海洋鱼骨胶原低聚肽改善骨质疏松的效果观察.doc

海洋鱼骨胶原低聚肽改善骨质疏松的效果观察观察食用海洋鱼骨胶原低聚肽营养制剂对骨质疏松患者的营养干预效果，并对其作用机制进行初步探讨。方法 选择原发性骨质疏松患者共45例，随机分为海洋鱼骨胶原低聚肽营养制剂组（A组）、乳清蛋白营养制剂组（B组）和膳食对照组（C组）。分别于试验第1天和第30天测定血清骨碱性磷酸酶（B-ALP）、血清型胶原C-末端肽（CTX），并观察疼痛感、睡眠、四肢活动障碍等感受指标。结果 A、B两组试验结束后B-ALP均升高（P0.05），CTX均下降，其中A组（P0.05），B组（P0.05），C组无变化；A、B、C3组疗效差异有统计学意义（P0.05）。结论 海洋鱼骨胶原低聚肽作为营养制剂食用对患者的骨质疏松状况具有改善作用。关键词 海洋鱼骨胶原低聚肽；骨质疏松；B-ALP CTX骨质疏松症是以骨量减少、骨微观结构退化、骨脆性增加，而引起腰背疼痛、骨痛甚至发生骨折的一种全身骨骼疾病。现在我国已进入老龄化社会，由于膳食结构的改变及体力活动的减少，我国中老年人群骨密度水平普遍下降，骨质疏松及其引起的骨折已成为威胁中老年健康的主要疾病之一。预防和有效改善骨质疏松状况成为营养研究工作的一项重要内容。近年的研究发现，食源性低聚肽具有易消化、吸吸收的特点，同时具有原蛋白和氨基酸所不具备的多种生理功能，如增强免疫力、抗氧化等，部分肽类物质在促进骨骼健康方面也发挥着重要影响。本研究拟观察含有海洋鱼骨胶原低聚肽的营养制剂对骨质疏松患者的临床效果，并初步探讨其作用机制，以寻求改善骨质疏松的营养干预新方法。1 对象与方法 1.1对象 从2009-07/2010-05期间的住院和门诊就医的原发性骨质疏松症患者中选择45例，诊断标准参照“中国人原发性骨质疏松症诊断标准试行”1。其中女性患者均为绝经后妇女。临床主要症状是腰背痛或全身骨痛、活动受限，骨密度值与当时同性别的峰值骨密度（BMD）相比减少大于25，排除影响骨代谢的各种疾病，肝、肾功能严重损害者，有内分泌代谢疾病包括糖尿病、慢性风湿性、类风湿性关节炎、原发性骨肿瘤、恶性肿瘤骨转移等。1.2方法1.2.1分组 45例骨质疏松患者，在接受必要的康复治疗后，按照随机原则分成A、B、C3组，每组15例。3组在正常饮食、能量供给（3035kcal/kgd）、蛋白质供给（1.01.2g/kgd，包括营养制剂中的蛋白质）、钙的供给量（在1000mg左右，包括每日口服400mg的钙补充剂）基本保持一致。不同之处主要在于A组膳食中的部分蛋白质是以海洋鱼骨胶原低聚肽营养制剂中的低聚肽代替，B组膳食中的部分蛋白质是以乳清蛋白营养制剂中的乳清蛋白代替，C组除正常膳食蛋白质外，无其他蛋白类制剂或蛋白食品的干预。海洋鱼骨胶原低聚肽营养制剂主要配料为海洋鱼骨胶原低聚肽、多种维生素、钙、磷等矿物质、益生元以及药食同源食物桑椹、葛根、芡实等，乳清蛋白营养制剂主要配料为乳清蛋白（整蛋白）、多种维生素、钙、磷等矿物质、益生元以及药食同源食物桑椹、葛根、芡实等。A、B两组食用营养制剂的量均为早晚各食用10克。观察期为30d。1.2.2观察指标 骨痛评分标准2，有自发性疼痛、无法忍受、活动受限者为4分；休息时痛，活动加重者为3分；休息时不痛，活动时疼痛者为2分；休息时不痛，活动时轻微痛者为1分；休息及活动均不痛者为0分。疗效评定标准：观察3组患者的临床症状与体征的变化，包括骨痛、关节肿痛、四肢活动障碍等。显效：疼痛分数值减少2分以上或由1分减少至0分，关节活动轻松；有效：疼痛减少1分，关节活动尚可；无效：疼痛分数值无变化或增加，关节活动障碍。1.2.3 生化检查 以上3组在实验第1天及第30天检测血清骨碱性磷酸酶（B-ALP）、血清型胶原C-末端肽（CTX），采用电化学发光法，使用罗氏Elecsys2010系统及试剂。1.3统计分析 资料用SPSS13.0统计软件进行统计分析，数据结果用 表示，两组间比较用t检验。2 结果2.1基本情况 研究对象共45例，其中男12例，女33例，年龄（70.475.67）岁，身高（155.107.02）cm，体重（56.66.86）kg。随机分为三组，每组各15例。3组年龄、身高、体重差异均无统计学意义（P0.05）（表1）。2.2 营养干预前后B-ALP，CTX的比较（ ） 3组在营养干预前后，分别测定血清骨碱性磷酸酶（B-ALP）和血清型胶原C-末端肽（CTX），发现A组在试验后与试验前相比，B-ALP升高(t=-5.522)，CTX下降(t=3.084)，两项指标的差异均具有统计学意义（P0.05）；B组在试验后与试验前比较，B-ALP升高（t=-2.426），统计学分析具有显著性意义（P0.05），而CTX在试验后虽然下降（t=1.726），但差异无显著性（P0.05）；C组在试验前后B-ALP（t=-0.666）与CTX（t=0.175）两项指标前后差异均无统计学意义（P0.05）（表2）。经统计学分析，三组疗效不全相同（t=10.409，P0.05）。从表3可以看出，B、C两组的总有效相同，A组的总有效率较高；A组的显效比率明显高于B、C两组。3.讨论肽与蛋白质都是氨基酸以酰胺键互相连接在一起形成的化合物，但肽尤其是低聚肽在营养吸收效果及生理调节作用方面具有氨基酸和完整蛋白质无法比拟的优势，如低聚肽比蛋白质和游离氨基酸更易吸收，某些低聚肽具有显著的生理功能，如保护胃黏膜及抗溃疡作用、抗氧化、降血压、降胆固醇、抗肿瘤细胞生长、促进伤口愈合、增强骨强度和预防骨质疏松、预防关节炎、促进角膜上皮损伤的修复和促进角膜上皮细胞的生长等多种生理活性功能 3-6。国内外已有部分研究论证了海洋生物活性肽对实验动物具有抗损伤和抗氧化等功效7,8。本研究中使用的海洋鱼骨胶原低聚肽营养制剂其主要成分海洋鱼骨胶原低聚肽是以海洋鱼骨为原料采用生物酶解技术生产制备的相对分子质量在1000以下的肽为主要成分的粉末状低聚肽产品，主要是由26个氨基酸组成的片段，含有多种必需氨基酸如缬氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸以及赖氨酸等，且具有吸收快、低黏度、水溶性好等特点。动物试验发现，海洋鱼骨胶原低聚肽能明显抑制去卵巢大鼠胰腺细胞凋亡，保护胰腺组织，减轻炎症损伤变性坏死，并能抑制去卵巢大鼠体重的增加，提示海洋鱼骨胶原低聚肽可能有助于绝经期妇女骨质疏松症、胰岛素抵抗和心血管疾病的防治9。这为本研究的开展提供了前期的基础性支持。骨骼是由骨细胞、蛋白质、钙和磷等矿物质构成，胶原蛋白又是骨骼蛋白质的主要成分，对维护骨骼的结构、保持骨骼的韧性具有重要作用。海洋鱼骨胶原低聚肽主要是鱼骨胶原蛋白的酶水解产物，易于吸收和利用，能够为机体骨骼胶原蛋白的更新提供优质而且必需的氮源营养物质。这是开展本研究的营养学理论基础。本研究通过对45例骨质疏松患者的研究发现，食用海洋鱼骨胶原低聚肽营养制剂的患者在试验结束后，自觉症状和体征均有不同程度的改善或消失，与乳清蛋白营养制剂组及膳食对照组的效果相比差异有统计学意义。说明补充海洋鱼骨胶原低聚肽在改善骨质疏松的效果方面，优于补充乳清蛋白等完整蛋白质，也优于单纯补充钙剂。这与国外动物试验研究的结果基本一致10。人体的骨骼在正常情况下，骨吸收与骨形成相互偶联维持平衡，骨吸收过多和骨形成不足引起平衡失调的最终结果是导致骨量的减少和骨细微结构的变化，从而形成骨质疏松。预防和改善骨质疏松也应该从促进骨形成、减少骨吸收两个代谢环节着手。骨特异性碱性磷酸酶（ALP）的活性变化与成骨细胞功能有着良好的相关性，用血浆B-ALP的测定作为成骨活跃的指标更为可靠。型胶原C-末端肽（CTX）是骨型胶原的特异性降解产物，血清CTX的含量能反映破骨细胞的活性，是敏感而特异的骨吸收指标。本研究选取的受试者均为排除了其他影响骨代谢疾病的患者，A组在食用海洋鱼骨胶原低聚肽营养制剂后B-ALP升高，试验前后差异有统计学意义；CTX下降，差异也具有统计学意义，说明食用海洋鱼骨胶原低聚肽改善骨质疏松症状的作用，与增强成骨细胞功能、降低破骨细胞活性、促进骨骼形成有关。食用乳清蛋白营养制剂的B组在试验后B-ALP升高，差异有统计学意义；但CTX的下降无统计学意义，说明乳清蛋白有助于促进成骨细胞活性，但可能不具备降低破骨细胞活性的功能。本研究中单纯补充钙剂的C组B-ALP和CTX两项指标在试验前后均无明显差异，说明单纯补充钙剂，其抑制骨吸收和促进骨形成的作用，明显弱于食用海洋鱼骨胶原低聚肽。本研究结果可以初步揭示海洋鱼骨胶原低聚肽在改善骨质疏松机制方面的优势。食用胶原肽能促进钙质吸收，增加骨密度，可能还能够促进骨髓细胞分化成造骨细胞，对骨代谢具有有益作用。10,12有研究证实，海洋鱼骨胶原低聚肽能够促进人体骨胶原蛋白的合成，并与骨细胞和钙、磷等矿物质共同促进新骨形成，并调节钙、磷代谢，增加骨钙沉积。综上所述，食用海洋鱼骨胶原低聚肽可作为改善骨质疏松的营养干预新方法使用。参考文献：1.刘忠厚，杨定焯，朱汉民，等中国人原发性骨质疏松症诊断标准(试行)J中国骨质疏松杂志，1999，5(1)：132.张玉兰，赵丽茹，杨肖荟阿仑膦酸钠治疗绝经后骨质疏松性骨痛的研究J中国骨质疏松杂志，2000，6(2)：28-303.曾名勇，崔海英，李八方.海洋生物活性肽及其生物活性研究进展J.中国海洋药物杂志，2005；2（24）1：46-51. 4.Iwamoto T, Watanabe S, Nishimura M. Inhibition of low-density lipoprotein oxidation by fish protein (mackertal peptide)C.11th International Symposium on Atheroxclerosis, Paris, 1997:223.5.Jeon YJ, Byun HG, Kim SK. Improvement of functional properties of cod frame protein hydrolysates using ult rafilt ration membranes J. Proc Biochem ,1999 ;35(5):471.6.赵海英，梁程超，缪锦来，等.鳕鱼皮胶原蛋白的制备及其成分分析J.中国海洋药物杂志，2005,24(5):30-32.7.田波，刘慧雯，吴树亮，等.大鼠FBN与胶原蛋白细胞载体联合培养及移植治疗脑损伤的实验研究J.中国生物医学工程学报，2005，24 (5): 5633-635.8.王军波，谢英，裴新荣，等. 海洋胶原肽的分子组成及其降血脂和抗氧化作用研究. 中华预防医学杂志，2008,42(4):226-230.9.朱翠凤，韩晓龙，张帆，等. 海洋骨胶原肽对去卵巢大鼠体重以及胰腺细胞凋亡和组织病变的影响. 中国老年医学杂志，2007,27(11): 1046-1049.10.Jian Wu, Maiko Fujioka, Kiho Sugimoto， et al. Assessment of effectiveness of oral administration of collagen peptide on bone metabolism in growing and mature rats. Journal of Bone and Mineral Metabolism, 2004, 22(6): 547-553.11.Adam M, Spacek P, Hulejova H, et al . Postmenopausal osteoporosis. Treatment with calcitonin and a diet rich