（分析化学专业论文）共振瑞利散射和共振非线性散射测定叶酸和甲氨蝶呤的新方法研究.pdf

摘要 共振瑞利散射和共振非线性散射测定叶酸和 甲氨蝶呤的新方法研究 分析化学专业研究生郗存显 指导教师刘绍璞教授 摘要 共振瑞利散射法( i 潞) 和共振非线性散射( r n l s ) 是近年来发展起来的新分析技术， 它以灵敏度高、仪器廉价、操作简便快速等优点而引起了人们的广泛兴趣和关注。在核酸、 蛋白质、糖类等生物大分子的测定中得到了较多的应用，而利用这一技术在金属、非金属、 纳米微粒和药物分析中的研究工作也日益增多。 我们将共振瑞利散射技术和共振非线性散射技术用于叶酸及甲氨蝶呤的分析。探讨了它 们的r r s 光谱特征、适宜的反应条件、影响因素及分析化学性质，发展了某些用i 墩s 和r n l s 测定叶酸和甲氨蝶呤的新方法，并对反应机理、i 邺增强的原因作了讨论。主要的研究内容 如下： 1 叶酸与铀( ) 及碱性三苯甲烷染料相互作用对吸收和共振瑞利光谱的影响及其分析应用 在p h 为4 2 _ 4 8 的h a c n a a c 缓冲溶液中，叶酸( f a ) 与u ( ) 形成2 ：1 的螫合阴离子， 它能进一步与乙基紫、甲基紫、结晶紫等碱性三苯甲烷染料( b t p m d ) 反应形成1 ：2 的离子缔 合物，此时染料将发生明显的褪色作用，并引起吸收光谱的变化，而且将能引起共振瑞利散 射( r r s ) 的急剧增强并产生了新的l 汛s 光谱。三种体系反应产物具有相似的光谱特征，其最大 褪色波长分别位于5 4 5n m ( e v 体系) 、5 7 4 姗( m v 体系) 和5 8 9n m ( c v 体系) ，最大砒峪 波长均位于3 2 8 i l i l l 附近，但相对强度有一定的差异，不论是褪色反应还是峪强度均是e v 体系 m v 体系 c v 体系。在一定条件下褪色反应吸光度的降低( 彳) 和散射强度( d 在 一定范罔内与叶酸的浓度呈正比，褪色分光光度法的线性范围和检出限( 3 0 ) 分别是0 2 1 7 0 p 咖l 和6 2 on g m l ( e v 体系) ，o 2 4 4 0p 酌1 l l 和7 1 0n 酌：i l l ( m v 体系) 及o 3 5 6 o 舭 和1 0 4 0n g m l ；i 汛s 的线性范围和检出限( 3 a ) 分别是o 0 0 4 5 o 嵋札和1 2n 删e v 体 系) ，o 0 13 4 鹇m l 和2 2n g m i 似v 体系) 及o 0 2 5 4 op 酌n l 和3 7n g m u c v 体系) 。方法具 i 两南大学硕+ 学位论文 有更高的灵敏度，囚而更适于痕量叶酸的测定。本文考察了适宜的反应条件和影响囚素，研 究了共存物质的影响，基于u ( ) 叶酸碱性三苯甲烷染料体系三元离子缔合物的i 潞光谱， 发展了一种高灵敏、简便快速测定叶酸的新方法。方法用于人血清和尿样中的叶酸的测定获 得满意的结果。文中还对三元离子缔合物的结构和反应机理进行了讨论。 2 叶酸f e ( i l i ) 体系的共振瑞利散射和共振非线性散射光谱及其分析应用 在p h5 0 的h a c n a a c 缓冲溶液中，叶酸( f o l i ca c i d ，f a ) 能还原f c ( ) 而生成f e ( i i ) ，f e ( i i ) 能进一步与叶酸形成配合物，此时能观察到共振瑞利散射a 良r s ) 、以及二级散射( s o s ) 和倍频 散射( f d s ) 等非线性散射的显著增强。其最大r r s ，s o s 和f d s 波长分别位于3 9 8 ，5 8 0 和3 9 0 姗 处。散射强度( 卸在一定范围内与药物的浓度成正比，方法对于f a 的线性范围和检出限分别 为o 0 3 3 8 0p 咖l 和9 8n 咖l ( i 汛s 法) 、0 0 4 9 6 0 嵋l n l 和1 4 6n 酌n l ( s o s 法) 、0 0 3 5 5 o p 咖l 和1 0 6n 咖l ( f d s 法) ，其中以r r s 法测定f a 的灵敏度最高。本文主要研究了r r s 的反应条件和影响因素，考察了共存物质的影响，表明方法有良好的选择性。基于上述研究结果， 建立了一种灵敏、简便、快速间接测定f a 的新方法，并用于人血清、尿样中f a 的定量测定。 3 钯( i i ) 甲氨蝶呤螯合物与某些碱性吩噻嗪料相互作用的共振瑞利散射光谱及其分析应用 在p h 为4 1 7 o 的b r i t t o n r _ 0 b i 璐o n 缓冲溶液中，甲氨蝶呤与钯( i i ) 形成l ：1 的螯合阴离 子，它能进一步与亚甲蓝( m b ) 、甲苯胺篮( t b ) 、天青a ( a z a ) 等碱性吩噻嗪染料反应形成1 ：1 的离子缔合物。此时能引起共振瑞利散射( r r s ) 的显著增强并产生新的砌峪光谱，三种体系反 应产物具有相似的光谱特征，最大i t r s 波长均位于3 3 0 姗附近。但它们的相对强度有一定的 差异，其顺序是m b 体系 t b 体系 a z a 体系。在一定条件下散射增强( d 与甲氨蝶呤的浓 度成正比，其线性范围分别是0 0 0 8 2 0 甥m l ( m b 体系) ：0 0 1 3 3 5 嵋m l ( t b 体系) 和o 0 2 5 _ 4 0 “g m l ( a za 体系) 。方法具有高灵敏度，不同体系对于甲氨蝶呤的检出限分别是2 5 n 咖l ( m b ) 、3 9n g n l l ( t b ) 和7 6n g m l ( a za ) 。三者均可用于甲氨蝶呤的测定，其中以m b 体系灵敏度最高。本文考察了适宜的反应条件和影响因素，研究了共存物质的影响，基于 p d ( i i ) 甲氨蝶呤碱性吩噻嗪染料体系三元离子缔合物的鼬峪光谱，发展了一种高灵敏、简便 快速测定甲氨蝶呤的新方法。方法用于人血清和尿样中的甲氨蝶呤的测定获得满意的结果。 文中还对三元离子缔合物的结构和反应机理进行了讨论。 4 铊( i i i ) 甲氨蝶呤反应体系的二级散射和倍频散射光谱及其分析应用 在p h4 9 的b r 缓冲溶液中，甲氨蝶呤( m ) 能与t l ( i ) 反应形成3 ：l 的螯合物，此时将 引起二级散射( s o s ) 和倍频散射( f d s ) 的显著增强，最大二级散射和倍频散射波长分别位于5 2 0 i l 摘要 姗和3 9 0 姗处。在0 0 2 2 2 op g m l ( s 0 s 法) 和o 0 0 8 - 2 5 蚓m l ( f d s 法) 范围内m 1 、x 的浓度与散 射增强程度( ) 成正比。方法具有高灵敏度，对m 1 x 的检出限分别为7 4n 咖l ( s o s ) 和2 3 n 卧n l ( f d s ) 。本文研究了适宜的反应条件和影响因素，并考察了共存物质的影响，表明方法 具有较好的选择性，据此发展了一种灵敏、简便和快速测定痕量m 的新方法，并可用于人 血清和尿液中m t x 测定。本文采用量子化学的o l i d o 法计算了m 电荷分布，探讨了反应机 理。 5 铊( ) 甲氨蝶呤反应体系的共振瑞利散射光谱及其分析应用 在p h4 6 5 o 的b r 缓冲溶液中，甲氨蝶呤能与t l ( i ) 反应形成3 ：1 的螯合物，此 时将引起共振瑞利散射显著增强并出现新的砌硌光谱，最大散射波长位于3 3 5n m 处，另在3 6 6 姗处有另一较强的散射峰。在o 0 1 0 2 5h g m l 范围内m t x 浓度与散射强度( d 成正比。方 法具有高灵敏度，对m t x 的检出限为3 1 舭， 方法也有良好的选择性。据此发展了一种灵 敏、简便和快速测定痕量m t x 的新方法，并可用于人血清和尿液中m 1 x 测定。 6 1 2 钨磷酸作光谱探针共振瑞利散射法测定叶酸和甲氨蝶呤 在p h0 1 5 的盐酸介质中，叶酸( f a ) 和甲氨蝶呤( m t x ) 能与1 2 钨磷酸反应形成3 ：l 的络合物，此时将引起共振瑞利散射显著增强并出现新的砌娼光谱，最大散射波长分别位于 3 7 0 姗( f a ) 和3 6 8l l i n ( m t x ) 处。散射强度( 卸在一定范围内与药物的浓度成正比，方法的线性 范围和检出限分别为o 0 5 6 5 0 “g m l 和1 1 2n g 札( f a ) ，0 0 2 1 3 o 灿和6 3n 舭( m t x ) 。 其中测定m t x 的灵敏度最高，以m t x 为例考察了共存物质的影响，表明方法有良好的选择 性。据此发展了一种灵敏、简便和快速测定痕量m r x 和f a 的新方法，并被可于人血清和尿 液中m t x 的测定。 关键词：叶酸甲氨蝶呤共振瑞利散射共振非线性散射 m a b s t i a c t a s m d y o nt h en e wm e t h o df o rt h ed e t e r m i n a t i o no ff o l i ca c i d a n dm e t h o 骶x a t eb yr e s o n a n c er a y l e i g hs c a t t e m ga n d r e s o n a n c en o n 一1 i n e a rs c a t t e r i n g s p e c i a l t y ：a n a l 如c a lc h e m i s t r y a u t h o r ：x ic u n x i 趾 s u p e r v i s o r ：p r o l i us h a o p u a b s t r a c t r e s o 删l c er a y l e i g hs c a t t e r i n g ( r r s )觚dr e s o n a n c en o n l i i l e a r s c a t t e r i n ga r et l l en e w a n a l y n c a lt e c h n i q u ed e v e l o p e di nr e c e n ty e 嬲b e c a 髑eo f l e i rl l i g l ls e i l s i t i v i 劬c h c a p n e s s i i l s t r i m l e n t ，s i m p l e0 p e r a t i o n 锄dr a p i d 锄m l y s i ss p e e d t l l e s er n e 也o d sc a t c hp e o p l e sm o r e a l t c n t i o na r l di l a v cb e e nw i d e l yu s e dt os t l i d yo fb i o l o g i c a lm c r 0 i t l o l e c u l e ss u c h 鹬n u c l e i ca c i d s ， p r o t e i 娜觚ds a c c h a r i d e 锄dd e t e l l l l i n a t i o no f 仃佻em e 协l i o 地，n o n m l 沲li o 璐，n o p a n i c l e 锄d s o m ep k m m c e u t i c a l s i i ln l i sw o r k ，也ea p p l i c a t i o no fl u 峪锄dr n l st oa i l a l y s i so ff o l i ca c i da l l dm e 廿1 0 t r e x a t ew e r e s t l l d i e dt h es p e c t r a lc h a r a c t 甜s t i c s ，o p t i m u mr e a c t i o nc o n d i t i o 璐，i n n u e n c i n gf a c t o 瑙a l l da n dm e p r o p e n i e so fa 1 1 a l y t i c a lc h e m i s n yh a v eb e e ns m d i e d s o m en e wm e t l l o d sf o rn l ed e t e 瑚缸n a t i o no f f o l i ca c i da n dm e t h o 仃c x a t cb yr r sa 1 1 di 斟l st c c t u l i q u e sh a v eb e e nd e v e l o p e d 1 1 1 er c a c t i o n m e c h a n i s ma n dm er e a s o n so fm er r se r l l l a n c e m e n th a v eb e e nd i s c u s s e d 1 e 腩c t so f1 1 1 t e r a c t i o no ff o l i ca c i dw i t l lu 黜i 啪( ) 锄db 弱i ct r i p h e n y l m e t h 觚ed y e so nm e a b s o r p t i o na n dr e s o n 锄c er a y l e i 曲s c a t t e r i n gs p e c 舰锄dt 1 1 e i ra n a l 如c a la p p l i c a t i h lb r i t t o n r o b i i l s o nb u 断o f p h4 2 _ 4 8 ，f o l i ca c i dr e a c t 丽t l lu m i 哪( ) t 0f o n n2 ：1a i l i o n i c c h e l a t e s w h i c h 如n 】rr e a c tw i lb 舔i c 乜印h e n y l m e m a n ed y e s ( b t p m d ) s u c h 硒e t h y l o l e t ， m e m y l o l e ta i l dc r y s t a l o l e tt of o 册1 ：2i o n 一弱s o c i a t i c o m p l e x e s t h e nt 1 1 ed y e sd i s c o l o 豫t i o n o b v i o u s l y 锄dt h ea _ b s o 印t i o ns p e c 位ac t 姗g e d t h eg r e a te n h a n c e m e n t so fr r si n t e n s i t i e s 撇 0 b s e n ，e da 1 1 dn e wr r ss p e c 仃aa p p e 她n e i rs p e c 倾ic l l a l 徼t e r i s t i c so ft l l et h 聆es y s t e i l l sa r es i l t l i l v 西南人学硕十学位论文 t l l em a x i m u mf a d i i l gw a v e l e n g t h sw e r es i t u a t e da t5 4 5m ( e vs y s t e m ) ，57 4i 吼( m vs y s t e m ) a n d 5 8 9 啪( c vs y s t e m ) 1 1 1 en 姒i m u mr r sw a v e l e n 咖s 玳a l la t3 2 81 1 1 1 1 b u tm ei n t e n s i t i e so fd y e s a r es o m cd 臁r e n c e ，e m e rd i s c o l o m t i o no rr r s 舔e m y l o l e ts y s t e m ( e v ) m e t l l y l o l e t s y s t e m ( m v ) c r y s t a l 0 1 e ts y s t e m ( c u n d e r 百v e nc o n d i t i o n sm ei n t e i l s i t i e so fr r sa n df a d eo f t 1 1 ea b s o 印t i o na 心a 1 1p r o p o r t i o n a lt om ec o l l s i s t e n c eo fe a ，t 1 1 e1 i n e 州t ) ，m g ea i l dl i m i t so ft h r e e f a d i i l gs p e c 仃o p h o t o m e t e rs y s t e 瞄a r e0 21 - 7 o 嵋m l 锄d6 2 on g n l ( e vs y s t c m ) ；o 2 4 _ 4 o “n l l 锄d7 1 on g n l ( m vs y s t c m ) ；o 3 5 6 op 咖l 锄d1 0 4 on m l ，r e s p e c t i v e l y t h el i n e a r i t yr a l l g e a n dl i m i t so ft h r e er 】畏ss y s t e n 塔a r e0 0 0 4 - 5 o h g h 1 la n d1 2n g 咄e vs y s t e n l ) ；o 0 13 4h g m l 锄d2 2n g m i ( m vs y s t e m ) ； o 0 2 5 _ 4 oi l 咖l 锄d3 7n 幽n 工 c vs y s t e m ) a 1 1t l l et h i e er r s s y s t e m sc a nb eu s e dd e t e m l i n a t e 仃a c ef am o r es e i l s i t i v ea n dm o r es u i t a _ b l e t h eo p t m m c o n d i t i o l l s o ft 1 1 er e a c t i o na r l di n f l u e n c ef a c t o r sa l l dm ee 饪- e c to fc o e x i s t i n gs u b s t a l l c e so nm er e a c t i o nw e r e i n v e s t 垃a t e d ah i g l ls e i l s i t i v e ，s i m p l ea i l df a s tm e t l l o di sp 芏i o p o s e dt ot 1 1 ed e t e n n i n a t i o no ff a t h e m e t l l o dc a l lb eu s e ds a t i s f a c t o r i l yf o rd e t e n l l i n a t i o n0 ff ai 1 1s e l l l ma n du 面1 es a n 叩l e s t h e c o m p o s i t i o nf o rt 1 1 et e m a r yi o n - a s s o c i a t i o nc o m p l e x i si n v e s t i g a t e d ，a n dm es t n j c t u r co fm ec o m p l e x a n di t sr e a c t i o nm e c 蜥s ma r ed i s c u s s e d 2 r c s o n a l l c er a y l e i g l ls c a 位e 豳gs p e c 觚a 1 1 dr e s o n 趾c en o n l i i l e a rs c a t t e 咖go ff e ( i ) 一f o l i ca c i d s y s t e ma n di t s 龇m l 如c a la p p l i c a t i o n h lp h5 oh a c - n a a cb u 脏rs 0 1 u t i o n ，f o l i ca c i d ( f a ) c a i l 他a c tw i mf e ( i ) t op r o d u c ef e ( i i ) ，a l l d m ef e ( i i ) w i i lr e a c t e dw i mf at of o 仰c h e l a t e ，讹c h1 e a dt 0m es i 鲥f i c 觚te 1 1 1 1 a n c e m e n to f r e s o n 锄c er a y l e i g l ls c a 仕e 血g ( r r s ) a n dn o n - 1 i i l e a rs c a t t e r i n gs u c h 舔s e c o n d - o r d e rs c a 渤g ( s o s ) a n d 缸q u e n c yd o u b l i i l gs c a 仕e 血g ( f d s ) t h em a x i r n u ms c 舭m g 、a v e l e n g t l l sw e r e3 9 8n mf o r r r s ，5 8 0 衄f o rs o sa l l d3 9 0 倘f o rf d s ，r e s p e c t i v e l y t h es c a 仕e r e di n t e m 埘i n c r e m e n t s ( do f f i v ep r o d u c t sw e r ed i r e c t l yp r o p 硎o n a lt ot l l ec o n c e n t r a t i o n so fa n t i b i o t i c si l lc e n a i nr a n g e s t h e l i n e 盯r a l l g e sa n dd e t e c t i o nl i 而t sf o rf aw e r eo 0 3 3 8 o 咖la n d9 8n 咖l f o rr r sm e t l l o d ， 0 0 4 9 6 op 咖l la n d1 4 6 叫m lf o rs o sm e m o d ，勰do 0 3 5 - 5 0p 咖l l 锄d1 0 6 吲m lf o rm s r m 1 0 d a m o n g 也e l l l m er r sm e 也0 de x l l i b i t e dt 1 1 e1 1 i g l l e s ts e 璐i t i v i t y h it l l i sw o r k ，圮r e t i o n c o n d i t i o n so fr 脑m e m o da n dm ci i l f l u e n c i n gf a c t o r sw e r cm e s t i g a t e d t h ee 脏c t so fc o e x i s 衄g s u b s t a i l c e s 、e r ee x a i ：【l i 】di n d i c a t i l l gt l l a tm em e m o dh a dag o o ds e l e c t i “t y b 船e do nm ea b o v e r e s e a r c h e s ，ah i 对d ys e n s i t i v e ，s 帅l e 锄df 如tm e 也o df o rt 1 1 ei i l d i f e c td e t e n i l i n a t i o no ff ah 嬲b e e n v i a b s n a c t d e v e l o p e d l tw a sa p p l i e di i l 龇d c t e n l 】l i i i a t i o no ff ai i ih 唧姗s e n h n 锄d u r i 鹏s 锄p l e s 3 r e s o n 锄c er a y l e i g l ls c a 蜘n gs p e c 昀o fm ei l l 衙a c t i o no fp d ( ) m e n l o 弛x a t ec h e l a 钯衍n l s o m eb a s i cp h e n o t l l i a z 雠d y c s 孤dm c i r 黜吼i c a la p p l i c a t i o n i i lb r i t t o n - r 0 b i i l s o nb u 蹶o f p h 4 1 7 o ，m e m 0 的【a t er e a c t s 埘t l lp a l l a d i 啪( i i ) t 0f o 蛳1 ：l 觚i o i l i cc h e l a t e s 讹c hr e a c t 如m l e r 谢t i lm c t i l y l e n eb l u e ( m b ) ，t 0 “d 沁b l u e f m ) a n d 珊a ( a za ) t 0f 0 肌n l ei o n 郴s o c i a t i o nc o m p i e x e s ，i i lm i sc 粼，m er e s o 啪c er a y l e 诎s c a n e 咖go 汰s ) 砥n s i t i e sa r ee i l l l a n c e d 辨a t l y 觚dn e wl 讯ss p e c 舰a p p e a l1 1 1 e i rc h 婀c t 砸s t i c so fr r s s p e c 衄 a r es i i t l i i 嫣a n dt l l em a ) 【i m u m 砌峪w a v e l e n g 吐培a r ca l la t3 3 0 砌b u t 圯i t r si n t e 粥i t i e so fn l e i o n - 骶s o c i a t i o nc o m p l e x e sa r ed i 舵r e n td 印c i l d i n g0 nu dd y c mo r d e ro ft l l er e l 撕v es c a t t e 咖g i 1 1 t e l l s i t i e sa r em bs y s t e 】舻t bs y s t e 】讹as y s t e m u n d e r 酉v e nc o n d i t i o i l st l i ei n t e n s i t i e so f 砌峪 a r ep r o p o n i o n a lt ot 1 1 ec o n c e n 仃a t i o no fm 1 x n el i l l e a r 啪g e sa r eo 肿8 2 o l 触，o o 13 3 5 p g n 儿，0 0 2 5 _ 4 o “g m lf 0 rm bs y s t e m ，t bs y s t e m ，a zas y s t e m ，r e s p e c t i v e l y t h em e t h o d sh a v e h i g l ls e n s i t i v i t i e st h ed e t e c t i o nl i l l l i t so fm 1 l xa r e2 5n 咖l f o rm b s y s t e 驰3 9n 酌i l l f o rt bs y s t e m 锄d7 6n n 1 l f o ra zas y s t e m t h eo p t i m u mc o n d i t i o l l so fn l er e a c t i o n ，i n n u e n c ef a c t o r s 觚d l e e 虢c to fc o e x i s t i n gs u b s t a i l c e sh a v eb e e ni n v e s t i g a t e d al l i g l ls e i l s i t i v e ，s i r n p l e 锄dq u i c km e m o d i s d e v e l o p e dt ot h ed e t e m i n a t i o no fm 1 x n l em e n l o dc a i lb ea p p l i c ds a t i s 蠡k t o r i l yt od e t e 姗j n a t i o n o fm t xi ns o n l es a m p l e s h la d d i t i o n ，n l es t n l c t u r eo fm et e m a 巧i o n 铺s o c i a t i o nc o m p l e x a i l dm e i r r e a c t i o nm e c h a l l i s mw e r ed i s c u s s e d 4 s e c o n d 。o r d e rs c a 他一n g 觚d 船q u c yd o u b l i n gs c a 的曲gs p c c 妇o f t 1 ( i i i ) - m e 的x a t es y s 钯m 孤di t sa l l a l 如c a la p p l i c a t i o n h 1p h4 9b r i 怕n - r 0 b i n s o n ( b r ) b u 髓rs o l u t i o n ，m e t l l 0 仃e x a t er e a c t e dw i m t h a l l i 啪( i i i ) t 0 f o n n3 ：1c h e l a t e i i l 廿l i sc 髂e ，t h cs e c o n d 0 r d e rs c a t t e 渤gs p e c 昀( s o s ) 锄d 疔e q u e n c y d o u b l i n g s c a n e m gs p e c 舰( f d s ) m t e n s i t i e sa r ee n h a i l c e d 即a t l y 7 i km a x i m ms o sa i l df d sw a _ v c l e n g t t l w c r el o c a t e da t5 2 0 姗锄d3 9 0 呱r e s p e c t i 、，e l y ，r i l el i l l e 州t ) r 啪g c so f 妇s y s t e ma r eo 0 2 2 - 2 0 p 砂1 1 l ( s o sm e m o d ) a i l do 0 0 8 - 2 5 斗咖l ( f d sm e t h o d ) ，a n dm em e t l l o d sh a v eh j 曲s e i l s i t i v i t i e s m ed e t e c t i o nl 删t so fm 1 xa r c7 4n 鲈n l 锄d2 3 蚍，r e s p e c t i v c l y t h eo p t i n l u mc o n d i t i o mo f n l er e a c t i o n ，i n n u e n c ef a c t a 髑锄dt l l ee c to f c o e x i s t i n gs u b s 切n c e sh a v eb e 肌i i l v e s t i g a t e d ak 曲 s e n s i t i v e ，s i i n p l e 锄dq u i c km e t h o dw 懿d e v e l 叩e dt om ed e t 翎1 1 i 舱t i o no fm t x - 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t u n g s t o p h o s p h o r i ca c i dp r o b e h l p ho 1 5 h c lm e d i 啪，f o l i ca c i d ( f a ) 锄d m e t h o t r e x a t e ( m t x ) r e a c tw i m 1 2 咖n g s t o p h o s p h 嘶ca c i dt 0f 0 肋3 ：1c o m p l e x i i lt h i sc 嬲e ，m er r si n t e n s i t i e sa r ee 1 1 l l a n c e d g r e a n ya 1 1 dn e wr r ss p e c 觚a p p e 筑n em 酞i m u mi 汛sw a v e i e n g t t li sl o c a t ea t3 7 0n mf o rf a ，a 1 1 d 3 6 81 1 i i lf o rm t x 1 h el i l l e 撕t yr 眦g e s 孤dt i l ed e t e c t i o nl i i i l i t s 粼0 0 5 6 5 0p 咖la n d1 1 2 n 幽m ，矗竹f a ，0 0 2 1 - 3 op 酌n l 锄d6 3n 咖l f ；d rm t x ，锄dt 1 1 ed e t e r n l i l l a t i o no fm t xe x 址b i t e d m eh i g l l e rs e n s i t i v i 够儆i n gm 1 xa s 姐e x 髓l p l e ，t t l ee 彘c t so fc o e x i s t i n gs u b s t 锄c e sw e r e e x 锄i n e di 1 1 d i c a t i n gm a tt h em e t l l o dt l a da9 0 0 ds e l e c t i v i 够ah i g l ls e l l s i t i v e ，s i l p l ea n dq u i c k m e t l l o dw 嬲d e v e l o p e dt 0m ed e t e n n i n a t i o no fm t xa n df a t h cm c m o dc a l lb e a p p l i e d s a t i s f a c t o r i l yt od c t e 彻i i l a t i o no fm 1 x i ns e 删：t l 锄du 曲es a l p l e s k e y w o r d s ： f o l i ca c i dm e t h o t r e x a t er e s o n a n c e r a y i e i g hs c a t t e r i n g r e s o n a n c en o n u n e a rs c a t t e r i n g v i i l 独创性声明 学位论文题目基拯瑞到邀射狸基拯韭线性邀挝迩4 定吐酸独里氢蠖 睑的新友法婴究 本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。论文中引用他人已经发表或出版过的研究成果，文中已加了 特别标注。对本研究及学位论文撰写曾做出贡献的老师、朋友、同仁 在文中作了明确说明并表示衷心感谢。 学位论文作者：荔恕逼 签字日期：如护另年辟月亏。日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规 定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允 许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院( 筹) 可以将学位 论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩 印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 ( 保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论文：q 不保密， 口保密期限至年月止) 。 学位论文作者签名：铆亿基 签字日期：力叼年群月如日 第l 章绪论 第1 章绪论 第1 节叶酸和甲氨蝶呤的性质、应用及常用分析方法 1 叶酸和甲氨蝶呤的结构和性质 1 1 叶酸的结构和性质 心n 焱n o p 缸疆? i l lj p a n l i r i o b e n z o i ca c j dg l u 协i n i ca c i d 叶酸的结构 d a y 等( 19 3 5 ) 发现，经口投予干燥酵母菌或肝脏浸膏，能治疗猴子的贫血症遂 将其中含有的未知有效因子命名为“维生素m ”s n e l l 等( 1 9 4 0 ) 发现，将酵母浸膏用 n 嘶t ( 一种活性炭名称) 吸附后，溶离出的因子是微生物干酪乳酸菌口c f d 6 口c f 跏 c 口s p f ) 生长和雏鸡发育所不能缺少的物质，因此将它称为n o r i t 洗脱因子( n o r i t e l u a t ef a t o r ) ”或“干酪乳杆菌因子犯c 傩反f a t o r ) ”m i t c h e l l 等( 1 9 4 1 ) 将其从菠菜中分 离出，命名为“叶酸( f o l i ca c i d ) ”l e d e r l e 研究所( 1 9 4 6 ) 阐明了这种干酪乳酸菌因子的 化学构造，并通过化学合成确证蝶酰谷氨酸( p t e r o y l 9 1 u