（药物化学专业论文）手性药物右雷佐生合成工艺的改进及质量控制.pdf

重庆医科大学硕士研究生学位论文 手性药物右雷佐生合成工艺的改进及质量控制 摘要 目的：细胞保护剂右雷佐生( d e x r a z o x a n e ，d e x ) 是种手性药物，于1 9 7 6 年c r e i g h t o n 首次合成，已成功地用于预防或降低阿霉素的心脏毒性。本研究旨在 简化右雷佐生合成工艺，提高反应效率，并对最终产物质量部分做初步研究。 方法：以d l 1 ，2 二氨基丙烷为起始原料，d 一( ) 酒石酸对其进行拆分制备 ( s ) ( + ) 1 ，2 二氨基丙烷二盐酸盐，该盐与甲醛及氰化钠缩合反应生成( s ) ( + ) n ， n ，n ，n 1 ，2 丙二氨基四乙氰，( s ) ( + ) n ，n ，n ，n 1 ，2 一丙二氨基四乙氰 酸水解生成( s ) ( + ) - n ，n ，n ，n - 1 , 2 丙二氨基四乙酰胺二盐酸盐，( s ) ( + ) - n ， n ，n ，n 1 ，2 丙二氨基四乙酰胺二盐酸盐通过与苯酚环合反应最终生成右雷佐 生。 结果和结论：目标化合物经i r 、m s 、h p l c 等方法确证了其化学结构，收率 5 6 3 。考察了右雷佐生的溶解度、熔点、旋光度等与文献资料相符。同时通过非 水滴定、紫外可见分光光度法以及高效液相色谱法等初步考察了右雷佐生质量标 准。经过实验证明，该路线工艺简单，反应效率显著提高。 关键词：右雷佐生，细胞保护剂，心脏毒性，药物合成，质量控制 3 重庆医科大学硕士研究生学位论文 s y n t h e s i z ea n dq u a l i t yc o n t r o lo f d e x r a z o x a n e a b s t r a c t o b j e c t i v e ：c e l l p r o t e c t i v ea g e n t d e x r a z o x a n eh a sb e e n s u c c e s s f u l l yu s e dp r e v e n t so rr e d u c e st h eh e a r tt o x i c i t yo fd o x o r u b i c i n i t w a ss y n t h e s i s e df i r s tt i m ei n19 7 6b y c r e i g h t o n t h i sp a p e ra i m st o s i m p l i f y t h e s y n t h e s i sp r o c e s so fd e x r a z o x a n e ，a n dd op r e l i m i n a r y r e s e a r c ho n q u a l i t yo f t h ef i n a lp r o d u c t m e t h o d s ：r e s o l u t et h ed l - l ，2 - d i a m i n o p r o p a n ew h i c hb e e nu s e d a st h e s t a r t i n gm a t e r i a lb yd 一- - ) - t a r t a r i ca c i d t h e nr e a c tw i t hb o t h f o r m a l d e h y d ea n ds o d i u mc y a n i d ea f t e rc o n d e n s a t i o n t o 1 , 2 一d i a m i n o - 一p r p a n et e t r a c e t o n i t r i l e ，a n dt h e nh y d r o l y z et o ( s ) 一( + ) - n ，n ，n ，n 一t e t r a - 一c a b o x a m i n d o m e t h y l 一1 ，2 一d i o m i n o p r o p a n e ，a tl a s tc h a n g ei n t od e x r a z o x a n e t h r o u g hc y c l i z a t i o nr e a c t i o n r e s u l t sa n dc o n c l u s i o n ：t a r g e tc o m p o u n d s c h e m i c a l s t r u c t u r ew a sc o n f i r m e db yi r , m s ，h p l c ，a n dt h ey i e l di s5 6 3 w e i n s p e c t e dd e x r a z o x a n e ss o l u b i l i t y , m e l t i n gp o i n t ，a n do p t i c a lr o t a t i o n a l l o ft h e ma r ec o n f o r mt ot h el i t e r a t u r e a tt h e s a l t l et i m ew ei n i t i a l l y e s t a b l i s h e dt h eq u a l i t ys t a n d a r d so fd e x r a z o x a n et h r o u g h n o n a q u e o u s t i t r a t i o n ，u v - v i s i b l es p e c t r o p h o t o m e t e ra n dh p l c t h ee x p e r i m e n t ss h o w t h a tt h i sr o u t ei ss i m p l ea n de f f i c i e n c y k e y w o r d s ：d e x r a z o x a n e ，c e l lp r o t e c t i v ea g e n t ，h e a r tt o x i c i t y ， s y n t h e s i z e ，q u a l i t yc o n t r o l 4 茎鏖垦型丕堂堡主堡塞生兰垡堡壅 _ i _ _ _ _ _ _ - _ _ - i _ _ _ - _ _ - - - _ - _ - 。_ i _ _ _ _ _ _ _ _ _ - _ _ _ _ _ _ 。_ 。- 。- 。_ _ 。- _ 1 。一一一 英文缩写 c h f d a u d e x d m s o d o x e d t a e p i h p l c l o d l o q l v e f r s d i 之p h p l c t h f u v 二v i s t r r a i n h l m l p l g m g “g 符号说明 英文全称 c o n g e s t i v eh e a r tf a i l u r e d a u n o m b i c i n d e x r a z o x a n e d i m e t h y ls u l p h o x i d e d o x o r u b i c i n e t h y l e n ed i a m i n et e t r a a c e t i c a c i d e p i r u b i c i n h i g hp e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h y l i m i to fd e t e c t i o n l i m i to fq u a n t i t a t i o n l e f tv e n t r i c u l a re j e c f i o nf r a c t i o n r e l a t i v es t a n d a r dd e v i a t i o n r e v e r s e dp h a s eh i g hp e r f o r m a n c el i q u d c h r o m a t o g r a p h y t e t r a h y d r o f u r a n u l t r a v i o l e t r e t e n t i o nt i m e m i n u t e h o u r l i t r e m i l l i l i t e r m i c r o l i t r e g r a m m i l l i g r a m m i c r o g r a m m e l 中文全称 充血性心力衰竭 柔红霉素 右雷佐生 二甲基亚砜 多柔比星 乙二胺四乙酸 表柔比星 高效液相色谱 检测限 定量限 左心室射血分数 相对标准偏差 反相高效液相色谱 四氢呋喃 紫外可见分光光谱 保留时间 分钟 小时 升 毫升 微升 克 毫克 微克 重庆医科大学硕士研究生学位论文 n g m o l l x m o l m m o l l a i n n m n a n o g r a m m o l e m i c r o m o l e m i l l i m o l e m i c r o m e t e r n a n o m e t e r 2 毫微克 摩尔 微摩尔 毫摩尔 微米 毫微米 重庆医科大学 研究生学位论文独创性声明 本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他 入已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构 的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已 在论文中作了明确的说明并表示谢意 申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任 学位论文作者签名： 日期：量! 星：生垒 学位论文版权使用授权书 本入完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学 位期间论文工作的知识产权单位属重庆医科大学本人保证毕业离校后，发表论 文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学学校有权保留并向国家有关 部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅学校可以公布学 位论文的全部或部分内容( 保密内容除外) ，可以采用影印、缩印或其他手段保 存论文 论文作者签名： 指导教师签名： 日 期： 重庆医科大学硕士研究生学位论文 手性药物右雷佐生合成工艺的改进及质量控制 上- j 刖昂 当今全球每年肿瘤( 癌症) 患者发病人数呈逐年上升趋势，死亡率高。我国 癌症年发病及死亡人数同样突出，约占世界癌症死亡人数的2 0 左右。癌症已成 了严重威胁人类健康的常见病、多发病i l j 。多数抗肿瘤药物在治疗的同时，常伴有 广泛的急性和蓄积性毒性，给病人带来痛苦，生存质量明显降低，如继续使用甚 至会引起严重后果。全身应用的细胞保护药物是用来预防或减少肿瘤化( 放) 疗 所致毒、副作用，进而通过提高肿瘤患者在肿瘤治疗中的顺应性和耐受性而达到 提高他们肿瘤治疗效果及其生存质量的一类药物【2 j 。 阿霉素( d o x o r u b i e i n , d o x ) 被认为是治疗晚期乳腺癌的标准药物p 】。但是，即 使只用较低的剂量也可诱发短期及长期的心脏毒性，尤其是在积累剂量较高以后 v o nh o 一4 j 在回顾性研究中报告了3 9 4 1 例使用阿霉素的肿瘤病人，其中1 8 5 例因 累积用量达到5 5 0 m g i n 2 而不得不停药。其后短期内3 5 例( 1 9 ) 病情完全复发， 5 2 例( 2 8 ) 部分复发。提示严重的心脏毒性限制了阿霉素的连续应用和疗效的充分 发挥。有鉴于此，寻找能减轻或阻遏葸环类心脏毒性的药物具有重要意义。 右雷佐生( d e x r a z o x a n e ，d e x ) 是消旋雷佐生的d 异构体，也是螯合剂乙二胺 四乙酸( e d t a ) 的亲脂性环状衍生物，对葸环类所致心脏毒性有显著防治作用。 在传统右雷佐生单一对映体的合成工艺中，路线复杂，反应时间长，收率低。本 文正是针对右雷佐生的传统工艺进行了大胆的创新性研究，无论在反应过程中， 还是在最后目标产物的质量控制上都能得到较为满意的结果。 本研究分为两个部分：l 、右雷佐生合成工艺的改进；2 、右雷佐生的质量控 制。 5 重庆医科大学硕士研究生学位论文 第一部分右雷佐生的合成 第一章右雷佐生的合成工艺研究 h h “ h y 麓q h h 2 n c h 3 n h 2 d 一( 一) 一酒石酸 h 2 n 丫n h ， - - - - - - - 二 一 三 c h 3 图1 2 拆分 f i g u r e1 - 2r e s o l u t i o n 与此同时，从右雷佐生两个环状结构部分的已有专利文献报道中可以总结得 6 重庆医科大学硕士研究生学位论文 知，主要有两种方式最终环合得到右雷佐生。分别是采用如下( 图1 3 ，图1 4 ) 两种关键中间体，即( s ) ( + ) - n ，n ，n ，n7 1 ，2 丙二胺四乙酸【8 9 】和( s ) ( + ) n ， n ，n ，n 1 ，2 丙二胺四乙酰胺【1o 】在不同的条件下环合生成右雷佐生。 h 图l - 3 环合路线 f i g u r e l - 3c y c l i z a t i o nr o u t e 图l - 4 环合路线 f i g u r e l - 4c y c l i z a t i o nr o u t e 逗) 7 h nn h 飞 y 冒入p厂n jy s 弋n d 一 _ ld mh 一n o a 一 等 厂n l 厂n o o n n 重庆医科大学硕士研究生学位论文 第二章合成路线的选择与设计 1 右雷佐生已有合成路线 目前见文献报道的合成路线归纳起来主要以下三条路线： 1 9 7 6 年c r e i g h t o n 首次合成右雷佐生，并申请了专利【8 】，专利路线以( s ) ( + ) 1 ，2 二氨基丙烷二盐酸盐为起始原料，经缩合、柱层析、环合等反应，制 得右雷佐生，收率1 5 8 ( 以( s ) 一( + ) n ，n ，n7 ，n 1 ，2 - 丙二氨四乙酸计) 。 h 2 n 、n h 乞 h h 3 n h 2 c h o 丽d o w e 矿x h o o c h o o c 瀛n 一一湖c o o h h 卜 n j 、 5 0 w x 4 h o o c 厂、n 、 图l - 5 合成路线 f i g u r e l 一5s y n t h e s i sr o u t e ( ) 该反应路线关键中间体( s ) ( + ) n ，n ，n ，n 一l ，2 丙二氨四乙酸的制备 时间较长，分离需用离子交换树脂，导致产率较低，难以实现工业化生产。 1 9 8 1 年c r e i g h t o n 在专利 9 1 q b 对右雷佐生的合成路线有所改变，首先同路线 以( s ) ( + ) 1 ，2 一二氨基丙烷二盐酸盐为起始原料，经缩合、柱层析的方法制得 ( s ) ( + ) n ，n ，n ，n7 1 ，2 一丙二胺四乙酸，再通过酯化、氨化得到( s ) ( + ) - n ， n ，n ，n 1 ，2 一丙二胺四乙酰胺，然后在多聚磷酸条件下环合得最终产物，收 率1 8 5 9 6 ( 以( s ) ( 廿n ，n ，n ，n 1 ，2 一丙二氨四乙酰胺计) 。 d o w e x 5 0 w x 4 h x n _ c o o h 邺h 3 c o o c c 一- n 瀛n 一一c c 呲o o c h h 。3 8 飞 一巩 入潍 重庆医科大学硕士研究生学位论文 喇h 2 。n c o c 瀛n _ 一c 洲o n 心h 2 p p a 线的缺陷，虽然在最终环合过程中采用( s ) 一( + ) n ，n ，n7 ，n7 1 ，2 丙二氨 四乙酰胺环合反应收率较之路线有所提高，但反应路线较长，同样不利于扩大 1 9 8 7 年m i l l e r 专利【l o 】制备右雷佐生路线中，也采用( s ) 一( + ) 1 ，2 - - - 氨 1 ，2 - i 天j - 胺四乙酰胺二盐酸盐，最后与胺基钠( n a n h 2 ) 在二甲基亚砜( d m s o ) 心n 冷吁2 眦一n 冷n g h 2 n o c 、 删o c j 孤n - 一洲c o n h 2 h 22 眦詈 图l 一7 合成路线 f i g u r e l 一7s y n t h e s i sr o u t e 该路线较以上两条路线反应时间大为缩短，但最后成环反应收率较之路线 提高不大。 9 心飞 一呲磊 入 “飞 一巩 溶 重庆医科大学硕士研究生学位论文 2 右雷佐生合成路线设计 在综合考虑文献资料的基础上，c r e i g h t o n 专利路线( 路线和路线) 中制 备( s ) ( + ) - n ，n ，n ，n 1 ，2 一丙二胺四乙酸路线过于复杂且收率过低，虽然 d w y e rf 等1 2 1 通过实验采用1 ，2 一丙二胺和氯乙酸在n a 0 h 碱性条件下制备( s ) - ( + ) 一n ，n ，n7 ，n - 1 ，2 一丙二胺四乙酸，大大缩短( s ) ( + ) - n ，n ，n ，n7 1 ， 2 一丙二胺四乙酸的制备时间，但由于( s ) ( + ) - h l ，n ，n ，n i ，2 一丙二胺四乙 酸在加热条件下易脱去羧基，故在与甲酰胺高温高压下环合生成右雷左生的收率 很低。与此同时，( s ) ( + ) - n ，n ，n ，n i ，2 一丙二胺四乙酸在如下( 图1 - 8 ) 所示的条件下，能转化成( s ) ( + ) - n ，n ，n7 ，n 1 ，2 一丙二胺四乙酰胺，对以 ( s ) _ ( + ) n ，n ，n ，n7 1 ，2 一丙二胺四乙酸作为环合中间体的反应不利i s , 9 1 。 嘲h o c o c h 冷n 一一c o o h ht u c h 3h 姜瀛k 一、删o c h 3 。 h ：瀛n 一洲o c h 。3 n h 3 c h 3 0 h 州h 2 。n c o c n 硷n - 一c c 。o 呲n h 2 图1 - 8 中间体转化 f i g u r e l - 8i n t e r m e d i a t et r a n s f o r m a t i o n 同时由路线中可以看出，通过( s ) 一( + ) - n ，n ，n7 ，n - i ，2 一丙二胺四乙 酰胺环合得到终产物收率有所提高，相对于( s ) 一( + ) 一n ，n ，n7 ，n 一1 ，2 一丙二 胺四乙酸对高温高压的不稳定，( s ) 一( + ) 一n ，n ，n ，n - 1 ，2 一丙二胺四乙酰胺 对反应条件要求简单。但从路线和路线中可以看出无论是在多聚磷或是胺基 钠反应条件下环合收率都不太高。 但就与前两条路线想比，路线反应过程简单，条件容易控制。故在对路线 的详细考察中，我们首先参照文献资料中对起始原料进行拆分，能够得到右旋l ， 2 一丙二胺，然后对反应条件进行了优化，尤其对环合过程中反应溶剂的考察，经 研究发现采用( s ) 一( + ) 一n ，n ，n7 ，n 一l ，2 一丙二胺四乙酰胺与苯酚反应，不仅 缩短了反应时间，同时提高了反应效率，目标产物收率也较为理想。 1 0 重庆医科大学硕士研究生学位论文 1 材料 1 1 原料与试剂 第三章右雷佐生的合成 表1 1 ：原料与试剂 名称规格标准生产厂家 d ( ) 酒石酸化学纯上海新浦化工厂 d l 1 ，2 二氨基丙烷分析纯 百灵威化学技术有限公司 甲醛分析纯重庆北碚化学试剂厂 硫酸 分析纯重庆北碚化学试剂厂 盐酸分析纯重庆无机化学试剂厂 乙醇 分析纯重庆东方试剂厂 乙酸乙酯分析纯 重庆东方试剂厂 苯酚分析纯重庆东方试剂厂 乙醚 分析纯重庆东方试剂厂 甲醇分析纯重庆东方试剂厂 氰化钠化学纯上海化学试剂四厂 硫酸钠分析纯重庆北碚化学试剂厂 1 1 重庆医科大学硕：研究生学位论文 2 合成路线路 h 2 n h 2 n h 3 h 2 n n h 2 n h 2 h 2 n n ，b i s ( d t a r t a r t e ) 一兰! ! 一- - 啼 唑帆竺n a c n n 兰瀛( 兰：。，。么。一c n h 2 n h 2 n 。o c c 一_ n 溉a h 卜- 洲c o n h h 严2 盟 3 工艺流程图 图1 - 9 合成路线 f i g u r e1 - 9s y n t h e s i sr o u t e i ：d l l ，2 一二氨基内烷 h c l - - - - - - - - 卜 2 一二氨基丙烷鍪华篓寸s 一( + ) 一l ，2 一二氨基丙烷 洒石酸盐 成盐酸盐 一 三益蘸篮。 警洲小忙胺四乙嗡茜龇兰矗黼忙氨基缩合水解四乙酰胺二盐酸盐 兰_ l 右雷佐牛粗品 堕塑 ，右雷佐牛精制晶 一右雷佐牛粗占扣= 二- 右雷佐牛精制晶 环合 图l 一1 0 工艺流程 f i g u r el 一1 0p r o c e s sc h a r t 1 2 以飞 一毗 溶 重庆医科大学硕士研究生学位论文 4 右雷佐生的合成工艺及详细操作步骤 4 1s 一( + ) 一1 2 一二氨基丙烷二盐酸盐的制备 将7 5 o g ( 0 5 m 0 1 ) d 一( ) 一酒石酸及1 5 0 m l 水放入5 0 0 m l 三口瓶中，加入2 2 0 9 ( 0 3 m 0 1 ) d l 1 ，2 二氨基丙烷，加热至8 0 ，搅拌，澄清后冷至5 c ，搅拌半小时， 过滤，尽量抽干，滤饼加入5 0 0 m l 三口瓶中，加入水1 5 0 m l ，搅拌加热至8 0 ， 澄清液冷至5 c ，搅拌半小时，过滤，干燥，得5 5 2 9 酒石酸盐，将5 5 2 9 酒石酸 盐放入装有2 0 0 m l 甲醇的5 0 0 m l 三口瓶中，通氯化氢气体至溶液澄清，继续通氯 化氢气体3 小时，过滤，得1 0 0 9 ( s ) - ( + ) 一1 ，2 一二氨基丙烷二盐酸盐，熔点2 3 7 2 3 9 ，比旋光度- 4 0 8 。，收率4 5 3 。 4 2 ( s ) 一( + ) _ n ，n ，n ，n 一1 2 一丙二胺四乙腈的制备 将( s ) - ( + ) - 1 ，2 - 二氨基丙烷二盐酸盐1 0 0 9 ( 0 0 7 m 0 1 ) 、水2 0 0 m l ，浓硫酸1 5 m l 、 甲醛( 4 0 ) 2 6 0 9 ( 0 3 5 m 0 1 ) 、氰酸钠1 5 o g ( 0 3 1 m 0 1 ) 投入反应瓶中，5 0 c 搅拌 3 小时，取样碱化t l c ( 展开剂：乙醇：氨水= 8 m l - 2 滴，( s ) 一( 廿1 ，2 - 二氨基丙烷： r 即8 5 ) 检测原料点消失后，继续反应2 小时，停止反应，溶液分为透明和棕红 两层，乙酸乙酯5 0 m l x 4 提取，乙酸乙酯液用稀盐酸( 1 0 ) 5 0 m l 5 洗涤，用 n a s 0 45 9 干燥乙酸乙酯液，蒸馏，得淡黄色液体1 3 8 9 ，比旋光度+ 3 0 7 。，收率 8 7 9 。 4 3 ( s ) 一( + ) - n ，n ，n ，n 一1 ，2 - 丙二氨基四乙酰胺二盐酸盐的制备 将稀盐酸( 2 0 ) 4 0 9 、( s ) 一( + ) 一n ，n ，n7 ，n7 l ，2 一丙二氨四乙腈1 3 8 9 ( 0 0 6 m 0 1 ) 投入2 5 0 m l 反应瓶中，6 0 搅拌5 小时，t l c ( 展开剂：氯仿：甲醇：甲酸= 7 - 2 5 ：2 ，( s ) - ( + ) - n ，n ，n7 ，n 1 , 2 丙二胺基四乙腈：剐邵6 8 ，( s ) 廿) n ，n ， n ，n7 1 ，2 丙二氨基四乙酰胺：r f 韧3 0 ) 判断终点，完毕后加入乙酸乙酯1 0 0 m l 振荡，静置分层，有机层为无色，水层为黄绿色，去掉有机层，搅拌下加入乙醇 1 0 0 m l 至水层，过滤，干燥，得淡黄色固体2 1 1 9 ，收率7 5 6 。 4 4 右雷佐生的制备 重庆医科大学硕士研究生学位论文 将苯酚1 5 o g ( o 1 6 m 0 1 ) 及( s ) - ( + ) 一n ，n ，n7 ，n 1 , 2 丙二氨基四乙酰胺 二盐酸盐1 5 o g ( 0 0 3 m 0 1 ) 投入2 5 0 m l 三口瓶中，于1 6 0 。1 7 0 反应回流5 小时， t l c ( 删j ：氯仿：甲醇：甲酸= 7 ：2 5 ：2 ，( s ) ( + ) n ，n ，n ，n 1 ，2 丙二 氨基四乙酰胺：r f = 0 3 0 ，右雷佐生：r f = - 0 3 8 ) 检测起始原料消失，停止反应，冷却， 过滤，加入乙醇1 0 0 m l ，过滤，析出，得黄色固体4 5 9 ，m p l 8 9 1 9 1 ，收率5 6 3 。 4 5 右雷佐生的重结晶 将粗品4 5 9 ，用乙醚乙醇( 1 ：2 ) 1 0 0 m l 重结晶，热溶后加入活性炭1 o g ， 趁热过滤，采用搅拌下骤冷法，外温控制在1 0 1 5 。c ，干燥后得类白色粉末3 8 9 ， m p l 9 2 1 9 3 。c ，收率8 4 4 。 5 实验结果及讨论 5 1 重结晶考察 在以d ( ) 酒石酸对d l 1 ，2 二氨基丙烷进行拆分形成酒石酸盐的过程中， 文献1 7 】对酒石酸盐进行了多次重结晶，但经多次试验，重结晶一次所得最终产品质 量与多次重结晶的产品质量一致，重结晶多次意义不大。 表l - 2 重结晶考察 重结晶次数 酒石酸盐质量( g ) 旋光度熔点( ) l 8 3 4 0 8 。 2 3 7 2 3 9 27 7- 4 1 2 02 3 6 2 3 8 3 7 1 - 4 0 8 。 2 3 7 2 3 9 注：在重结晶试验中，酒石酸盐粗品的初始重量均为1 0 0 9 5 2p h 的确定 在制备( s ) 一( + ) - l ，2 一丙二胺基四乙氰的过程中，经研究p h 值控制在1 3 之间，尤以p h 值为2 左右效果最佳，p h 值大于3 时反应收率较低： 表l - 3p h 考察 p h 值 l 23 3 收率8 5 4 8 7 9 8 0 3 7 7 1 1 4 重庆医科大学硕士研究生学位论文 5 3 重结晶溶剂的确定 最后对重结晶溶剂考察时，对同一批右雷佐生粗品在不同溶剂对条件下进行 了收率、旋光度以及熔点考察结果，如下表所示： 表l 一4 重结晶溶剂考察 收率旋光度熔点 粗品 2 5 3 。1 7 5 一1 7 7 d m f 乙醇7 8 8 1 7 6 01 9 1 1 9 2 乙醚乙醇 8 4 4 1 0 9 01 9 2 1 9 3 t h f 乙醇6 9 1 1 4 7 。1 9 4 1 9 6 6 结论 在以上试验工作基础上，我们以d l 1 ，2 二氨基丙烷为起始原料，d 一( - ) 一酒 石酸对其进行拆分制备( s ) ( + ) 1 , 2 二氨基丙烷二盐酸盐，该盐与甲醛及氰化 钠缩合反应生成( s ) 一( + ) - n ，n ，n ，n 一1 , 2 丙二氨基四乙氰，( s ) ( + ) - n ，n ， n 7 ，n - 1 ，2 丙二氨基四乙氰酸水解生成( s ) ( + ) - n ，n ，n ，n 1 ，2 一丙二氨基 四乙酰胺二盐酸盐，( s ) 一( + ) - n ，n ，n ，n 一1 , 2 - 丙二氨基四乙酰胺二盐酸盐通 过与苯酚环合反应最终生成右雷佐生。 1 5 重庆医科大学硕士研究生学位论文 1 质谱 第四章右雷佐生的结构解析 图1 n 质谱 f i g u r e l - l lm a s ss p e c t r o g r a m 解析：根据本品的结构特征，其质谱中的几个特征离子碎片解析如下： h c 咄瓮蓬 h z 它一 h 2 n o r 图1 1 2 离子碎片 h nm n f i g u r e l 一1 2 i o nf r a g m e n t 仪器：l c m s2 0 1 0 e v ，离子源：e s i + 叱 c 叫 h 2 h 重庆医科大学硕士研究生学位论文 结论：由上图可知样品质谱的分子离子峰与右雷佐生的分子量相符，主要碎 片也与右雷佐生结构相符。 2 红外光谱 仪器型号：p e r k i n e l m e r 红外光谱图：将自制右雷佐生样品和标准品分别用k b r 压片，记录红外光谱 图( 附图1 1 3 、1 1 4 ) ，测定数据列表如下： 表1 - 5 红外光谱测定数据 t a b l e1 - 5d a 切o f 己 吸收峰 样品 标准品振动类型基团 强度 3 2 2 7 0 43 2 2 7 3 3伸缩n hm 3 0 9 0 4 93 0 9 0 2 6组频带c = oa n d n hw 2 9 8 5 5 5 ；2 9 5 2 7 6 2 9 8 5 1 1 ：2 9 5 2 3 2伸缩c ha n dc h 3w 2 8 0 0 7 9 ；2 8 2 2 8 82 8 0 0 3 2 ；2 8 2 2 5 0伸缩- c h 2 - 1 、m 1 6 9 4 9 7 1 6 9 4 5 0 伸缩 c = os 1 3 9 9 0 21 3 9 9 4 1对称变形 - c h 3 1 3 4 5 7 7 ；1 3 1 8 2 0 1 3 4 5 6 8 ：1 3 1 8 2 5 伸缩亚酰胺c n m 1 2 7 6 5 9 1 2 7 9 8 7 伸缩脂肪胺c - n m 1 1 2 7 3 61 1 2 7 3 2骨架 异丙基m 8 2 9 5 68 2 9 6 1面外变形n hm 6 1 6 3 l ：6 0 2 3 5 6 1 6 2 2 ：6 0 2 3 3面内弯曲 n hm 解析： 亚酰胺单元结构：3 2 2 7 c m j 亚酰胺的n h 伸缩振动，3 0 9 0 c m j 碳基伸缩振动 和n h 伸缩振动的组频带。1 6 9 4c m 1 亚酰胺的碳基伸缩振动。1 3 4 5c m 。和1 3 1 8c m d 亚酰胺的c - n 伸缩振动。8 2 9c m 1 亚酰胺的n h 面外变形振动，6 1 6c m 1 亚酰胺的 n h 面内弯曲振动。证明分子中含有亚酰胺结构单元。 脂肪胺单元结构：1 2 7 6c m 。1 脂肪叔胺的c n 伸缩振动。证明分子中喊有脂肪 叔胺结构单元。 c h 2 结构单元：2 8 0 0c m 。亚甲基直接与氮原子相连，受氮原子的影响，它们 1 7 重庆医科大学硕士研究生学位论文 的饱和c h 伸缩振动想低频率移动。证明分子中含有c h 2 - n 结构单元。 c h 2 ( c h ) c h 3 单元结构：2 9 8 5c m 1 和2 9 5 2e m 1 甲基和次甲基的c h 伸缩 振动。1 3 9 9c m 以甲基的对称变形振动。1 1 2 7c m d 异丙基的骨架振动。证明分子中 含有c h z ( c h ) c h 3 结构单元。 结论：右雷佐生自制品和标准品红外光谱一致，且与其化学结构相符合。 1 8 一2矗口口霄-的-q口嚣hon喇曩iq口-o笛一。毒n一。一p-昌眦一 寝匝女甚咄憩冀斟犁睁诞ni-_匝 议秘犁扑删妖奄书器貅k藻凼巡栅 。一 一。一盘暑露v q置露时vnh矗co口-o罾。皇一n一。一昌眦一i!i 密匝女最喀凄一举橱诞=-i匝 议错牮扑州铁奄书匿扑k宾盥送恻 重庆医科大学硕士研究生学位论文 3h p l c 图谱 色谱柱足g r a c e s m a r t 川r p c i s ( 46 x 2 5 0 m m ld ，5 9 m ，g r a c e 公司) ；流础k t 为厶腊一2 0 m m o l 一n a h 2 p 0 4 溶液( 1 0 ：9 0 v v , p h - 45 ) ：榆；_ l 4 波长2 0 5 n m ：流 谜为10 m l r a i n 一：审温：进样聃2 0 1 1 1 。记求( 圈1 一1 5 ，l 1 6 ) 。 田l 1 5 右雷佐生标准品h p l c 囤谱 f i l i 町e l - 1 5 t i l e h p l co f o e x r a z o x a n ( 对a n d a r d l 。一 】 j ! ! i o 】! ! ! e ! ! i j ! ! ! ! = ! r m -u 结论：打h i 优，“制品和标准乩离效液十1 j 色带敛 重庆医科大学硕士研究生学位论文 4 总结 以上的对自制产物的结构考察，由于研究费用有限，没能完全按照对合成产 物进行结构方面全部项目的考察。但就完成的有关质谱，红外光谱以及高效液相 色谱的实验工作，可以初步确认自制产物与右雷佐生结构相一致。 2 2 重庆医科大学硕士研究生学位论文 第二部分右雷佐生的质量控制 由于手性药物的不同立体异构体在药效、药代及毒理等方面都可能存在差异， 美国f d a 在其关于开发立体异构体新药的政策中要求在对手性药物进行药理毒理 研究时，应分别获得该药物的各立体异构体，进行必要的比较研究，以确定拟进 一步开发的药物。所以手性药物药学研究的主要任务就是为药物的筛选与进一步 研究提供足够数量与纯度的立体异构体【1 3 - 15 1 。 本文采用消旋体的拆分的方法，即采用手性拆分试剂与外消旋的中间体或终 产品反应生成非对映异构体，分离纯化得到所需的非对映异构体，再去掉手性拆 分试剂，从而得到所需构型的手性化合物。在此工艺中影响终产品的光学纯度的 因素有：手性拆分试剂的光学纯度、分离纯化是否完全、拆分及后续反应的构型 变化。 总之，在手性药物制备工艺研究中，如果能充分考虑从工艺中对产品的光学 纯度进行有效的全程控制，就能从源头上控制产品的质量。当终产品的质量标准 难以全面有效地控制其光学纯度时，就更应该重视制备工艺研究中的过程控制。 最后根据本合成路线的相关特点，对按照以上合成路线方法制得最终产物， 做了如下初步的质量方面的考察。 重庆医科大学硕士研究生学位论文 4 1 2 高氯酸标准溶液的配制和标定 主要仪器和试剂 电子分析天平( 万分之一) s a r t o r i u sa n a l y t i c 德国 邻苯二甲酸氢钾重庆市北碚化学试剂厂 高氯酸重庆市北碚化学试剂厂 冰乙酸重庆市北碚化学试剂厂 乙酸酐重庆市北碚化学试剂厂 结晶紫指示剂重庆市北碚化学试剂厂 溶液的配制 在5 0 r a l 冰乙酸中加入8 5m l 高氯酸、2 0m l 乙酸酐混匀冷至室温，用冰乙酸 定容至1 0 0 0 m l ，静置过夜。 溶液的标定 称取约0 1 6g 已于1 0 5 1 1 0 ( 2 下干燥2h 的基准邻苯二甲酸氢钾，精密称定， 装入2 5 0m l 三角烧杯中用约2 0m l 冰乙酸温热溶解，滴入l 滴结晶紫指示剂，摇 匀。用配制好的高氯酸溶液滴定到溶液由蓝紫色变为绿色，并做空白实验。 计算 高氯酸标准溶液浓度按下式计算： c ( i i c l 0 4 ) 2 = ( v i - v 2 ) x0 2 0 4 2 式中：乙( 啪) 高氯酸标准溶液浓度( m o l l ) ；m 邻苯二甲酸氢钾的质 量( g ) ；k 滴定基准物时高氯酸用量( m l ) ；吒溶剂空白实验耗用高氯 酸体积( m l ) ；0 2 0 4 2 与1 o o m ll ( h c l 0 4 ) = 1 o m o l l 标准溶液相当的以g 表示 的邻苯二甲酸氢钾的质量。 重庆医科大学硕士研究生学位论文 表2 - 1 高氯酸的标定 t a b l e 2 1s t a n d a r d i z a t i o nh c l 0 4 邻苯二甲酸氢钾质量( g )高氯酸体积( m l ) 冰乙酸( m l ) c ( 确：吼) 0 0 2 5 2 0 o 1 5 7 4 6 9 5 5 2 0 0 1 0 1 0 0 1 5 2 67 2 7 52 0o 1 0 3 0 0 1 9 9 09 4 0 02 0o 1 0 4 0 4 1 3 右雷佐生含量的测定 圭蔓堡墨塑遮型 z d j 4 a 型自动电位滴定仪 玻璃电极 饱和甘汞电极 电子分析天平( 万分之一) 高氯酸 冰乙酸 乙酸酐 结晶紫指示剂 测定方法 上海精密科学仪器有限公司 上海精密科学仪器有限公司 上海精密科学仪器有限公司 s a r t o f i u sa n a l y t i c 德国 重庆市北碚化学试剂厂 重庆市北碚化学试剂厂 重庆市北碚化学试剂厂 重庆市北碚化学试剂厂 取本品约0 1 9 ，精密称定，加冰醋酸醋酐1 5 m l 溶解后，照电位滴定法( 中华 人民共和国药典2 0 0 5 版第二部附录v i ia ) ，用经标定高氯酸滴定液( 0 1 m o l l ) 滴定，同时加入结晶紫指示剂确定终点颜色变化，并将滴定的结果用空自试验校 正。 计算 右雷佐生含量按下式计算： k 渊= 生业鼍产：塑l o 。 式中：d 吖) 右雷佐生含量( ) ；m 样品质量( g ) ；矿滴定时高 氯酸用量( m l ) ：0 0 0 6 空白实验耗用高氯酸体积( m l ) ；2 6 8 2 8 右雷佐生分 子质量。 重庆医科大学硕士研究生学位论文 表2 - 2 右雷佐生的含量 t a b l e 2 1c o n t e n to fd e x r a z o x a n e v ( 高氯酸)结晶紫 测定次数 m ( 右雷佐生) gw ( 右雷佐生) m l 滴定前滴定终点 1 0 0 0 6紫色蓝绿 20 0 9 3 03 4 5 39 9 4 5 紫色 蓝绿 3o 1 0 3 23 8 3 6 9 9 5 7紫色蓝绿 40 1 0 1 33 7 5 8 9 9 3 7紫色蓝绿 平均值 0 0 9 9 23 6 8 29 9 4 6 4 2 紫外一可见分光光度法测定右雷佐生的含量 4 2 1 主要仪器与试剂 u v - 2 5 01p c 紫外可见分光光度计 右雷佐生对照品 盐酸 水为重蒸馏水 4 2 2 溶液的配置 日本岛津公司 重庆博凯药业有限公司，批号2 0 0 6 1 0 1l 重庆市北碚化学试剂厂 精密称定右雷佐生对照品0 0 1 0 0 9 ，于1 0 0 m l 容量瓶，加入o 1 m o l l 盐酸适 量，振摇溶解，定容至刻度线，制成浓度为1 0 0 m g 1 0 0 m l 溶液。 4 2 3 波长测定 取“2 2 ”项下溶液，用0 1 m o l l 盐酸稀释成1 0 m g 1 0 0 m l 溶液，在2 0 0 4 0 0 n m 范围内做全波长扫描，结果在2 0 5 n m 处有最大吸收峰，故选用此波长作为测定波 长，见图2 1 。 2 7 重庆医科大学瞬研兜生学位论文 童i 曹i 4 2 4 标准曲线 田厶l 吸收波长的考察 f i g u 陀2 - ia b m r p t i o nw a v e l e n g t he x p e r i m e n t 溶液的削骨；取“22 ”1 0 1f 溶液，丌 0l m o l l 盐酸定吊稀释成浓度分剧为o2 ， 0 4 ，06 ，o8 t10 m g 1 0 0 m i 的对照品溶液作2 0 5 n m 处测得吸光度tj f = 以吸光度 ( a ) 为纵啦标，浓度( c ) 为横啦标绘制标准i i i l 线。 袁2 - 32 0 5 n m 处不同采度样品吸收建长 浓度波k 标准- 垴 a la 2a 3、f 均值 ( m g 1 0 0 m 1 ) ( n m ) l022 0 50 15 50 1 5 50 1 5 70 1 5 6 20 42 0 503 3 803 3 803 3 703 3 8 3062 0 504 6 404 6 404 6 204 6 3 4082 0 505 9 405 9 405 9 505 9 4 5】02 0 507 0 307 0 207 0 307 0 3 重庆医科大学硕士研究生学位论文 图2 - 2 标准曲线 f i g u r e 2 - 2s t a n d a r dc u r v e 回归方程为：y = o 6 7 5 x + 0 0 4 0 4 ，r - - 0 9 9 5 7 ( n = 5 ) ，右雷佐生对照品溶液在浓度为 0 2 1 o m g l o o m l 范围内线性关系良好。 4 2 5