i o n 5 1 i i id i s c u s s i o n ! ；：1 1e m u l s i f i l c m i o n s o l v e n te v a p o r a t i o nm e t h o d 5 2 2t h ep r e p a r a t i o no fm l t - p l g a m s 5 2 2 1s e l e c t i o no f t h ep l g a 5 2 2 2e f f e c to f t h es t i r r i n go ne n c a p s u l ee f f i c i e n c y 5 2 2 3s e l e c t i o no f t h ep l g a 5 3 2 4t h ee f f e c to fe m u l s i f i e rc o n c e n t r a t i o no ne n c a p s u l ee f f i c i e n c yo f m i c r o s p h e r e s 5 3 2 5t h ee f f e c to fp l g ac o n c e n t r a t i o n so ne n c a p s u l ee f f i c i e n c yo fm i c r o s p h e r e s ! ；3 s e c t i o nt w o ：i nv i t r od r u gr e l e a s ea n ds t a b l i l i t yo fm l t - p l g a m s 5 3 2 im a t e r i a l s 5 3 1i n s t r u m e n t s 5 3 2c h e m i c a l sa n dr e a g e n t s 5 3 i im e t h o d sa n dr e s u l t s 5 4 1i nv i t r od r u gr e l e a s eo fm l t - p l g a - m s 5 4 山东大学硕上学位论文 1 1t h ec h o i c eo fr e l e a s em e d i u m 5 4 1 2m e t h o d o l o g i c a ls t u d yo fi nv i t r od r u gr e l e a s e 5 4 1 3d e t e r m i n a t i o no fi nv i t r od r u gr e l e a s e 5 5 1 4t h ed y n a m i cm o d e lf i t t i n ga n dd a t aa n a l y s i s 5 7 2s t a b i l i t ys t u d i e s 5 7 2 1f a c t o r sa f f e c t i n gt e s t 5 7 2 2a c c e l e r a t e dt e s t 6 1 2 3l o n g t e r mt e s t 6 2 i i id i s c u s s i o n 6 3 1i nv i t r od r u gr e l e a s eo fm l r r - p l g a m s 6 4 2s t a b i l i t ys t u d i e s 6 z l c o n c l u s i o n 6 4 c h a p t e rt h r e e ：t h es t u d yo np r e p a r a t i o n sa n d i nv i t r or e l e a s e so fm l t - l i p g e la n d m l t m s g e l 6 5 s e c t i o no n e ：p r e p a r a t i o n so f m l t - l i p g e la n dm l r r - m s g e l 6 5 im a t e r i a l s 6 5 1i n s t r u m e n t s 6 5 ：! c h e m i c a l sa n dr e a g e n t s 6 5 i im e t h o d sa n dr e s u l t s 6 5 lt h ep r e p a r a t i o no fm l r - g e l 6 5 1 1t h ep r e p a r a t i o no f b l a n kg e l s 6 5 1 2p r e p a r a t i o n so fm l t - g e l m l t - l i p g e la n dm l ，r m s g e l 6 6 2d e t e r m i n a t i o no fg e l a t i o nt e m p e r a t u r e ：6 6 3s e l e c t i o no f p f l 2 7c o n c e n t r a t i o n 6 6 3 1t h ee f r e c to f p f l 2 7c o n c e n t r a t i o no ng e l a t i o nt e m p e r a t u r e 6 6 3 2t h ee f f e c to fp f12 7c o n c e n t r a t i o no nt h ea b i l i t yo ft h r o u g ht h es y r i n g e n e e d l e s 6 7 i i id i s c u s s i o n 6 8 ld e t e r m i n a t i o no fg e l a t i o nt e m p e r a t u r e 6 8 2s e l e c t i o no f p f l 2 7c o n c e n t r a t i o n 6 8 s e c t i o nt w o ：i nv i t r od r u gr e l e a s e so fm l t - l i p g e la n dm l r - m s - g e l 6 8 im a t e r i a l s 6 8 1i n s t r u m e n t s 6 8 2c h e m i c a l sa n dr e a g e n t s 6 8 i im e t h o d sa n dr e s u l t s 6 9 ld e t e r m i n a t i o no fi nv i t r od r u gr e l e a s e 6 9 2i nv i t r od r u gr e l e a s eo fm l r - g e l 6 9 2 1d e t e r m i n a t i o no fi nv i t r od r u gr e l e a s eo fm l t - g e l 6 9 2 2t h ed y n a m i cm o d e lf i t t i n ga n dd a t aa n a l y s i s 7 0 3i nv i t r od r u gr e l e a s eo fm l t - l i p g e l 7 0 3 1d e t e r m i n a t i o no fi nv i t r od r u gr e l e a s eo fm l t - l i p - g e l 7 0 3 2t h ed y n a m i cm o d e lf i t t i n ga n dd a t aa n a l y s i s 7 2 4i nv i t r od r u gr e l e a s eo fm l r - m s g e l 7 2 4 1d e t e r m i n a t i o no fi nv i t r o