（水产养殖专业论文）重金属Cdlt2gt对微藻生长及叶绿素荧光特性的影响.pdf

重金属c d 2 + 对微藻生长及叶绿素荧光特性的影响 重金属c d 2 + 对微藻生长及叶绿素荧光特性的影响 摘要 1 重金属c d 2 + 胁迫对7 株微藻生长及叶绿素荧光特性的影响 在温度为2 5 a ：1 ，盐度为2 8 ，光照强度1 0 0 f t m 0 1 m - 2 $ d 的条件下，采用舵培养基对中国 海洋大学微藻种质库( m a c c ) 保存的绿色巴夫藻( p a v l o v av i r i d i s ) 、等鞭金藻塔溪堤品系 ( i s o c h r y s i s g a l b a n a ( t a h i t i a n ) ) 、小球藻( c h l o r e l l as p ) 、微绿球藻( n a n n o c h l o r i so c u l a t a ) 、 雨生红球藻( h a e m a t o c o c u s p l u v i a l i s ) 、塔胞藻( p y r a m i d o m o n a ss p ) 和杜氏盐藻( d u n a l i e l l a s a l i n a ) 分别进行培养，研究了重金属c d 2 + 胁迫不同的时间( 2 4 h 、4 8 h 、7 2 h 和9 6 h ) 后，7 株 微藻的叶绿素荧光参数、叶绿素相对含量以及细胞密度的变化情况。测定的主要参数有：光 系统i i ( p s i i ) 的最大光能转化效率( 他) 、p s i i 的潜在活性( f v f o ) 、p s i i 的实际光能转化 效率( y i e l d ) 、相对光合电子传递效率( r e t r ) 、光化学淬灭( q p ) 和非光化学淬灭( n p q ) 。 单因子方差分析结果表明，不同c d 2 + 浓度对7 株微藻各叶绿素荧光参数及生长均有显著影响 ( 尸 塔胞藻 绿色巴夫藻 小球藻 等鞭金藻塔溪堤品系 雨生红 球藻 微绿球藻。 2 重金属c d 2 + 与温度交互作用对3 株微藻生长及叶绿素荧光特性的影响 研究t 不同c d 2 + 浓度与不同温度交互作用对中国海洋大学微藻种质库( m a c c ) 保存的 小球藻( c h l o r e l l as p ) 、微绿球藻( n a n n o c h l o r i so c u l a t a ) 和杜氏盐藻( d u n a l i e l l as a l i n a ) 的 叶绿素荧光参数( p s i i 的最大光能转化效率他、p s i i 的潜在活性眦、p s i i 的实际光能转 1 重金属c d 2 + 对微藻生长及叶绿素荧光特性的影响 化效率y i e l d 、相对光合电子传递效率r e t r 、光化学淬灭q p 和非光化学淬灭n p q ) 、叶绿素相 对含量以及细胞密度的影响。培养条件为盐度为2 8 ，光照强度为1 0 0 1 a m o l m - 2 8 ，f 2 培养基。 小球藻的c a 2 + 浓度设定为0 ，2 0 ，4 0 m n o l l ；微绿球藻的c a 2 + 浓度设定为o ，1 0 ，3 0 1 a m o l l ； 杜氏盐藻的c d 2 + 浓度设定为0 ，7 0 ，1 4 0 1 m a o l l 。小球藻的培养温度设定为2 0 ，2 5 ，3 0 c ；微 绿球藻的培养温度设定为2 0 ，2 5 ，3 0 * ( 2 ：杜氏盐藻的培养温度设定为1 5 ，2 5 ，3 5 。c 。研究结 果表明，随着c d 2 + 浓度的升高，3 株微藻各荧光参数、叶绿素相对含量和细胞密度呈明显下降 趋势。但微绿球藻凡假n 和凡低在1 0 p x n o l l c d 2 + 浓度时与对照组差别不大，这可能是由于低浓 度c d 2 + 在一定程度上刺激了藻体的生长和合成机制。3 株微藻荧光参数、眦、y i e l d 和 r e t r 均与c d 2 + 浓度呈极显著的负相关，小球藻和微绿球藻的叶绿素相对含量和细胞密度与 c d 2 + 浓度呈显著的负相关，杜氏盐藻在4 8 h 后与c d 2 + 浓度呈显著的负相关，随着c d 2 + 浓度的增 加而降低。多重比较结果表明，小球藻在2 5 * c 时对c d 2 + 的耐受性更强，由于2 0 。c 与3 0 c 不利 于藻的生长，细胞密度和叶绿素相对含量显著低于2 5 c 处理组；与2 0 c ，2 5 c 相比，微绿球 藻对3 0 * c 时更为敏感，各叶绿素荧光参数值较低，细胞密度和叶绿素相对含量有明显下降。 c d 2 + 胁迫下，杜氏盐藻在2 5 c 时受到影响最小，过高或过低的温度条件下，各参数有明显下 降，表明不适合的温度增加了重金属c d 2 + 的胁迫作用。由此可以看出，高低温胁迫下3 株微藻 的p s i i 光合电子传递均受到了抑制，但是低温处理受到的抑制程度轻于高温处理组。 3 重金属c d 2 + 与不同n 浓度交互作用对3 株微藻生长及叶绿素荧光特性的影响 在温度为2 5 士1 ，盐度为2 8 ，光照强度为1 0 0 1 m a o l m - 2 s 以的条件下，分别用含有不同 c d 2 + 浓度( 小球藻的c d 2 + 浓度设定为o ，2 0 ，4 0 1 m a o l l ；微绿球藻的c d 2 + 浓度设定为0 ，1 0 ， 3 0 i - t m o l l ；杜氏盐藻的c d 2 + 浓度设定为0 ，7 0 ，1 4 0 1 m a o l l ) 、不同n 浓度( 5 5 ，8 8 0 ，7 0 4 0 斗m o l l ) 的培养基对中国海洋大学微藻种质库( m a c c ) 保存的小球藻、微绿球藻和杜氏盐藻分别进 行培养，研究了不同c d 2 + 浓度与不同n 浓度交互作用对3 株微藻叶绿素荧光参数( p s i i 的最 大光能转化效率舰、p s i i 的潜在活性眦、p s i i 的实际光能转化效率y i e l d 、相对光合电 子传递效率r e t r 、光化学淬灭q p 和非光化学淬灭n p q ) 、叶绿素相对含量以及细胞密度的 影响。研究结果表明，c d 2 + 浓度与n 浓度对3 株微藻的光合作用及生长均具有显著影响 ( 尸 只v i r i d i s c h l o r e l l as p lg a l b a n a ( t a h i t i a n ) 丘p l u v i a l i s o c u l a t a 2 e f f e c t so f c da n dt e m p e r a t u r ein t e r a c tio n o nt h eg r o w t ha n dc hio r o p h yi i f i u o r e s c e n c eo f3m i c r o a i g a is t r a ir l s t h ee f f e c t so fd i f f e r e n tc d 2 + c o n c e n t r a t i o n s ( c h l o r e l l as p ：0 ，2 0 ，4 0 1 m a o l l ；o c u l a t a ：0 ，10 ， 3 0 9 r n o l l ；d s a l i n a ：0 ，7 0 ，1 4 0 9 m o l l ) a n dd i f f e r e n tt e m p e r a t u r e ( c h l o r e l l as p a n d o c u l a t a ：2 0 ， 2 5 ，3 0 。c ；d s a l i n a ：1 5 ，2 5 ，3 5 c ) i n t e r a c t i o no nt h ec h l o r o p h y l lf l u o r e s c e n c ep a r a m e t e r s ( f v f m ， f v 佛，y i e l d ，r e t r , q pa n dn p q ) ，r e l a t i v ec h l o r o p h y l lc o n t e n ta n dc e l ld e n s i t yo f3m i c r o a l g a l s t r a i n sw e r er e p o r t e d t h e3s t r a i n so fm i c r o a l g a e ( c h l o r e l l as p ，o c u l a t aa n dd s a l i n a ) w e r e o b t a i n e df r o mt h em i c r o a l g a ec u l t u r ec e n t e r ( m a c e ) ，o c e a nu n i v e r s i t yo fc h i n at h ef 2i n n a t u r a ls e aw a t e rw a sc o n t r o l l e dt h es a l i n i t ya t2 8b yu s i n gd i s t i l l e dw a t e r , a n dt h el i g h ti n t e n s i t y w a s10 0 “m o l m - 2 s t h er e s u l t ss h o w e dt h a tt h ec h l o r o p h y l lf l u o r e s c e n c ep a r a m e t e r s ，r e l a t i v e c h l o r o p h y l lc o n t e n ta n dc e l ld e n s i t yd e c r e a s e do b v i o u s l yi n3m i c r o a l g a ls t r a i n sw i t ht h ei n c r e a s i n g o fh e a v ym e t a l ( c d c o n c e n t r a t i o n f v f ma n df v f oi n o c u l a t aw e r ea l m o s tt h es a m ec u r r e n t b e t w e e nt h ec o n t r o la n d c d 2 + c o n c e n t r a t i o n ( 1 0 1 a m o y l ) ，i tw a sp o s s i b l et h a tl o wc a 2 + c o n c e n t r a t i o n c o u l ds t i m u l a t e a l g a e sg r o w t ha n ds y n t h e t i c a lm e c h a n i s mi nac e r t a i ne x t e n t t h ec o r r l a t i o n a n a l y s i s r e s u l t ss h o w e dt h a tt h e r ew e r ev e r y s i g n i f i c a n tn e g a t i v ec o r r e l a t i o n sb e t w e e nt h e f l u o r e s c e n c ep a r a m e t e r s 叮f m f f o ，y i e l da n d r e t r ) ，t h er e l a t i v ec h l o r o p h y l lc o n t e n ta n dc e l l d e n s i t yo fc h l o r e l l as p a n d o c u l a t aw i t hc d 2 + c o n c e n t r a t i o n s t h er e l a t i v ec h l o r o p h y l lc o n t e n t a n dc e l ld e n s i t yo fds a l i n aw e r es i g n i f i c a n tn e g a t i v ec o r r e l a t i o n sw i t hc d 2 + c o n c e n t r a t i o n sa f t e r 4 8 h ，t h ec h a n g e dd e g r e eo ft h ea b o v ep a r a m e t e r si n c r e a s e dw i t ht h ei n c r e a s i n gc d 2 + c o n c e n t r a t i o n m u l t i p l ec o m p a r i s o nt e s t ss h o w e dt h a tt h ef a s t n e s so fc h l o r e l l as p w a sb e t t e ru n d e r2 5 t h a n 2 0 。ca n d30 c ，m o r e o v e r , r e l a t i v ec h l o r o p h y l lc o n t e n ta n dc e l ld e n s i t yw e r et h e h i 曲e s ti nt h et h r e e t e m p e r a t u r e c o m p a r e d2 0 ca n d2 5 * cw i t h30 。c ，t h es e n s i t i v i t yo fn o c u l a t aw a sg r e a t e s to fa l l ， t h ec h l o r o p h y l lf l u o r e s c e n c ep a r a m e t e r s ，r e l a t i v e c h l o r o p h y l lc o n t e n ta n dc e l ld e n s i t yd e c l i n e d s 重金属c d 勺寸微藻生长及叶绿素荧光特性的影响 m a r k e d l y d s a l i n aa d a p t e dw e l lt o2 5 ( 2 ，a n dt h ep a r a m e t e r sd e c r e a s e du n d e ro v e rh i g ho rl o w t e m p e r a t u r e ，i ti n d i c a t e dt h a tu n c o n f o r m a b l et e m p e r a t u r ec o u l de n h a n c eh e a v ym e t a l ( c 十) s t r e s s n er e s u l ti n d i c a t e dt h a te l e c t r o nt r a n s p o r tw a sr e s t r a i n e du n d e ro v e r1 1 i 曲o rl o wt e m p e r a t u r e ，a n d p r o h i b i t i v ed e g r e ei nl o wt e m p e r a t u r ew a sl i g h t e rt h a nh i 曲t e m p e r a t u r e 3e f f e c t so fc d 舳a n ddif f e r e n tnc o n c e n t r a tio n sin t e r a c tio no nt h eg r o w t ha n d c h i o r o p h y iif i u o r e s c e n c eo f31 1 1 i c r o a i g a is t r a i r s t h ee f f e c t so fd i f f e r e n tc d 2 + c o n c e n t r a t i o n s ( c h l o r e l l as p ：0 ，2 0 ，4 0 p m o l l ；o c u l a t a ：0 ，10 ， 3 0 1 m a o l l ；d s a l i n a ：0 ，7 0 ，1 4 0 p m o l l ) a n dd i f f e r e n tnc o n c e n t r a t i o n s ( 5 5 ，8 8 0 ，7 0 4 0 1 x m o l l ) i n t e r a c t i o no nt h ec h l o r o p h y l lf l u o r e s c e n c ep a r a m e t e r s 婚一f 嘶f o f 的y i e l d ，r e t r , q pa n dn p q ) ， r e l a t i v ec h l o r o p h y l lc o n t e n ta n dc e l ld e n s i t yo f3m i c r o a l g a ls t r a i n sw e r ei n v e s t i g a t e d t h e3s t r a i n s o fm i c r o a l g a e ( c h l o r e l l as p 。n o c u l a t aa n dd 。s a l i n a ) w e r eo b t a i n e df r o mt h em i c r o a l g a ec u l t u r e c e n t e r ( m a c c ) ，o c e a nu n i v e r s i t yo fc h i n a t h ec u l t u r ew a sc o n t r o l l e du n d e r2 5 士1 c ，t h es a l i n i t y a t2 8b yu s i n gd i s t i l l e dw a t e r , a n dt h el i g h ti n t e n s i t yw a s10 0 1 x m o l m - 2 s - 1 t h er e s u l ti n d i c a t e dt h a t c d 2 + c o n c e n t r a t i o n sa n dnc o n c e n t r a t i o n sh a ds i g n i f i c a n te f f e c t so nt h ep h o t o s y n t h e s i sa n dg r o w t h o f3m i c r o a l g a ls t r a i n s 吁式0 5 ) t h ef l u o r e s c e n c ep a r a m e t e r s 唔f 嘶f f 油y i e l da n dr e t r ) o f3 m i c r o a l g a ls t r a i n sw e r es i g n i f l c a n tn e g a t i v ec o r r e l a t i o n sw i t hc d c o n c e n t r a t i o n s c e l ld e n s i t yo f3 m i c r o a l g a l s t r a i n sw a ss i g n i f i c a n tn e g a t i v ec o r r e l a t i o n sw i t hc d 2 + c o n c e n t r a t i o n s a n dt h e p a r a m e t e r s ，耽，y i e l da n dr e t rd e c r e a s e di n 3m i c r o a l g a ls t r a i n su n d e rl o wn c o n c e n t r a t i o n ( 5 5 r t m o l l ) ，a n di t a l s oc a u s e dt h ed e c r e a s eo ft h ec e l ld e n s i t ya n dr e l a t i v e c h l o r o p h y l lc o n t e n to f3m i c r o a l g a ls t r a i n s t h ec h l o r o p h y l lf l u o r e s c e n c ep a r a m e t e r s ，r e l a t i v e c h l o r o p h y l lc o n t e n ta n dc e l ld e n s i t yo ft h ec o n t r o li nc h l o r e l l as p r e a c h e dt h eh i g h e s tv a l u e sa t 7 0 4 0 1 x m o l l ，a n dt h ee f f e c to fh i g hc d 2 + c o n c e n t r a t i o nw a ss t r e n g t h e n e da tl o wa n dh i g hn c o n c e n t r a t i o n s ( 5 5 ，7 0 4 0 p m o l l ) t h ef l u o r e s c e n c ep a r a m e t e r s o fds a l i n ad e c r e a s e da t 7 0 4 0 i ，t m o l l i ti n d i c a t e dt h a th i g hn c o n c e n t r a t i o nc o u l dr e d u c et o x i c i t yu n d e rc d 2 + s t r e s s t h e f a s t n e s so fn o c u l a t aw a sb e t t e ra t8 8 0 1 x m o l l ，a n dt h er e l a t i v ec h l o r o p h y l lc o n t e n ta n dc e l ld e n s i t y g o tt ot h eg r e a t e s tv a l u e si n o c u l a t a 4e f f e c t so fc d 2 + a n ddif f e r e n tpc o n c e n t r a tio n sin t e r a c tio no nt h eg r o w t ha n d c h i o r o p h y l if i u o r e s c e n c eo f3m i c r o a i g a i s t r a i n s t h ee f f e c t so fd i f f e r e n tc d 2 + c o n c e n t r a t i o n s ( c h l o r e l l as p ：0 ，2 0 ，4 0 1 x m o l l ；o c u l a t a ：0 ，10 ， 6 重金属c d 2 + 对微藻生长及叶绿素荧光特性的影响 3 0 9 m o l l ；ds a l i n a ：0 ，7 0 ，14 0 1 m a o l l ) a n dd i f f e r e n tpc o n c e n t r a t i o n s ( 2 2 7 ，3 6 3 ，2 9 0 4 1 x m o u l ) i n t e r a c t i o no nt h ec h l o r o p h y l lf u o r e s c e n c ep a r a m e t e r s 婚f 嘶f o f 呐y i e l d ，r e t r , q pa n dn p q ) ， r e l a t i v ec h l o r o p h y l lc o n t e n ta n dc e l ld e n s i t yo f3m i c r o a l g a ls t r a i n sw e r er e p o r t e d t h et h r e es t r a i n s o fm i c r o a l g a e ( c h l o r e l l as p ，n o c u l a t aa n dd s a l m a ) w e r eo b t a i n e df r o mt h em i c r o a l g a ec u l t u r e c e n t e r ( m a c c ) ，o c e a nu n i v e r s i t yo fc h i n a t h ec u l t u r ew a sc o n t r o l l e du n d e r2 5 4 - 1 ，t h es a l i n i t y a t2 8b yu s i n gd i s t i l l e dw a t e r , a n dt h el i g h ti n t e n s i t yw a s10 0 9 m o l - m - 2 s t h ec o r r l a t i o na n a l y s i s r e s u l t ss h o w e dt h a tc d c o n c e n t r a t i o n sa n dnc o n c e n t r a t i o n sh a ds i g n i f i c a n te f f e c t so nt h e p h o t o s y n t h e s i sa n dg r o w t ho f3r n i c r o a l g a ls t r a i n s 俨 c d c u z n p b c o c r 。但这并不是绝对的，对不同的微藻而言，对重金属离子的耐受力有所不同。 i s m a i l 等( 2 0 0 2 ) 对4 种热带海洋微藻的研究结果表明，c u 2 + 和c d 2 + 对每种微藻的毒性大小没 有显著差异。m a u i c k 和m o h n ( 2 0 0 3 ) 对栅藻( s c e n e d e s m u s ) 进行的研究，得出了c u z + c 十 z n 2 + 的结论。p r a n g e ( 2 0 0 0 ) 的研究结果表明z n 2 + c u 2 + 。 利用藻类生长抑制试验可以在短时间内准确得到被测毒物的半致死浓度( l c s o ) 或半抑 制浓度( e c 5 0 ) ，从而得知被测化学物的生物毒性，在生态毒理学和污染生态学中不失为一 种经济快捷、反应灵敏的生物测试方法，在了解重金属对藻类的生态毒理学效应方面有着重 2 重金属c d 2 + 对微藻生长及时绿素荧光特性的影响 要的意义。国内外已对多种微藻受单一重金属胁迫的影响进行了大量研究，并计算出其l c 5 0 或e c s o 值。现将九十年代之后微藻受单一重金属胁迫的l c 5 0 或e c 5 0 值总结如下( 表1 1 ) 。 寸 一ni nnn n- ni n暑 _ n v 一 hn - nni n nni n n ov 1 o8ooooo ooo一 o n一 n n o 若a 删 丘 。鬲 一o。 昌g 葛 扑 苗 o 兰兰 垦 n j 矗 g o8 8o 小西 ga goo 们 h 0 22o旦宝 ooo q金 n - 一 nn r - 签 ：坚婆 l 塑 婆 - 暑 量 】盛垭垭 昏 铸_嚣 捌 goo 求滥崇 1 曷 垭j l 皿 1 基 蛋 毫 鬯 n一 看 z二 o。 昌葛葛 疆 n 兰委兰 h 崇岽 h强 o o 钗 n 帮 o 磊 媳 g h 是 香 毫总 香 毫总 蜃 昂 骂 县景 萼 宝 饕 罨暹 。 晷 。 昌 墨 墨 主 毫 驾 昌 嚣 墨 基 鲁 遣 箕 墨 委 重 暑 蔫 苫 6 。 宾 毫毫 暑 毫总 患 。 要磊 霉 暮 导 呈 暑 暑 蔓 暑暑 鎏 鲁 浚 凑 巷害 ddd6 。 d 总毫总 患 总 总忌甚 蔓 景l 叠-姜 善 景焉 曩景 g d萌 三 “。“ d 星 藿 蓥 屯 忐 釜 志志 志 + 屯屯 志 屯 走 高 走 毒口 高 屯屯 志 盅 + 口o： 盘 u u 主 口勺 u n山 u 山 o它j o 丑 u。 u 蜜 u uu u山 焉 l | 田i 荟 鏊 q 髦 暑 萋 暨 蔷 募 ：墨 盘 呈 专 昱 呈 釜 g妻 8 舀 譬 柰 铤 暴娟 鼎 翎 群啦 兹 釜 g 餐- e - 耀 量 专 童 基 专 器 萋 叁 鼍 寒 彩 墼 墓 耋 慕 器 萧 8 专 暑 u 磊 妻 2曼 2 毯 暑 6 粼 糍 嚣 钾 臻 最 稽 量 轴 溱糍 垲娟 ooqq胃雠rboio一至o寓u田昌nu，i-ootl焉oi工h二qd耐目 靼。d5nu，i g 麟幕= 搽 罾醛g掣浆装粼搬繇蕾嗡半划涨撂苓岛u嘤锚删 ”、i n 害罟 昌 n、l n 昌 i n、 一 h - 一 nn aaa n v 窨 80 0 鬯 n r - , 暑 o 葛 o 高 o n 工 。 苗 oo ：兮 8og。 gg o8gg&蜜 小 们们 o当 o 一 oohho - o 昌 昌 呙呙 一 - 一 _ 一 未 趟 -l 翊翊 目 _ 娶 雪君 氍爵 嚣 。8 88oooon n - 要要 嶷孙 糌1 卜 州h糌 爵 o。 一 nn一n一nn i n一 - 媲蛾 l 蜒 橡辖酞 爨 橡罂 索 1 k1 k 要 嚣 嚣 目媚爿肆啜翻蔷啜茸 祗 瘿遴宦 卜h 糌 港烈畿裂爱裂畿烬 蛊 香 暑 香 蛊 毫 毫 宴 蔷患蛊 毫 患 毫 皂0 患 萎毒 善暑 罨 星景 景 星 萋 娶晷 蠹 善 里量 c 芎 gr 銮s 。 暑詈 9 0蔫 昱 暑 譬 g 寸 父 。 s _ _ 卜n胬n两卜 香 营 宴宴 量皇 宝 。 0oo 莹呈 目gi 晏 量 遣昌 氡窘要 禽= 6 66 ah 患甓患 蚤 昌暑更真 裘 莹爱 三 志 屯屯屯 志 整 + 惫 屯 屯 走 冬毛 志 屯屯 高 警 屯屯 整 + 屯o u 口口 。u晶uu山 勺 。uu舀山翟zun山 u 蒌 莲 ：羹 窀 q 塞 募 ：萋 螯 莹 基 已 墨 薹 s u 巷 8 罢 吞 3 6 糍 糍 兹 蝾 羹 嶷 尝 贮 o s 麟 兹 七 暮 妻 专 嚣 毽 毒 毒 乏 o 6 糍 街 囤 s 皿 霎 奄 童 囊 塔 水 裂 h 羽 口 骚 j ： 涨 蝾 善谶譬裁球装拭般嘶古隧举州麟器茛+z它u噬铺嘲 nn 卜n i n，n i noo nng 墨 nnn一 l n o0oo0 ooooo nn n oo曾o二 高矗矗晶 。 暑吕gg葛 8昌 oooooooo 。0 hj兰h 晌 n 鬯 昌 onhooo 攀 婪 n ： 一 n一 置 秀 丘 嚣 颦 - 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