液相培训试题.doc

高效液相色谱仪培训检测一、选择题1. 以下属于光学性质检测器的是（ ） A. 紫外-可见光检测器 B. 荧光检测器 C. 电导检测 D. 光声检测器2. HPLC流动相对溶剂的要求有（ ） A. 纯度高、化学稳定性好B. 对待检测样品具有合适的极性和选择性C. 用于紫外检测时，溶剂在检测器的工作波长下不能有紫外吸收D. 分析纯级别即可以被用来作为流动相3. 高效液相色谱的流动相常见的脱气方法有（ ）A. 超声波脱气 B. 抽真空脱气 C. 在线真空脱气 D. 加热脱气4. 液相使用过程中若发现有盐析出导致压力较高，应该选择用哪种流动相进行冲洗（ ） A. 水 B. 甲醇 C. 乙腈 D. 缓冲盐5. 不可以用来对泵头进行冲洗的试剂是（ ） A. 异丙醇 B. 甲醇 C. 水 D. 缓冲盐6. 在高效液相色谱流程中，试样混合物在（ ）中被分离。 A. 检测器 B. 记录器 C. 色谱柱 D. 进样器7. 液相色谱流动相过滤必须使用何种粒径的过滤膜（ ） A. 0.5m B. 0.45m C. 0.6m D. 0.55m8. 在液相色谱法中，提高柱效最有效的途径是（ ） A. 提高柱温 B. 降低板高 C. 降低流动相流速 D. 减小填料粒度 9. 在液相色谱中，不会显著影响分离效果的是（ ） A. 改变固定相种类 B. 改变流动相流速 C. 改变流动相配比D. 改变流动相种类10. 在高效液相色谱仪中保证流动相以稳定的速度流过色谱柱的部件是（ ） A. 贮液器 B. 输液泵 C. 检测器 D. 温控装置二、判断题11. 液相色谱柱没有方向区别，所以接色谱柱时无需根据流路方向来接。（ ）12. 液相色谱仪使用完后，如果管路中有缓冲盐，需要用水冲洗。（ ）13. 不建议使用乙醇代替甲醇作为常用的流动相，但可以作为低含量改性剂使用。（ ）14. 脱气后的溶剂放置时间长了，又会溶解新的气体，使用时需要重新处理。（ ）15. 乙腈作为流动相时，其体积浓度比例最好不超过75%。（ ）16. 液相使用人超过申请使用时间后，若后续无其他人使用，可以不用申请，继续使用。（ ）17. 流动相必须贴有配制标签，用水做流动相时需要每天进行更换。（ ）18. 若临时有事离开，可以让未经培训的同事，经自己家临时培训后使用液相设备。（ ）19. 间隔3小时以上不用液相时，可以不用关闭液相仪器和紫外灯。（ ）20. 液相使用结束，用大量水相冲洗完系统和色谱柱后即可关闭系统。（ ）三、填空题：21. 高效液相色谱法系采用 将规定的流动相泵入色谱柱进行分离测定的。22. 高效液相色谱仪基本由 ， ， ， 和 组成。 23. 色谱系统的适用性试验通常包括 、 、 、 等四个指标。 24. 开机步骤：接通电源，依次开启 、 、 、 ，待泵和检测器自检结束后，打开 、 ，最后打开 。 25. 高效液相的维护：最后一次进样完成后，应用流动相冲洗 分钟，以保证洗脱完全，若流动相中含有无机盐类，应用 冲洗 分钟。四、简答题：26. 流动相为什么要脱气？常用的脱气方法有哪几种？ 27. 操作液相时发现压力很小，可能的原因是什么；操作过程若发现压力非常高，可能的原因是什么？ 28. 长时间分析中如何保证液相色谱的保留时间漂移不大？29. 高效液相色谱有哪几种定量方法，其中哪种是比较精确的定量方法，并简述之。答案：一、 选择题1-5：AB，ABC，ABCD，A，CD 6-10：C，B，D，B，B二、 判断题11-20：错，对，对，对，对，错，对，错，错，错三、 填空题21. 高压输液泵 22. 泵，进样器，色谱柱，检测器和色谱数据处理器 23. 理论板数、分离度、重复性和拖尾因子 24. 电源、 真空脱气机、泵、 检测器；电脑显示器、主机；色谱工作站 25. 20，高纯水，30四、 简答题1. 流动相中溶解气体存在以下几个方面的害处： （1）气泡进入检测器，引起光吸收或电信号的变化，基线突然跳动，干扰检测。 （2）溶解在溶剂中的气体进入色谱柱时，可能与流动相或固定相发生化学反应。 （3）溶解气体还会引起某些样品的氧化降解，对分离和分析结果带来误差。 因此，使用前必须进行脱气处理。 常用的脱气法有以下几种： A、 加热脱气法；B、真空脱气法C、超声波振荡脱气法。 2. 压力很小：排气阀没有完全关闭、色谱柱没有连接不良、系统的管件连接有漏、泵的单向阀闭锁不全、泵腔有气泡。 压力过高：管路已堵、色谱柱堵塞。3. 要保证保留时间的长期稳定性，主要从几方面来考虑：（1）保证仪器的运行稳定性，泵流量稳定，比例阀工作正常，流路没有渗漏和堵塞现象，避免泵和管路中存在气泡。（2）温度尽量保持恒定，最好配备柱温箱，房间要有空调，柱温与方面的温差要小。（3）注意挥发性流动相的密封性，流动相的温度应与周围环境温度保持一致，避免采用高比例的流动相。（4）分析前流动相平衡足够的时间。（5）流动相的PH值与样品（离子化合物）的等电点最好相差两个单位以上。（6）采用质量好的色谱柱，柱子在分析前必须冲洗干净。4. 高效液相色谱的定量方法主要有归一化