粪便检查标本采集与处理 ppt课件.ppt

粪便检查theexaminationoffeces/stool,1,.,粪便组成,是水是固体,未消化的食物,消化道分泌物和有形成分,食物分解产物,细菌占干重1/3,固体成分,2,检查的主要目的,1.了解消化道以及消化器官是否有炎症、出血和寄生虫感染等情况;2.OB试验作为消化道肿瘤的过筛试验;3.根据粪便的性状和组成，了解消化状况，借以粗略判断胰腺外分泌功能;4.检查粪便中有无致病菌以防治肠道传染病。,3,第一节标本采集与处理,一、标本的采集二、粪便标本的处理,4,一、标本的采集,采用自然排出的粪便无粪便排出而又必须检查肛门指诊或采便管采集标本。,5,标本采集注意事项,1标本容器带盖、干净、干燥、无渗漏、无吸水性细菌学检查：灭菌容器2标本的采集量常规性检查：约5g粪便集卵检查和血吸虫毛蚴孵化：约30g粪便3标本的采集部位含粘液、脓血等异常成分从粪便的表面不同部位，深处及粪端多处取材,6,4标本的送检时间随送随检，1h内检查完毕阿米巴滋养体：立即检查，标本保温5检查蛲虫卵透明薄膜拭子/棉拭子:晚12时或清晨排便前自肛门周围皱裂处拭取，立即镜检。6检查寄生虫虫体及虫卵计数采集24小时粪便,7,7粪胆原定量检查连续采集3天粪便，每天约取20g送检8脂肪定量检查脂肪膳食50150g/日，连服6天，第3天开始收集72h内的粪便，混合称重，取约60g送检9隐血试验化学法素食三天，禁服VitC及铁剂等干扰试验的药品10灌肠或服油类泻剂的粪便不适合作检查标本,8,二、粪便标本的处理,1标本容器为纸类或塑料等材料置于焚化炉内进行焚化处理。2标本容器为玻璃、瓷器等材料浸入5%甲酚皂溶液24h，或0.1%过氧乙酸12h，处理后的粪便倒入厕所。用过的载玻片浸入0.5%过氧乙酸消毒过夜，煮沸消毒，清洗干净备用。,9,第二节粪便理学检验,一、量二、性状三、颜色四、气味五、寄生虫六、结石,10,一、量,粪便量的多少与人体的进食量、食物的种类及消化器官的功能状态有直接的关系。进食粗粮及含纤维素较多的食物：粪便量相对较多；反之，则相对较少。健康成人每日排便一次，粪便量约100300g。病理情况：粪便的量、排便次数和性状等可不同程度改变。,11,二、性状,正常成人粪便：黄色或棕黄色，质软，成形便婴儿粪便：黄色或金黄色糊状便。,12,粪便异常性状及可能原因1,13,粪便异常性状及可能原因2,14,三、颜色,正常人粪便：黄色或褐色婴儿粪便：黄绿色病理情况：粪便可不同的颜色改变,15,粪便异常颜色及可能的原因,16,四、气味,健康人粪便有一定臭味：经细菌作用后，蛋白质分解产生吲哚、硫醇、粪臭素、硫化氢、靛基质等很多有臭味的物质肉食者：含大量蛋白质而使臭味强烈素食者：臭味相对较淡,17,慢性肠炎、胰腺疾病、消化道大出血、结肠或直肠溃烂：多因未消化的蛋白质发生腐败而致粪便有恶臭脂肪及糖类消化或吸收不良：由于脂肪酸分解及糖的发酵，可致粪便有酸臭味阿米巴肠炎：粪便呈鱼腥臭味,18,五、寄生虫,肉眼分辨的较大虫体：蛔虫、蛲虫、猪肉绦虫、牛肉绦虫、阔头裂节绦虫等将粪便过筛冲洗后：可发现钩虫、鞭虫等细小虫体服驱虫剂后：查有无虫体驱绦虫后：寻找头节,19,六、结石,最重要且最多见的是胆石，另外还有胰石、肠石和粪石。体积较大者肉眼可见，较小者需用铜筛淘洗粪便后仔细查找才能检出。,20,第三节粪便化学检验,一、隐血试验二、胆色素三、脂肪,21,一、隐血试验（occultbloodtest,OBT）,隐血消化道出血量少于5ml，肉眼及镜检不能发现大便内的血液隐血试验可以通过化学法或免疫学等方法来证实隐血的试验,22,检测方法,1化学法2免疫法3.其他隐血试验,23,【检测原理】,1化学法血红蛋白含有类似过氧化物酶的作用，催化供氢体，将供氢体中的氢转移给过氧化氢生成水，供氢体脱氢（氧化）后形成发色基团而呈色。呈色的深浅可反映血红蛋白量（出血量）的多少。,24,常用方法：邻联甲苯胺法、邻甲苯胺法、还原酚酞法、联苯胺法、愈创木酯法、匹拉米洞法、无色孔雀绿法等根据灵敏度的高低高灵敏度试验、中灵敏度试验和低灵敏度试验隐血试验多选用中度灵敏的试验如联苯胺法、匹拉米洞法和无色孔雀绿法,25,几种化学法隐血试验的比较,26,2免疫法,免疫学法有三类抗体：抗人血红蛋白抗体抗人红细胞基质抗体抗血液中其他成分如1-AT、Tf、Hb-Hp,27,抗人血红蛋白法和抗人红细胞基质法隐血试验主要检测下消化道出血约有4050%的上消化道出血不能检出红细胞或血红蛋白经消化酶降解变性失去免疫原性;大量出血使反应体系抗原过剩出现后带现象抗1-AT、Tf、Hb-Hp等抗体的隐血实验对所有消化道出血均呈阳性反应。,28,主要方法：酶联免疫吸附法胶体金法免疫斑点法胶乳凝聚法反向间接血凝法等,29,粪便隐血试验-胶体金法,失败,30,3.其他隐血试验方法,同位素法同位素标记红细胞消化道出血时：进入消化道,随大便排出将大便中的放射性与每毫升血液中放射性进行比较计算，求出胃肠道出血量。,31,卟啉荧光法血红蛋白定量试验血红蛋白在热草酸试剂作用下变为原卟啉，进行荧光检测检测：粪便中未降解的血红蛋白，血红蛋白衍化物卟啉,32,转铁蛋白测定伴随粪便隐血出现的蛋白质（如转铁蛋白、结合珠蛋白、清蛋白等），可作为消化道出血的标志。胃肠道出血时，粪便中出现大量转铁蛋白，其稳定性高于Hb。,33,【方法学评价】,1.化学法优点：操作简单易行，成本低廉，应用广泛。缺点：特异性差、灵敏度较低、影响因素多易受试剂类型、粪便中血红蛋白的多少、过氧化氢的浓度及粪便放置时间、观察时间、血液在肠道中滞留时间、粪便取材的多少以及食物、服用药物等。,34,1）假阳性动物性食品：含有血红蛋白和肌红蛋白或其它酶类大量生食蔬菜：含有的过氧化酶或触酶及某些肠道菌属,以及重金属离子的存在,35,2）假阴性：服用大量维生素C或其他具有还原作用的药物：还原H2O2，不能再氧化色原血液在肠道停留过久：细菌降解Hb,36,2.免疫学方法,优点：快速方便、灵敏度高、特异性强。HBG0.2mg/L或0.03mg/g粪便：阳性；检测前不需控制饮食动物HBG500mg/L，HRP2000mg/L：无干扰缺点：仍存在假阳性与假阴性,37,3血红蛋白荧光定量法,临床意义：,（1）对消化道出血有诊断价值；,（2）为消化道溃疡与肿瘤出血的鉴别；,（3）可作为消化道恶性肿瘤普查的1个筛选指标。,38,二、胆色素,正常粪便中没有胆红素有粪胆原及粪胆素粪胆色素检查粪胆红素粪胆原粪胆素,39,1.粪胆红素定性检查,【原理】胆红素被三氯化铁氧化成蓝色的胆青素和绿色的胆绿素。【参考范围】阴性【临床意义】婴幼儿阳性：正常肠道菌群尚未建立。成年人阳性：大量应用抗生素，严重腹泻、肠蠕动加速等。,40,2粪胆原,【原理】在碱性溶液中：粪胆素被硫酸亚铁还原为粪胆原，粪胆原与对二甲氨基苯甲醛反应生成红色化合物。【参考范围】75350mg/100g粪便【临床意义】黄疸类型的鉴别；各种溶血性疾病的辅助诊断。,41,3粪胆素,【原理】粪胆素与氯化高汞结合，形成红色化合物。【参考范围】阳性【临床意义】胆道梗阻：阴性,42,粪便胆色素的检验,43,三、脂肪,【原理】,1称量法盐酸处理粪便，使结合脂肪酸变成游离脂肪酸；乙醚、石油醚等有机溶剂萃取粪便中的中性脂肪及游离脂肪酸；蒸发除去有机溶剂，天平上精确称重，除去蒸发皿的重量即得总的脂肪重量。,44,2滴定法（Vandekamer法）粪便脂肪与氢氧化钾乙醇溶液煮沸皂化形成脂皂过量的盐酸使脂皂转换成脂酸；用有机溶剂抽提脂酸蒸干后残渣以中性乙醇溶解后，用氢氧化钠滴定，从而计算出脂肪总含量,45,【临床意义】协助诊断脂肪泻疾病：脂肪泻：总脂质量6g/24h粪便引起脂肪泻的疾病：梗阻性黄疸、慢性胰腺炎、胰腺癌、胰腺纤维囊性病、胆汁分泌不足的肝胆疾病、蛋白丧失性肠病及小肠病变等,46,第四节粪便显微镜检查,一、细胞二、食物残渣三、结晶四、病原生物五、粪便分析工作站,47,最常用的方法：生理盐水涂片法镜检方法：低倍镜浏览全片：注意观察有无寄生虫卵、原虫及其包囊等高倍镜：寻找、观察和鉴定病理性成分的形态结构。要观察10个以上的高倍视野,48,粪便中镜检细胞报告方式,49,一、细胞,1、白细胞2、红细胞3、吞噬细胞4、上皮细胞,50,1、白细胞,正常粪便偶见：主要是中性分叶核粒细胞。肠道炎症：增多，15个/HP，分散存在，数量与炎症轻重程度及部位相关。小肠炎症：白细胞均匀混合于粪便中，细胞形态难以辩认；细菌性痢疾、阿米巴痢疾和溃疡性结肠炎：大量成堆出现，伴脓细胞；过敏性肠炎和肠道寄生虫感染：较多的嗜酸性粒细胞，伴有夏科-莱登结晶。,51,WBConstoolsmear,52,puscellonstoolsmear,53,2红细胞,正常粪便中不含红细胞红细胞增加：下消化道炎症或出血溃疡性结肠炎、急性血吸虫病、结肠癌、直肠癌、直肠息肉、细菌性痢疾、阿米巴痢疾、痔疮出血及其它出血性疾病等细菌性痢疾：以白细胞为主，红细胞形态正常，常散在分布阿米巴痢疾：红细胞多于白细胞，且成堆出现伴形态破碎,54,炎症：红细胞常伴白细胞出现上消化道出血：红细胞常被胃肠道中的消化液消化破坏，显微镜检查常阴性，可通过隐血试验证实,55,RBConstoolsmear,56,3吞噬细胞,细菌性痢疾：常见较多的吞噬细胞吞噬细胞可辅助诊断急性细菌性痢疾急性出血性肠炎：可见吞噬细胞溃疡性结肠炎：偶见吞噬细胞,phagocyteonstoolsmear,57,4上皮细胞,正常粪便：很难发现结肠炎症：上皮细胞数量增多坏死性肠炎、霍乱、副霍乱、伪膜性肠炎等,epitheliaonstoolsmear,58,二、食物残渣,正常情况：仅见到无定形的细小颗粒残渣，偶见少量脂肪小滴和淀粉颗粒。食物消化不完全时：不同类型的食物残渣1淀粉颗粒2脂肪3肌肉纤维4结缔组织5植物纤维及细胞,59,1淀粉颗粒正常粪便中较少见碳水化合物消化不良及腹泻：可大量出现，常伴较多的脂肪小滴和肌肉纤维,granuleamylumonstoolsmear,60,2脂肪三种形式：中性脂肪、游离脂肪酸、结合脂肪酸正常情况：粪便中很少见到脂肪排泄增多：脂肪小滴6个/HP，常见腹泻脂肪小滴大量存在：提示胰腺功能障碍：急慢性胰腺炎、胰头癌、乳糜泻和吸收不良综合征等游离脂肪酸增多：提示脂肪吸收障碍：阻塞性黄疸,61,fattinessonstoolsmear,62,粪便中脂肪的检验和鉴别,63,3肌肉纤维大量食肉后的粪便：少量肌肉纤维，10个/标准盖片肌肉纤维增多：常见于腹泻、肠蠕动亢进或蛋白质消化不良,64,4结缔组织正常情况下结缔组织少见结缔组织增多：胃蛋白酶缺乏或腹泻,connectivetissueonstoolsmear,65,5植物纤维及细胞正常粪便中可少量出现,66,planfibreandcellonstoolsmear,67,三、结晶,正常粪便：可见到少量磷酸盐结晶、草酸钙结晶和碳酸钙结晶，一般没有临床意义,68,phosphaticcrystalonstoolsmear,69,calciumcarbonatecrystalonstoolsmear,70,calciumoxalatecrystalonstoolsmear,71,病理性结晶有夏科-雷登结晶阿米巴痢疾、钩虫病及过敏性肠炎的粪便血晶胃肠道出血后的粪便脂肪酸结晶阻塞性黄疸的粪便,72,四、病原生物,1、细菌2、寄生虫卵3、肠道原虫4、酵母菌5、霉菌,73,1、细菌正常菌群与菌群失调成人粪便：主要菌群：大肠埃希氏菌、肠球菌和厌氧菌，约占80%少量菌群：产气杆菌、变形杆菌、芽胞菌及酵母菌等；少部分：致病细菌,74,bacteriumonstoolsmear,75,霍乱弧菌初筛：米泔样粪便：生理盐水悬滴检查，加入霍乱弧菌抗血清，观察是否制动试验阳性粪便粘液部分：涂片染色后，油镜观察。革兰阴性红色鱼群样排列，逗点状或香蕉样形态的弧菌，应及时报告并培养和鉴定,76,V.choleraeonstoolsmear,77,2、寄生虫卵,正常人粪便没有虫卵肠道寄生虫感染：涂片中可出现相应的虫卵粪便中常见的寄生虫卵：蛔虫卵、鞭虫卵、钩虫卵、蛲虫卵、血吸虫卵、肺吸虫卵、华枝睾吸虫卵、姜片虫卵、绦虫卵等最少观察10个低倍视野，以低倍镜所见虫卵的最低和最高数值报告。常用方法：饱和盐水漂浮法、离心沉淀法、静置沉淀集卵法,78,3、肠道原虫,常见感染阿米巴原虫、蓝氏贾第鞭毛虫、隐孢子虫、人芽胞子虫等,79,溶组织阿米巴,新鲜粪便的脓血粘液部分直接涂片检查滋养体碘液染色检查包囊,Fig10-4-23Entamoebahistolyticatrophozoitcystonstoolsmear,80,蓝氏贾第鞭毛虫,旅游者、男性同性恋者、胃切除者、胃酸缺乏者和免疫功能低下者易感，可引起慢性腹泻。,Fig10-4-24Giardialambliaonstoolsmear,81,隐孢子虫,条件感染性原虫引起严重腹泻儿童和免疫功能缺陷患者，尤其是艾滋病患者列为艾滋病患者的重要检查项目之一粪便常规直接涂片金胺-酚-改良抗酸染色法,82,人芽胞子虫,寄生在高等灵长类动物和人类消化道的机会致病性寄生原虫人芽胞子虫与白细胞及原虫包囊形态鉴别：破坏试验：用蒸馏水代替生理盐水涂片迅速镜检，人芽胞子虫遇水即破坏消失，而白细胞与原虫因不易破坏仍可看见,83,4酵母菌,粪便中常可见到