（植物病理学专业论文）苍耳农用抑菌生物活性的初步研究.pdf

苍耳教用抑菌生物活性的翻疹研究 攘要 率论文黯苍器( 毖髓越溯s i b i r i c u m ) 静农潮揶蓠生物活髓进行了初步磷 究，结果如下： 1 ，鞍燕提取溶裁豹臻定 瑶石灞醚、褥翻、乙醚、译醇、蠢薛、承等6 耱溶翔对苍繇垡株 分辩遴辑冷浸挺取，以肇鬃壤避、壤鹫赛瘸、撼藏裢萎等3 辩瘸藤蘩为袋试 麓，室内熟鼗试验裘明，忍醚、薅酮撼敬液袭理强烈匏麴藏活一瞧，对端藏绩葵瘸 蒽、攀暴腐烂壤蕙、蓑莓囊媵瘸鬻3 秘瘸艨燕熬搀蒜攀分裂为? 9 。撼，1 0 0 ，t 0 0 7 6 8 ，1 0 0 ，1 0 0 ，石油醚提取液活憔次之，其他溶剂摄取液抑随活性较蓉。 2 涵性成分提取部位的确定 采用乙醚、丙酮、石漓醚为提取溶剂，辩苍耳的穰、蘩、盱戳及集实分剐进 行提取，以苍耳叶的乙醚、丙酮提取液对苹粜腐烂瘸菌等4 种真黼抑菌活性墩为 嚣薯，鲡时鹣蕴醚撬壤滚鼹4 释卖蘸辩孳露裁奉分掰为8 3 褊，i 0 潞，1 0 0 ，7 5 ，2 饕。 粮撬取液滔链次之，茎稍泶实静辛牵蔼淤褴较麓。辞潞涟瞧成分撼黻的酋涟。 3 ，萃取方法鼹逮舞 震滚滚分配萃骏法瓣苍莓黪乙醚瓣墩憋遴行了裙步分亵，漕燃测定焱明，醛 酸萃取法优予争珏撵度攀瑕法。浓度必5 5 0 # g m 靛5 溅溪酸萃敷戆霹攀票腐燃 菌等3 种真麓的抑制作用乓1 0 0 0 婪g m l5 碳酸氢钠举取物的活性相当。室内掷 慧试验结果袭碉，浓度为6 0 0i s , g m l 的5 0 磷酸攀取物对黄瓜桔溪等7 神瘸原 i 菌也具有一定的抑制作用。间时测定了磷酸萃取物对苹果腐烂、构巢曲霉、棉花 糕葵、黄瓜桔黉4 种真菌的毒力，e c ”德分剃为2 9 4 。0 3 驻g m 1 、7 2 1 2 3 * g m 1 、 4 1 5 2 5 “g m 1 、2 6 9 6 8 i ig m l 。 4 硅胶柱层柝对活性成分的避一步分离 活性追踪袋明，梯度淡脱中的乙酸乙蒋洗脱液对孳暴腐烂等6 稀粪菌的抑帝 作用最为显著。己酸乙酯洗脱液在不同浓度下对苹果腐烂、黄瓜枯蒸等5 种真菌 勤蠢一定蕊李枣蘩 乍爱，在浓波兔4 8 0pg 磷羧萃取物细l 辩，对5 耱冀蘩有裙显静 抑制作用，抑黼率均在8 4 以上。将分段收集而得到的5 段乙酸乙酯洗脱液进行 意淘臻蓥嚣毽浏定，结暴表鞠，第3 、4 、5 段洗残滚对肇莱褒烂、橡筏糖萎痣蘩 2 种病原菌均具有较显著的抑制作用，特别是第3 段的抑茵作用最照著，抑菌率 分剐为1 0 0 ，9 7 7 。 荚键词：苍耳；农用抑菌滔性 p r e l i m i n a r ys t u d i e so na g r i - f u n g i c i d a lb i o a c t i v i t y f r o mx a n t h i u ms i b i r i c u m a b s t r a c t i nt h i sp a p e r ，p r e l i m i n a r ys t u d i e sw e r ec o n d u c t e dt os c r e e nt h ea g r i - f u n g i c i d a l b i o a c t i v i t yo f x a n t h i u ms i b i r i c u m r e s e a r c hr e s u l t sw e r ea sf o l l o w s 1 t h ea e t h e ra n dt h ea c e t o n ew e r eo p t i m u ms o l v e n t st oe x t r a c tf u n g i s t a tf r o m x a n t h i u ms i b f ，i c u m i n h i b i t i o ne f f e c to f x a n t h i u ms i b i r i c u me x t r a c t so f 6s o l v e n t s w a st e s t e dw i t hi s o l a t eh y p h ao f f u s a r i u mo x y s p o r u m , v a l s am a l i , e t c u n d e r s e p a r a t ec u l t i v a t i n gc o n d i t i o n s t h er e s u l t ss h o w e dt h a ta e t h e ra n d a c e t o n ee x t r a c t so f x a n t h i u ms i b i r i c u mh a dt h em o s to b v i o u sf u n g i s t a s i s ，t h ei n h i b i t i o nr a t e sw e r e 7 9 2 ，1 0 0 ，1 0 0 ；7 6 8 ，1 0 0 ，1 0 0 t h ef u n g i s t a s i so f p e t r o l e u me t h e re x t r a c t w a so b v i o u st o o 2 a m o n gt h eo r g a n ，t h ef u n g i s t a s i so f t h el e a v eo f x a n t h i u ms i b i r i c u mw a s m o s t o b v i o u s i n h i b i t o r ye f f e c to fd i f f e r e n to r g a no f x a n t h i u ms i b i r i c u me x t r a c t sa g a i n s t4 f u n g iw a st e s t e d r e s u l t ss h o w e dt h a tt h ef i m g i s t a s i so ft h el e a v ew a sm o s to b v i o u s i n h i b i t i o nr a t e so f t h el e a f a e n h e r e x t m c t so n4f u n g iw e r e8 3 6 ，1 0 0 ，1 0 0 ，7 5 2 3 c o m p a r e dw i t ht h ep hs t e p se x t r a c t i o n ，e x t r a c t i n gr a t i oo ft h ee x t r a c t i o no f t h ep h o s p h o r o u sa c i dw a sb e t t e r t h ef u n g i s t a s i so f 5 5 0ug m l5 0 p h o s p h o r o u sa c i d e x t r a c t sa g a i n s t3f u n g iw a se q u a lt ot h a to f10 0 0ug n i l5 s o d i u mb i c a r b o n a t e e x t r a c t t h ef u n g i s t a s i so f6 0 0 i xg m l5 0 p h o s p h o r o u sa c i de x t r a c ta g a i n s t7f u n g i w a so b v i o u s t o x i c i t yd a t ao f4f i m g is u c ha sv a l s am a l iw a sm e n s u r a t e d t h ee c s 0 w e r e 2 9 4 0 3 扯g m l 、7 2 1 2 3 肛g m l 、4 1 5 2 5 斗g m l 、2 6 9 6 8 p g m 1 j i i 4 i n h i b i t i o nr a t eo fe t h y la c e t a t ee f f l u e n tw a sm o s to b v i o u sa m o n g4e f f l u e n to f s i l i c ag e lc h r o m a t o g r a p h y i n h i b i t i o nr a t e so f4e f f l u e n tw a st e s t e dw i t hi s o l a t eh y p h a o ff u s a r i u mo x y s p o r u m , v a l s am a l i ，e t ct h er e s u l ts h o w e dt h a tt h ei n h i b i t i o nr a t eo f e t h y la c e t a t ee f f l u e n tw a sm o s to b v i o u s i n h i b i t i o ne x p e r i m e n t so fe t h y l a c e t a t e e f f l u e n to n5f u n g ia tt h ed i f f e r e n td e n s i t yw e r et e s t e d t h er e s u l ts h o w e dt h a tt h e f u n g i s t a s i so fe t h y la c e t a t ee f f l u e n tw e r eo b v i o u s i n h i b i t i o nr a t e so f5s u b s e c t i o n so f e t h y la c e t a t ee f f l u e n tw e r et e s t e d t h er e s u l ts h o w e dt h a tt h es e g m e n t 3 、4a n d5h a dt h e m o r eo b v i o u sf i m g i s t a s i so n2f i m g i ( v a l s am a l ia n df u s a r i u mo x y s p o r u m ) ，e s p e c i a l l y t h a to f t h es e g m e n t3i n h i b i t i o nr a t e so f t h es e g m e n t3w e r e1 0 0 ，9 7 7 k e yw o r d ：x a n t h i u ms i b i r i c u m ；a g r i - f u n g i c i d a lb i o a c t i v i t y 学位 仑文独创性声明 零人声盟鼹里我麴学位谚文怒零人在导帮攒导下遴行的磷究工作及取褥熬 研究成聚。据我所知，除了文中特别加以标注和数谢的地方外，论文巾不怒食其 稳入基缀发表或撰写避戆磷究残暴。芍我一阕工豫筠露意辩零研究赝骰赫镁簿贡 献均基谯沦文中终了明确的援骥势袭示谢意。龆不实，零a 擞愈郝责任。 学掇谂文作喾签襄；封献签警基嬲；滞? 月i 口曩 学位论文版权使用授权书 零学位论文作者滗全了解学校肖关保留、使用学能论文的规定，有权保留 并向国家有关部门或机构送交论文的复印讳和磁擞，允谗论文被查阅和借阙。本 太攘投鬻校霹黻将掌键论文静全部竣罄势蠹客镳入毒美数攥露避孬梭索，搿跌襄 用影印、缩印或扫描姆复制筝段保襻、汇编学饿论文。( 保整的学位论文线解密 后适用零授权书) 学位论文作者签名：越球静师签字； 跏融 签字日期：如卅掣占周l o 曰 撩字日期驯年，月，臼 攀蓬论文律尝拳建嚣裘巍： 工 謇单挝； 通讯地皱； 电话：静r 岁尊域r 予7 啦嚣编：g ，。，q 致谢 本论文怒在导师蟊昭礼教授的懑心指导下完成的。三年来，导师在学习上给 _ 予我精心的豢导孜孜不倦戆教海，穗生活上飨予我无微不至关悔期帮助。从论文 的选题、研究过程到论文的写作和修改，导师都倾注了大誊静心盘。导师严谨撬 著的治学风格、平易避人的工作态度以及开放宽容的胸怀，将永远是我学习、工 作积生嚣豹榜样。僮援论文完残之躲，良导魉表示深深憋谢意 在论文开题时，德物保护系的李宝茑教授、剐维志教授、郭立忠副教授。李 宝华副教授和赵洪海副教授等老师给过良好的建议；在论文研究过程中，得到了 穰缳系纛忠楱割教授、罗兰、至楚、杨从军、才秀华、武铗等众多老烬豹帮助鄹 指点；在化学方丽的试验部分樽到了基础部曲宝涵教授的热心指爵。在学习和警 活中，逐得到了植保系和研究曼匕处的各位领导和老师的炙微不至的关心。在此 对镌稍表示袭心黪感谢! 试验过程中，还得到了2 0 0 1 级研究生李玉群、潮浃对，2 0 0 2 级研究垒傅蘸 臣、黄建华、田嚣梅等同学的热心帮助。在此，向大家表示深深的谢意! 对帮我一超学习、生活静精友辩溺学费遴一声衷，基熬祝裰，我翻一起痰过了 3 年的时光，我会珍惜这一段记忆 感落| 我的父母、媳姐及赝商亲人给予我的支持与鼓励 最聪，再次向各位关心、帮劲过我酶 季长、阕学和掰友销表示衷心豹感谢! 前言 在可预见的将来，农业植物痫虫害的防治仍将主要采用化学手段进行。从 2 0 世纪4 0 年代起，化学合成农药由于具有晶辩多，效果好，见效快，缀济效 益显著和使用方便等突出优点，褥到了蓬勃发展，迅速占领了整个农药市场 成了农药的主导。化学台成农药谯控制植物瘸、虫、草害，调节植物生长发育， 提商粮食产量，满慰人类生存需骚中，发挥了疯大作嗣，散出了匿大贡献。但 随着化学农药的长期不科学使用及其自身固有的缺点，许多弊端日益突出”， 热环麓污染、久畜中毒、蓉嫠天敬、破嚣生态警衡、“3 r ”( r e s i d u e 、r e s i s t a n c e 、 r e s u r g e n c e ) 问题等。近年来，随糟i p m 理论( i n t e g r a t e dp e s tm a n a g e r m e n t ) 戆实憨秘人类怼妻势毽康帮嚣穰簿方瑟要求豹强凑，纯学农药产生夔一蓉列公 害问题已经引起广滋关注。许多黼毒性、高残留、持久性农药已被禁止使用。 援报邋，欧盟于2 0 0 3 年1 2 月3 l 母正式禁止3 2 0 秽农药在欧疆销售，其巾涉及 中国磁在生产、使用以及出口的农药达6 0 多个鼯种。这些被禁用的农药中，仅 杀虫剂就有3 1 种，熙前在国内广泛应用于苹果、柑橘、番懿、黄瓜、谷物等的 生产中。这将会直接影响至8 我国农药的出日和使用这些农药的农产品的出日。 笼公害化将会是农药的发展方向。无公害农药，也有人称之为环境友好农 药( e n v i r o n m e n ta c c e p t a b l ep e s t i c i d e s 或e n v i r o n m e n tf r i e n d l yp e s t i c i d e s ) ，凝有纯 学农药不具有的优点，如：对有害艇物高效、对非靶标生物安全、易分解飘分解 产耱慰繇凌无害。植物源农药嚣予燹公害褰蓊熬范蒋之蠹e 猿物添表蘩是攒矮予 防治病威害的植物体及植物体的某个器官，同时也包括分离纯化的单体物质。众 所霜翘，天然产物鬻表褒出诲多特豫的生梅特性，予季年来已广必入嚣】掰爱。盎予 植物源农药的有效成分是自然存猩的，有其自身的降解规律，在环境中累积枣性 l 的可能性不大，阂对人和动物与这类植物长期处予阉一环境中，这些撼甥又是生 态环境的组成部分，因灏植物源农药被认为是对人和动物的毒燃e b 较低，对生态 环境影响小的农药。在有机化学合成农药之前，最昂的农药有不少就是直接利用 植物或其粗提取物，有然已开发成商晶，如值藤酮、烟碱等。近年来，由于人类 健康和环保要求的压力，直接开发植物源农药或从植物中探寻新的活性先导物或 新的作用靶标，通过类推合成或生物合理设计进行新农药的开发已成为当前农药 化学和农药毒理学研究的热点。本研究就是菠于这样的背景，对苍耳的农用系菌 活锉迸行了初步研究。 2 l 文献综述 1 1 植物源杀菌剂研究进展 1 1 1 具有抗菌杀菌活性的植物资源研究 可以开发利用于农作物病害防治的植物资源非常丰富。s w a i n ( 1 9 7 7 ) 认为植 物是生物活性化合物的天然宝库，其产生的次生代谢物质超过4 0 00 0 0 种，其中 大多数化学物质如萜烯类、生物碱、类黄酮、甾体、酚类、独特的氨基酸和多糖 类等均具有杀虫或抗菌活性【3 1 。大部分具有活性物质的植物集中在菊科、唇星科、 木兰科、马兜铃科、蓼科、木犀科、百合科、葫芦科、莎草科、豆科、十字花科 等植物中h ，除此之外还有樟科的肉桂、香叶树、暴马丁香5 6 1 、t h y m b r as p i c a t a 、 s a t u r e j at h y m b r a 、白桂等7 一】。目前人们已经从植物、微生物中提取抗真菌、细 菌、病毒、线虫、杀虫、除草的活性物质眇”】。w i l k i n g s 和b o a r d 于1 9 8 9 年撰 文报道有1 3 8 9 种植物有可能作为杀菌剂，植物中的抗毒素、类黄酮、罹病相关 的蛋白质、有机酸和酚类化合物等均有杀菌或抑菌活性14 1 。g r a n g e 和a h m e d ( 1 9 8 8 ) 曾报道约有2 4 0 0 种植物具有控制有害生物的活性，而这些在化学性质 上做过调查研究的植物仅占全世界现有植物种类的1 0 “。b j 托金所著的植 物杀菌素一书中列举了7 l 科、3 2 4 种植物具有杀菌活性。在中国土农药志 中所记载的2 2 0 种主要植物中大约有1 2 植物的水提物或醇提物对农作物病害 表现出抑制能力。 1 1 2 植物的农用抑菌活性研究 人类在古代就懂得了利用许多具有抗菌或杀菌作用的植物，如中国、印度等 东南亚以及一些非洲国家的劳动人民积累了许多利用植物防治病害的经验嗍。几 个世纪前，我国劳动人民就已经知道植物中含有抗菌物质，在许多实例中，这些 化合物能以天然的抗性或防御体系来抵御微生物或其他病害嗍。 近年来，植物源杀菌剂的研究在不断蓬勃发展。自2 0 世纪中叶尤其是7 0 年 代以来，国外很多学者进行了有益的探索。g i l l i v e r 报道在1 9 1 5 种植物中有2 3 的提取物完全抑制v e n t u r i ai n a e q u a l 括的分生孢子萌发1 1 6 i 。a r k 和t h o m p s o n 1 7 1 的试验结果表明，大蒜提取物中含有杀菌活性物质。c a r r i erp o w e l l 等用3 2 个 科的5 7 种植物根提取物对病原菌p h y t o p h t h o r a p a l m i v o r a 的抑菌活性进行了筛选 试验，发现有6 种植物根提取物对于pp a l m i v o r a 的孢子萌发具有强烈抑制作用4 种具有中等抑制作用，1 0 种具有弱抑制作用。w i l s o n 等【1 9 1 对3 4 5 种植物提取物和 4 9 种植物精油对b o t r y t i sc i n e r e a 孢子的抑制活性进行了检测，发现有1 3 种提取物 和4 种精油表现强抑制活性。f a v a r o n 等【2 0 1 报道了韭葱卅i l i u mp o r r u ml ) 和洋葱 口c e p al ) 提取物对真菌产生的多聚半乳糖醛酸酶( p g s ) 的抑制活性。s h a r m a 和 j a n d a i k l 2 ”报道了5 种植物叶片提取物对4 种种子真菌的抑制作用。s t e p h e n t 2 2 1 报 道了对新西兰3 4 4 种植物的抗病毒，抗微生物和细胞毒性的筛选结果。b i s h t 和 k h u l b e t 2 3 】手艮道了几种植物提取物对水稻胡麻斑病病原菌的室内抑制效果。他们测 定了1 0 种植物叶片的水提取物对水稻胡麻斑病病原菌d r e c h s l e r ao r y z e 的抑菌活 性。f r a n km u l l e r - r i e b a u 等对土耳其南部的9 种野生芳香植物精油的生物学活 性进行了测定，并对其组分进行了鉴定，鉴定出2 0 种组分，并且发现植物精油对病 原真菌的抑制作用与酚类组分的浓度有直接关系。s u n d a r r a j 等阱1 报道了3 5 种植 物叶片，大葱鳞茎和3 种不同的o i l c a k e s 和7 种不同的动物粪便的冷水浸提液对 立枯丝核菌( r h i z o c t o n i as o l a n i ) 删l 菌活性的研究结果。m o h a m e d 等【2 6 1 报道用乙 醇提取的属于2 4 个科的5 8 种马来西亚植物的提取物用于测试对7 种植物病原 真菌的抗菌活性，其中2 个品种的p i p e rb e t t l e 提取物表现了对所有被测病原物的 4 强抑菌活性。d a m a y a n t i 等【2 7 i 对1 6 种植物提取物对凤梨果腐病菌c i r c o t o c y s t i s p a r a d o x o 的杀菌活彀效果迸幸亍了测定，发现x a n t h i u ms t r u m a r i u m 效果最好萁次 是大蒜 i l i u ms a t i v u m ) ；还_ 发现乙酵最适于提取x a n t h i u ms t r u m a r i u m ，细菌过滤器 过滤鹣撬取液琵经麓压灭菌豹麴糕活穗离。s r i n i v a s 等溺霹一整稽携瞧羹甥翻证 学品对向日葵疫病( h e l i a n t h u sa n n u a s ) 的研究结聚表明a s p i r i n 对菌丝生长抑制率 最裹，蠢a l l i u mc e p a 鬟争涎避a ，a t t e r n a t a 夔生长；瘸l 冁| 斡大羲联s a t i v u m ) 鳞蒸提取 液在叶片上喷施可明鼹控制病害增加产量。s h i v p u r i 等例测定了1 0 种植物的乙 醇提取烧砖5 静檀物疯愿真菌静蓉薅滠性。r a h m a n 等鲫报邋了三秘从穗物时片 中提取的生物碱对几种病原真菌和病原细菌的抑制活性。b i r g f f 和b e n n 0 1 3 1 1 报道 了几种檬物心材中其露杀真菌活性的化合物的瞬系物对几种植物病原真麓的活 性。m a r u z z e l l a h e 和b a l t e l 对多种植物精油潘性系统的测试发现多种籀物精油 能抑制真菌的生长。在多种植物中普遍存在的小孽碱能有效防治马铃瓣晚疫 病帮1 。存在于曹藿校部的蓄藿酸驻及海红豆串瀚紫攘素等瓣裘现鑫擐强静抗真 菌活性【3 4 1 。另外，t a h a r a 发现蒲公藻中的一种储半萜具抗菌活性口5 1 ，r a t u a y a k e 簌e u p a t o r i c u mr i p a r i c u m 幸分亵窝其撬蓥逶髅豹惫燎阁； y 穗嚣s ( 1 9 9 5 ) 综述奔绍 了植物源抗菌剂实际使用的可能性”1 。 l 霞年来，国内学喾也逐濒热黻了这方嚣敬辑突。麸植物体麦寻找搏藏活性 物质，融成为开发研制新型杀菌剂的热点之一1 3 引。方才君f 3 ”报道了4 种丰赢物精 油对青瓣( p e n i c i l l i u mi t a l i c u mw e h m e r ) 和绿撵( 只d i g i t a t u ms a e e ) 的抑蒎l 乍用 效果，缩果表明，供试植物精油其肖抑制柑桔脊簿和绿霉的撤物活性，其掷菌力 强弱随糍油品种和浓度不同而有较大差异。余馓耀，范青生糌【4 0 1 报道了6 0 多味 中草药辩1 9 稃常觅食品腐败菌的狮制效果。周力刚等# 1 1 报邋了从药蘑植物中分 离得到的1 2 种黄酮和5 种甾体化合物对尖孢镰刀菌( f u s a r i u mo x s p o r u m ) 和白 色念珠菌( c a n d i d aa l b i c a n s ) 的生长抑制作用。余伯良m 1 报道了山苍子油对霉 菌的抗菌性及对黄曲霉产毒的影响，对植物提取物作为食物天然防腐剂进行了探 讨。李重九等从韭菜中分离出多种具有萘酚结构骨架的抑菌活性化合物【4 3 1 ，吴 恭谦等发现白头翁提取物对小麦赤霉病菌有较强的抑制作用h 4 1 。9 1 0 5 1 2 5 制剂 是由原白头翁提取液加工成的，其大田实验结果表明，该制剂具有较好的防治效 果和明显的增产作用1 4 5 i 。黄连体内含有大量的生物碱，这些生物碱除对许多植 物病原真菌菌丝生长和孢子萌发有抑制作用，对水稻白叶枯病菌也有很强抑制作 用f 4 6 】。孟昭礼等从银杏中分离出对植物病原菌有很高活性的化合物，并开发出 了银杏农用杀菌剂【4 7 “引。印楝提取物除了对害虫、害螨具有抑制作用以外，也 具有对植物病原菌、线虫的抑制作用【4 9 】。从麻黄和细辛中提取的挥发油对 a l t e r n a r i ap a n a x , p h y t o p h t h o r ac a t h o r u m , r h i z o c t o n i as o l a n i 等均有较强的抑 制作用5 0 1 。厚朴叶粗提物对多种植物病原菌有很强抑制作用，在盆栽和大田实 验中均表现出较高的防治效果 5 l 】。从毛蒿植物中分离出的毛蒿素，从南欧丹参 中分离出的硬尾醇，库拉索芦荟中分离出的酚性与非酚性成分的抗菌活性与新霉 素、四环素相匹敌l 锄。 烟草、茶饼、鱼藤、雷公藤等植物的提取物能抑制某些病菌孢子的萌发和生 长或阻止病菌侵入植株m 1 。对苦参研究表明，苦参乙酸乙酯提取物对多种真菌和 细菌有显著抑制作用，抑菌圈直径为l o - - 4 2 m m t 5 4 1 。对四种常见红树的研究表明 其9 5 乙醇浸提物对m 删f “mo x y s p o r u m 等三种病原菌具有不同程度的抑菌能力 5 ”。冯俊涛等对5 6 种植物进行抑菌活性筛选，结果表明，莴苣等植物具有较强的 抑菌作用【5 6 】。于平儒等对6 2 种植物进行了抑菌活性筛选芦7 1 。李玉平等对菊科1 5 6 属2 5 种植物的杀菌抑菌活性进行了初步研究结果表明，大花金挖耳、猪毛蒿的 效果最好 5 8 】。另外，还发现了许多植物具较强的抑菌活性，如茶子 5 9 1 、花椒( 6 0 l 以 及蕨类植物 6 l 】等。 1 1 3 植物源杀菌剂的研究与开发 1 1 3 1 活性物质的提取、分离和结构鉴定 植物提取物中的抑菌物质有效成分结构类型较多，几乎涉及各类植物成 分。在化学组成上分属于多类化合物，大致可以分为以下几类：萜类( 如倍半 萜类、皂甙类等) 、含氧或含硫组分( 生物碱、胺和酰胺) 、脂肪族化合物( 尤 其是长链烯烃和脂肪酸) 和芳香族化合物( 如酚类、联苯甲酰和苯醌) 。在一 种植物中可能含有多种不同的抗菌成分，发挥着不同的抗菌作用，包括生物碱 类、酚类、皂苷类等。而在不同的植物中也可能含有同一种抗菌物质，如黄连、 黄柏、三颗针都含有小孽碱。 实验室中常用的溶剂提取法包括浸渍法、渗漉法、水蒸汽蒸馏法、回流法、 连续回流法等 6 2 1 。近年来又出现了破碎提取法、微波提取法、超声波提取法、 超临界萃取法等新方法【4 】。提取时，应分别将植物的各部位进行提取，并将各 提取物进行系统的活性测定。为了有效的提取活性物质，最好选用极性不同的 多种溶剂组成一个溶剂系列。包括溶剂的分步提取和溶剂的分别提取，前者可 以使活性成分不造成漏筛，后者能确定最佳溶剂【6 2 1 。除溶剂外，有时还须加入 提取辅助剂，目的在于提高提取效能，增大有效成分的溶解度及其在提取过程 中的稳定性、除去或减少某些杂质。常见的有酸、碱、表面活性剂、纤维素酶 等。提取效能还与材料细度、溶剂的比例、提取时间、提取温度等有关旧“”。 其中超临界c o 。流体萃取是一种新型的提取和分离技术。可以在接近室温 ( 3 5 4 0 ) 时萃取，因而可防止“热敏性”化合物的氧化和逸散，且能把高沸点、 低挥发度、易热解的物质远在其沸点以下萃取出来，特别适合植物油的提取分 离。何军等、高疆生等在探讨萃取温度、压力及c 0 2 体积对精油萃取影响的基 础上，已用此法分别从花椒、扁桃中萃取到了花椒油、扁桃油。可以预 见，c 0 2 一s f e 将成为植物精油大规模提取生产的首选技术。 植物粗提物成分分离通常采用分馏、沉淀法、结晶和重结晶、液一液分配萃 取、柱层析、薄层层析( t l c ) 、高效液相色谱( h p l c ) 等h “”。天然产物，特别是 植物中的化学成分是十分复杂的。有效成分的分离不能依赖单一的分离技术， 而是多种分离技术的巧妙结合【6 2 】。 测定有效成分的化学结构，特别是当有效成分为一新的未知化合物时，难度 比较大。在天然产物活性成分的结构测定中常用的仪器分析方法主要有紫外光谱 ( u v ) 、红外光谱( i r ) 、质谱( m s ) 、核磁共振谱( n m r ) 、x 射线衍射等。复杂的天 然产物分子结构的鉴定，在大多数情况下，任何一种分析方法都是难以胜任的， 往往需要多种方法的结合，对有关的谱图进行综合分析方能正确判断分子结构和 构效分析【6 2 “1 。 1 1 3 2 植物源杀菌剂的卉寸型 植物源杀菌剂的剂型目前分单一剂型和复方剂型。 i 单一剂型 这类剂型中活性物质研究较为深入，已有一些明确了其中的有效杀菌物质 的化学成分和结构。据不完全统计，迄今为止已对3 0 0 余种中药进行过较系统 的化学成分研究，发现了6 0 0 余种活性单体化台物，大多数为生物碱、黄酮、 萜等低极性的化学成分，近年来对极性较大的和水溶性的成分如皂形苷、鞣质、 多糖等亦进行了较深入的研究【6 5 】。大蒜的有效成分为大蒜素，具有广谱抗菌抑 撼活性，不但澍甥菌有较强的掷刳效果，聪显对真菌、线虫也有较好终羯。庶黄 ( e p h e d r a s i n i c a ) 油、细辛( a s a r u m h e t e r o t r o p o i d e s v a r ，m a n d s h u r i c u m ) 油两种 搀发油对供试的a l t e r n a r i a p a n a 置魉y t o p h t h o r a , r m z o c t o n i a s o t a n i 等几种 病原真菌有较疆的抑制作用唧1 。献厚朴树的自然落叶中提取总酚亿合物，对汞 赤色镰孢霉( f u s a r i u m g r a m i n e a r u m ) 、立桔丝核菌( r h i z o c t o n i a s o l a n i ) 等l o 萃孛真菌都有缀强静捧稍俸穗，盆栽稻大嘲试验均显示斑较好酶防治效采辫 。 i i 复方剂型 这类裁熬蓉蓬羯效暴较擎一熬鐾臻毂增强，是今爱磷突翻开发发震款重点 【6 叼。现在一般多采用复方中草药，一味中草药中就禽有很多化学成分，一个由 卡是耪中药缀艘魏复方霹筑媚互爱瘦产懋凝豹物质剐。透建应刊用中草药豹复 既增效作用，积极开发克服单一剂型麴效不高、疗效缓慢的药剂。 从茶叶中提取的茶皂索作为可湿性粉潮农药豹澎润剂，能使可湿性粉剂农 药的湿润性、p h 、悬浮率簿各项指标都能达到或超过国家规定标猴，而且还具 有杀菌作用，这对植物源杀菌剂的开发舆有极大的价值。甘肃省三川药业有限 公司研制生产蹬一种鞋天然植物为原料静无公害农蕊2 。溉生物辕箨释裁，含畜 黄酮、糖苛、海蛋白等多种生物碱。田间实验结果表明，拌种剂对瓜类蔓枯病、 浚豆褒疫镶粥蘩、套麦及麓米镰刀蘩簿姻耱藏蓑魏予豹撺涮率迭8 9 醐 1 0 0 t 6 8 】；浙汉省博杰科技祷限公司的产晶“植保1 0 1 ”、“植保1 0 2 ”、“植保1 0 3 ” 怒献叁莛、浮兰、羞参等2 0 多睐孛草药孛采取蠢秘技技寒生产戆蓉宝裁、系 菌剂。对植物因真菌引起的腐烂、根腐、锈病、黑鼠痫有很好的防治效果。 9 1 1 3 3 植物源杀菌剂开发的类别 植物源杀菌剂开发的类别有直接提取利用和间接开发利用。 直接提取利用，即对植物中的活性物质进行粗提取后，直接加工成可利用 的制剂。这种利用方式的主要优点是能够发挥粗提物中各种成分的协同作用，而 且投资少，开发周期短【6 9 j 。如俄罗斯以冷杉叶提取物制成杀菌剂能高效防治作物 上的多种真菌和病毒病害【7 0 】。 间接开发利用，即研究活性物质的结构、作用机制、结构与活性间的关系， 进而人工模拟合成筛选，从中开发新型植物源杀菌剂。以植物源活性成分为先导 物不仅可以研究开发出一系列的类似物，而且它们的活性可以优于先导物，并能 克服先导物的某些物理性质的不足，扩大了应用范刚5 6 1 。间接利用是当前植物 源农药研究开发的重点，也是我国植物源农药研究发展的方向。孟昭礼等从银杏 中分离出对植物病原菌有很高活性的化合物并仿生合成开发出了银杏系列农用 杀菌剂【4 74 8 1 就是很好的例子。 1 1 3 4 植物源杀菌荆稳定性的研究进展 来源于植物的具有杀虫、杀菌或除草活性的成分对温度、紫外光、p h 值、 降雨以及湿度等因子比较敏感，其温定性差，大f f i 使用容易分解，在很大程度 上影响了它的开发利用。 目前改善植物源农药稳定性的方法有两种：一种是在分子内部用对光稳定的 一部分( p h o t o s t a b l em o i e t i e s ) 来代替对光不稳定( p h o t o l a b i l es i t e s ) 部分。 例如，由于光对除虫菊酯类农药的稳定性影响较大，所以对除虫菊酯的不稳定改 造就是将卤素团( h a l o g e ng r o u p s ) 和其它的修饰结构集合而形成的对光稳定化 合物；第二种方法是加入稳定剂( s t a b i l i z e r ) 。稳定剂包括抗氧化剂( a n t i 1 0 o x i d a n t s ) 秘紫外光屏藏物质( u v s c r e e n s ) 。例如，天然灼除虫麓酯类农药就蹩 趔熙这对方法嚣傻其稳定黝。瞧于这辨方法蹩在维持活蛙物质分子本身骢特性之 外，由改变或调节稳定剂浓度来使箕拣定的，所以它具有更大的潜在的优势，研 究相对也比较多r ”。 其中，撬戴傀裁是磷究和皮用诧较多的一种稳怒潮，可分为纯学合成和鸯然 提取两类：一是化学合成抗氧纯剂，如对苯二酚、避涨三酚、二丁麓羟簇甲苯铎 二怒天然魏载诧裁，蟊桧褥酸、鑫蘩芦簿、了予豢瓣、菝坏盘黢簿辩。”。 1 1 ，4 植瓣滚杀蘩裁存猩翡溜瑟及瓣决方法 筏鋈棱境溪蓉蓑裁灏辨究毒秀发激澄褒褥较大遴袋，蕊蛰存森诲多阏蘧：1 ) 整接划眉参，淘羧零i j 焉少；2 ) 对德甥垮瀵蛙物质鬣蒸侔爱撬裁苓，瓣。盘予接蠛 中爨含戏分嶷杂爨菠性戏分往往不只静，激囊活性麓分提取帮分离建寰大，辩 活性成分殿作用机制缺泛研究 7 0 l3 ) 翡物稳定性羞。些植物源恭菌剂的防治效 榘程实际生产应用中稳寇性不赢，易受环境影响1 7 0 1 ；4 ) 作爝缓慢，羽阅掩效期短， 往往要重簸阁药或与其窀合成农药混用才能达至预期防治目的。 为了敲大强液的发撵植物源杀黼剂的优点，开发出在实践中具有推广价德 的禳耪源泶蘩裁。我稻麓绥在 鬟下豆个方嚣开震研究工律：1 ) 疆瀚中溪往或势雅 构、作用税溅及构效关粼静研究；2 ) 释找先等纯合物避雨人工合成；3 ) 植物渊恭 藿麴赛l 囊麴工与会理镬承搜零懿赣嚣、将爨爨荚予农菸稳囊毪裁笺方麟裁瓣臻炎 f s ，醛弗，? 铂。 l ，窒羲莓鬟熬耩舞壤嚣 l ，2 。1 苍骂爝瓣叟物学姆憔及篡她理分蠢 羲耳属( z a n t h i a r 口l ) ，蘩科一零生摹本植物，程鼗；投缩锤状残分技a 茎薹c 立，具糙伏豫，柔镳或近涎毛，鹰时具劁，多分枝。叶互生，全缘或多少 分裂。有柄。头状花序单性，雌雄同株，戈或近光花序梗，在叶腋单生或密榘 成穗状，或成束凝生于熬枝的顶端。雄头状花序着生于鉴枝的上端，球形，具 多数不结果实的两性花；总苞宽半球形，总筏片1 2 层，分离，椭圆状披针形， 革质；花托柱状，托片披针形，无色，包围管状花；花冠管部上端有5 宽裂片 花药分离，上端内弯，花丝结合成管状，包围花柱；花柱细小，不分裂，上端 稍膨大。罐头状獠序单生或密集于茎棱的下部，卵圆形，各有2 绪采安的小花； 总蕊片两滋，乡 瓣小，稀懑获援锌形，劳离# 内联总苞片结合成囊状，羚彩 在巢实或熬交瑗，上端爨l 一2 令坚疆戆凑，乡 瑟瑟锋状豹裁；2 室，器买l ，l 、 葱；雌兹纛拢冠；蛙头2 深裂，裂片线形，馋出总麓的喙夕 。痰暴2 ，测卵形， 藏予总苞内，无题毛m 1 。 接掾 聚实 本属约有2 5 种，主舞分布于美洲d b 部和中部、欧洲、亚洲及非洲j b 部。 我国有3 种及1 变种：苍耳( x a n t h i u ms i b i r i c u m ) 、蒙古苍耳( x a n t h i u m m o n o g i c u m ) 、偏蒜苍耳( x a n t h i u m i n a e q u i l a t e r u m ) 、近无刺苍耳( 变种) 。 其中，苍耳( x a n t h i u ms i b i r i c u m ) 广泛分布于东北、华北、华南、磷j b 及 西南备省区。常生长予平蘸、鼓陵、低由、荒野路逾、宙边。为稀常见的 困淹条草。释子耀榨潼，苍茸子涵与桶涵髓质裙镑，可渗帮穗油豢l 潼漆， 1 2 也可作油墨、肥皂、油毡的原料；又可制硬化油及润滑油；粜实供药用。 1 2 。2 苍耳属孛静主簧纯学或分及煞耪活性 脊耳属中药用檄物资源的主隳化学成分及嫩物活性可见袭1f ”l 。 表1 苍霉j | 霉药蔫德魏篱套 其中，苍耳( 胁t h f u ms f b y r f c u m ) 中的难要化学成分f 7 7 l ：主要有舞成分 必羧墓苍米贰( c a r b o x y a t r a c t y l o s i d e ) 黎苍拳贰( a t r 8 e t y l o s i d e ) 。逡主帮努 含倍半鞲内酯：如旗耳内酯( x a n t h i n i n ) 、隐舔耳内酯( x a n t h u m i n ) 、耱耳萜 ( x a n t h a t i n e ) 和苍嚣嚣( x a n t h i n ) 。另步 还含裔三藉酵和疆碱。 袭2 苍耳属中的倍半萜内黼类化台物 序号名豁聚源$ 渡谱数据 痔弩名髂 来源$ 装谣数摇 t h a t i n 2 x a n t h a n o t 3i s o x a n t h a n o l a ，b1 3 e 哪 a ，b l ，妒 42 - e p i x a n t h a n o l cm s 1 h 1 1 0 1 54 - e p i x a n t h 8 n o l 84 一e p i i s e x a n t h a n o l 7 x a n t h i n i n 8x a n t h u m i n 9 2 - e p i x a n t h u m i n 瓣2 - h y d r o x y t t n t l e n t o s i n 1 l 2 8 _ h y d 珈帮嘴* 曲i s i n 1 2x a n t h i n o s i n b 。dl h ”c 9 1 b ，d h 。”c 辩 a ，b1 h ，1 3 一 e f l h 【1 1 】 ei r 。m s i t t 】 b ，e ，f ，g 捧磷 a i r 。m s ，1h i 嘲 b c ，d 1 3 c 1 9 1 1 34 - h y d r o x y 一1 s ) ，l “1 3 ) d戮 x a n t h a d i e n 1 2 8q o li d e 2 3x a n 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