（有机化学专业论文）三株南海红树林内生真菌次级代谢产物研究.pdf

中山大学硕士学位论文 三株南海红树林内生真菌次级代谢产物研究 s t u d i e so nt h es e c o n d a r ym e t a b o l i t e so ft h r e e m a n g r o v ef u n g i f r o mt h es o u t hc h i n as e a 专业有机化学 硕士生李庆 导师佘志刚副教授 摘要 海洋复杂多变的环境导致了海洋微生物的多样性。海洋微生物因其特殊的 生存环境而具有产生新型生物活性物质的巨大潜力。近年来，从海洋真菌中分离 鉴定了许多结构新颖的次级代谢产物，这些化合物显示了良好的抗肿瘤、抗细菌 或抗真菌等生物活性，为新药的开发和各种疑难疾病的治愈提供了新的希望。 本论文主要分成两个部分，第一部分( 第1 章) 综述了海洋微生物次生代谢 产物的最新研究情况。第二部分( 第2 到第4 章) 系统研究了来自中国南海红树 林的三种内生真菌( z h l l 6 ，1 4 0 3 # ，z h 5 1 ) 的次级代谢产物。从以上3 种南海 红树林真菌的培养液及菌体中，分离得到了2 9 个化合物，并通过u v 、i r 、n m r 、 m s 等方法鉴定了这2 9 个化合物的结构，其中三个是新化合物，1 个化合物是首 次从自然界分离得到的，同时还得到一个新的单晶。 论文的第2 章，研究了采自珠海琪澳岛的红树林内生真菌z h l l 6 的次级代 谢产物。通过实验室发酵培养，反复柱层析，制备薄层层析，重结晶纯化，共得 到了8 个化合物，其中有三个是香豆素和异香豆素类化合物，它们分别是 4 一a c e t y l 一6 ，8 - d i h y d r o x y i s o c h r o m a n - 1 一o n e ( 2 1 ) ，3 , 7 一d i h y d r o x y - 9 m e t h o x y - 1 - m e t h y l 一6 h - b e n z o c c h r o m e n - 6 - o n e ( 2 2 ) ，6 ，8 一d i h y d r o x y - 3 - m e t h y l - 1h - i s o c h r o m e n - 1 一o n e ( 2 3 ) ， 环脯异亮肽( 2 4 ) ，麦角甾醇( 2 5 ) ，三羟基麦角甾醇( 2 6 ) ，尿嘧啶( 2 7 ) ， 胸腺嘧啶( 2 8 ) 。在实验过程中，首次得到了化合物( 2 1 ) 的单晶。 论文的第3 章，研究了南海红树林内生真菌1 4 0 3 # 的次级代谢产物。经过分离 纯化，通过波谱分析和理化常数对照，一共得到了1 3 个化合物，其中( 3 1 ) 和 中山大学硕士学位论文 ( 3 2 ) 是新化合物。这1 3 个化合物是l ，4 ，6 ，7 ，9 - p e n t a h y d r o x y l 一2 - m e t h o x y - 7 a m e t h y l - 5 伐p ，6 a ，8 a f t ，8 弗，兜，lo a a - h e x a h y d r o a n t h r a c e n - 10 - o n e ( 3 1 ) ，4 一h y d r o x y - 2 , 6 ，7 t r i m e t h o x y - 6 、一m e t h y l 一3 h s p i r o b e n z o f u r a n - 2 ，l - c y c l o h e x 2 e n e 一3 ，4 - d i o n e ( 3 2 ) ， 灰黄霉素( 3 3 ) ，去氯灰黄霉素( 3 4 ) ，l ，4 , 5 ，6 ，7 ，9 一h e x a h y d r o x y - 2 m e t h o x y - 7 a - m e t h y l 一5 p ，9 p ，8 a 1 3 ，6 a ，10 a a - h e x a h y d r o a n t h r a c e n - 10 ( 10 a 1 1 ) - o n e ( 3 - 5 ) ，1 , 4 一二羟基 一3 - 甲氧基一7 一甲基一9 ，1 0 - 葸醌( 3 6 ) ，l ，4 二羟基一7 - 甲基- 9 ，1 0 - 葱醌( 3 7 ) ，i - h y d r o x y - 3 一m e t h y l a n t h r a c e n e 一9 ，1 0 d i o n e ( 3 - 8 ) ，大黄酚( 3 - 9 ) ，5 , 7 - 二羟基2 甲基色原酮 ( 3 一l ，6 ，7 ，8 ，9 ，10 - p e n t a h y d r o x y - 2 一m e t h o x y - 6 - m e t h y l - 5 ，6 ，7 ，8 - t e t r a h y d r o - a n t h r a c e n e 一1 ，4 - d i o n e ( 3 - 11 ) ，6 ，7 ，9 ，1 0 - t e t r a h y d r o x y - 2 - m e t h o x y - 6 一m e t h y l - 5 ，6 ，7 ，8 - t e t r a h y d r o a n t h r a c e n e - 1 ，4 一d i o n e ( 3 12 ) ，7 - h y d r o x y - 2 ，5 - d i m e t h y l - 4 h c h r o m e n - 4 - o n e ( 3 1 3 ) 。初步药理测试显示，新化合物3 1 和已知化合物3 5 对口腔癌细胞k b ， k b v 2 0 0 及乳腺癌细胞m c f 。7 不显示明显的细胞毒性，3 1 l 具有抑制六株肿瘤细胞 的活性，包括肺癌细胞株a 5 4 9 ，肝癌细胞株h e p 2 ，肝癌细胞株h e pg 2 ，口腔癌 细胞株k b ，结肠癌缨胞株l o v o , 乳癌细胞株m c f 7 ，多药抗药乳瘸细胞株 m c f - 7 a d r ，其i c 5 0 分别为，2 4 4 “劝脚，3 1 5p i i l l ，4 4 1i i g l i l l ，3 1 5 咖l 3 。3 5 瑟韵融，4 7 6 转蓟瞳，5 。4 5 鲳樾。本论文还逶过n o e s y 确定了他合物3 5 的穗 对构型。 论文的第4 章，研究了南海红树林内生真菌z h 5 1 的次级代谢产物。从培养 液的乙酸乙酯提取物中共分离得到4 个化合物，其中4 1 是一个具有两个三环共 轭平面豹新化合物，具有非常强的荧光量子效率，且与d n a 有较强的俸用，有 成为与d n a 作用药物的可能。l ，1 0 - d i h y d r o x y d i b e n z o b ，e o x e p i n e 一6 ，1 1 d i o n e 洚2 ) ，凌桂酸( 4 3 ) ，2 甲基3 羟基4 h - 曦嚷4 酮( 今4 ) 。从菌体孛分到4 个化 合物丁二酸( 4 5 ) ，麦角甾醇( 4 6 ) ，过氧麦角甾醇( 4 7 ) 和环( 苯丙甘) 二 歉( 4 8 ) 。 关键词：海洋微生物，红树林真菌，生物活性，次级代澍产物 i l 中山大学硕士学位论文 a bs t r a c t t h ee n v i r o n m e n to ft h eo c e a ni sc h a n g e a b l ea n dc o m p l e x ，w h i c hc a u s e st h e d i v e r s i t yo fm a r i n em i c r o o r g a n i s m m a r i n em i c r o o r g a n i s m s ，w h i c hl i v ei ns p e c i a l e n v i r o n m e n t ，h a v eb e e np r o v e dt ob e p o t e n t i a li np r o d u c i n gn o v e lb i o a c t i v e s u b s t a n c e s i nr e c e n ty e a r s ，al o to fn o v e lc o m p o u n d sh a v eb e e ni s o l a t e da n d s t r u c t u r a l l ye l u c i d a t e df r o mm a r i n ef u n g i ，a n dm o s to ft h e ms h o w e da n t i t u m o r ， a n t i b a c t e r i a l ，a n t i f u n g a lo ro t h e rb i o a c t i v i t i e s t h i sm a s t e r st h e s i si n c l u d e dt w os e c t i o n si nf o u rc h a p t e r s t h ef i r s tp a r t ( c h a p t e r1 ) i sar e v i e wo nt h ea d v a n c eo fn a t u r a lp r o d u c t sf r o mm a r i n e - d e r i v e dm i c r o o r g a n i s m i n t h es e c o n dp a r t ( c h a p t e r2t oc h a p t e r4 ) ，t h es e c o n d a r ym e t a b o l i t e so ft h r e em a n g r o v e e n d o p h y t i cf u n g i ，z h l1 6 ，1 4 0 3 # a n dz h 5 1 w e r es t u d i e ds y s t e m a t i c a l l y 2 9 m e t a b o l i t e sw e r ei s o l a t e df r o mt h et h r e em a n g r o v ee n d o p h y t i cf u n g i , a n da l lo f t h e mw e r ei d e n t i f i e db yi r , u v ，m s ，n m rs p e c t r u m s ，i n c l u d i n g3n e wc o m p o u n d s ， an o wc r y s t a ls t r c t u r ea n do n ec o m p o u n dw a si s o l a t e df r o mt h en a t u r ef o rt h ef i r s t t i m e i nc h a p t e r2 ，e i g h tc o m p o u n d so b t a i n e df r o mm a n g r o v ee n d o p h y t i cf u n g u sz h116 ， i n c l u d i n gt h r e ec o u m a r i n sc o m p o u n d s 4 - a c e t y l 一6 ，8 - d i h y d r o x y i s o c h r o m a n - 1 一 o n e ( 2 一1 ) ，3 , 7 d i h y d r o x y - 9 - m e t h o x y - 1 m e t h y l - 6 h - b e n z o c c h r o m e n - 6 - o n e ( 2 - 2 ) ， 6 , 8 一d i h y d r o x y - 3 一m e t h y l - il l - i s o c h r o m e n - 1 - o n e ( 2 - 3 ) ，c y c l o 一( p h e - g l y ) ( 2 4 ) ，e r g o s t e r o l ( 2 5 ) ，7 ，2 2 一( e ) - d i e n e - 3 1 b ，5 a ，6 d t r i o l - e r g o s t a ( 2 - 6 ) ，u r a c i l ( 2 7 ) a n d5 - m e t h y l u r a c i l ( 2 8 ) t h ec r y s t a ls t r c t u r eo fc o m p o u n d 2 - 1w a so b t a i n e da st h ef i r s tt i m e i nc h a p t e r3 ，t h es e c o n d a r ym e t a b o l i t e so fm a n g r o v em a r i n e - d e r i v e df u n g u s h a l o r o s e l l i n i as p 14 0 3 # f r o mt h es o u t hc h i n as e aw a ss t u d i e d t h i r t e e nc o m p o u n d s w e r ei s o l a t e df r o mt h ec u l t u r ea n dm y c e l i u mo f14 0 3 # a n dt w oo ft h e mw e r en e w c o m p o u n d s 3 - 1 1a n d3 - 1 2w e r ed e r i v a t i v e so f a n t h r a q u i n o n e ，3 1 1w a st e s t e da g a i n s t a 5 4 9 ，h e p 一2 ，h e pg 2 ，k b ，m c f 一7 ，a n dm c f - 7 a d ru s i n gt h em t tm e t h o d 3 9 s i g n i f i c a n t l ys u p p r e s s e dt h eg r o w t ho f t h e s ec e l ll i n e si nv i t r ow i t hi c 5 0v a l u e so f 2 6 4 ， 5 3 9 ，5 9 0 ，4 1 9 ，6 1 3 ，a n d6 6 8 1 x g m l ，r e s p e c t i v e l y , 3 - 1s h o w e dw e a kc y t o t o x i c i t y t o w a r dk b 、k b v 2 0 0a n dm c f 7c e l l s t h er e l a t i v ec o n f i g u r a t i o no f3 - 5w a s i i i 中山大学硕士学位论文 e l u c i d a t e db yn o e s y i nc h a p t e r4 ，t h es e c o n d a r ym e t a b o l i t e so fm a n g r o v em a r i n e - d e r i v e df u n g u s s t e m p h y l i u ms p z h 5 1f r o mt h es o u t hc h m as e aw a ss t u d i e d 4 - 1w a san o v e l c o m p o u n dw i t hu n i q u en e ws k e l e t o n s ，l ，1 0 一d i h y d r o x y d i b e n z o b ，e o x e p i n e - 6 ，1 1 - d i o n e ( 4 - 2 ) ， c i n n a m i ca c i d ( 4 3 ) a n d2 - m e t h y l - 3 一h y d r o x y - 4 h - p y r a n - 4 - o n e ( 4 - 4 ) w e r ef r o m t h eb r o t h ，s u c c i n i ca c i d ( 4 5 ) ，e r g o s t e r o l ( 4 6 ) ，7 , 2 2 ( e ) e r g o s t a d i e n e - 3 1 3 ，5 a ，6 多一t r i o l ( 4 7 ) a n dc y c l o - ( p h e g l y ) ( 4 8 ) w e r eo b t a i n e df r o mt h em y c e l i u m k e yw o r d s ：m a r i n em i c r o o r g a n i s m , m a n g r o v ef u n g u s ，b i o l o g i c a la c t i v i t y , s e c o n d a r y m e t a b o l i t e s i v 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下， 独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外， 本论文不包含任何其它个人或集体已经发表或撰写过作品成果。 对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确 方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名：礴认 日期：湖7 年6 月昌日 知识产权保护声明 本人郑重声明：我所提交答辩的学位论文，是本人在导师 指导下完成的成果，该成果属于中山大学化学与化学工程学院， 受国家知识产权法保护。在学期间与毕业后以任何形式公开发表 论文或申请专利，均需由导师作为通讯联系人，未经导师的书 面许可，本人不得以任何方式，以任何其它单位作全部和局部 署名公布学位论文成果。本人完全意识到本声明的法律责任由本 人承担。 学位论文作者签名：李 20 0 9 年6 月 学位论文使用授权声明 本人完全了解中山大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学 校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电 子版和纸质版，有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论 文进入学校图书馆、院系资料室被查阅，有权将学位论文的内容编入 有关数据库进行柃索，可以采用复印、缩印或其他方法保存学位论文。 新签名：盔刎 醐：叩汨彦日 # 倍日 者 f 作净 姗乎 做 矽 中山大学硕士学位论文 第一章海洋微生物活性代谢产物研究进展 及其研究新方法 1 1 引言 海洋微生物作为活性物质的新来源，正瞄益为国内外海洋研究工作者、化学 研究工作者、生物医药工作者所重视。海洋约占地球表面积的7 1 ，其中蕴藏着 丰富的微生物资源，特殊复杂的海洋环境( 高盐度、高压力、低温及特殊的光照 等) 赋予海洋微生物产生不同于陆地微生物的特殊产物。随着陆地资源的不断开 发及枯竭，发现新的活性物质的可能性日益减小，再加上抗药性等问题越来越严 重，据w t o 报道目前药物失去作用的速度与发现新药的速度差不多，寻找新药 的任务迫在眉睫i n 。 从陆地微生物中继续筛选天然药物的工作一直未曾停止，此工作每年估计耗 资9 0 亿美元，但是从中发现新的代谢产物的速度已在下降，爵前分离到的陆生微 生物的代谢产物大部分是已知化合物。一方面，随着抗生素类药物的普遍使用， 传染性病菌对传统抗生素的抗药性正在迅速增长，过去几十年曾一度被控制住的 一些疾病又开始蔓延1 2 l 。据报道，器前有1 2 种重要病菌具有抗药性，丽且病原微 生物获得抗药性的速度远快于人类从陆生微生物中获得新抗生素的速度。其中结 核分枝枵菌( m y c o b a c t e r i u mt u b e r c u l o s i s ) 和金黄色葡萄球麓( s t a p h y l o c o c c u s a u r e u s ) 的高度耐药性就是两个很好的例证；另一方面，随着环境的不断恶化， 心脑血管疾病、恶性肿瘤、糖尿病、老年性痴呆症等疾病日益严重地威胁着人类 健康，艾滋病、玛尔堡病毒病等新的疾病又不断出现，仅病毒性疾病平均每年就 新增2 3 种，人类迫切需要寻找新的、特效的药物来治疗这些疾病。 我国海域辽阔，海洋资源丰富，是世界上最早研究和应用海洋药物的国家。 早在公元前的尔雅内就有蟹、鱼、藻类药物的记载。黄帝内经中，就有 以乌贼骨制作药丸的记载。本草纲目中也记载了9 0 余种海洋药物f 引。 2 l 世纪是海洋的世界，“向海洋要药 的战略设想，己弓| 起学术界、科技 中山大学硕士学位论文 界、产业界和政府的高度重视。海洋生物的多样性、复杂性和特殊性使源于其中 的海洋天然产物也具有多样性、复杂性和特殊性，这正为寻找海洋生物活性物质 提供了丰富的资源。海洋生物的生存环境也远比陆地环境恶劣，种间的生存竞争、 生态作用和影响也远比陆生微生物复杂和广泛。因此与陆生生物相比，海洋生物 活性物质的生理活性也要强的多l “i 。人们对从海洋微生物中找到特殊药物寄予 了极大的希望。融从1 9 2 9 年弗莱明从真菌中发现青霉素以来，微生物活性代谢 产物就成了药物的丰富源泉。在过去的近8 0 年的时间里，科学家已经从微生物 中发现了3 0 0 0 0 5 0 0 0 0 种天然产物，其中1 0 0 0 0 多种具有生物添性，8 0 0 0 多种是 抗菌和抗肿瘤活性物质。如今，全球抗生素年产量超过l o 万吨，产值5 0 多亿元 1 7 l 。由此可见，海洋微生物的活性物质对人类健康的极为重要性。 早在1 9 1 4 年i s s a t c h e n k o 就写出了第一部有关深海微生物的专著，此后 z o b e u 等发表了有关深浅海海洋微生物学的巨著。此蜃，海洋微生物的研究进 展十分迅速：1 9 7 8 ，1 9 8 7 年间，有2 0 7 0 篇文章报道海洋天然产物，其中只有2 1 篇( 王) 是有关微生物的。这些文献共列述了3 0 7 0 种代谢物，其中有2 2 种( o 7 源自细菌和真菌。以后十年间( 1 9 8 8 - 1 9 9 7 ) 文献总数量( 4 7 9 1 篇) 及分离得到的代 谢物数量( 7 0 9 9 种) 都增长了1 3 1 ，1 5 1 篇文章申报道了2 4 6 种化合物，文献总 数量及代谢物数量分别增长了6 1 9 和1 0 1 6 隅1 。1 9 8 8 1 9 9 2 年间，海洋微生物产 生的新化合物几乎麸零上拜到1 2 ? ，丽来源于陆栖链霉菌产生的新化合物已 由7 4 7 下降到5 0 5 。 海洋微生物不仅广泛存在于无生命的各种海洋基菝当中，还广泛存在予海洋 高等动植物当中。这些微生物可能存在于细胞外，细胞内或存在于宿主细胞的核 内，与宿主之间存在着共生、附生、寄生、互惠同生等等的各种关系。如科学家 们发现阮l a e m o nm a c r o d a c t y l u s 虾的卵，对l a g e n i d i u mc a l l i n e c t e s 的病原真菌具 有明显的免疫能力。于是，从其表露分离得到一株a l t e r o m o n a ss p 。的海洋细菌， 从该细菌中找到了可以抑制这种病原真菌的化合物2 ，3 一吲哚啉二酮，此化合物 可以防止瘸原真菌感染。嚣此，化学家们开始热衷于微生物天然产物新药先 导化合物的新资源的研究。此外，海洋共生微生物有可能是其宿主中天然活性物 质的真正产生者，具有重要的研究价值1 9 1 。 2 0 0 9 年，b l u n t 等人对1 9 6 5 2 0 0 7 年间报道的新化合物的生物学来源和地域 2 巾山大学碰士学位论文 来源进行了分类比较( 图卜1 ，1 2 ) l i o j 图1 - 1 按生物学来源分的新海洋天然产物的分布状态 传统优势的海绵和腔肠动物依然在新化合物来源分类中占有优势，而海洋 微生物则是另外一个主要来源，尤其引人注意的是2 0 0 7 年从海洋微生物中得到 的新化合物的数量比2 0 0 6 年增长了3 8 ，比1 9 6 5 2 0 0 5 年的年均数量增长了 6 0 0 。这一增长趋势直观的反应出科学家们对海洋微生物的研究越来越感兴趣。 图1 - 2 按地域来源分的新海洋天然产物的分布状况 从图1 - 2 中可| 三【看出，中国海域，日本，西太平洋，加勒比海，印度洋在新 化合物的地域来源分类中占有优势，其中又以中国海域占绝对优势。2 0 0 1 - 2 0 0 7 年从中国海域得到的新化舍物年均数量较1 9 6 5 2 0 0 7 年的年均数量有了几何数量 级的激增。中国海域现在已经成为新化合物的最重要来源地之一。 1 9 9 6 年，中国正式启动了海洋“8 6 3 ”计划，将海洋生物技术和海洋药物的 研究与开发列为重点课题，但是微生物、浮游生物的开发比较少。2 0 0 1 年“8 6 3 ” 课题正式有了海洋微生物研究这一课题研究方向。海洋天然产物、海洋多糖、海 洋微生物和海洋生物技术的研究是我国海洋药物研究的四大特点。这极大地推动 巾由大学矮士学位论文 了我困海洋微生物药物的研究工作。 我们课题组与香港城市大学、中山大学生命科学院以及其他高等院校积极合 作，率先在国内开展海洋微生物研究工作，从几十种南海海洋微生物中分离得到 许多有价值的代谢产物。有些结构葚# 常珍奇，有些有较强的抗菌、抗肿瘤、降血 压或抑制z | 酰胆碱酯酶的活性1 1 舶1 。该缓的研究成果弓| 起了国际学术赛的广泛 关注。 薹。2 海洋微生物活性代谢产物的研究进展 1 2 1 海洋微生物抗菌物质的研究进展 在当今抗生索普遍应焉的时代，社会和科学界对细菌的耐药性迅速凄现显得 措手不及，因此迫切需要新类型的抗生素快速和持续的开发，以适应缨菌抗生素 敏感性改变的速度。在过去的十年中，通过微生物筛选来寻找抗蘸素和其它具有 医疗和保健价值的活性化合物的开发研究正在迅速展开，许多具有新分子结构的 抗菌、抗病毒化合物已被分离和鉴定，其活性成分是多种多样的，包括萜烯、脂 肪酸、大环内酯类、醌类、肽类、生物碱、醚类及杂环化合物等，其中有些成分 的结构、性质己被阐明。也有许多含尚未鉴定其活性分子结构的微生物萃取物， 用予预防和治疗水产养殖动物的病害1 1 s l 。日本近年来对海洋微生物进行了广泛研 究，发现约有2 7 的海洋微生物具有抗菌活性，他们还检测了海洋微生物对金黄 色葡萄球菌、大肠杆菌、自假丝酵母等8 种细菌和真菌的拮抗作用，结果发现， 海洋微生物中1 4 1 的细菌、4 4 0 放线菌、o 5 的真菌都具有不同程度的拮抗 性。 b e l l 等报道从硬磷鱼( o s t r o e i o n c u b i e u s ) 的毒液中分离纯化出副溶血弧菌，冷 士其发酵液迸行提取、分离得到鼙q 睬类衍生物v i b r l n d o l e a ( 亿合物1 ) 浓度在1 0 0 i 童g m l 时对金黄色葡萄球菌、自色葡萄球菌和秸革杆菌有一定的抑制活l 强l 。 4 中山大学硕士学位论文 l l a a t s c h 研究组从海洋链霉菌b 8 3 0 0 培养液中提取得到多色霉素类似物 p - i n d o m y c i n o n e ， i - i n d o m y c i n o n e 和7 - i n d o m y e i n o n e ( 化合物2 4 ) ，它们是葸醌类 衍生物，其中p 和f i - i n d o m y c i n o n e 对枯草杆菌的m i c 分别为1 0 0 和1 1 3 i t g m l ， 对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌的m i c 为1 0 0t t g m l1 1 7 l 。 r o ( 4 ) r = v w p r o k s e h 研究组从海绵n i p h a t e so l e m d a 组织中分离出真菌c t a v u l a r i al u n a t a ， 液体培养液中分离出一系列化合物，其中l o n a t i n ( 化合物5 ) 和c y t o s k y r i n ( 化 合物6 ) 两个葸醌类衍生物在琼脂平板实验中对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯 草杆菌有活性，1 0 0 一1 1 1 l 时，抑菌圈达到8 - 9 m m e l 引。 h h 3 c o hoh h o h 56 b e nc l a r k 等从一株澳大利亚放线菌s t r e p t o m y c e sm s t 7 7 7 5 5 中分离到一 个葸环衍生物d a u n o m y c i n ( 化合物7 ) ，它对b s u b t i l i s 有显著的抑菌活性， m i c 值为0 6 l g m l l l 9 1 。 o m eoo h9 6 h n h 2 z ；q 7 7 o ho h o h o o c h l i u 等对海洋丝状真菌k e i s s l e r i e l l as p ( 菌株编号：y s 4 1 0 8 ) 的生物活性 中山大学硕士学位论文 追踪分离获得了个含有全新碳骨架的抗真菌代谢物：3 ，6 ，8 - t r i h y d r o x y - 3 - 【3 ， 5 - d i m e t h y l 2 o x o 3 ( e ) h e p t e n y l 2 ，3 。d i h y d r o n a p h t h a l e n - 1 ( 4 h ) o n e ( 化合物8 ) 1 蚋。 在抗真菌体外活性检测中，发现化合物8 对入致病菌假丝酵母c a n d i d aa l b i c a n s ， t r i c o p h y t o nr u b r u m 和黑曲霉a s p e r g i l l u sn i g e r 有抑制活性( m i c 值分别等于4 0 ， 2 0 和8 0 1 x g 椭) 。对该真菌重新培养后，又分到一个新的抗菌代谢物k e i s s l o n e ( 化 1 2 1 l 含物9 ) 1 0k e i s s l o n e 能也抑制人致病菌假丝酵母c a n d i d aa l b i c a n s ，t r i c o p h y t o n r u b r u m 和黑曲霉a s p e r g i l l u sn i g e ，( m i c 值分别等于5 0 ，7 0 ，4 0 鲋【1 1 1 ) 。 e d r a d a 报从寄生在x e s t o s p o n g i ae x i g u a 海绵身体蠹部的p e n i c i l l i u mo f m o n t a n e n s e 的发酵液中提取到十元环内醋结构的活性物质x e s t o d e c a l a t o n e l o 1 2 ，冀孛纯合物l l 对鑫色念珠菌有抑制作用，2 0 m o l r r d 浓度时抑菌圈力 7 m m t 勉i 。另外，海洋孢霉菌e m e r i c e l l av a d e c o l o rm 7 5 2 的发酵液中得到的化合 物v a r i x a n t h o n e ( 1 3 ) ，显示抗微生物活性。对大肠杆菌、变形杆菌、枯草杆菌和 金黄色葡萄球菌的m i c 为1 2 5 i _ t g r a l ，对革兰阴性的粪链球菌的活性较弱，m i c 为5 0 g m l 。 l lr 钮 1 2r = o h , 9 , 1 1 嘏s 4 1 3r = o h , 9 , 1 l - t r a m b e m a n 等人研究了从佛罗里达州采集的海洋沉积物样品中分离到的放线菌 s t r e p t o m y c e ss p 。l l - 3 1 f 5 0 8 ，从其发酵液中分离到1 个憝捧制革兰阳性菌豹化合物 b i o x a l o m y c i n su 2 ( 1 4 ) ，m i c 在0 0 0 2 0 2 5 p # m l 。机理研究表明b i o x a l o m y c i n s 毗 可以抑制缨菌0 撇合成( 9 4 捧制) ，对麟矗和蛋自质的会成被抑制3 3 和3 0 澄i 。 3 c h a c o ，e 龟 1 4 s o f i a - - m e r c a d oi e 等在1 5 2 m 深海沉积物得到的一株放线菌中分离得到化 6 中山大学硕士学位论文 合物c h l o r o - - d i h y d r o q u i n o n e s ( 1 5 - 1 7 ) 。这些化合物还对v a n c o m y c i n - - r e s i s t a n t 屎 肠球菌( v r e f ) 和m e t h i c i l l i n - - r e s i s t a n t 葡萄球菌( m r s a ) 有杀灭活性，其 m i c 介于1 9 5 1 5 6 1 a g m l 之间i 肄2 6 1 。 1 5 o h o o ho c l , y 1 6 h c i f 1 7 n a m i k o s h i 等从海洋真菌a s p e r g i l l u so s t i a n u s ( p h h n p e i 海绵分离到的) 中分离 到三个含氯抗生素2 7 1 。它们的结构通过光谱数据确定为：8 氯9 羟基8 , 9 脱氧内 酯( 1 8 ) ，9 - 氯8 羟基8 , 9 一脱氧内酯( 1 9 ) 和9 - 氯- 8 一羟基8 , 9 脱氧吡喃酮( 2 0 ) 。化 合物8 对r u e g e r i aa t l a n t i c a 的最小抑制浓度是5t t gd i s k j ( 抑制区：1 2 7m m ) ，7 和8 的抑制活性为2 5 鹇d i s k 1 ( 抑制区分别是：1 0 1 和1 0 5 m m ) 。 l gk l = c 1 r z = u h 1 9r l = o 讧r 2 = c l 2 0 从o l a n a w a n 海洋棕色海藻a c a n o t r i c h i af r a g i l i s 分离纯化得到的海洋真菌 c l a d o s p o r i u ms p 的浸膏中分离得到两个1 2 元大环内酯的细胞毒素：s p o r i o l i d e s a ( 2 0 ) 和b ( 2 1 ) ，两个化合物结构是通过波谱数据得到确证的i 矧。s p o r i o l i d e s a 对c r y p t o c o c c u sn e o f o r m a n s ( 隐球菌) 和n e u r o s p o r ac r a s s a ( 脉胞菌) 显示抗菌活性。 2 0r = c o p h 2 1r = m e r = c o c h 3 ( 2 2 ) r = c o c h 2 c 6 h s ( 2 3 ) 化合物2 2 ，2 3 是三羟基甾醇衍生物有抑制细菌b a c i l l u ss u b t i l i s ， 7 中山大学硕士学位论文 s t a p h y l o c o c c u sa u r e u s ，s a r c i n al u t e aa n dp s e u d o m o n a ss p m i c 值从2 5 到 7 5 t g m l 。而且2 2 ，2 3 抑制真菌c a n d i d aa l b i c a n sa n da s p e r g i l l u sn i g e rm i c 值在 5 0 和1 0 0 p 蛐之闻渊。 两个新的聚酮类化合物a l l t h r a b i ca c i d sa ( 2 4 ) ，b ( 2 5 ) 均来自内生真菌 a n t h r a c o b i as p 。光谱数据表明a n t h r a c o b i ca c i d s 八b 含有一个与羧基共轭的链烯 存在，药理活性显示a n t h r a c o b i ca c i d sa ，b 拥有抑$ 1 s t a p h y l o c o c c u sa u r e u $ , b a c i l l u s s u b t i l i s ，e s c h e r i c h i ac o l l 的活性，y o s h i h i t os 还讨论了内生真菌a n t h r a c o b i as p 产生的次级代谢产物a n t h r a c o b i ca c i d s 氏b 可能防止寄主被植物病原菌感染的方 式i 3 0 i 。 2 42 s 来自中国南海褐藻内生真菌n o z z f 3 6 的菌体中l a s i o d i p l o d m 类的大环内酯 新化合物2 6 、2 7 ，它们具有好的抗微生物活性。能构抑制五种微生物的生长，特 别是抑制& a u r e u s 的生长，鬟a u r e u s 是导致全世界香蕉减产的主要病原菌，这些 化合物的发现，对香蕉的巴拿马病的防治提供了前体化合物1 3 1 i 。 异海松烷类化合物s c o p a r a r a n ea ( 2 8 ) ，b ( 2 9 ) 和松胞素s c o p a r a s i na ( 3 0 ) ， b ( 3 1 ) 均来自于真菌e u t y p e l l as c o p a r i ap s u d 4 4 w i p a p a np o n g c h a r o e n 在 s c o p a r a r a n ea ，b 和s c o p a r a s i na ，b 的抗菌活性试验中显示出非常有意义的抑制 活性，抑制sa u r e u sa t c c2 5 9 2 3 和勉g y p s e u ms h m u - 4 。的i c 5 0 分别为 l 3 0 5 0 r t m m l i j 捌。 中山大学硕士学位论文 o o h ，夕八弋 。文。 h d 3 03 1 从巴哈马群岛的褐藻r o s e n v i n g e as p 中分离出来的一株真菌，它只有在与一 种单细胞海洋细菌共同培养时才能产生一个氯代的苯甲酮抗生素( 3 2 ) 1 3 3 1 在这 两个微生物单独培养时都不能检测到这个化合物。3 2 对耐甲氧苯青霉素的葡萄 球菌和耐万古霉素的肠球菌都显示出强有力的抗菌活性，m i c 分别达到3 7n g m l 和7 8n e , n d 。 h o 3 23 3 从韩国的曲霉菌a s p e r g i l l u ss p 中分离到的新化合物3 3 对葡萄球菌 s t a p h y l o c o c c u sa u r e u s ，苯甲氧青霉素抗药性金黄色葡萄球菌m e t h i c i l l i n r e s i s t a n ts 口姗娜和多药耐药性金黄色葡萄球菌有中等抑制活性洲。 1 2 2 。抗肿瘤活性代谢产物 海洋微生物的代谢产物有多种活性，其中以抗肿瘤活性最为重要。近年来， 科研人员对来自海洋细菌、海洋真菌、海洋放线菌的抗肿瘤活性物质作了较多研 究，从海洋微生物中筛选的抗肿瘤活性物质的种类包括含氮类、内酯类、酮类、 醌类、多糖类1 3 5 1 ；按其来源又可分为海洋细菌的抗肿瘤活性物质、海洋放线菌的 抗肿瘤活性物质及海洋真菌的抗肿瘤活性物质。 f e l l i c a l 研究组首次发现并成功培养了一株全新的海洋放线菌( m a r i n o s p o r a ) ， 经培养提取分离、鉴定出一系列结构新颖的化合物s a l i n o s p o r a m i d e s ( 3 4 ) ，这些 9 中山大学硕士学位论文 化合物具有很强的抗菌及抗肿瘤活性，其中生物碱类化合物s a l i n o s p o r a m i d ea x f f h c t - 11 6 细胞的i c s o 为lln g l i l l1 3 6 1 。 3 4 3 5 化合物3 5 是从海洋放线菌( c n h 0 9 9 ) 分离到的含倍半萜的新萘醌类抗生素 n e o m a r i n o n e ，在体夕 - h c t - 1 1 6 有中等细胞毒。陡( z c s o = o 8 m g l 。 ，对n c i ( 美国国 家癌症研究所) 的6 0 个人类肿瘤细胞群i c 5 0 平均值为10 m o l l 1 1 3 7 1 。 从海洋小单胞菌属t p - a 0 4 6 8 的培养液中分离得到的一类醌环类抗生素 k o s i n o s t a t i n ( 3 6 ) 和异醌环素b 。k o s i n o s t a t i n 对入的骨髓性白血病u 9 3 7 细胞有 骧显的细胞毒性( i c s o 为0 0 9 罄m o l ，并对2 1 种人类癌细胞具有抑制作用，i c s o d 子0 11 # 0 1 t 3 s l 。 b r i l lg e r w i c k 醐：究组从加勒比海真菌l y n g b r am a j u s c u l a 中分得c u r a c i na ( 3 7 ) ，并对2 6 种的同系物进行了构效比较。c u r a c i n a 是一种具有潜力的抗有丝 分裂和抗嚣申瘤剂，临床翦试验表硬它对人体肺瘤移植的小鼠有