（生药学专业论文）桑叶降血糖胶囊的研制.pdf

学位论文版权使用授权书- ，拗1 黝8 0 罂9 9 物6 9 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定， 同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版， 允许论文被查阅和借阅。本人授权江苏大学可以将本学位论文的全部 内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手 段保存和汇编本学位论文。 保密可 本学位论文属于 ，在) 年我解密后适用本授权 书。 不保密口 学位论文作者签名：弗耘 扣2 年6 月湃e l 指导教师签名、脚 扣口8 年莎月f 弘日 独创性申明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独 立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容以外，本 论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本 文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。 本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名：彰经 日期：础年6 月 江苏大学硕士学位论文 摘要 在生活水平普遍提高的当今，糖尿病已经成为自心血管疾病和恶性肿瘤后威 胁人类健康的第三大杀手。其发病率呈上升趋势，已经成为一种常见病、多发病。 糖尿病的病因和发病机制至今仍不十分清楚，目前临床尚无根治此病的药物。西 药治疗糖尿病作用靶点单一，且不良反应较大，我国传统中药对糖尿病的治疗历 史悠久，无毒副作用，可长期使用。桑叶为桑科植物桑m o r u sa l b al 。的干燥叶， 自古以来，就有用于“止消渴”，即现代糖尿病的记载。近年来，其降血糖活性 作用受到广泛关注和研究。本课题组已对桑叶中降血糖效应物质进行了系统研 究，其降血糖药效组分主要为多糖、黄酮和生物碱类成分。本论文在前期研究工 作的基础上采用现代提取分离与制剂技术对桑叶降血糖药效组分进行分离纯化 和制剂研究，研制开发出治疗糖尿病的口服制剂桑叶降血糖胶囊，并系统地 研究了桑叶降血糖胶囊的制剂成型工艺、质量标准、稳定性及初步药效学。主要 研究内容和结论如下： 研究了桑叶多糖的提取纯化工艺。采用单因素实验和正交实验，以桑叶多糖 得率为考察指标，优选出最佳提取工艺为：提取溶剂为纯化水，料液比1 ：1 5 倍， 9 0 回流提取两次，每次1 0 0 m i n 。合并提取液浓缩，用5 0 乙醇沉淀得桑叶总 多糖m p l 。 采用d e a e 一纤维素柱和s e p h a d e xg 1 0 0 柱层析进一步纯化m p l 得m p l l ， m p l 2 ，m p l 3 三个多糖组分。采用色谱学手段和化学分析法，分析了三种组分 的单糖组成m p l l 主要由鼠李糖，阿拉伯糖，木糖，甘露糖，葡萄糖和半乳糖组 成，其摩尔比为2 1 ：1 6 ：3 ：3 ：l ：2 0 ；m p l 2 主要由鼠李糖和葡萄糖组成，其摩尔比 为3 ：1 ；m p l 3 主要由鼠李糖组成。 研究了桑叶黄酮类成分的提取纯化工艺。采用单因素实验和正交实验，以桑 叶总黄酮得率为考察指标，优选出最佳提取工艺为7 0 乙醇，2 0 倍生药量，8 5 提瑰两次，每次2 h 。得到纯度为3 7 1 的桑叶总黄酮，得率为2 8 1 m g g 。 研究了大孔吸附树脂纯化桑叶总黄酮的工艺。以桑叶总黄酮吸附量为考察指 标，筛选了四种大孔吸附树脂，得到s 8 型树脂吸附和解吸附性能最好。研究了 江苏大学硕士学位论文 s 一8 型树脂的静态吸附性能，树脂对桑叶总黄酮的吸附量为3 1 6 2 m g g 湿树脂， 解吸率为8 2 6 9 。并研究了树脂的动态吸附性能，树脂的饱和吸附量为2 9 8 m g g 湿树脂，最佳洗脱工艺为3 0 7 , 醇1 1 倍柱体积( b v ) 洗脱和5 0 乙醇5 倍柱体 积( b v ) 洗脱。纯化后所得桑叶总黄酮纯度达7 6 6 3 ，提取率达7 2 。s - 8 型 树脂再生性能良好。 研究了s 8 型树脂和纯化后桑叶总黄酮的有机溶剂残留。结果表明，经预处 理后的s 8 型树脂基本无有机溶剂残留；纯化后桑叶总黄酮亦检测不到有机溶剂 残留物。表明所采用的预处理方法有效、可行，经处理后的树脂可用于桑叶总黄 酮的精制纯化。 系统研究了桑叶降血糖胶囊的制剂成型工艺。以吸湿百分率为指标，考察了 三种稀释剂对药物吸湿性的影响，结果表明，羟丙纤维素可降低药物的吸湿性。 通过正交实验优选最佳处方为：药物：稀释剂= l ：l ，润湿剂为7 0 乙醇，用量为 1 2 ( 1 2 m l 1 0 0 9 药粉) 。制得颗粒流动性好，无需加入润滑剂可直接灌装l 号 胶囊。 研究了桑叶降血糖胶囊的质量标准。对制剂中桑叶总黄酮、桑叶生物碱分别 采用薄层色谱法和高效液相色谱法进行定性、定量分析；每粒胶囊中桑叶总黄酮 以芦丁计不得少于10 m g ，桑叶生物碱以l 一脱氧野尻霉素计不得少于3 m g 。 研究了桑叶降血糖胶囊的初步稳定性。通过影响因素实验和加速实验，对制 剂外观性状、含量和崩解时限的变化情况进行了考察。结果表明，温度和光线对 制剂影响不大，湿度对制剂影响较大，因此制剂应密封，置阴凉干燥处贮藏。 对桑叶降血糖胶囊进行了初步药效学研究。结果表明，桑叶降血糖胶囊可降 低四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠的血糖，促进肝糖合成，增加肝糖原，增强糖尿病 动物糖的贮藏能力。 关键词：桑叶，制剂，质量标准，稳定性，降血糖 江苏大学硕士学位论文 a b s t r a c t a l o n gw i t hw o r l dp o p u l a t i o n sa g i n g ，d i a b e t e sa l r e a d yb e c a m eo n ek i n do f c o m m o nd i s e a s e , i t si n c i d e n c er a t ea s s u m e st h et r e n do fe s c a l a t i o n d i a b e t e s c a u s eo f d i s e a s ea n dp a t h o g e n e s i su n t i ln o ws t i l ln o tv e r yc l e a r , a tp r e s e n tc l i n i c a ls t i l ld i dn o t h a v ep e r m a n e n t l yc u r e st h i ss i c k n e s st h em e d i c i n e c l i n i c a lu s e si nt r e a t i n gd i a b e t e s m e d i c i n em a j o r i t yi st h ew e s t e r nm e d i c i n e ，b u ti t su n t o w a r de f f e c ti sa l s oo b v i o u st o a 1 1 o nt h ec o n t r a r y , t h ec h i n e s em e d i c i n et r e a t sd i a b e t e st oh a v et h ew e s t e r n m e d i c i n eu n r e p l a c e a b l es u p e r i o r i t y l e a v e so fm o r u sa l b al c o m e sf r o mt h ep l a n to f m o r n sa l b al i nt c m ，t h el e a v so fm o r u sa l b al h a v eb e e nu s e df o rt r e a t m e n t x i a o k e ，i e ，d i a t e t e sm e l l i t u s r e c e n t l ys om a n y r e s e a r c h e r sp a yg r e a t l ya t t e n t i o nt oi t t h ep r o j e c tg r o u ph a v eb e e ns t u d i e do i lt h eh y p o g l y c e m i ca c t i v ec o m p o n e n t so ft h e l e a v e s ，i ts h o w st h a tt h ee f f i c a c yc o m p o n e n tm a i n l yf o rt h ep o l y s a c c h a r i d e ，t h e f l a v a n o n ea n dt h eb i o l o g i c a la l k a l i si n g r e d i e n t b a s e do nt h ew o r kf o rp r e p r o j e c t ，t h e r e s e a r c hu s e st h em o d e me x t r a c t i o ns e p a r a t i o na n dt h ep r e p a r a t i o nt e c h n o l o g yt o s t u d yo nt h eh y p o g l y c e m i ca c t i v ec o m p o n e n t si n l e a v e so fm o r u sa l b al a s y s t e m a t i c a l l ys t u d yo nt h ep r e p a r a t i o nt e c h n i c s ，q u a l i t ys t a n d a r da n dr u d i m e n t p h a r m a c o d y n a m i c so fm u l b e r r yl e a v eh y p o 西y c e m i cc a p s u l ew a sc a r r i e do u t t h e m a i nc o n t e n t sa n dc o n c l u s i o n sw e r ea sf o l l o w s ： s t u d yo nt h ee x t r a c t i o nt e c h n i c so fp o l y s a c c h a r i d ei nl e a v e so fm o r u sa l b al t h em o n o t h e t i cd e s i g na n do r t h o g o n a ld e s i g nw e r ec a r r i e do u tf o rt h ee x t r a c t i o no f p o l y s a c c h a r i d ei nl e a v e so fm o r u sa l b al t h eo p t i m a le x c t r a c t i o nc o n d i t i o ，n sw e r ea s f o l l o w s ：e x t r a c t e dt w i c ew i t h15t i m e sw a t e ra t9 0 ，10 0 m i nf o re a c ht i m e m e r g e d t h ee x c t r a t i o n ，p r e c i p i t a t e db y5 0 a l c o h o l ，a n dt h e nt h ep o l y s a c c h a r i d e s ( m p1 ) w a s o b t a i n e d t h e nt h r e ep o l y s a c c h a r i d e ( p m11 ，p m12a n dp m13 ) w e r ep u r i f i e df r o mm p1b y d e a e - c e l l u l o s ea n ds e p h a d e xg 1 0 0c o l u m nc h r o m a t o g r a p h yt h em o n o s a c c h a r i d e o fm p11 ，m p12a n dm p13w e r es t u d i e dw i t hc h r o m a t o g r a p h ym e t h o da n dc h e m i s t r y a n a l y s i sm e t h o d t h er e s u l t ss h o w e dt h a tm p 11w a sc o m p o s e do fr h a ，a r a ，x y l ，m a n ， g l ua n dg a l ，a n dt h e i rm o l a rr a t i ow a s2 1 ：1 6 ：3 ：3 ：1 ：2 0 m p l 2w a sc o m p o s e do f r h aa n dg l u ，a n dt h e i rm o l a rr a t i ow a s3 ：1 m p l 3w a sc o m p o s e do f r h a s t u d yo nt h ee x t r a i o nt e c h n i c so ff l a v o n ei nl e a v e so fm o r u sa l b al t h e m o n o t h e t i cd e s i g na n do r t h o g o n a ld e s i g nw e r ec a r d e do u tf o rt h ee x t r a c t i o n ，t h e i i i 江苏大学硕士学位论文 o p t i m a le x c t r a c t i o nc o n d i t i o n sw e r ea sf o l l o w s ：t h ee t h a n o lc o n c e n t r a t i o na t7 0 ， e x t r a c t e dt w i c ew i t h2 0t i m e s7 0 e t h a n o la t8 5 ，2 hf o re a c ht i m e t h ep u r i t y q u o t i e n tw a s3 7 1 a n dt h ey i e l dw a s2 8 1m g g s t u d yo nt h ep u r i f i c a t i o nt e c h n i c so ff l a v o n ei nl e a v e so fm o r u sa l b al a d s o r p t i o nq u a n t i t yo fs - 8m a c r o p o r o u sa d s o r p t i v er e s i ni st h eb e s ti no t h e r3r e s i n s ， t h es t a t i ca d s o r p t i o nq u a n t i t yw a s3 1 6 2 m g m l ，a n dt h ed e s o r p t i o nr a t ew a s8 2 6 9 s t u d yo nt h et r e n da d s o r p t i o np e r f o r m a n c eo fs - 8r e s i n ，t h er e s u l ts h o w e dt h a tt h e s a t u r a t i o na d s o r p t i v eq u a n t i t yw a s2 9 8 m g g a n dt h eb e s te l u t i o nc o n d i t i o nw a s30 e t h y la l c o h o lw i t hl 1b va n d5 0 e t h y la l c o h o lw i t h5 b v o b t a i nt h ef l a v o n ei n l e a v e so f m o r u sa l b al p u r i t yw a s7 6 6 3 ，e x t r a c t i o nr a t ew a s7 2 s t u d yo nt h ef l a v o n ei nl e a v e so fm o r u sa l b al e x t r a c t i o n so r g a n i cs o l v e n t r e s i d u u mw h i c hw a sp u r i t e db ys - 8 t h er e s u l t ss h o w e dt h a tt h e r ew a sn o to r g a n i c s o l v e r n ta f t e rs - 8w a s h e db y9 5 a l c o h o lw i t h4 b v a n dt h ep u r i f i c a t i o no ff l a v o n e i nl e a v e so f m o r u sa l b al w a sn o te x a m i n e do r g a n i cs o l v e r n tr e s i d u u m a s y s t e m a t i c a l l ys t u d yo nt h ep r e p a r a t i o no fm o r u sa l b ala n t i d i a b e t i c sc a p u l e n e 删u v a n tw a sh y p r o l o s e , a n dd r u g ：a d j u v a n t = l ：l ；t h ew e t t i n ga g e n tw a s7 0 e t h a n o l ，t h ea m o u tu s e dw a s12 ( 12 m l 10 0 9d r u g ) 1 1 1 eq u a l i t ys t a n d a r do ft h ep r e p a r a t i o nw a se s t a b l i s h e d t h em u l b e r r yl e a f a l k a l o i da n df l a v o n ew e r ei d e n t i f i e db yt l ca n dh p l c t h ec o n t e n to fm u l b e r r yl e a f a l k a l o i da n df l a v o n ew e r en o tl e s st h a n1 5 a n d4 5 s t u d yo nt h es t a b i l i t yo ft h ep r e p a r a t i o n n ea p p e a r a n c e ，c o n t e n ta n dd i s s o l u t i o n r a t eo ft h ep r e p a r a t i o nw e r ee x a m i n e db yi n f l u e n c ef a c t o rt e s t ，a c c e l e r a t i n gt e s t t h e r e s u l t ss h o w e dt h a tt h eh u m i d i t yi nr o o mc o u l da f f e c tt h ep r e p a r a t i o n t h e r e f o r et h e p r o p e r t yo fp r e p a r a t i o ns h o u l db ek e p tc l o s et i g h t l yi ns h a d ya n dc o o lp l a c e r u d i m e n tp h a r m a c o d y n a m i c sw a sc a r r i e do u t t h et e s tr e s u l t ss h o w e dt h a tt h e m u l b e r r yl e a v eh y p o g l y c e m i cc a p s u l ec a nl o w i n gb l o o da n di n c r e a s eh e p a t i c g l y c o g e n k e yw o r d s ：m u l b e r r yl e a v ea n t i d i a b e t i c sc a p u l e ，m u l b e r r y ( m o t u sa l b al ) ， q u a l i t ys t a n d a r d ，s t a b i l i t y , h y p o g l y c e m i c i v 江苏大学硕士学位论文 目录 摘要：i a b s t r a c t i i i 第一章绪论1 1 1 糖尿病的研究概况。l 1 2 糖尿病的治疗及临床用药情况2 1 2 1 西药治疗糖尿病的研究现状2 1 2 2 中药治疗糖尿病的研究现状2 1 3 桑叶的研究现状一4 1 3 1 桑叶原植物简介4 1 3 2 桑叶的化学成分4 1 - 3 3 桑叶的药理作用6 1 4 本课题的立题背景和意义1 l 1 5 主要研究内容1 1 参考文献。1 2 第二章桑叶降血糖药效组分的提取纯化工艺研究1 7 2 1 桑叶多糖的提取纯化工艺研究1 7 2 1 1 桑叶多糖的提取工艺研究1 7 2 1 2 桑叶多糖的分离纯化及组成分析2 2 2 2 桑叶总黄酮的提取纯化工艺研究2 7 2 2 1 仪器、试剂和材料2 7 2 2 2 桑叶总黄酮的提取工艺研究2 8 2 2 3 桑叶总黄酮的分离纯化工艺研究。3 3 2 2 4 大孔吸附树脂有机溶剂残留的研究3 9 2 3 桑叶生物碱提取纯化工艺研究4 2 2 3 1 桑叶生物碱的提取工艺研究4 2 2 3 2 桑叶生物碱的分离纯化研究。4 3 2 4 本章小结4 3 参考文献一4 5 v 江苏大学硕士学位论文 第三章桑叶降血糖胶囊制剂工艺研究4 6 3 1 处方及剂型选择4 6 3 2 制剂的制备方法4 6 3 2 1 仪器、试剂和材料。4 6 3 2 2 桑叶降血糖药效组分群的提取4 7 3 2 3 胶囊成型工艺4 7 3 3 处方筛选及制粒条件优化4 7 3 3 1 评价指标。4 7 3 3 2 辅料的选择。4 8 3 3 3 正交实验优选制粒条件4 9 3 3 4 颗粒干燥温度的考察5 1 3 3 5 胶囊的填充5 l 3 4 本章小结5 2 参考文献5 3 第四章桑叶降血糖胶囊的质量标准研究5 4 4 1 原料( 药材) 和辅料来源及质量标准5 4 4 1 1 原料( 药材) 来源与标准5 4 4 1 2 辅料来源与标准5 4 4 2 桑叶降血糖胶囊的质量标准研究5 4 4 2 1 定性鉴别5 4 4 2 2 含量测定5 7 4 3 胶囊的检查6 4 4 3 1 实验方法6 4 4 3 2 结果与讨论6 5 4 4 桑叶降血糖胶囊质量标准草案6 6 4 5 本章小结6 9 参考文献7 0 第五章桑叶降血糖胶囊初步稳定性研究7 l 5 1 仪器、试剂与材料7 l 5 3 3 高湿度实验结果。7 3 5 3 4 加速实验结果7 4 5 4 本章小结7 5 参考文献7 6 第六章桑叶降血糖胶囊初步药效学研究7 7 6 1 桑叶降血糖胶囊对糖尿病小鼠降血糖的作用7 7 6 1 1 仪器、试剂与材料7 7 6 1 2 实验方法7 7 6 1 3 结果与讨论7 8 6 2 桑叶降血糖胶囊对糖尿病小鼠肝糖原的影响7 9 6 2 1 仪器、试剂与材料7 9 6 2 2 实验方法7 9 6 2 2 结果与讨论8 0 6 3 本章小结8 1 参考文献8 2 第七章总结与展望8 3 7 1 主要结论8 3 7 2 工作展望8 5 致 射8 6 攻读硕士学位期间发表的论文8 7 v i i 江苏大学硕士学位论文 1 1 糖尿病的研究概况 第一章绪论 糖尿病是遗传因素和环境因素长期相互作用所导致的一种慢性、全身性、代 谢性疾病，它主要是由于体内胰岛素分泌绝对或相对不足以及靶组织细胞对胰岛 素敏感性降低，引起的血糖升高，尿糖出现以及脂肪、蛋白质、水、电解质代谢 一0 紊乱的疾病i l j 。 现代医学界将糖尿病分为两型。i 型糖尿病( 胰岛素依赖型) 是一种t 细胞 介导的自身免疫性疾病，胰岛素是与细胞损害相关的自身免疫性反应的重要靶位 点，损害的具体机制尚不清楚，有研究表明c d 8 t 细胞自身反应性与人类i 型糖 尿病b 细胞损害有关联【2 】。对于i 型糖尿病，目前除给予外源性胰岛素即胰岛素 i i 替代疗法外，尚无切实有效的办法。 i i i 型糖尿病( 非胰岛素依赖型) 的发病机制十分复杂，根据现有的研究，其 j 主要表现在b 细胞胰岛素分泌缺陷及胰岛素抵抗两方面，其发病机制【3 】如下图： 糖尿病基因 高血糖毒性 肥胖基因 环境冈素 胰岛素分 泌不全 鉴兰耋坌鲨n 厂厂赢 组织对胰岛 素反应上 胰岛素 抵抗 b 细胞功能损伤 毒性 基础高胰岛素血症 图1 - 1i i 型糖尿病发病机制 t a b 1 - 1p a t h o g e n e s i so fd i a b e t e sm e l f i t u sh 胰岛素结合 江苏大学硕士学位论文 1 2 糖尿病的治疗及临床用药情况 1 2 1 西药治疗糖尿病的研究现状 目前，临床用于治疗糖尿病的降血糖药物多为西药。但大多数西药存在治疗 靶点单一，具有严重不良反应等缺陷，如导致低血糖、乳酸酸中毒，长期服用需 要加量并有继发失效的可能，此外，西药不能有效地控制慢性并发症【4 】o 西药降血糖药物根据其作用机制可分为： ( 1 ) 胰岛素分泌促进剂。该类药物有两类。磺酰脲类药物作用于胰岛b 细胞 膜上的磺酰脲受体，而促进胰岛素释放，现已发展到第三代。第一代以甲苯磺丁 脲为代表；第二代包括格列本脲( 优降糖) 、格列吡嗪( 美吡哒) 、格列齐特( 达 美康) 等；第三代以格列美脲和格列喹酮( 糖适平) 为代表。非磺酰脲类药物与 磺酰脲类作用机制相似，但与b 细胞膜作用位点不同，以那格列奈、瑞格列奈为 代表。 ( 2 ) 胰岛素增敏剂。胰岛素增敏剂可降低机体胰岛素抵抗作用( i r ) ，充分发 挥胰岛素的作用。目前已有多种类型的胰岛素增敏剂，临床主要使用三类。噻唑 烷二酮类代表药物有曲格列酮、罗格列酮、吡格列酮。双胍类药物代表药物有二： 甲双胍、苯乙双胍和丁双胍。糖苷酶抑制剂以阿卡波糖( 拜糖平) 、伏格列波糖、 米格列醇为代表。 ( 3 ) 醛糖还原酶抑制剂。醛糖还原酶( a r ) 是聚醇代谢通路中的关键限速酶， 其抑制剂( a r i ) 可以有效改善机体聚醇代谢通路的激活，从而达到预防和延缓 糖尿病并发症的目的。 ( 4 ) 蛋白非酶糖基化抑制剂。蛋白非酶糖基化抑制剂可阻断非酶糖基化反应， 抑制糖基化终产物( a g e s ) 形成，进而防治糖尿病慢性并发症，代表药物如氨 基胍。 1 2 2 中药治疗糖尿病的研究现状 祖国医学认为糖尿病主要是由于饮食不节、情志失调、劳累过度、先天凛赋 不足或过服温燥药物等而成，治疗以补中益气、滋阴清热、活血化瘀为大法 5 1 。 多数西药治疗靶点单一，不良反应较多，不宜长期服用。相反，中药疗效稳 2 江苏大学硕士学位论文 定，作用温和持久，毒性和不良反应小【6 】，在降血糖的同时，可以降低血脂、抗 血小板聚集、降低血液黏稠度、改善血流动力学、改善微循环等，能有效地预防 并发症发生并缓解糖尿病及其并发症的症状，提高病人的生存质型7 】。 中药治疗糖尿病从以下几个方面着手： ( 1 ) 作用( 保护、刺激) 于( 胰岛) 1 3 细胞，促进胰岛素分泌。如天然中 草药提取物汉防己甲素、黄连素，单味中药桑叶、人参、苦瓜、玉米须【8 舢】、麦 冬【i l 】等，中药复方益肾消渴方、天芪胶囊等有保护( 胰岛) 1 3 细胞促进胰岛素分 泌作用。 ( 2 ) 增加或恢复受体数目，提高其结合力，从而增加胰岛素敏感性。大黄 1 2 - 17 】能明显提高胰岛素受体的结合力( p 0 0 0 1 ) ：加味桃核承气汤可使链脲佐 菌素致糖尿病大鼠肝细胞膜高亲和力受体数目明显增加并接近j f 常，低亲和力受 体数目也上升。 ( 3 ) 抑制糖异生，促进外周组织对葡萄糖的利用，增强葡萄糖的分解。黄 连中小檗碱能抑制糖异生，促进外周组织对葡萄糖的酵解而降低血糖。 ( 4 ) 抑制醛糖还原酶。研究结果表明苏木查耳酮、半夏黄酮c 苷、日本柳 杉树、黄芩苷、黄连素等有抑制醛糖还原酶( a r ) 的活性。如苏木查耳酮( 1 x1 0 巧m o l l ) 可抑制8 3 9 a r 。 ( 5 ) 抑制蛋白质非酶糖基化。葛根、柴胡等对人血清白蛋白( h s a ) 非酶 糖基化有明显抑制作用，抑制率为4 0 和4 3 。对晶体状蛋自的非酶糖基化也 有明显的抑制作用，抑制率分别为4 6 和3 0 。当归【1 8 , 1 9 口- - - 通过降低血脂和胆 固醇来发挥作用，能很好地预防和治疗糖尿病及其并发症。 ( 6 ) 抑制糖原分解，促进糖原合成。桑叶、人参、三七【2 0 1 、大蒜、夏枯草、 女贞子、麦冬等均有增加糖尿病模型小鼠肝糖原含量( 增加肝糖原合成) 而 降低血糖作用。 应用中药治疗糖尿病已经越来越受到人们的关注。在已知的对糖尿病具有良 好治疗作用的中药中，桑叶作为药食两用品，有着悠久的应用历史，在我国尤其 是江苏地区有着大量的资源优势，且安全性好，无毒副作用，可长期使用。 江苏大学硕士学位论文 1 3 桑n t 0 9 研究现状 1 3 1 桑叶原植物简介 桑叶异名铁扇子，为桑科桑属m o r u sa l b al 植物桑的树叶。桑叶的药用首载 于神农本草经，桑叶性味苦甘、寒，甘所以益血，寒所以凉血。甘寒相合， 故下气而益阴，又能止咳，有补益之功效，是中医清热解毒之要药。主治风热感 冒，肺热燥咳，头晕头疼，目赤晕花等型2 2 2 3 1 。现代药理研究证明桑叶具有抑制 血糖上升，可预防和治疗糖尿病。本属植物全球约有1 6 种，分布于北温带、亚 洲热带和非洲热带及美洲地区。我国约有1 1 种，分布于全国大部分地区，以江 苏、浙江等南方养蚕地区产量较大【2 3 1 。桑属植物具有降血糖、降血压、抗菌和 抗病毒等多种生物活性。 桑( 诗经) m o r u sa l b al ，又名：家桑( 日华子本草) ，荆桑( 王祯农 书) ，桑椹树( 救荒本草) ，黄桑。 落叶乔木，高3 - 7 米或更高，通常灌木状，植物体含乳液。树皮黄褐色， 枝灰白色或灰黄色，细长疏生，嫩时稍有柔毛。叶互生；卵形或椭圆形，长5 1 0 c m ，最长可达2 0 e r a ，宽5 - - l l e m ，先端锐尖，基部心脏形或不对称，边缘有 不整齐的粗居齿或圆齿；叶柄长1 5 4 c i i l ；托叶披针形，早落。花单性，雌雄异 株；花黄绿色，与叶同时开放；雄花成穗状花序；萼片4 裂；雄花有雄蕊4 ；雌 花无花柱，柱头2 裂，向外卷。聚合果腋生，肉质，有柄，椭圆形，长l - 2 5c n l ， 深紫色或黑色，少有白色。花期4 - 5 月。果期6 7 月【2 3 1 。 1 3 2 桑叶的化学成分 1 3 2 1 黄酮及黄酮苷类 黄酮及黄酮苷类化合物是桑叶化学成分中研究最多，结构和成分比较明确的 一类化合物。主要含有芸香苷、槲皮素、异槲皮苷、槲皮素3 三葡糖苷等化合 物【2 4 1 。 1 3 2 2 生物碱类 生物碱也是桑叶的主要活性成分之一。日本学者a s a n o 等2 5 1 从桑叶中分离 出多种多羟基生物碱，包括d n j ( 1 脱氧野尻霉素) 、n 甲基1 d n j 、2 氧a d o 4 江苏大学硕士学位论文 半乳糖吡喃糖苷- l d n j 、f a g o m i n e 、1 , 4 二脱氧1 ，4 亚胺基d 阿拉伯糖醇、1 ，4 二脱氧一l ，4 - 亚胺基- ( 2 一氧1 3d 吡喃葡萄糖苷) - d 阿拉伯糖醇、l a ，2 p ，3 q ，4 p 一四羟 基去甲莨菪烷( n o r t r o p a n o l i n e ，去甲莨菪碱) 。 1 3 2 3 多糖类 桑叶多糖是近年来发现的又一活性成分。陈福君等【2 6 】报道了自桑叶中提取 的桑叶总多糖( t p m ) 对四氧嘧啶糖尿病小鼠有显著降血糖作用，t p m 的结构 有待于进一步研究。赵骏等【2 7 2 8 1 通过j 下交实验，并综合考虑大生产的各种因素条 件，优选出桑叶多糖的提取工艺并进行质量控制初探。 1 3 2 4甾类成分 含p 一谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇、p 一谷甾醇p d 葡糖苷、蚊麻脂醇、内消 旋肌醇、昆虫变态激素牛膝甾酮和蜕皮甾酮等2 3 刀】。 1 3 2 5 挥发性成分 含有乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸、己酸、异己酸、水杨酸甲 酯、愈创木酚、苯酚、邻苯甲酚、问苯甲酚、丁香油酚等。还含草酸、延胡索酸、 酒石酸、柠檬酸、琥珀酸、棕榈酸、棕榈酸乙酯、三十一烷、羟基香豆精 2 3 , 2 4 。 1 3 2 6 糖类 含有蔗糖、果糖、葡萄糖【2 3 】。 1 3 2 7 氨基酸类 桑叶中含有天门冬氨酸和谷氨酸等1 7 种氨基酸。降血压物质丫氨基丁酸含 量高达2 2 6 m g 1 0 0 9 ，而丫- 氨基丁酸由谷氨酸转化而来，桑叶中谷氨酸高达2 3 2 3 m g lo o g l 2 3 1 。 1 3 2 8 维生素类 桑叶中含有维生素a 、维生素b l 、维生素b 2 、烟酸、维生素c 、视黄酮、 胡萝卜素及食物纤维等f 3 0 , 3 1 1 。 1 3 2 9 微量元素 桑叶中含有锌、铜、锰、铁等多种人体必需的微量元素【”, 2 4 1 。每l o o g 桑叶 约含钙2 6 9 9 m g ，钾3 1 0 1 m g ，镁3 6 2 m g ，铁4 4 1 m g ，钠3 9 9 m g ，锌6 1 m g ，铜 1 0 m g ，锰2 7 m g 等。 江苏大学硕士学位论文 1 3 3 桑叶的药理作用 l1 3 3 1 降血糖作用 a s a n o 等【2 9 】比较了从桑叶中分离出的7 种生物碱的降血糖活性，发现1 脱氧 野尻霉素( d n j ) 具有很强的糖苷酶抑制作用。k i m u r am 等【3 0 j 观察了以上7 种 生物碱对s t z 引起的糖尿病小鼠降糖作用，实验结果表明，d n j 、n m e d n j 、 g a l d n j 和f a g o m i n e 都可显著地降低血糖水平。 宫司进之【3 l 】等制备了大花紫薇和桑叶提取物的混合物( 1 ：1 ) ，观察了对大 鼠血糖值的影响。实验结果表明，大花紫薇和桑叶提取物的混合物对四氧嘧啶糖 尿病模型大鼠的血糖升高具有抑制作用，推测是混合物中的c o r o s o l 酸和m a r o n a 对四氧嘧啶障碍具有细胞保护作用，以及维持某种程度的胰岛素分泌作用。这两 种物质通过提高末梢组织的胰岛素利用能力以及促进糖转运而降低血糖。 陈福君等【2 6 】报道了自桑叶中提取的桑叶总多糖( t p m ) ，腹腔注射给药对四 氧嘧啶糖尿病小鼠有显著的降血糖作用；t p m 还可以提高糖尿病小鼠的耐糖能 力，增加肝糖元含量而降低肝葡萄糖；t p m 腹腔注射给药可以提高正常大鼠血 中的胰岛素水平。 方晓【3 2 】等报道，桑叶粉沸水提取得0 4 9 m l 浸液，以2 m l d 浸液给四氧嘧 啶致糖尿病大鼠，观察3 0 d ，测定血糖水平，结果表明，桑叶浸液对实验性糖尿 病大鼠有明显的降血糖作用。 日本宫劂3 3 1 等采用自然发病且症状类似成人型糖尿病和糖尿病合发症的大 鼠( w b n l 幻b 雄性大鼠) 进行研究，试验发现d n j 能同小肠中的麦芽糖酶、蔗 糖酶和乳糖酶等2 糖苷酶结合，使二糖不能进一步分解为单糖而被吸收，从而明 显地抑制了食后血糖值急剧升高现象，耐糖量试验亦表明桑叶能抑制胰腺兰格尔 罕氏岛的病变进展，同时可维持胰岛素的分泌，抑制血糖值的升高，延缓糖尿病 的发作和恶化。 佐藤修二报道【3 4 1 ，用桑叶5 0 甲醇提取物( m e ) 作大鼠小肠灌流实验，在 m e ( 相当o 1 桑叶) 共存时迅速抑制蔗糖吸收，中止加m e 时，立即恢复。显 示桑叶成分对二糖类分解酶活性的抑制作用。 饭冢幸澄【3 5 】等将桑叶水提，冻干作试验材料( 得率5 5 ) ，分别以高中低剂 量对w i s t a r 雄性大鼠门静脉注射给药，3 0 1 2 0 m i n 后外周静脉血葡萄糖分别降至 6 江苏大学硕士学位论文 5 0 、2 0 、7 。显示桑叶的提取物作用于淀粉消化的最后阶段，对二糖酶( 麦 芽糖酶和乳糖酶) 有明显地抑制作用，桑叶提取物可能是控制餐后血糖的有效手 段。 i t 0 等f 3 6 】将类黄酮与d n j 结合或者是与桑叶中的d n j 结合，并将其加入到 饮料中，这种饮料比单独的d n j 或者是桑叶中所含的d n j 更能有效地抑制血糖 的上升。h o s s e i n z a d e h 等【3 7 】研究了黑桑和白桑的叶对血糖的抑制作用，实验表明， 无论黑桑还是白桑的叶提取物都具有同样的降血糖作用。 k i m 3 8 】等通过试验证明：桑叶和蚕的乙醇提取物对a 葡萄糖水解酶的抑制作 用比桑叶和蚕的水提取物强，