（应用心理学专业论文）音乐和慢性应激对大鼠神经内分泌、免疫及心理行为的影响.pdf

摘要 目的：通过观察放松性音乐和慢性应激对大鼠体重、心理行为、空间学习能力的影响， 以及免疫器官的变化、检测血清中l l 1 p 、l l 2 、c o r t 、a c t h 、海马中5 h t 水平的变化， 探讨放松性音乐和应激对大鼠的心理行为、免疫功能和神经内分泌的影响及其可能的影响 机制，对于防治亚健康、缓解大众压力、提高人们的身心素质具有重要的实践意义。 方法：s d 雄性乱7 周龄大鼠4 0 只，根据旷场实验的行为学得分筛选动物后随机分为 对照组、应激组、音乐组、应激音乐组，每组l o 只。采用慢性温和应激模型，播放放松 性音乐，实验结束后采用旷场实验、悬尾实验以及m o r r i s 水迷宫实验观察音乐和应激对大 鼠的心理行为变化。处死，取大鼠胸腺、脾脏称重，计算胸腺指数和脾脏指数。取大鼠血 清和脑组织，采用e l i s a 方法检测大鼠血清i l 1 b 和l l 2 的水平，采用放射免疫方法检测 大鼠血清中c o r t 、a c t h 水平，采用光学显微镜观察脑组织海马中5 h t 的表达。 结果：应激组大鼠在规定时间内的水平运动次数和垂直运动次数明显减少，体重增长 减慢( 尸 o 0 5 ) ，音乐组可明显增加水平运动次数和垂直运动次数，促进大鼠体重增长，减 少悬尾时的不动时间( 氏0 0 5 ) ，表明音乐可以显著改善大鼠的抑郁情绪。应激组大鼠在 m o 币s 水迷宫中寻找平台的潜伏期明显延长( 火o 0 5 ) ；在空间探索实验中在目标象限的游 泳时间比例显著升高( 尸 0 0 1 ) ，音乐组的平均潜伏期缩短，在目标象限的游泳时间比例显 著缩短( p 0 0 5 ) ，表明音乐可以增强大鼠的空间学习能力。应激致使大鼠血清i l - l b 、i l 广2 含量升高( p o 0 5 ) ，音乐可显著降低血清i l 1p 、i l - 2 的含量c p o 0 5 ) ，应激和音乐两因素 交互作用对i l 2 的分泌有显著的调节作用( p 0 0 5 ) 。中央格停留时间是动物对空间认知能力的 反映【3 5 】，表明大鼠进入一个陌生环境后对新环境的好奇程度，正常动物会避开空旷环境， 迅速离开中央格，沿周边活动。如果对新环境的认知能力差，则大鼠停留在中央格的时间 延长。反映动物的空间认知能力。水平运动次数反映动物的兴奋性，垂直运动次数反映动 物对新环境的探究性和满意程度，粪便次数反映动物的紧张恐惧状态。 1 3 3 悬尾实验 悬尾实验能反映动物的“失望 情绪及“抑郁”状态，用于观察大鼠为克服不正常体 位而进行挣扎的体力及心理疲劳程度，是较为经典的反映大鼠心理抑郁程度的行为学评定 方法。本研究中四周实验结束后进行悬尾实验l d 。实验在暗光、无噪声的环境下进行，操 作者将大鼠的尾端1c i i l 处固定于一悬尾实验箱上，悬挂高度为距地面l m 左右，使其呈一 种被动的倒挂状，大鼠为克服不正常体位，试图通过挣扎来改变现状。但活动一定时间后， 便会减少或停止挣扎，出现间断性“不动 状态。采用双盲法观察6m i n 。记录大鼠的不动 时间( 大鼠处于完全放松静止不动状态的累积时间) ，以及挣扎次数( 大鼠由倒挂向上翻 转的总次数) 。由于每次翻转挣扎都要消耗大量体能，体力不济亦会导致挣扎次数减少、不 动时间延长。不动时间的长短与大鼠在实验过程中的“失望 情绪呈正相关，亦可表示大 鼠的体力变化。 1 3 4m o f r i s 水迷宫实验 m o 而s 水迷宫实验能反映动物学习和记忆的形成和维持时剐3 6 】。是记忆量化的良好指 标。悬尾实验结束后，大鼠休息一天以恢复体力，次日进行水迷宫实验，一共进行五天。将 水池按划分为四个象限，按顺时针方向定义为a 、b 、c 、d ，第一象限的中央放置圆形隐 藏平台，实验期间平台位置保持不变，水面高于平台o 5 c m ，水温控制2 2 2 5 。迷宫外有 空间参照物且始终不变，以供大鼠定位平台。迷宫上方安置带有显示系统的摄像机，采集 7 山西医科大学硕士学位论文 记录m o r r i s 水迷宫数据及大鼠的运动轨迹。 隐藏平台获得实验：用于测量动物在水迷宫中的学习和记忆能力。实验历时四天。实 验前先将动物放置隐藏平台1 m i n ，每天训练四次，每次1 2 0 m i n ，随机从东南西北4 个入水 点选择一个，将动物面向池壁放入水中，记录动物寻找至发现并爬上平台所需时间即逃避 潜伏期( e s c a p el a t e i l c ”，若动物在1 2 0 秒内没有找到平台，由实验者将其引导至平台并停留 3 0 秒，逃避潜伏期记为1 2 0 s 。( 此次停留可以减轻大鼠的疲劳程度，缓解大鼠的紧张情绪， 同时可避免大鼠再跳回水中，以保证实验的成功。) 每次训练之后，将大鼠擦干，预防大鼠 低体温。每只动物共计训练1 6 次，计算每天四组大鼠4 次逃避潜伏期的平均值。在此实验 中，动物需记忆平台在迷宫中的位置及其周围环境，学会爬上平台以减轻其疲劳程度。 空间搜索实验：用于测量动物对平台空间位置的记忆，即记忆保持能力。第五天撤走 平台，任选一个点将大鼠放入水中，动物在水中停留2 m i n ，记录它在四个象限中停留时间 的百分比，将其作为大鼠的空间记忆能力。 1 3 5 血标本采集 水迷宫实验后，次日上午8 ：0 0 1 1 ：0 0 ，大鼠断头取血，置于室温凝固2 小时后， 1 5 0 m m i i l 离心1 5 m i n ，取血清，2 0 冰箱保存待用。 1 3 6 脑组织标本处理与制片 大鼠断头取血后，剥离颅骨，至枕骨大孔以上，快速摘取全脑组织，用4 多聚甲醛溶 液固定2 4 小时以上，常规脱水、透明、浸蜡包埋制作石蜡切片( 切片厚6 岬) 。然后将切 片贴附于多聚赖氨酸预处理过的载玻片上。 1 3 7 大鼠胸腺指数及脾脏指数 胸腺指数和脾脏指数是反映应激对胸腺和脾脏等免疫器官影响的一个灵敏、有效和经 济的指标，可为进一步进行生化和病理组织学检查提供线索。操作方法如下：大鼠取脑组 织后，剪开胸腔，轻轻剥离胸腺( 附着于心脏表面，白色双叶状) ，置滤纸上吸去表面液体， 用电子精密天平称取其重量。然后剖腹，轻轻摘取脾脏，处理同胸腺。实验指标：胸腺指 数= 胸腺重量( 1 n g ) 大鼠体重( 曲；脾脏指数= 脾脏重量( m g ) 大鼠体重( 曲。 1 3 8 大鼠血清i l - 1 b 、i l 2 水平的测定 i l 1 在应激反应的多种生理和病理过程中发挥关键性作用，i l 2 是一种主要的免疫调 节因子，它的生产能力可作为机体细胞免疫功能的重要指标【3 7 1 。大鼠血清i l 1 p 、i l 2 水平 的测定均采用双抗体酶联免疫吸附试验法( e n z y i i l e l i i l l 【e dh 1 1 m u n o s o r b 锄a s s a y ， e l i s a ) ，严格按照试剂盒说明书进行操作，具体操作过程如下：在预先包被抗体的酶标板 上，分别加入标本及不同浓度的标准品( 1 0 叫孔) ，电热恒温培养箱中3 7 孵育9 0 分钟， 反应后甩去酶标板内液体，再对着吸水机拍几下。然后加入生物素抗大鼠i l 2 工作液 ( 0 1 m l 孔) ，3 7 孵育6 0 分钟，用0 0 1 p b s 洗涤5 次，每次浸泡l 砣分钟左右。加入砷肥 8 山西医科大学硕士学位论文 显色液( 9 0 u l 孔) ，3 7 避光反应2 0 砣5 分钟；加州b 终止液( 0 1 m l 孔) ，此时蓝色变 成黄色，用酶标仪在4 5 0 姗测定o d 值，绘制标准曲线，查出标本浓度。i l 一1 b 水平的检测 按试剂盒说明进行，基本同上。 1 3 9 大鼠血清c o r t 、a c t h 的检测 应激反应最重要的特征是h p a 轴的激活以及由此引起g c 的分泌增加。过高水平的 g c 不但影响机体的代谢、免疫、呼吸、心血管的活动，还会引发思维不集中、烦躁等表现。 并且对下丘脑、垂体的负反馈作用减弱或者消失，从而引起血清中a c t h 、g c 浓度更高。 大鼠血清c o i h 、a c t h 水平的测定均采用放射免疫法( r i a ) 。a c t h 放免实验操作具体 过程按照试剂盒的说明进行，加样，混匀，4 保温2 4 h ，加入1 2 5 i a c t h l 0 0 u l 管，4 充分混 匀，静置2 4 h ，加入分离剂，5 0 0 u l 管，充分混匀，室温静置1 5 m 弛4 3 5 0 0 r p m 离心2 0 m i l l ， 去上清，测各管沉淀c p m 值。c o r t 的检测按试剂盒说明进行，基本同上。 1 3 1 0 大鼠脑组织中5 h t 的免疫组化测定 在中枢神经系统中5 一h t 能系统主要参与疼痛、情绪( 焦虑和抑郁) 、睡眠、体温等 多种功能活动的调节【3 8 l 。大鼠脑组织5 一h t 表达的检测采用免疫组化s a b c 法，具体操作 过程如下： ( 1 ) 切片后5 6 5 8 电烤箱烤2 4 小时；二甲苯脱蜡1 0 m i n ，2 次；酒精系列脱水；( 2 ) 加新鲜配制的3 h 2 0 2 室温处理1 0 分钟，以灭活内源性酶，蒸馏水洗2 m i l l ，3 次；( 3 ) 将切 片浸入0 o l m 枸椽酸盐缓冲液( p h 6 o ) ，微波炉加热至沸腾，煮1 l i l i i l ，断电1 嘶i l l 后再次 煮沸l m i n ；( 4 ) 在冷水盆中冷却后用p b s 洗涤2 m i n ，2 次；( 5 ) 滴加5 b s a 封闭液，3 7 2 0 1 1 1 i n ，甩去多余液体不洗；( 6 ) 滴加一抗5 一h t ( 1 ：1 0 0 稀释) ，4 过夜，p b s 洗2 m 氓 3 次；( 7 ) 滴加生物素化山羊抗兔i g q3 7 ，3 0 m i n ，p b s 洗2 而i l 3 次；( 8 ) 滴加试剂s a b c ， 3 7 ，2 0 m i n ，p b s 洗5 i i l i n ，4 次；( 9 ) d a b 显色，取l m l 蒸馏水，加试剂盒中a 、b 、c 试 剂各一滴，混匀后加至切片，室温显色约1 5 m i n ；蒸馏水洗涤；( 1 0 ) 苏木素轻度复染；脱 水，透明，封片。整个过程于湿盒中进行；( 11 ) 显微镜观察，采用m i 嬲2 0 0 0 图像分析系统 对免疫组化染色的切片进行形态学图像分析。 1 3 1 1 统计学处理 实验数据以x s 表示，所有数据进入s p s s l l 5 统计软件( s p s s l l 5 氨ww i n d o w s ) 包进 行分析。大鼠的体重、旷场实验的数值、寻找隐藏平台实验的平均潜伏期采用重复测量的 方差分析，同一时间点的数值采用多元方差分析；大鼠悬尾实验的不动时间、挣扎次数、 脾脏指数、胸腺指数采用单因素方差分析，血清i l 1 d 、i l 2 、c o r t 、a c t h 指标比较采 用析因设计方差分析。 9 山西医科大学硕士学位论文 第二章实验结果 2 1 音乐和慢性应激对大鼠体重的影响 方差分析的结果显示，处理效应与时间效应之间的交互作用有统计学意义( 严9 1 5 7 ， p o 0 1 ) 处理主效应有统计学意义( 庐5 6 1 ，尸 0 0 5 ) 。故不能推断应激和音乐对大鼠 中央格停留时间有影响。时间主效应有统计学意义( 庐1 2 4 9 4 ，p o 0 1 ) ，可认为五周大鼠 中央格停留时间的总体均数不全相同。实验前停留时间显著多于后四周的中央格停留时 间。见表3 、4 ，图2 。 表3 四组大鼠旷场实验的中央格停留时间( 石s s ) 表4 大鼠中央格停留时间的方差分析 3 藿 萋 导 0 周1 周 2 周 3 周4 周 时间 图2 四组大鼠旷场实验的中央格停留时间 因对照组 口应激组 日音乐组 盈音乐一应激组 山西医科大学硕士学位论文 2 2 2 音乐和应激对大鼠旷场实验水平运动次数的影响 方差分析的结果显示，处理效应与时间效应之间的交互作用有统计学意义( 庐3 3 0 3 ， p o 0 1 ) ；处理主效应有统计学意义( 刑2 2 8 ，p 0 0 1 ) ，时间主效应有统计学意义( ，一8 6 6 6 ， 氏0 0 1 ) ，可认为五周大鼠水平运动次数的总体均数不全相同。对同一时间点的四组大鼠 水平运动次数进行比较，从第二周开始，应激组大鼠的水平运动次数明显少于对照组，音 乐组的水平运动次数多于应激组，提示应激组大鼠活动性减弱，音乐组大鼠的活动性和探 究性增强。见表5 、6 ，图3 。 表5 四组大鼠旷场实验的水平运动次数( i s ) 注：与同一时间点对照组相比，6 与同一时间点应激组比 表6 音乐和慢性应激对大鼠水平运动次数影响的方差分析 网亡搦闲闲 震雾蓁鋈冀弱，蓁雾 0 周1 周2 周3 周4 周 时间 图3 四组大鼠水平运动次数的变化趋势 1 2 母对照组 口应激组 目音乐组 囱音乐一应激组 o 5 o 5 0 5 o 5 0 5 籁蜒酞 山西医科大学硕士学位论文 2 2 3 音乐和应激对大鼠旷场实验垂直运动次数的影响 方差分析的结果显示，处理效应与时间效应之间的交互作用有统计学意义( 严5 4 5 1 ， 氏o 0 1 ) ，时间主效应有统计学差异( 仁7 4 2 9 ，尸 o 0 1 ) ，处理主效应也有统计学意义 ( 严1 0 9 2 5 ，p 0 0 1 ) ，大鼠垂直运动次数随应激时间的延长而减少。对同一时间点来比较， 音乐组大鼠垂直运动次数明显高于对照组( p o 0 5 ) ，提示音乐组大鼠对新环境满意度较 高。见表7 、8 ，图4 。 表7 各组大鼠的垂直运动次数( i s ) 注：与同一时间点对照组相比，6 与同一时问点应激组比 表8 音乐和慢性应激对大鼠垂直运动次数影响方差分析 2 5 2 0 籁1 5 怒 制 矧1 0 5 0 鋈 荔 蓁 窿 蓁霾 o 周l 周2 周3 周 4 周 时问 图4 四组大鼠垂直运动次数的变化趋势 日对照组 口应激组 口音乐组 口音乐一应激组 山西医科大学硕士学位论文 2 2 4 音乐和应激对大鼠悬尾情绪的影响 结果显示，在悬尾实验中，四组大鼠的不动时间有显著性差异( 卢7 0 6 9 ，p o 0 5 ) 。 应激组大鼠的不动时间明显高于其它三组，差异有统计学意义( 氏o 0 5 ) 。其中音乐组大鼠 不动时间最短，应激音乐组低于对照组，但显著高于应激组。四组大鼠的挣扎次数有显著 性差异( 辟4 4 6 1 ，尸 0 0 1 ) 。应激组的挣扎次数明显低于其他三组，除与应激音乐组外，都 有显著性差异。提示放松性音乐能够改善大鼠的抑郁状态。见表9 。 表9 四组大鼠不动时间和挣扎次数情况( 孑s ) 注：与对照组相比，6 与应激组比 2 3 音乐和慢性应激对大鼠空间学习能力的影响 2 3 1 空间学习训练 结果表明，经过寻找隐藏平台训练，对照组运动轨迹简单、清楚；应激组大鼠多呈贴 池壁环形或漂浮式游泳，其游泳路线紊乱，对目标进行无效搜索，音乐组大多选用直线式 搜索策略，见图5 8 。在4 天的平均训练潜伏期中，其平均训练潜伏期都呈下降趋势。由重 复测量的方差分析知，处理效应与时间效应之间的交互作用有统计学意义( f - - 2 0 3 5 ， 尸 o 0 5 ) ，处理主效应有统计学意义( 辟5 1 3 2 ，p o 0 1 ) ，故推断应激和音乐对大鼠空间学 习能力有影响。时间主效应有有统计学意义( 芦1 3 0 9 6 ，氏0 0 1 ) ，可认为四天大鼠的平均 潜伏期的总体均数不全相同。对同一时间点的不同组别进行比较知，应激组平均潜伏期明 显高于对照组( 尸 0 0 5 ) ，第4 天应激音乐组与应激组比较差异显著( p 0 0 5 ) ，应激组脾脏指数、胸腺指数比对照组略有升高，音乐组的胸腺指 数、脾脏指数均低于应激组，差异无显著性意义( 尸| 0 0 5 ) 。见表1 3 。 表1 3 四组大鼠主要免疫器官指数( x j ，m g g ) 2 5 音乐和慢性应激对血清i l 1 p 、i l 2 的影响 结果显示，应激因素的主效应有统计学意义p o 0 5 ，应激促进大鼠血清i l - 1b 、i l 2 的分泌，其含量高于无应激大鼠；音乐因素的主效应也有统计学意义p o 0 1 ；音乐能够提 高血清i l 1b 、i l 2 的含量( p o 0 1 ) 。对i l 1b 的影响上两因素间的交互作用无统计学意 义伶0 0 5 ，提示音乐对应激大鼠的i l l6 没有调节作用，对i l 2 的影响上两因素间的交互 作用有统计学意义p 0 0 1 ，提示音乐对正常大鼠及应激大鼠的i l 2 的分泌有调节作用。见 表1 4 1 7 。 表1 4 音乐和慢性应激对大鼠血清i l 一1b 的影响( x s ，p g m i ) 表1 5 音乐和慢性应激对大鼠血清i l lb 影响的方差分析( 无交互作用) 1 7 山西医科大学硕士学位论文 2 6 音乐和慢性应激对大鼠血清c o r t 、a c t h 含量的影响 2 6 1 音乐和慢性应激对大鼠血清c o r t 的影响 结果显示，应激因素的主效应有统计学意义尸 o 0 5 ，应激组大鼠的血清c o i 玎含量高 于无应激组大鼠；音乐因素的主效应无统计学意义胗o 0 5 ；故不能推断有无音乐对大鼠血 清c o i 玎水平的影响有差异。见表1 8 、1 9 。 表1 8 音乐和慢性应激对大鼠血清c o r t 含量的影响( x j ，n g m 1 ) 总变异 处理 应激 音乐 误差 3 9 2 l 1 3 7 l7 3 5 4 7 4 2 2 6 3 8 5l 12 0 7 0 9 8 4 9 0 7 1 6 3 5 3 7 4 6 1 3 2 4 6 0 o 0 3 9 0 0 3 8 0 1 2 5 2 6 2 音乐和慢性应激对大鼠a c t h 的影响 结果显示，应激因素的主效应有统计学意义尸 0 0 5 ；故不能推断有音乐组和无音乐 组的a c t h 水平有差异。但两因素间的交互作用有统计学意义p o 0 5 ，放松性音乐对于应 激有良好的改善作用。见表2 0 、2 1 。 表2 0 音乐和慢性应激对大鼠血清a c t h 含量的影响( 工s ，n g m i ) 1 8 必 螂 跚 嗍 揣 一 姗 m m 2 7 音乐和慢性应激对大鼠海马5 一h t 的影响 脑组织5 一h t 表达光镜观察结果显示正常对照组大鼠海马锥体细胞层均有5 一h t 阳性 表达细胞胞浆呈深棕色细胞形态、大小规则，大多呈锥体形。应激组大鼠海马锥体细 胞层的5 一h t 阳性细胞数量减少，细胞形态不规则，间隙增大，排列琉松不齐。音乐组太 鼠海马细胞5h t 阳性细胞数量增多，大小规则、排列整齐。( 见图) 。 、 ( 8 ) 正常对照组海马4 ! 委p ：、 r t c ( c ) 音乐组海马4 0 0 ，一一、。 一? 一：、_ 一，耋三 ， 各一j 、， 。 ， 予萝4 建 ( d l 应搬音乐组海马x 4 ? 心 - 山西医科大学硕士学位论文 第三章讨论弟二早t 匕 3 1 音乐和慢性应激对大鼠心理行为的影响 3 1 1 音乐和慢性应激对大鼠情绪的影响 旷场实验是是测试抑郁症大鼠行为学的经典方法，可以反映动物在新异环境的活动、 探究、紧张、恐惧等情绪和新鲜环境的好奇程度。其活动在一定程度上表明了中枢神经系 统的兴奋或抑制状态【3 9 1 。悬尾实验是近年来神经药理学发展的方法，通过观察大鼠克服外 界刺激所做的努力及其心理疲劳程度，反映动物的“失望情绪 及“抑郁状态”的行为学 评定方法。实验结果显示，应激组大鼠的水平运动次数减少，反映了大鼠的活动度的降低； 垂直运动次数减少，反映了大鼠对新鲜环境的好奇程度降低；悬尾后不动时间延长，反映 了大鼠的“失望 状态及其体力明显下降，体力活动中易于出现疲劳，说明应激组大鼠具 有“抑郁 情绪倾向，处于“心理疲劳和“躯体疲劳状态。与正常组比较，应激组无 论是水平活动还是垂直活动次数都明显减少( 氏o 0 1 ) 。陈夫银等研究证实慢性应激后动物 在旷场实验中的穿格次数和竖立次数等主动性行为减少【删，与本研究结果一致。经过音乐 治疗后实验大鼠水平和垂直活动次数都明显增加，与模型组比较有差异显著性( p o 0 1 ) 。研 究结果提示放松性音乐能改善慢性心理应激大鼠的心理行为，缓解应激大鼠的焦虑和抑郁 情绪。 研究表明，音乐可以直接作用于主管情绪的下丘脑及边缘系统，提高皮层神经的兴奋 性，活跃和改善情绪状态，消除外界精神心理因素所造成的“紧张状态”，调节激素分泌 从而提高应激能力，改变机体的情绪体验和身体机能状态【4 k4 2 1 。本实验结果提示，通过播 放舒缓类的音乐，可以提高个体的对负性情绪事件的承受能力，避免心理上长时间处于压 抑沉闷和愤怒状态，保持乐观情绪和积极的生活态度，及时排除不良情绪。 3 1 2 音乐和慢性应激对大鼠空间学习记忆的影响 学习记忆是一个非常复杂的过程，脑内许多结构参与学习的不同过程，并与不同的学 习方式相关联。m o r r i s 水迷宫是一种研究与海马功能直接相关的空间学习记忆模型，能较 准确的反映动物的空间学习记忆能力【4 3 1 。隐藏平台实验反映动物对平台空间位置的记忆， 评价动物的空间学习记忆能力，逃避潜伏期缩短提示学习能力的提高，巩固过程延长；空 间探索实验用于测试大鼠记忆保持的能力，大鼠在目标象限停留时间延长说明记忆保持能 力提高。本实验显示，慢性应激大鼠的学习记忆功能显著低于正常大鼠，音乐可显著提高 正常大鼠及应激大鼠的记忆功能，这与既往研究显示的人在慢性应激状态下学习记忆功能 下降以及音乐可使人聪明是相一致的。大鼠虽与人不同，但这二者相对于外界环境均是一 个有机的整体，有其自身内环境的相对稳定性，却又都生存在外界环境中并与外界环境发 生相互关系。 本实验的结果显示，音乐对应激大鼠变差的学习记忆功能有显著的改善作用。说明音 山西医科大学硕士学位论文 乐可打破其由于慢性应激所导致机体整体的延长的适应或不良的适应状态，调动机体的调 控机制，促使机体原来紊乱的内部环境恢复正常。不仅如此，本实验结果还显示，音乐对正 常大鼠的学习记忆功能亦有显著的增强作用。说明音乐可作为一种良性应激原作用于相对 正常状态下的机体，通过机体的调控系统的整体调控，更好的协调各子系统之间的关系， 使相对正常的系统向着更优的状态发展，从而增加了适应环境的能力。可能原因是音乐刺 激引起神经系统相应的神经结构数量增加表达n m d a 受体的神经元以及神经突起数目 增加，或者刺激可以提高神经元活动，通过活动依赖性方式，来调节神经网络的结构和功 能m l 。 3 2 音乐和慢性应激对大鼠神经内分泌免疫及体重的影响 3 2 1 音乐和慢性应激对大鼠体重的影响 体重是反映机体骨骼、肌肉等发育程度和肥胖程度的指标。通过体重的变化可以反映 机体的营养以及肌肉的发达情况。它能对机体的生长发育及健康状况进行评价，所以体重 对衡量机体的生长发育及健康状况具有重要意义。本实验结果显示，应激组大鼠增长缓慢， 音乐组大鼠能够促进正常大鼠和应激大鼠的体重增长，说明音乐疗法能抑制大鼠体重下降 的趋势，已有研究表明角调曲调优美，节奏明快的乐曲，不仅使人感到轻松和消除疲劳， 而且还能增强脏腑的生理功能活动，达到舒畅情志、助益饮食的效果【4 5 1 。其机理可能是： 音乐作用于大鼠中枢神经系统，调节中枢神经兴奋与抑制的平衡，促进机体生物节律恢复 正常，改善调节内分泌系统产生消化酶，调动胃肠功能的恢复。同时i l 1 可以直接作用于 外周组织，使机体代谢发生明显改变，使组织的合成代谢减弱，而分解代谢增强，从而使 动物生长抑制，同时i 【广1 可以作用于神经内分泌c o l 玎的分泌，而c o r t 能改变胃肠道激 素的分泌，促进脂肪分解和肌肉蛋白质降解。本实验音乐可以促进大鼠体重的增加，原因 可能为音乐减少了i l 1 的产生，i l 1 对机体代谢和神经内分泌的影响，直接或间接促进大 鼠体重的增加。 3 2 2 音乐和慢性应激对大鼠免疫系统的影响 胸腺是机体重要的淋巴器官，主要功能是培育、选择和向周围淋巴器官和淋巴组织输 送t 淋巴细胞，并在这些器官内增殖，参与机体的免疫反应，增强机体的抵抗力。慢性应激 下动物免疫器官可发生损伤，胸腺皮质、镱质变薄萎缩。动物实验发现束缚应激可以导致 大鼠胸腺退化，胸腺指数降低。本实验结果显示应激组、音乐组大鼠胸腺指与正常对照组 相比差异无统计学意义。原因可能是成年大鼠的胸腺产生萎缩致使差异不显著。还可以通 过增加指标如胸腺细胞凋亡率、胸腺病理切片来全面的反映胸腺功能。脾是人体最大的淋 巴器官，它的重要功能是产生免疫反应，脾还能产生对免疫反应有调节作用的活性物质， 脾脏的漫游功能在机体的淋巴器官中占有重要的地位，本实验中应激组、大鼠脾脏指数稍 低于对照组，音乐组脾脏指数略高于应激组，但差异无统计学意义。 目前认为i l 1 ，特别是i 【广l 的b 亚型是免疫系统和h p a 轴重要的信使物质m 】。在应 2 l 山西医科大学硕士学位论文 激状态时，出现中枢i l 1b 活性增强及下丘脑等部位i l 1 删 埘a 表达1 4 7 j ，中枢注射i l l 与 应激反应也很相似，都表现为交感神经系统活性增强、下丘脑垂体肾上腺轴激活、升高血 浆c r h 、a c t h 和g c 的水平，并可能出现行为异常【4 引。i l 2 是一种活化的t 淋巴细胞分 泌的一种细胞因子，i l 2 水平的高低是机体细胞免疫的重要标志。有报道认为，心理应激后 i l 2 产生减少【4 9 1 。音乐能够降低n k 细胞活性以及淋巴细胞活性，本实验中，应激组i l 2 出现下降，这意味着细胞免疫不可避免的出现抑制。应激大鼠在音乐刺激后出现i l 2 的明 显回升，显示了音乐有效的降低了应激反应，从而保护了机体的免疫稳定。虽然应激音乐 组的水平还未达到对照组的水平，但免疫波动范围已经减少。 3 2 3 音乐和慢性应激对大鼠血清c o r t 、a c t h 的影响 在应激反应中，体内的交感神经系统( s n s ) 和脑内的应激系统( h p a ) 共同完成了生物体 对应激的非特异性适应反应。正常的h p a 轴功能是生存所必需的，因为其可以使机体应对 刺激作出适应性调控，而重复的h p a 轴激活能产生损伤性生理效趔5 0 】。体内过高水平的 g c 不但影响机体的代谢、免疫、呼吸、心血管的活动，还会引发思维不集中、烦躁等表现。 而且对下丘脑、垂体的负反馈作用减弱或者消失，从而引起血清中a c t h 、g c 浓度更高。 动物实验研究显示【5 l 】，慢性应激抑郁模型动物血浆中a c t h 、c o i 汀的含量高于对照组。 而且血清c o r t 水平的高低与应激的强度有关，r o b e n 掣5 2 】研究结果显示，轻度职业心理 应激组的血清c o i 汀水平明显低于中度和重度心理应激组。a c t h 能减低正常动物的情绪 反应，中枢神经系统给与a c t h 能导致人失眠，长期注射可使大脑活动减弱1 5 引，对人或动 物的行为、学习有一定的影响。 本实验结果显示，应激使大鼠血清a c t h 、c o i 玎均明显升高，提示四周慢性温和应激 使大鼠h p a 轴功能失调，神经内分泌功能紊乱，表现出功能亢进。音乐对大鼠c o r t 的水 平有下调作用，未达到统计学意义，音乐对应激大鼠血清a c t h 有明显的下调作用。以往 研究表明，以往研究播放小夜曲可降低c o i 汀、a c t h 结论一致。适度压力下，少量的 c o i 玎分泌能激活大脑的奖赏中枢让我们产生欣快感，促进长时程增强的形成，从而促进 学习记忆。提示音乐能够拮抗慢性应激对大鼠血清c o l 玎的分泌，从而起到改善情绪、提 高记忆力的作用。研究表明，音乐作为一种声波信号，在耳蜗处转变成神经信号经听神经 上传至中脑和蜗神经核，从蜗神经核上传到达听觉丘脑，杏仁核和眶额皮质】。n i t e c k a 等【5 5 】