（分析化学专业论文）液质联用技术在食品安全检测中的应用研究.pdf

摘要 摘要 本研究的主要目的是为食品安全检测建立高效分离的、高选择性和高灵敏度的多残 留关键技术和确证方法。本文将先进的高效液相色谱一质谱联用技术应用于食品安全检 测中，建立了四类有害物质残留量的一系列检测方法。这四类研究对象包括1 0 种禁用 染料、8 种禁用兽药和2 类有限量规定的兽药，都是食品安全检测中重点关注的物质。 建立的所有方法均经确证并已应用于实际检测，解决了食品安全检测中的系列技术难 题。归纳出了一个应用高效液相色谱一质谱联用技术检测食品中有害物质方法开发的基 本模型，为开发同类方法提供了理论指导和范例。同时对化合物分子在二级质谱内的碎 裂方式和机理进行了初步理论探讨。 提出了用高效液相色谱法( h p l c ) 同时测定食品中苏丹l 4 号染料的方法，食品中的 苏丹染料用正已烷提取，经中性氧化铝固相萃取柱净化后，用高效液相色谱分离，二极 管阵列检测器检测定量，并根据可见光谱图的相似系数进行定性。 提出了用h p l c 一离子阱质谱联用法同时鉴定和分析食品中苏丹l 4 号染料的方 法。样品用甲醇超声提取1 5 m i n ，静置过滤后直接进行仪器检测。采用a g i l e n tz o r b a x x b c 1 8 色谱柱，0 1 的乙酸溶液和乙腈( 1 5 ：8 5 ，v ) 为流动相来分离四种染料。采用 e s i 离子阱质谱进行质谱检测，质谱条件根据被测物分子量采用智能模式选定。对二级 质谱的碰撞能量进行了优化。分析了苏丹染料分子在质谱中的碎裂方式和机理，纠正了 权威文献上关于苏丹4 号分子结构及其谱图解析的错误。方法检出限可达l n g m l ，线 性范围为5 1 0 0 n g m l ，加标回收率在8 5 9 7 之间。本方法列为中华人民共和国检验 检疫行业标准。 建立了一个用凝胶渗透色谱( g p c 卜h p l c 一二级质谱( m s m s ) 联用技术同时检测辣 椒制品中苏丹l 一4 号、苏丹橙g 、苏丹红b 、苏丹红g 、苏丹红7 b ，黄油黄和对位红等 1 0 种禁用染料的方法。用g p c 对辣椒制品提取液进行净化。h p l c 以甲酸水溶液和甲 醇为流动相，通过i n e r t s i lc18 液相色谱柱使待测物质分离开，通过正模式电喷雾电离二 级质谱检测。对于所测的禁用染料，浓度线性响应范围在3 个数量级，在不同基质中的 检出限( l o d ) 可达到0 1 1 8 n g g ，定量限( l o q ) 可达到o 4 5 0 n g g 1 0 种禁用偶氮染 i 摘要 料在5 种基质中的方法回收率在8 1 7 9 2 9 之间。日内和日间精密度( 相对标准偏差 r s d s ) 分别为2 9 7 8 和3 9 8 1 ，。 建立了固相萃取( s p e 卜h p l c m s m s 技术同时测定肠衣品中8 种硝基咪唑类药 物残留量的方法。样品用乙酸乙酯提取，经s c x 固相萃取柱净化后，h p l c m s m s 法测定，同位素稀释内标法定量。方法按照欧盟2 0 0 2 6 5 7 e c 指令要求进行了验证。8 种分析物在0 1 、0 5 和l ”g k g 三个水平的回收率在8 7 3 11 7 之间，重复性在 3 3 5 1 0 1 ，室内重现性在3 2 1 一1 0 3 。8 种分析物的确定限( d e c i s i o nl i m i t ，c c a ) 为 0 0 2 9 - - 0 0 4 9 g k g ，检测能力( d e t e c t i o nc a p a b i l i t y , c c p ) 为o 0 4 4 ) 0 8 3i t g k g 。 建立了s p e h p l c - m s m s 法快速测定牛组织及奶中的痕量氯氰碘柳胺残留量的 方法。样品经乙腈丙酮( 8 0 ：2 0 ，v v ) 提取后，过o a s i sm a x 固相萃取柱净化，液相色谱 串联质谱条件为负模式下多反应监测，外标法定量。方法在低浓度和高浓度两个水平范 围均呈良好线性，相关系数( r 2 ) 大于0 9 8 9 9 。在不同基质的3 4 个浓度水平上的回收率 在7 3 0 9 5 7 之间，相对标准偏差在3 2 9 9 8 7 之间，检出限( l o d ) 为o 0 0 8 1 a g k g ， 定量限( l o q ) 为0 0 2 1 a g k g 。本方法列为中华人民共和国检验检疫行业标准。 建立了g p c h p l c - m s m s 法测定动物组织及禽蛋中地克珠利、妥曲珠利及其2 种代谢物的残留量的方法。样品用乙酸乙酯提取，经凝胶渗透色谱净化，液相色谱串联 质谱测定，同位素稀释内标法定量。结果表明，在1 - 1 0 0 0 i t g k g 范围内，四种分析物 呈良好线性，相关系数均大于0 9 9 2 1 。在三个添加水平的回收率在8 4 6 - - 一1 0 3 之间， 相对标准偏差在2 6 4 - 8 8 2 之间，方法的l o d 在肝脏、肾脏中为1 0 “g k g ，禽蛋、 肌肉中为3 g k g 。方法的l o q 在肝脏、肾脏中为2 0i - t g k g ，禽蛋、肌肉中为1 0i t g k g 。 通过上述方法研究，提出了一套应用高效液相色谱一质谱联用技术检测食品中有害 物质方法开发的基本模型：1 选取适当溶剂采取超声、振荡等手段从样品中提取被测物； 2 用g p c 技术去除提取液中的蛋白、脂肪、天然色素等大分子量的共提取物；用以消 除基质效应和保护色谱柱；仍有干扰时采用s p e 技术进一步净化：3 利用高效液相色谱 分离目标化合物以及其它分子量接近的杂质：4 按目标化合物分子量的不同，在其保留 时间附近的时间区段内优化二级质谱条件。不同分子量的物质通过检测其分子离子信号 而分别得到检测。对于同分异构体等分子量相同的物质，根据其分子离子在质谱中碎裂 方式的不同，选取不同的子离子作为检测离子，使其分别得到检测；5 采用溶剂校正曲 线与基质匹配校正曲线进行统计分析，检验是否存在基质效应，如果存在基质效应，则 摘要 检测时需要制作基质匹配校正曲线来进行定量。采用同位素内标稀释技术可以消除基质 效应和其它样品处理过程带来的误差：6 方法的特异性、线性、基质校正、准确度、精 密度、c c n 、c c p 等指标应该而且必须遵照i u p a c 和2 0 0 2 6 5 7 e c 和方法学要求加以确 证。 关键词：偶氮染料、硝基咪唑、氯氰碘柳胺、地克珠利、妥曲珠利、凝胶渗透色谱、液 相色谱质谱联用、残留分析、方法模型、谱图解析 m a b s t r a c t 鲁詈詈詈曼曼曼皇篁曼曹! 曼i i i iii ii =： ：- - ：一= ：i _ i ：_ i i i i | ! a b s t r a c t t h em a i ng o a lo ft h i ss t u d yw a st oe s t a b l i s ht h ek e yt e c h n o l o g ya n dv a l i d a t e dm e t h o d s c h a r a c t e r i z e dw i t he f f e c t i v es e p a r a t i o n , h i g hs e l e c t i v ea n dh i g hs e n s i t i v ed e t e c t i o nf o rf o o d s a f e t ya n a l y s i s as e r i e so fn o v e lm e t h o d sf o rt h ea n a l y s i so fd y e sa n dd r u g sr e s i d u e si nf o o d s w e r ee s t a b l i s h e db ya p p l i c a t i o no fa d v a n c e dh p l c m st e c h n i q u e t h e s es u b s t a n c e sw e r ea l l c u r r e n t l yw i t hp o p u l a rc o n c e r n e df o rf o o ds a f e t y , i n c l u d i n g10b a n n e da z od y e s ，8b a n n e d n i t r o i m i d a z o l ed r u g sa n dt w oc l a s s e so fd r u g sw h o s em r lw e r ee s t a b l i s h e d ap r a c t i c a l t e m p l a t ef o ra p p l i c a t i o no ft h eh p l c m st e c h n i q u et of o o ds a t e t ya n a l y s i sw a sb r o u g h t f o r w a r d ，w h i c hc a na f f o r ds o m et h e o r yg u i d a n c ea n dp r a c t i c a le x a m p l ef o rt h em e t h o d d e v e l o p m e n ti nt h i sf i e l d m e a n w h i l et h ec l e a v a g ep a a e r na n dm e c h a n i s mo fi o n si nm s s p e c t r u mw e r ea l s oi n v e s t i g a t e da n da ：t t e m p e dt og i v ear e a s o n a b l ee x p l a i n a t i o n ah p l cm e t h o df o rs i m u l t a n e o u sd e t e r m i n a t i o no fs u d a ni ，s u d a nu ，s u d a ni i ia n d s u d a ni vi nf o o d s t u f f sw a sp r o p o s e d t h es u d a nd y ei nf o o d s t u f f sw a se x t r a c t e d 、析mh e x a n e a n dc l e a n e du pb yn e u t r a la l u m i n u mo x i d es p ec o l u m n q u a n t i t a t i v ed e t e r m i n a t i o nw a s c a r r i e do u tw i t hh p l c d a da n dq u a l i f i e dw i t ht h es i m i l a ri n d e xo ft h e i rv i ss p e c t r o m e t r y f o u rk i n d so fs u d a nd y e s ( i e s u d a ni ，i i ，i i i ，i v ) i nf o o d s t u f f sw e r ec h a r a c t e r i z e da n d d e t e r m i n e ds i m u l t a n e o u s l yb yt h eh y p h e n a t i o no fh p l ca n di o n - t r a pm s m s t h ep o w d e r e d s a m p l ew a se x t r a c t e df o r 15 m i nw i t hm e t h a n o li nu l t r a s o n i cb a t h a f t e rs t a n d i n g ，t h e m i x t u r ew a sf i l t e r e da n di n t r o d u c e dd i r e c t l yi n t ot h eh y p h e n a t e da n a l y t i c a li n s t r u m e n t t h e a g i l e n tz o r b a xx b c 18c o l u m nw a su s e df o rt h es e p a r a t i o no ft h ef o u rd y e s am i x t u r e c o n t a i n i n g0 1 a c e t i ca c i dw a t e rs o l u t i o na n da c e t o n i t r i l ei nt h ep o r t i o no f15t o8 5 w a su s e d a st h em o b i l ep h a s e e s ii o nt r a pm s m sw a su s e df o rt h em sa n a l y s i s t h es m a r tm o d eo f s e t i n gt h ec o n d i t i o no ft h ea g i g e n tl10 0i o nt r a pm a s ss p e c t r o m e t e rw a sa d o p t e da n dt h e c o l l i s i o ne n e r g yw a so p t i m i z e d t h ep a a e ma n dm e c h a n i s mo ft h em o l e c u l e sw e r es t u d i e d b a s e do nw h i c ham i s t a k eo ft h es t r u c t u r eo fs u d a ni va n dc o r r e s p o n d e de x p l a i n a t i o no fi t s m a ss p e c t r u mr e p o r t e di na na u t h o r i z e dl i t e r a t u r eh a sb e e nc o r r e c t e d 砀el i m i to fd e t e c t i o n ( l o d ) w a sl n g m l ，a n dl i n e a rr e s p o n d i n gr a n g ew a sf r o m5 n m lt o1 0 0n g m 1 f o r t i f i e d r e c o v e r yw a si nt h er a n g eo f8 5 9 7 a na c c u r a t em e t h o db a s e do nc o m b i n a t i o no fg e l p e r m e a t i o nc h r o m a t o g r a p h y ( g p c ) _ - h p l c - e s l m s m sw a sd e v i s e d f o rs i m u l t a n e o u s d e t e r m i n a t i o no fs u d a n ( h v ) ，s u d a no r a n g eqs u d a nr e db ，s u d a nr e dqs u d a nr e d7 b ， 、， a b s t r a c t b u t t e ry e l l o wa n dp a r ar e di nh o tc h i l ip r o d u c t s ag p cc l e a n - u pp r o c e d u r ew a sd e v e l o p e d f o rs i m u l t a n e o u sq u a n t i f i c a t i o no f10d y e si nh o tc h i l ia n di t sp r o d u c t s ah p l cw a s p e r f o r m e do n a l li n e r t s i lc18c o l m n nu s i n gam u l t i s t e pg r a d i e n te l u t i o nw i t h0 1 f o r m i ca c i d a n dm e t h a n o la st h em o b i l ep h a s e m s m sa c q u i s i t i o nw a sd o n ei np o s i t i v ei o nm o d e l i n e a r i t yo fa r o u n dt h r e eo r d e r si nt h em a g n i t u d eo fc o n c e n t r a t i o nw a sg e n e r a l l yo b t a i n e d ， a n dt h eli m i to fd e t e c t i o n ( l o d ) a n dl i m i to fq u a n t i f i c a t i o n ( l o q ) f o rt h ei n v e s t i g a t e dd y e s w e r ei nt h er a n g e so f0 1 1 8a n do 4 - 5 0 l l g k gd e p e n d i n go nm a t r i c e s ，r e s p e c t i v e l y t h e r e c o v e r i e so ft h e1 0s y n t h e t i cd y e si nf i v em a t r i c e sw e r ei nt h er a n g eo f81 7t o9 2 9 1 1 1 e i n t r a - a n di n t e r - d a yp r e c i s i o n s ( r s d s ) w e r eb e t w e e n2 9 7 8 a n d3 9 - 8 1 ，r e s p e c t i v e l y as e n s i t i v ea n dv a l i d a t e dm e t h o db a s e d o n s o l i d - p h a s ee x t r a c t i o n ( s p e ) 一h p l c - - e s i m s m sw a sd e v i s e df o rt h es i m u l t a n e o u sd e t e r m i n a t i o no ft h e e i g h t n i t r o i m i d a z o l e ( n o z ) d r u g si n c l u d i n gm e t r o n i d a z o l e ( m n z ) ，r o n i d a z o l e ( r n z ) ，d i m e t r i d a z o l e ( d m z ) ，t i n i d a z o l e ( t n z ) ，o r n i d a z o l e ( o n z ) ，s e c n i d a z o l e ( s n z ) ，m e t r o n i d a z o l e o h ( m n z o h ， t h em e t a b o l i t eo fm n z ) a n d2 - h y d r o x y m e t h y l l m e t h y l - 5 一n i t r o i m - i d a z o l e ( h v l m n i ，t h e m e t a b o l i t eo fr n za n dd m z li nn a t u r a la n i m a lc a s i n g s a f t e re x t r a c t i o nw i t he t h y la c e t a t e a n de v a p o r a t i o n ，t h en i t r o i m i d a z o l e sw e r er e d i s s o l v e di ne t h y la c e t a t ea n dp u r i f i e du s i n g s t r o n gc a t i o ne x c h a n g e ( s c x ) s p ec o l u m n ，a n dt h e nh p l c - m s m sa n a l y s i sw a sp e r f o r m e d b yp o s i t i v ee l e c t r o s p r a yi o n i s a t i o n ( e s i ) a p p l y i n gm u l t i p l er e a c t i o nm o n i t o r i n go ft h r e e t r a n s i t i o nr e a c t i o n sf o re a c hc o m p o u n d t h ew h o l em e t h o dh a sb e e nv a l i d a t e d ，a c c o r d i n gt o t h ee uc o m m i s s i o nd e c i s i o n2 0 0 2 6 5 7 e c s p e c i f i c i t y , l i n e a r i t y , d e c i s i o nl i m i t ( c c a ) ， d e t e c t i o nc a p a b i l i t y ( c c p ) ，a c c u r a c ya n dp r e c i s i o nw e r ed e t e r m i n e d a v e r a g er e c o v e r i e so f t h ee i g h tn o z sf r o mn a t u r a la n i m a lc a s i n gf o r t i f i e da tt h r e el e v e l so f0 1 ，o 5a n d1 i t g k g w e r ei nt h er a n g ef r o m8 7 3t o11 6 5 r e l a t i v es t a n d a r dd e v i a t i o n s ( r s d ) o f r e c o v e r i e sa ta l l f o r t i f i c a t i o nl e v e l sw e r el e s st h a n10 3 f o rt h ee i g h tn o z s t h ec a l c u l a t e dc c af o rn o z s w a si nt h er a n g ef r o mo 0 2 9t o0 0 4 9p g k g ，a n dc c pw a si nt h er a n g ef r o mo 0 4 9t o0 0 8 3 g k g an e ws p e - h p l c - e s i m s m sm e t h o dw a sd e v e l o p e da n dv a l i d a t e df o rd e t e r m i n a t i o n o fc l o s a n t e lr e s i d u e si nb o v i n et i s s u e sa n dm i l k a na c e t o n i t r i l e - a c e t o n em i x t u r e ( 8 0 ：2 0 ，v v ) w a su s e df o ro n e - s t a g ee x t r a c t i o no fc l o s a n t e lr e s i d u e sf r o mt h es a m p l e s ，a n dt h ee x t r a c tw a s c l e a n e db ys p ew i t ho a s i sm a x c a r t r i d g e s t h em s m sw a so p e r a t e di nm r m m o d ew i t h n e g a t i v ee l e c t r o s p r a y i n t e r f a c e e x t e r n a ls t a n d a r dm e t h o dw a su s e dt oq u a n t i t a t i o n 1 1 圮 l i n e a r i t y i s s a t i s f a c t o r yw i t hr 2 f r o mo 9 8 9 9t oo 9 9 8 7a tb o t hc o n c e n t r a t i o nr a n g e so f v i a b s t r a c t 0 0 2 1 0 0i - t g k ga n d5 0 0 - 5 0 0 0g g k g t h eo v e r a l lr e c o v e r i e sf o rb o v i n em u s c l e 1 i v e r , k i d n e y a n dm i l ks a m p l e ss p i k e da td i f f e r e n tl e v e l si n c l u d i n gm r lw e r ei nt h er a n g eo f7 3 0 - 9 5 7 t h eo v e r a l lr s d sw e r ei nt h er a n g eo f3 2 9 9 8 7 t h el o da n dl o qw e r eo o o s g g k ga n d o 0 2 9 9 k gr e s p e c t i v e l y t h em e t h o dh a sb e e nl i s t e da sat r a d es t a n d a r df o ri n s p e c t i o na n d q u a r a n t i n ei nc h i n a an o v e lg p c h p l c - e s i m s m sm e t h o dw a sd e v e l o p e df o rd e t e r m i n a t i o no fd i c l a z u r i l ， t o l t r a z u r i la n di t st w om e t a b o l i t e s ( t o l t r a z u r i ls u l f o n e ，t o l t r a z u r i ls u l f o x i d e ) r e s i d u e si na n i m a l t i s s u e sa n de g g sw e r ee s t a b l i s h e d t h ee x t r a c t i o no f t h es a m p l e sw i t he t h y l ea c e t a t ew a sc l e a n u pw i t hg p c ，t h e na n a l y s e db yh p l c - e s i m s m sw i t hi s o t o p ei n t e m a ls t a n d a r dd i l u t i o n t e c h n i q u e ，n l er e s u l t ss h o wt h a tt h el i n e a r i t yi ss a t i s f a c t o r yf o rt h ef o u rc o m p o u n d sw e r e a b o v eo 9 9 21i nt h ec o n c e n t r a t i o nr a n g e so f1 - 1 0 0 0 g k g t h eo v e r a l lr e c o v e r i e ss p i k e da t t h r e el e v e l sw e r ei nt h er a n g eo f8 4 6 - 10 3 t h eo v e r a l lr e l a t i v es t a n d a r dd e v i a t i o n sw e r ei n t h er a n g eo f2 6 4 _ 8 8 2 t h el o d sw e r elo g g k gf o rl i v e r sa n dk i d n e y s ，a n d3 1 a g k gf o r t i s s u e sa n de g g s 1 h el o q sw e r e2 0 1 a g k gf o rl i v e r sa n dk i d n e y s ，a n dlo g g k gf o rt i s s u e s a n de g g s t h r o u g ha b o v e - m e n t i o n e ds t u d 弘ap r a c t i c a lt e m p l a t ef o ra p p l i c a t i o no ft h eh p l c m s t e c h n i q u et of o o ds a f e t ya n a l y s i sw a sb r o u g h tf o r w a r da sf o l l o w s ： a ) c h o o s es u i t a b l es o l v e n t sa n dm a n n e rs u c ha su l t r a s o n i ct oe x t r a c tt h er e s i d u e sf r o m t h es a m p l e s b ) r e m o v et h ec o e x t r a c t i o n ss u c ha sp r o t e i n ，f a t , n a t u r a lp i g m e n t se t ew h i c h h a v eh i g h e rm o l e c u l a rw e i g h tw i t hg p c t e c h n i q u et oa v o i dt h ei n t e r f e r e n c ea n dp o s s i b l e d a m a g eo ft h ec o l u m n s i ft h el a s tr e s u l t ss h o wt h a tt h ei n t e r f e r e n c es t i l lr e m a i n s ，u s es p ef o r f u r t h e rc l e a n u p ；c ) s e p a r a t et h e a n a l y t e s ，a l s o t h e p o s s i b l ei m p u r i t i e sh a v i n gs i m i l a r m o l e c u l a rs i z ew i t hh p l c ；d ) o p t i m i z et h em s m sp a r a m e t e r sf o rt h em o l e c u l a rw e i g h to f t h ea n a l y t e si nt h ec o r r e s p o n d i n gt i m es e g m e n t sa r o u n di t sr e t e n t i o nt i m e c o m p o u n d sw i m d i f f e r e n tm o l e c u l a rw e i g h t sc a l lb ed e t e c t e di n d i v i d u a l l yt h r o u g hs e l e c t i o ni t sm o l e c u l a ri o n s a sm o n i t o ri o n s c o m p o u n dw i t hs a m em o l e c u l a rw e i g h ts u c ha si s o m e rc a nb ef u r t h e r d i s t i n g u i s h e di nm s m sw i t hd i f f e r e n td a u g h t e ri o n sd e r i v e df r o md i f f e r e n tf r a g m e n t a t i o n e ) 1 1 1 em a t r i xe f f e c tc a nb ec h e c k e dt h r o u g hc o m p a r a t i o nb e t w e e nt h es o l v e n tc a l i b r a t i o nc u r v e a n dt h em a t r i xm a t c h e dc a l i b r a t i o nc u r v e w h e n e v e rt h es i g n i f i c a n td i f f e r e n c ee x i s t s ，am a t r i x m a t c hc a l i b r a t i o nc u r v ei sn e e d e df o rq u a n t i t a t i o n 们1 ei s o t o p ed i l u t i o ni n t e r n a ls t a n d a r d c a l l b eu s e dt oe l i m i n a t et h ee f f e c to fm a t r i xa n do t h e re r r o r sc a u s e dd u r i n gt h es a m p l et r e a t m e n t p r o c e s s 0 s p e c i f i c i t y , l i n e a r i t y ，m a t r i xc a l i b r a t i o n , a c c u r a c y , p r e c i s i o n , c c a 、c c pe t c o f t h e a b s t r a c t m e t h o ds h o u l db ea n dm u s tb ev a l i d a t e di na c c o r d i n gt oi u p a ca n d2 0 0 2 6 5 7 e ca sw e l la s t h em e t h o d o l o g yd e m a n d s k e y w o r d s ：a z o - d y e s ，n i t r o i m i d a z o l ，c l o s a n t e l ，d i c l a z u r i l ，t o l t r a z u r i l ，g p c ，s p e ， h p l c i o nt r a pm s ，h p l c - m s m s ，r e s i d u e sa n a l y s i s v m 河北大学 学位论文独创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师指导下进行的研究工作及取得 的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他 人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得河北大学或其他教育机构的学位或证书 所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确 的说明并表示了致谢。 作者签名： 王鼠；炒 日期：望墨年j 二月正日 学位论文使用授权声明 本人完全了解河北大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国 家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布 论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。 本学位论文属于 1 、保密嗣，在年月日解密后适用本授权声明。 2 、不保密击。 ( 请在以上相应方格内打“) 保护知识产权声明 本人为申请河北大学学位所提交的题目为( ；i j 滋氍聪 锨冬膨i 崩翩碧红 的学位论文。是我个人在导师蕊指导并与导师合作下取得的研究成果，研 究工作及取得的研究成果是在河北大学所提供的研究经费及导师的研究经费资 助下完成的。本人完全了解并严格遵守中华人民共和国为保护知识产权所制定的 各项法律、行政法规以及河北大学的相关规定。 本人声明如下：本论文的成果归河北大学所有，未经征得指导教师和河北大 学的书面同意和授权，本人保证不以任何形式公开和传播科研成果和科研工作内 容。如果违反本声明，本人愿意承担相应法律责任。 声明人：乏! 塾炒 作者签名王叙灿 导师签名： 日期；卫钲上月一日 醐：旦年上月上日 日期：岔垂年月厶日 第1 章液质联用技术在食品安全检测中的应用进展 第1 章：液质联用技术在食品安全检测中的应用进展 1 1 食品安全检测技术概述 近年来，食品安全问题越来越成为全球关注的焦点之一。危及人类健康、生命安全 的重大食品安全事件屡屡发生。从欧州的疯牛病、二恶英到我国的苏丹红、瘦肉精、甲 胺磷等令人防不胜防。新技术的发展、农用化学品的滥用，养殖业的不规范用药以及环 境的污染等都是造成食品安全问题的原因。随着经济日益全球化和国际食品贸易的日益 扩大，食品安全问题更是成为了一个国际化的问题。各国政府都致力于改善食品安全性， 但同时也不排除有借食品安全问题恶意炒作，制造技术壁垒和贸易摩擦的现象发生。但 不管出于什么原因，食品安全问题，已经成为全世界关注的焦点是不争的事实。 要解决食品安全问题，要保护国民的身体健康和贸易利益，除了加强食品生产的管 理外，首先需要解决的问题就是食品安全检测的关键技术问题。因为只有解决了检测问 题，才能知道食品安全的真实情况，也才能突破国外技术壁垒对贸易的限制，才能保护 国民的身体健康。 食品安全检测技术近年来得到了飞速发展，在有机分析方面当前使用的主要方法有 气相色谱法、气相色谱质谱联用法、液相色谱法、液相色谱质谱联用法、毛细管电泳 法、电化学法、敏联免疫法、放射免疫法、生物芯片法等，而且各项新技术正在以越来 越快的速度被食品安全领域采用，促进了各种新兴检测手段的快速发展。 色谱质谱联用技术是在色谱分离的基础上采用高选择性的质谱技术进行检测的一 项联用技术，前处理和色谱分离去除了样品中的大量杂质，使得质谱技术可以应用到实 际样品检测，而质谱技术又可以提供足够的分子结构信息，作为化合物分析确证的主要 依据，因此这分析技术随着质谱技术的成熟，得到了日益广泛的应用。欧盟 2 0 0 2 6 5 7 e c 指令等国际相关技术要求文件的发布【，明确了化合物确证的要求，色质 联用技术是其中最方便实用的手段，大大加速了这一技术在食品分析中的应用。 1 2 液质联用技术发展概述 高效液相色谱一质谱( h i g h - p e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h y m a s ss p e c t r o m e t 巧， h p l c m s ) 联用技术是将液相色谱与质谱串联成为一个整机使用的检测技术。这项技 - 1 河北大学理学博十学何论文 术始于上世纪7 0 年代，液相色谱质谱联用技术发展的一个瓶颈是如何通过一个“接口” 脱掉液相色谱中流出的大量溶剂，并将被测物离子化。在接口研制方面，前后发展了有 2 0 多种，其中主要有直接导入界面、传送带界面、渗透薄膜界面、热喷雾界面和粒子束 界面，但这些技术都有不同方面的限制和缺陷，直到上世纪9 0 年代大气压电离技术成 熟后，液质联用才得以迅速发展，成为科研和日常分析的有力工具。1 2 】 液质联用技术集液相色谱的高分离与质谱的高灵敏度，极强的定性专属性于一体。 质谱检测器具有更高的灵敏度，而且应用范围广。在选择合适电离方法的前提下，一般化 合物都能被电离得到检测，从而能获得更多的化合物结构信息。h p l c 可分离极性的、 离子化的、不易挥发的相对分子质量大和对热不稳定的化合物。同时h p l c m s 联机弥 补了传统检测器的不足，具有广泛的适用性。作为一种具有广泛应用前