（基础兽医学专业论文）喹烯酮临床前毒理学研究.pdf

华中农业大学2 0 0 7 届硕士论文 缩略语表 a g a l b u m i n g l o b u l i nr a t i o a d i a c c e p t a b l ed a i l yi n t a k e a l ba l b u m i n a l pa l k a l i n ep h o s p h a t a s o a 【t a l k a l i n ea m i n o t r a n s f e r a s a s t a s p a r t a t ea m i n o t r a n s f e r a s e b u nb l o o di i l an i t r o g e n c a ”c a l c i u m c l -c h l o r i n e c m c c a r b o x y m e t h y l - c e l l u l o s es o d i u m c r c r e a t i n i n e c pp r o t h r o m b i nt i m e g l 0g l o b u l i n g l u g l u c o s e h e h a e m a t o x y l i n - e o s i ns t a i n h c th e m a t o c r i t h g b h e m o g l o b i n i c hn 峙i n t e r n a t i o n a lc o n f e r e n c eo nh a r m o n i s a t i o n o ft e c h n i c a lr e q u i r e m e n t sf o rr e g i s t r a t i o no f p h a r m a c e u t i c a l sf o rh u m a nu s e i p i n o r g a n i cp h o s p h o r u s j e c f a t h ew h o f a oj o i n t e x p e r tc o m m i t t e eo n f o o da d d i t i v e s m c h k _ l d 5 0 m c h c m c v m e a nc o r p u s c u l a rh e m o g l o b i n p o t a s s i u m m e d i a nl e t h a ld o s e m e a nc e l lh e m o g l o b i nc o n c e n t r a t i o n m e a nc o r p u s c u l a rv o l u m e i 0 白球蛋白比值 每日容许摄入量 白蛋白 碱性磷酸酶 丙氨酸氨基转移酶 天门冬氨酸氨基转移酶 血中尿素氮 钙离子 氯离子 羧甲基纤维素钠 肌酐 凝血酶原时间 球蛋白 血糖 苏木素伊红染色 红细胞压积 血红蛋白 人用药注册国际协调局 无机磷 世界卫生组织国际粮农组 织食品添加剂联合专家委 员会 平均红细胞血红蛋白含量 钾离子 半数致死量 平均红细胞血红蛋白浓度 平均红细胞体积 华中农业大学2 0 0 7 届硕 论文 n a +s o d i u m n o a e ln oo b s e r v e da d v e r s ee f f e c tl e v e l p i j r b c s c a n t b i l c h o l t p v i c h 、b c p l a t e l e tc o u n t r e db l o o dc e l l s c i e n t i f i cc o m m i t t e ef o ra n i m a ln u t r i t i o r t t o t a lb i l i r u b i n c h o l e s t e r o l t o t a lp r o t e i n i n t e r n a t i o n a lc o o p e r a t i o no bh a r m o n i z a t i o no f t e c h n i c a lr e q u i r e m e n t sf o r r e g i s t r a t i o n o f v e t e r i n a r ym e d i c i n a lp r o d u c t s 、b i t eb l o o dc e l l 钠离子 最大未观察到 有害作用剂量 血小板计数 红细胞 动物营养科学委员会 总胆红素 胆固醇 总蛋白 兽药注册国际协调局 白细胞 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 耄芸姜喜il 如需保密，解密时间 年月1 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书 而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任 何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。 研究生签名：弓氏伟时间：2 9 0 3 年1 月了日 学位论文使用授权书 本人完全了解“华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定”，即学生必须按 照学校要求提交学位论文的印尉本和电子版本：学校有权保存提交论文的印刷版和电 子版，并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印，缩印或扫描等复制手段保存、汇 编学位论文。本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表，传播学位论 文的全都或部分内容。 注：保密学位论文在解密后适用于本授权书， 学位论文作者鲐呈烯钟鲐荔彩字 签名日期：a 年7 月了日 签名日期： 缈7 周夕日 注：请将本表直接装订在学位论文的扉页和目录之间 华中农业大学2 0 0 7 届硕士论文 喹烯酮临床前毒理学研究 研究生i 张伟导师：袁宗辉教授 ( 国家兽药残留基准实验室( h z a u ) 农业部食品安全评价重点歼放实验室， 华中农业大学中国武汉4 3 0 0 7 0 ) 摘要 喹嚼啉类化合物是一类具有抗菌促生长作用的药物，自上世纪7 0 年代以来被广 泛的使用。喹乙醇和卡巴氧是本类的代表产品，主要作为饲料添加剂以5 0 1 0 0 m g k g 的浓度用于食品动物，但因对动物具有不同程度的毒副作用而被禁用或被严格限制 使用。喹烯酮为新一代喹嗯啉类抗菌促生长剂。为评价喹烯酮的安全性，进行了系 统的临床前毒性试验。测定喹烯酮的急性毒性，致突变性，亚慢性毒性，喂养致畸 毒性和繁殖毒性，计算a d i ( 每日容许摄入量) 和其在动物性食品中的最高残留限 量。为喹烯酮的开发应用提供毒理学安全性评价依据。 l 急性毒性试验 w i s t a r 大鼠和昆明小鼠各6 0 只，雌雄各半，喹烯酮用o 5 羧甲基纤维素钠 ( c m c ) 助溶制成混悬液，同时设同类药物喹乙醇、卡巴氧和痢菌净作为对照，采 用一次性灌胃染毒，观察1 4 d 内的中毒反应，用寇氏法计算半数致死量和9 5 的可 信限。结果表明，喹烯酮对w i s t a r 大鼠和昆明小鼠的经口l d 5 0 分别为8 6 8 7 3 1 和 1 5 8 4 8 9 3 m g k gb w ；喹乙醇、卡巴氧和痢菌净对w i s t a r 大鼠经口l d 5 0 分别为 1 8 7 7 6 3 、8 7 8 0 1 和5 6 2 3 4m g k g b w ，对昆明小鼠经口l d s o 分别为3 6 7 7 5 6 、2 8 1 5 5 1 和6 9 4 4 4m g k gb w 。按照急性毒性分级标准喹烯酮为实际无毒物质，喹乙醇、卡 巴氧和痢菌净都为低毒物质。 2 遗传毒性研究 鼠伤寒沙门氏菌回复突变( a m e s ) 试验试验菌株为t a 9 7 ，t a g s ，t a l 0 0 ，t a l 0 2 ， t a , 5 3 5 ，t a l 5 3 7 。试验剂量为1 0 ，2 6 ，6 9 ，1 8 2 ，5 0 o t t g m t ，用已知的阳性物作阳 性对照，同时设溶剂对照( 二甲亚砜( d m s o ) ) 和空白对照( 蒸馏水) ，加和不加 s 9 混合液的对照。每个处理作3 个平行平皿，采用平皿掺入法，计数各皿回变菌落 数，结果评价为计算各处理平均每皿诱发回变菌落数与相应的空白对照组的平均每 皿自发回变菌落数的比值( m r ) ，如m r 大于2 为阳性，小于2 为阴性。 试验结果表明，喹烯酮对t a l 0 2 和t a l 5 3 5 加与不加s 9 时都为阴性；1 7 加和不 华中农业大学2 0 0 7 届硕士论文 加s 9 在剂量三6 9 9 9 n l l 时均为阳性：t a 9 $ 加和不加s 9 在剂量为5 0 o g 皿时均为阳性； t a i o o 加和不加s 9 在剂2 1 8 2 甥皿时均为阳性；t a l 5 3 7 加s 9 在剂2 6 9 t g i m 时为阳 性，不加s 9 在剂2 1 8 2 t t g m t 时为阳性。作为对照药物，喹赛多的结果与喹烯酮基 本相似，喹乙醇、卡巴氧和痢菌净对各菌株均为阳性结果，并呈一定的剂量反应关 系。 小鼠骨髓细胞微核试验昆明种小鼠按体重随机分组，每组1 0 只，雌雄各半， 试验分组分别为溶剂对照组( o 5 c m c ) ，喹烯酮组( 1 7 0 0 ，3 6 0 0 ，7 2 0 0 m g k gb w ) 。 阳性对照组( 环磷酰胺( c p ) 4 0 m g k gb w ) ，并设药物对照喹赛多组( 3 6 0 0 ，6 0 0 0 ， 1 0 0 0 0 m g k gb 、v ) 、喹乙醇组( 4 0 0 ，7 0 0 ，1 7 0 0 m g k g b w ) 、卡巴氧( 3 5 0 ，7 0 0 ，1 4 0 0 m g k g b w ) 和痢菌净( 9 0 ，1 7 5 ，3 5 0 m g k gb w ) 。各组经口灌胃给药2 次，间隔2 4 h ，于 末次给药后6 h 采样制片。每只小鼠计数1 0 0 0 个嗜多染红细胞，计算含微核的嗜多 染红细胞( m n p c e ) 数和含微核的嗜多染红细胞率，同时计数嗜多染红细胞( p c e ) 和正染红细胞( n c e ) 的比例。 结果表明，溶剂对照组和喹烯酮、喹赛多各剂量组含微核嗜多染红细胞率与阴 性对照组比较差异不显著( p o 0 5 ) 。阳性对照组和喹乙醇组、卡巴氧组及痢菌净组 微核率显著增加，与阴性对照组比较差异显著( p 1 0 ，表明各药物对小鼠骨髓未呈明显的细胞毒性作用，红细胞的形成未受到抑制， 不影响微核计数。阴性对照组含微核多染红细胞率 o 0 5 ) ，组织病理学检查也未发现 与药物有关的异常病变。1 8 0 0 m g k g 喹烯酮组大鼠的平均体重极显著低于对照组 ( p o 0 1 ) 。喹烯酮1 8 0 0 m g k g 组和3 0 0 m g k g 喹乙醇组大鼠的血清丙氨酸氨基转移 酶活性显著低于空白组( p 0 0 5 ) ，肾、肝、睾丸( 带附睾) 的脏器系数显著大于空 白组( p 0 0 5 ) ，尿常规、血常规和其他生化指标均没有异常变化。组织病理学观察 表明，喹烯酮1 8 0 0 m g k g 和喹乙醇3 0 0 m g k g 饲料组部分大鼠肝脏汇管区胆管增生。 喹烯酮对w i s t a r 大鼠亚慢性毒作用的靶器官为肝脏，与喹乙醇相同。喹烯酮亚慢性 最大未观察的有害作用剂量( n o a e l ) 为3 0 0 m g k g 饲料，相当于3 0 m g k gb w 。 4 喂养致畸试验 s p f 级w i s t a r 大鼠按体重随机分为5 组，每组雌性2 4 只，雄性1 2 只。设喹烯 酮试验组( 5 0 、3 0 0 、1 8 0 0 m g k g 饲料) ，药物对照喹乙醇组( 3 0 0 m g k g 饲料) ，空白 对照组。各组均连续饲喂1 2 周后进行交配。妊娠第2 0 d 剖腹进行畸胎检查。畸胎检 查包括测窝重、活胎数、死胎数、胎鼠体重、体长、尾长等。试验结果表明，喹烯 酮1 8 0 0 m g r k g 组胎鼠体重、体长、尾长和窝重极显著低于空白对照组( p 0 0 1 ) ，死 胎数极显著高于空白对照组( p 9 9 5 ；批号：2 0 0 5 1 2 2 5 ，由华中农业大学兽药研究所合成；痢 菌净，含量9 8 ，批号：2 0 0 5 0 8 2 2 ，购自湖北中牧安达药业有限公司。 所有实验动物均为健康s p f 级w i s t a r 大鼠和昆明系小鼠，购自湖北省实验动物 研究中心，合格证号s c x k 2 0 0 3 0 0 0 5 。 2 2 主要试剂 羧甲基纤维素钠( c m c ) ，批号：f 2 0 0 2 0 8 1 2 ，上海化学试剂公司；甲醇，分析 纯，国药集团化学试剂有限公司，批号：t 2 0 0 6 0 8 2 2 ：胰蛋白酶( 牛胰) ，1 ：2 5 0 ，活 性2 - 4 u m g ，d i f c 0 0 1 5 2 7 - 1 7 ：d m e m 培养基( 高糖) ，1 2 8 0 0 0 1 7 ，g i b e o ：新生牛血 华中农业大学2 0 0 7 届硕士论文 清( 超级) ，杭州四季青生物工程材料有限公司；二甲亚砜( d m s o ) ，s i g m a 公司， 色谱纯，批号：1 2 9 h 0 0 6 8 ；组氨酸，上海化学试剂公司，批号：0 1 0 1 0 9 ；生物素， 上海化学试剂公司，批号：0 6 0 5 0 1 ；2 - 氨基芴，s i g m a ，批号：4 3 1 0 1 2 ：叠氮钠( n a n 3 ) ， 上海化学试剂公司，批号：0 6 0 5 1 1 。 2 3 主要仪器设备 电子天平( t y 6 0 1 型，感量0 1 9 ) ，上海海康电子仪器厂；电子天平，d f - 2 0 0 a , 2 0 0 # 0 1 m g 常熟市衡器厂；二氧化碳培养箱，c 0 2 w a t e r - j a c k e t e di n c u b a t o r ，美国； 生物显微镜，b x 4 1 ，o l y m p u s ，日本：立式压力蒸汽灭菌锅，上海博迅实业有限公 司医疗设备厂超净工作台，哈尔滨市东联公司；飞鸽牌离心机，t d l - 4 0 b 型，上海 安亭科学仪器厂；s n 3 0 自动双重纯水蒸馏器，上海荣生化学仪器厂；酸度计， s n 0 7 9 4 7 7 ，t h e r m o 电子公司；全自动血液分析仪，a b b o t tc d 1 7 0 0 ，美国；全自 动生化分析仪，o l y m p u s a u2 7 0 0 ，日本：转轮式切片机，k d l 5 0 8 型。浙江金华科 迪仪器设备有限公司；病理组织漂烘仪，z m n 6 8 0 2 型，常州市华利电子公司。 2 4 急性毒性试验 试验设计根据f d at o x i x o l o g i c a lp r i n c i p l e sf o r t h es a f e t ya s s e s s m e n to ff o o d i n g r e d i e n t s i vc 3 a s h o r t - t e r mt o x i c i t ys t u d i e sw i t hr o d e n t s ( f d a , 2 0 0 0 - 3 a ) 和e p a h e a l t he f f e c t st e s tg u i d e l i n e so p p t s8 7 0 1 1 0 0 a c u t eo r a lt o x i c i t y ( e p a ，1 9 9 6 ) 。 试验动物及其饲养管理健康s p f 级w i s t a r 大鼠和昆明小鼠，6 7 周龄，每组 各1 0 只，雌雄各半，体重差异不超过平均体重的2 0 。按照f d a 及美国国家研究 中心( n a t i o n a lr e a s e a c hc e n t e r ( n r c ) ) 发布的实验动物饲养与使用原则( f d a , 1 9 9 3 ； n r c 1 9 9 6 ) 规定，实验动物自由采食、饮水，非交配期雌雄分笼饲养；饲养温度 2 2 a = 3 c ，相对湿度5 0 - a ：2 0 ；人工昼夜，1 2 h 照明，1 2 h 黑暗，光照强度为1 3 0 - - 3 2 5 勒克斯；氨浓度_ 2 0 m g l ；噪声 6 9 皿时为阳性；t a l 0 2 加和不加s 9 在剂f _ 1 8 2 t t g l 时均为阳性。 卡巴氧和痢菌净对各菌株在剂6 2 6 9 9 皿( 除t a l o n 6 9 t t g 皿) 时加或不加s 9 均为阳性。 3 3 小鼠骨髓细胞微核试验结果 试验结果如表6 所示。喹烯酮和喹赛多各剂量组微核率与阴性对照组比较差异 不显著( p o 。0 5 ) ，为阴性；喹乙醇、卡巴氧和痢菌净各剂量微核率与阴性对照组比 较差异极显著( p o 0 1 ) ，为阳性。阳性对照组微核率与阴性对照组比较差异极显著 ( p o 0 1 ) 。各组小鼠的嗜多染红细胞与正染红细胞的比值( p c e n c e ) 均大于l ， 表明各受试药对小鼠骨髓细胞未呈现明显的细胞毒性作用，红细胞的形成未受到抑 制，不影晌微核计数。阴性对照组含微核多染红细胞率小于3 0 0 0 ，符合一般自发率 ( 朱蓓蕾，1 9 9 4 ) 。 捌冒 碾窆 雾 梳 惠囊薰蔓墓重要要要蓦耋奏枣喜蚕 聿薰要墓蚕堇要要蔓委薰奏囊要蕃 錾薹奏薹蚕墓薹薹錾蚕耋耋萋薹蚕 霎薹墓耍薹薹墓薹奏薹耋羹奏薹萋 尊湛求出求鲞烈善盘基至翟券畚墨 罱鬲胬葛葛；罱器高高圣缓罱羚高 驰薹| | 薹耄羹塞薹茎室茎妻薹薹 弱薹薹薹羹墓薹墓蚕妻耋耋羹蚕 薹重墓墓墓萋妻亳基要塞重萋薹墨 至塞菩善夏重童要喜要羹重量蒌葛 塞羹羹趱萋蚕薹蔓羹| | 耄要0 1 重 量釜0 ”c , i 三景星0 ”e , i 宝量坌暑：三 逛n星籁犍坦锹叵越皿蠹堑茛正甜上钟笛上籍链粗制叵惜磷。燃 。一书口n n 书i s n 考h 氛州n n w = 9 太文 寸州小 i 一州卜 。= 刊h n 一 一奇= ”州n 寸 n 内n 千8 t n 槲n喑寻n州ic 西卅卜” 制。寸 。一= z 口 尊t n 式目 h 制口n 譬。荨 千o _卜咐寸n剞n寸 寸州n n 州n 寸 口6 口 n 千9 ， o 一州f 一 o h 各n n n n 翕 =千9nh一 。a = 卅= o h o 一州n 一 一心书n n n一心州n o 各”州g。”n豢 聃州o nn n 州一峪n 三口千9，t口t州n葛 蔓v尊h_ 雏f z 割嫡骼静 匿骏螫 a + 昏 口+ 西+ 昏。 西+ g v 上 。叭基 g v 工 o s 千k v 籁 瓣 组 斟 匠 目 世 霸 牛 ls掌mo暮-o=：2譬声noqll工 眯与筝辑帮苎lv啭 杈刁=馨哩_00n扑爿子争 重耋室奏星塞奏童蠢要萋委 墓 喜鲞叁重羹薹妻妻重蓦薹墨r - 薹-高誉s 导寓窘赛窨熹蜀= 一宗 塞耋重塞墨皇妻室鎏善蔓蚕 羹 塞奏薰耄奏耋耄叁鱼羹蚕禹墓 戮蓦墓辫粥l | - i | | 爨趱粥羹 辩疆撵掰 童墓重垂薹羹喜重蚕妻墓要 誉鲞出求鲞衷冬岂鲞墨莰浸 9 叠壹一n 。o 一“一 羹奏童堇善耋茎耋室耍薹要薹 - 颦n星籁链组制叵越皿崭虽茛正甜一婶餐-上纂捷扭锹叵惜啭。捌 = 一制口= n 口一卅n 一 曲n 州卜寸n熏：= 卅田心na 坩卜昏n 。n 斜器t n 。o州一西。一 小n一圳6n一 a n 啊c i n寸n 心n 寸 口l千一n口 冬h平in一 口o l 制，h 2 寸一刊”一h “n一_世n一 。=dtn m 一州吕“ 山奇一h 。o 节f z q t1 q 制口h 。to一千hh_l t 口o i 千l 口t n。o ：千l n n n 。n 9 千n ，。o ”州n 婚口 。一一_曲西n一 。a 0 i _ = 8 0 n n 。小。一卅寸”h o 一卅n n 一一卅n n 一 。口h 千9 n鑫n内一口 ho一“=乙hci。0i墨奇n寸一 志hnn s h 千6 n ”罩” 。o千罱一 。an一刊一h一 。n2出h“ 苏ci槲nn oon最o-8_ o o _ _ ：i 文 ”一 n 7 奄z o o n a 2 占 。 o = o 正谢 0 一峪一 6 峪 n h 。n 毒c 纽蜃 o 一心一 口口 n 一 薜盯牛 西+ 口。 凸+ 直 西+ 凸 小+昏 6 s + 凸 昏+ 西 gv上 iv上 g 昌 v上 口v工 g v 上 凸s千kv籁 键 糨 锹 叵 目 世 露 争 o o ” 一目奄3 捌暴 露刍至 苗3叽。星-o=ns2 oll卜”o一是廿jq暑cou 眯蠕辑馏8昌n群端 杈馨。器嗟h8n扑x爿娶岳醉 华中农业大学2 0 0 7 届硕上论文 注：表示与空白组相比具有极显著差异，p o 0 1 华中农业大学2 0 0 7 届硕士论文 3 4 体外哺乳动物细胞染色体畸变试验 试验结果如表7 所示。喹烯酮和喹赛多各剂量组在加与不加s 9 时细胞畸变率均 小于5 ，为阴性。喹乙醇加和不加s 9 在剂量三5 o l l g m l 时细胞畸变率均大于1 0 为阳性，在剂量5 2 5 t t g m l 时细胞畸变率均大于5 小于1 0 ，为可疑阳性。卡巴氧 和痢菌净各剂量组在加与不加s 9 时细胞畸变率均大于1 0 ，为阳性。 3 59 0 d 喂养试验结果 一般观察在给药期内，各组大鼠均未出现明显的中毒反应和死亡。大鼠外观 体征和行为状态基本正常。 体重雌性和雄性大鼠在试验期内的体重变化如图2 、图3 所示。整个试验期 间雄性大鼠体重明显大于雌性大鼠，符合大鼠生长发育的正常规律。 雌性大鼠：给药2 周后开始直至试验结束时，喹烯酮1 8 0 0 m g k g 饲料组( q 1 8 0 0 ) 大鼠平均体重极显著低于空白组( p o 0 1 ) ，喹烯酮5 0 m g k g 饲料组( q 5 0 ) 、喹烯酮 3 5 0 3 0 0 2 5 0 72 0 0 栅1 5 0 堆l o o 5 0 o o5 时间( w ) 十空白组+ q 5 0 + q 3 0 0 十q 1 8 0 0 + 0 3 0 0 图29 0 d 喂养试验各雌鼠组平均体重变化图 f i g 2m e a nb o d yw e i g h t so f f e m a l er a t si nt h e9 0d a y sf e e d i n gs t u d y 3 0 0 m g k g 饲料组( q 3 0 0 ) 、喹乙醇3 0 0 m g k g 饲料组( 0 3 0 0 ) 大鼠平均体重略高于 平均组，但与空白组相比无显著差异( 少田0 5 ) 。 雄性大鼠：给药2 周后开始直至试验结束时，q 1 8 0 0 组大鼠平均体重极显著低 于空白组( p o 0 1 ) ，q 3 0 0 组大鼠平均体重极显著高于空白组( p ，o 0 1 ) ，q 5 0 和0 3 0 0 组大鼠平均体重虽高于空白组，但无显著差异( 少o 0 5 ) 。 华中农业大学2 0 0 7 届硕士论文 注：表示试验结果为阳性；表示试验结果为可疑阳性。 华中农业大学2 0 0 7 届硕上论文 6 0 0 5 0 0 4 0 0 b o 懈3 0 0 蝗2 0 0 1 0 0 o 05 1 0 1 5 时间( w ) + 空白组+ 0 5 0 + 0 3 0 0 睁0 1 8 0 0 + 0 3 0 0 图39 0 d 喂养试验各雄鼠组平均体重变化图 f i g 3m e a nb o d yw e i g h t so f m a l er a t si nt h e9 0d a y sf e e d i n gs t u d y 饲料利用率结果如表8 所示。雌性大鼠：q 1 8 0 0 组在给药期间饲料利用率始 终为各组最低，在前4 周极显著低于空白对照组( p o 0 1 ) ，5 - 8 周显著低于空白对 照组( p o 0 5 ) 。 雄性大鼠：q i s 0 0 组在给药期间饲料利用率始终为各组最低，在前4 周极显著 低于空白对照组( p o 0 1 ) ，第5 - 8 周显著低于空白对照组( p o 0 5 ) 。 血清生化指标血清生化检查结果表明，给药第3 0 、6 0 d ，各试验组雌鼠和雄 鼠的所有血清生化检参数与空白组无显著差异。给药9 0 d ( 表1 0 ) 时，q 5 0 、q 3 0 0 和q 1 8 0 0 组雌鼠和雄鼠a l t 显著低于空白组( p o 0 5 ) ，0 3 0 0 组极显著低于空白组 ( p 0 0 1 ) ；q 1 8 0 0 组雌鼠t p 、c r 显著低于空白组( p 0 0 5 ) ，q 1 8 0 0 组雄鼠a l p 显著高于空白组( p o 0 5 ) ，雌性和雄性大鼠各给药组的其他生化指标无显著差异。 耸 10ov钆馨越露正诮才罾啭：soov乱翁丑正剞。露啭。燃 t l o 手品 叶0 丰n h 叶。遵一 o 千； n重 吨。千譬 乜0 辛； ”胃器 口毒婚 0千警 8 - 0 丰竺一 n一是n一 1羊冀_l t 笥8 8 一 g n o n 宝啦一 叶口坩龟一 n一宝奇咤一 寸君岢n t o 书n n n 口唧，n t o 槲n ，n 彘君岂n 1鬲一崎 ：_一山迸卜 ：no圳幽卜 ：i i 州q 昏 ；q 鬲q o 一 一千11ix苗一。 封覆忑 哼。莩c - h n 一o 千8 q n t o 千8 n 9嚣甘 叶0 千n | n窜on 乌。千9，口 9鼋龟卜 ：口一手c2 ：n一尊= 一千82 ：由一丰c2 ：一出6i 9 8 叶。毒h 叶爱遵n 叶拳离n 畸。千； 气。千； t o 千； no碣寸 o一千9n n一书卜 l i 式。一 _遵。一 i千n2 n 州2 上书啪一 o n o n金水_l 吒。千1 一 心o盘n 6 帚晦n 寸幂n n 峰o 丰8 n l i 出甘 上帚或” n一卷， 竹一千6舟 6 i 芊n 1 i i i 喾i 宅出n q千c上i 口钭 一譬一心o n10州上o = o 出t _ 2零是一 n 君岜n n 0 千，n 宝啦 n一文n t o 尊n 畸君如唪 岛辱p 9 曰一 畸l尊1l 吮一尊i 8 n o 蔫帚g - o =鼋嚣0 ”一0千葛一 冀。堪一 吨富焉 t o 手： o一出n c o 千寻 i-一毒n o一出寸 ：t 雪嚣 n一千8n ：oi千； ：i i 千6 g l o 1 1 0 手；o 掣。寰d t 0 千： ”o 千二 n 茸皇n 寸0眷n 崎一岑n o 一千i n ：遂心 ：舀崎 o一遵 一l卅n西 9 千i = t 钳承= 8 n o i 帚s o 两。千写o n0芊与一 no千竺 一0 丰i c 寸茸盘h i i 丰i ， 是寸 i i 文崎 乱o毒甘 o墨 “一赢尊 啦一州0一 吨甜0 _ 0 8 霜宝碍号。 一一|o 吨。卅t nq宝譬_ 气o 一 no制9一 n 君t 呻 c 0 ：毋寸 唧l 千一崎 n 一制呷n 6 o 芊l ， 田一州q 小 n 一嘟，2 琨! 耩 翟c l 掭 蛋n 一赣 霹= 瓣 蛋。一量i；瑶小掭 嚣耩 窭卜按 霉口鞣 窭”躲 琨叶躲 婆n 祷 翟n 抵 翟一辑 矗杀 一罨-粤。一嚣d州善。至一hpm嚣u一絮曾奢口06-oj量hgo苗疆。号2o一自盘 套匿8一嚣。牮珥as千k v褂ff熏凄器磁孓繇缮称警06样 烈秘。草嗟卜gn扑爿廿并 华中农业大学2 0 0 7 届硕t 论文 表9 大鼠给药9 0 d 血常规指标( 可士s d ) t a b l e 9h a m a t o l o g yp a r a m e t e r so f r a t ss a c r i f i c e do l ld a y9 0o f 9 0 一d a yf e e d i n gt e s t ( m e a n - s d ) 华中农业大学2 0 0 7 届硕士论文 表l o 大鼠给药9 0 d 血液生化指标( x - 士s d ) t a b l e 1 0s e r u mc l i n i c a lc h e m i s t r yo f r a t ss a c r i f i c e do nd a y9 0o f 9 0 - d a yf e e d i n gt e s t ( m e a r 眭s m 注：表示与空白组相比差异显著， 0 0 5 ；+ ，表示与空白组相比差异极显著，p 0 0 1 华中农业大学2 0 0 7 届顾士论文 恢复期时，q 1 8 0 0 组雌鼠a l l 显著低于空白组( p o 0 5 ) ，雌性和雄性大鼠各给药组 的其他生化指标无显著差异。 尿常规指标整个试验期间，各剂量组尿常规各项指标与空白组比较无显著性 差异。 脏器系数q 1 8 0 0 组雌鼠肾和肝的脏器系数在试验期间均显著大于空白组 ( p o 0 5 ) ，q 1 8 0 0 组和0 3 0 0 组雌雄鼠肾和肝的脏器系数在第6 0 d 、9 0 d 和恢复期显 著大于空白组( p o 0 5 ) ；q 1 8 0 0 组和0 3 0 0 组雄鼠睾丸( 带附睾) 的脏器系数在第 9 0 d ( 表1 1 ) 和恢复期显著大于空白组( p 0 0 5 ) 。其他脏器的脏器系数无显著差异。 病理学检查病理学检查发现q 1 8 0 0 和0 3 0 0 组部分动物肝脏汇管区胆管增生 ( 图4 ) ；其他各被检脏器未见有毒理学意义的病理改变。 图4 肝脏病理学组织结果 a 空白组肝脏汇管区，一般有动、静脉血管和胆小管各一根( 4 0 ，h e ) bq 1 8 0 0 和0 3 0 0 组 肝脏汇管区胆小管明显增生，出现多根胆小管( 4 0 ，h e ) f i g 4h i s t o p a t h o l o g i er e s u l t so f l i v e r 正常情况下肝脏汇管区一般有动脉、静脉和胆管各一根，如图4 a 所示。切片 中细胞界限清晰，核质分明。在q 1 8 0 0