（水产养殖专业论文）氟苯尼考在克氏原鳌虾体内的药动学及残留研究.pdf

l 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 奄 如需保密，解密时间年 月日 是否保密 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他 人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构 的学位或证书而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志 对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。 研究生签名：卅4 l时间：川。年莎月7 日 学位论文使用授权书 本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定，即学生必须按 照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版 和电子版，并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段 保存、汇编学位论文。本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、 传播学位论文的全部或部分内容，同时本人保留在其他媒体发表论文的权力。 注：保密学位论文( 即涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交保 密的论文) 在解密后适用于本授权书 学位论文作者签名螂一孙张际参玺 签名日期：z 町。年6 月7 日签名日期：- m 口年6 月7 日 氟苯尼考在克氏原螯虾体内的药动学及残留研究 目录 摘要i a b s t r a c t 缩略语表v 第一章文献综述及研究的目的与意义1 1 1 氟苯尼考理化性质和氟苯尼考及氟苯尼考胺的结构1 1 2 氟苯尼考在动物中的应用现状1 1 3 氟苯尼考药效学研究概况2 1 4 氟苯尼考的毒理学研究概况3 1 5 氟苯尼考及氟苯尼考胺检测方法研究概况4 1 5 1 高效液相检测方法4 1 5 2 气相色谱法4 1 5 3 色谱质谱联用法5 1 5 4 其他检测方法6 1 6 氟苯尼考药动学研究概况6 1 6 1 药动学概述。6 1 6 2 氟苯尼考在畜禽体内的药动学研究概况7 1 6 3 氟苯尼考在水产动物中的药动学研究概况一9 1 7 氟苯尼考的动物体内的残留研究概况1 1 1 8 研究的目的和意义1 2 第二章高效液相色谱法检测克氏原螯虾组织中氟苯尼考及氟苯尼考胺1 4 2 1 材料和方法1 4 2 1 1 仪器与设备1 4 2 1 2 实验动物1 5 2 1 3 药品与试剂1 5 2 1 4 实验方法1 5 2 2 结果和讨论1 7 2 2 1 提取、净化条件的选择1 7 2 2 2 色谱条件的选择1 8 2 2 3 线性范围、相关性1 8 2 2 4 回收率、精密度和检测限1 8 第三章氟苯尼考及其代谢产物氟苯尼考胺在克氏原螯虾体内药动学研究2 3 3 1 材料和方法2 3 3 1 1 仪器与设备2 3 华中农业大学2 0 1 0 届硕士学位论文 3 1 2 实验动物2 3 3 1 3 药品和试剂2 3 3 1 4 色谱条件2 3 3 1 5 实验设计2 4 3 1 6 数据分析2 4 3 2 结果2 5 3 3 讨论一2 7 第四章氟苯尼考及氟苯尼考胺在克氏原螯虾体内的残留研究3 l 4 1 材料和方法31 4 1 1 仪器和设备3 1 4 1 2 实验动物，31 4 1 3 药品和试剂3 1 4 1 4 色谱条件31 4 1 5 实验设计3 2 4 1 6 数据分析3 2 4 2 结果3 3 4 3 讨论3 4 4 3 1 残留特征3 4 4 3 2 休药期3 5 参考文献3 7 致谢4 5 氟苯尼考在克氏原螯虾体内的药动学及残留研究 摘要 氟苯尼考是化学合成的第三代氯霉素抗菌素，具备广谱、高效、安全、动物专 用等特点，在水产养殖业有了较为广泛的应用。本课题在建立克氏原螯虾组织中氟 苯尼考及其主要代谢产物氟苯尼考胺定量分析方法的基础上，开展了氟苯尼考在克 氏原螯虾体药动学和残留研究，为氟苯尼考在克氏原螯虾养殖中的合理应用和安全 性控制提供理论依据。 采用液液萃取和固相萃取技术建立了氟苯尼考及其主要代谢产物氟苯尼考胺 在克氏原螯虾组织中的高效液相色谱法。氟苯尼考和氟苯尼考胺在血淋巴、肌肉、 肝胰脏的检测限分别为o o l m g l 和0 0 1 5 m g l ，0 0 2 m g k g 和0 0 3 m g k g 、0 0 3 m g k g 和0 0 5 m g k g ；组织的加标回收率为7 8 8 9 4 2 ，相对标准偏差小于8 1 6 。在 0 0 2 5 。2 0 m g k g 范围内，血淋巴的线性回归方程分别为y = 1 1 4 3 1 + 0 9 5 1 ，r = 0 9 9 9 1 5 ， y = 9 3 7 1 x + o 7 7 1 ，r = 0 9 9 9 8 3 。在0 0 5 1 0 m g k g 范围内，氟苯尼考和氟苯尼考胺在 肌肉的线性回归方程为y = 1 1 0 4 2 x 0 3 5 5 ，间9 9 9 8 6 ，y = 9 1 1 2 x + 0 3 5 2 ，r = 0 9 9 8 7 3 ， 在肝胰脏的线性回归方程为y = 1 0 9 9 0 x 0 1 3 8 ，r = 0 9 9 9 6 9 ，y = 9 1 5 3 x + 0 3 6 6 ， r = 0 9 9 9 6 8 。该方法适用于氟苯尼考在螯虾体内的药代动力学研究和氟苯尼考及氟苯 尼考胺在其组织中的残留检测。 在试验水温2 1 1 。c 时，分别按2 0 m g k g 和5 0 m g k g 剂量对克氏原螯虾进行血 窦注射和口灌氟苯尼考，采用高效液相色谱法检测血淋巴中氟苯尼考和氟苯尼考胺 的含量，3 p 9 7 软件非房室模型分析药时数据，研究氟苯尼考及其代谢产物氟苯尼考 胺在克氏原螫虾体内的药动学特征。血窦给药后，氟苯尼考的消除半衰期( t 1 ，2 ) 、 表观分布容积( v d ( s s ) ) 、总体清除率( c l ) 分别为8 2 6 h 、1 4 4 3 l k g 、1 2 1 l k g h ， 氟苯尼考胺消除半衰期和代谢率( m r ) 分别为2 0 2 8 h 、9 3 ；口灌给药后，氟苯 尼考达峰浓度( c 一) 、达峰时间( t 一) 、消除半衰期、生物利用度( f ) 分别为 2 4 9 m g k g 、l h 、1 0 0 1 h 、2 1 6 ，氟苯尼考胺的消除半衰期和代谢率分别为1 6 o h 、 3 7 5 。 对克氏原螯虾按5 0 m g k g 剂量单次1 2 1 灌氟苯尼考后，分别于6 、8 、1 2 、1 8 、2 4 、 3 6 h 采样，每时间点取样4 只，检测其肌肉和肝胰脏中的氟苯尼考和氟苯尼考胺含 华中农业大学2 0 1 0 届硕士学位论文 量。结果表明，氟苯尼考在肝胰脏中消除半衰期为1 6 9 h ，低于氟苯尼考在肌肉中 的消除半衰期2 1 h ，氟苯尼考胺在两组织的消除速率相差不大。肝胰脏中标示残留 物( 氟苯尼考和氟苯尼考胺之和) 的含量高，消除慢，是残留检测的靶组织。若规 定标示残留物在螯虾可食组织中残留限量为o 1 m g k g ，建议休药期不小于5 d 。 关键词：氟苯尼考；氟苯尼考胺；药动学；残留；克氏原螯虾 氟苯尼考在克氏原螯虾体内的药动学及残留研究 a b s t r a c t f l o r f e n i c o l ，t h e t h i r dg e n e r a t i o no fc h l o r o m y c e t i nw i t ht h ec h a r a c t e r i s t i co f b r o a d s p e c t r u m ，h i ：g he f f i c i e n c y , s a f e t y , a n i m a l - s p e c i f i c ，h a s b e e nw i d e l yu s e di n a q u a c u l t u r e t h i ss t u d yw a sd e s i g n e dt od e v e l o pa t ld e t e r m i n a t i o nm e t h o df o r f l o e f e n i c o l a n di t sm a j o rm e t a b o l i t e ，f l o r f e n i c o la m i n e ，i nr e ds w a m pc r a y f i s ht i s s u e s ，a n dt h e n i n v e s t i g a t e dp h a r m a c o k i n e t i c s a n dr e s i d u e s d e p l e t i o no ff l o r f e n i c o li nr e ds w a m p c r a y f i s h ，i no r d e rt op r o v i d eu s e f u li n f o r m a t i o nf o ra p p r o v a lo f f l o r f e n c o li nc r a y f i s h w i t hm c h n i q u eo fl i q u i d - l i q u i da n ds o l i dp h a s ee x t r a c t i o n ，t h eh l p cm e t h o do f s i m u l t a n e o u sd e t e r m i n i n gf l o r f e n i c o la n df l o r f e n i c o la m i n ei nc r a y f i s ht i u s s e sh a sb e e n d e v e l o p e d t h el i m i t so fd e t e c t i o no ff l o r f e n i c o la n df l o r f e n i c o la m i n ei nh e m o l y m p h ， m u s c l ea n dh e p a t o p a n c r e a sw e r eo o l m g la n d0 0 1 5 m g l ，0 0 2 m g k ga n d0 0 3 m g k g ， 0 0 3 m g k ga n d0 0 5 m g k gr e s p e c t i v e l y , t h er e c o v e r yv a l u e so ff l o r f e n i c o la n d f l o r f e n i c o l a m i n ew e r ef r o m7 8 8t o9 4 2 m l m i v es t a n d a r dd e v i a t i o n sw e r el e s st h a n8 16 a tt h e r a n g eo f0 0 2 5 - 2 0 m g k g ，t h er e g r e s sl i n e a re q u a t i o n sa n dr e l a t i v ec o e f f i c i e n t s w e r e y = 1 1 0 4 2 x - 0 3 5 5 ，r = 0 9 9 9 8 6a n dy = 9 1 1 1 6 x + 0 3 5 2 ，车o 9 9 8 7 3 a tt h er a n g eo f 0 0 5 - 1 0 m g k g ，t h er e g r e s sl i n e a re q u a t i o n sa n d r e l a t i v ec o e f f i c i e n t so ff l o r f e n i c o la n df l o r f e n i c o l a m i n ei nm u s c l ea n d h e p a t o p a n c r e a s w e r ey = i1 0 4 2 x - 0 3 5 5 ，r = 0 9 9 9 8 6a n d y = 9 1 1 2 x + 0 3 5 2 ，r = 0 9 9 8 7 3 ，y = 1 0 9 9 0 x 一0 1 3 8 ，r = 0 9 9 9 6 9a n dy = 9 1 5 3 x + 0 3 6 6 ， r = 0 9 9 9 6 8r e s p e c t i v e l y t h er e s u l ts h o w e dt h a tt h i sm e t h o di ss u i t a b l ef o rs t u d yo n p h a r m a c o k i n e t i c s o ff l o r f e n i c o la n dt h er e s i d u ed e t e r m i n a t i o no ff l o r f e n i c o la n d f l o r f e n i c o la m i n ei nc r a y f i s h t h ep h a r m a c o k i n e t i c so ff l o r f e n i c o l ( f f ) a n di t sm e t a b o l i t e ，f l o r f e n i c o la m i n e ( f f a ) w a si n v e s t i g a t e df o l l o w i n gas i n g l ei n t r a - s i n u sa d m i n i s t r a t i o n ( i v ) o f2 0 m g k go ro r a l a d m i n i s t r a t i o n ( p o ) o f5 0 m g k gb o d yw e i g h to f f fi nr e ds w a m pc r a y f i s ha t21 1 c f f a n df f ac o n c e n t r a t i o n si nh e m o l y m p hw e r ed e t e r m i n e db yah i g h - p e r f o r m a n c el i q u i d c h r o m a t o g r a p h ys p e c t r o m e t r y h e m o l y m p hc o n c e n t r a t i o n t i m ed a t a a f t e ri v o r p o a d m i n i s t r a t i o nw e r ea n a l y z e db yan o n c o m p a r t m e n tm e t h o do f3 p 9 7 f o l l o w i n gi v i n j e c t i o n ，t h ee l i m i n a t i o nh a l f - l i f e ( t i 2 ) t h ev o l u m eo fd i s t r i b u t i o n ( v d ( s s ) ) ，t h et o t a lb o d y i i i 华中农业大学2 0 1 0 届硕士学位论文 c l e a r a n c e ( c l ) o ff fw e r e8 2 6 h ，1 4 4 3 l k g ，1 2 1 l k g l lr e s p e c t i v e l y t h ee l i m i n a t i o n h a l f - l i f e ，m e t a b o l i t er a t e ( m r ) o ff f aw e r e2 0 2 8 h 、9 3 a f t e ro r a la d m i n i s t r a t i o n ，c n 姒。 t l 咖，t u 2a n db i o a v a i l a b i l i t y ( f ) o ff fw e r e2 4 9 m g k g 、l h 、1 0 0 1 h 、2 1 6 t ma n dm r o ff f aw e r e1 6 o h 、3 7 5 f o l l o w i n gas i n g l eo r a ld o s eo f5 0 m g k gb o d yw e i g h t ，f l o r f e n i c o la n df l o r f e n i c o l a m i n ec o n c e n t r a t i o n si nm u s c l ea n d h e p a t o p a n c r e a sw e r es i m u l t a n e o u s l yd e t e c t e da t6 ，8 ， 12 ，18 ，2 4 ，3 6 h ，f o u rc r a y f i s ha te v e r ys a m p l ep o i n t t h er e s u l tr e v e a lt h a tt h ee l i m i n a t i o n h a l f - l i v eo ff l o r f e n i c o li nh e p a t o p a n c r e a sw a s1 6 9 hs h o r t e rt h a n2 1 hi nm u s c l e e l i m i n a t i o nh a l f - l i v eo ff l o r f e n i c o la m i n ew e r es i m i l a ri nb o t ht i u s s e s h e p a t o p a n c r e a s w a st h em a i nr e s e r v o i ro ft h em a k e rr e s i d u e ( t h es u mo ff l o r f e n i c o la n df l o r f e n i c o la m i n e ) i nr e ds w a m pc r a y f i s hb e c a u s eo fh i g h e rc o n c e n t r a t i o na n ds l o w e re l i m i n a t i o no ft h e m a k e rr e s i d u ei ni t w i t h d r a wt i m ei sm o r et h a n5 dw h e nt h em a x i m u mr e s i d u ei s o 1m g k gf o re d i b l et i s s u e si nc r a y f i s h k e y w o r d s ：f l o r f e n i c o l ；f l o r f e n i c o la m i n e ；p h a r m a c o k i n e t i c s ；r e s i d u e ；r e ds w a m p c r a y f i s h ； i v 氟苯尼考在克氏原螯虾体内的药动学及残留研究 缩略语表 简称 中文全名 m i c m b c t l ，2 a t 1 肋 c l v d ( s s ) 、v f a u c c 脚x t m m r f f f 阡a m r l h p l c s n f d a v d d 最小抑菌浓度 最小杀菌浓度 吸收半衰期 消除半衰期 总体清除率 表观分布容积 药时曲线下面积 峰浓度 达峰时间 代谢率 生物利用度 氟苯尼考 氟苯尼考胺 最大残留限量 高效液相色谱 信噪比 美国食品药品管理局 加拿大兽药局 v 氟苯尼考在克氏原螯虾体内的药动学及残留研究 第一章文献综述及研究的目的与意义 1 1 氟苯尼考理化性质和氟苯尼考及氟苯尼考胺的结构 氟苯尼考为甲砜霉素的单氟衍生物，分子式为c 1 2 h 1 4 c l 2 f n 0 4 s ，为白色或类 白色、无臭的结晶性粉末，极易溶解于二甲基甲酰胺和甲醇，极微溶于水和氯仿。 氟苯尼考胺是氟苯尼考主要代谢产物，呈弱碱性，分子式为c l o h l 4 f n 0 3 s ，两物质 的结构如下图1 1 h i h v r i 、! h v r ( a ) 氟苯尼考的化学结构，c h e m i c a ls t r u c t u r eo ff l o r f e n i c o l ( b ) 氟苯尼考胺的化学 结构c h e m i c a ls t r u c t u r eo ff l o r f e n i c o la m i n e 1 2 氟苯尼考在动物中的应用现状 氟苯尼考是氯霉素和甲砜霉素的替代药物。在水产养殖的方面，日本在上市之 初就批准其用于治疗黄尾蛳、真鲷、日本竹荚鱼、罗非鱼、鳗鲡等假结核性巴氏杆 菌病和链球菌病；中国1 9 9 9 年批准氟苯尼考用于鳗鲡爱德华氏病和赤鳍病的防治， 在欧洲和北美，氟苯尼考主要用于斑点叉尾鲴和鲑鱼的细菌性疾病防治。在畜禽方 面，氟苯尼考主要用于治疗溶血性巴氏杆菌和睡眠嗜血杆菌引起的呼吸性系统疾病 ( 徐力文等，2 0 0 5 ；m o o r e ，2 0 0 7 ) 。 华中农业大学2 0 1 0 届硕士学位论文 1 3 氟苯尼考药效学研究概况 氟苯尼考作用机制如氯霉素和甲砜霉素，主要是阻止细菌肽酰转移酶的转肽反 应，抑制细菌蛋白的合成。氟苯尼考在结构上取代基团的改变使其降低了毒性和耐 药性的产生，因此具有更高的应用价值，目前不少学者对氟苯尼考的药效学进行了 研究。b 仕金等( 2 0 0 2 ) 研究表明氟苯尼考对禽败血支原体( m g ) 的m i c 为1 2 5 m g l ， 采用氟苯尼考混饲给药方式对感染m g 的鸡连续治疗5 d ，不同剂量组的死亡率为 0 3 6 7 ，而对照组死亡率为2 5 。王小莺等( 2 0 0 4 ) 研究发现，氟苯尼考及对照 药物氯霉素、红霉素、林可霉素、s m z 、氟哌酸对鸭疫里氏杆菌的体外m i c 分别 为l m g l 、2m g l 、4m g l 、3 2 m g l 、6 4m g l 、8m g l ；按1 0 、2 0 、3 0 m g k g 剂量 以灌胃法对感染鸭疫里氏杆菌的鸭进行内服治疗，连续用药l d ，l d l 次，给药1 5 d 后，各试验组的治愈率分别为8 0 7 、9 0 、9 3 3 ，相比于3 0 m g k g 氯霉素组8 2 1 的治愈率，氟苯尼考的治疗效果整体优于氯霉素。苑丽等( 2 0 0 5 ) 研究结果显示， 氟苯尼考、氯霉素、甲砜霉素、多西环素对鸡大肠杆菌的m i c 分别为1 6 、1 6 、6 4 、 3 2 m g l ，m b c 分别为1 6 、1 6 、1 2 8 、6 4 m g l ，氟苯尼考对鸡大肠杆菌的体外抗 菌活性与氯霉素相似，但明显优于甲砜霉素，氟苯尼考在2 、4 、8 m i c 产生的体外 抗菌后效应( p a e ) 的范围为1 4 5 2 0 7 h ；在1 0 m g k g 体重的口服剂量下，感染大 肠杆菌的氟苯尼考组的治疗效果与甲砜霉素相差不大，在2 0 m g k g 口服剂量下，氟 苯尼考组的治疗效果要高于多西环素组，3 0 m g k g1 2 1 服氟苯尼考的试验组治愈率和 相对增重率明显高于给药剂量为5 0 m g k g 的氯霉素组。张旭等( 2 0 0 6 ) 采用了菌落 计数法测定氟苯尼考对禽多杀巴氏杆菌的体外抗菌后效应( p a e ) 、抗菌后亚抑菌浓 度效应( p a s m e ) 及亚抑菌浓度效应( s m e ) ，结果表明：氟苯尼考在2 8 m i c 范 围内对禽多杀性巴氏杆菌的p a e 为1 3 1 - 5 0 1 h ，p a s m e 为1 6 6 2 4 2 0 h ，s m e 为 o 0 5 1 3 1 h 。王海花等( 2 0 0 8 ) 进行氟苯尼考和多西环素联合给药对人工诱导鸡的 慢性呼吸道疾病的疗效试验，相对于单一药物的治疗效果，联合用药优势明显，治 疗效果随剂量的增加而增强。郭闯等( 2 0 0 3 ) 从患病的水产动物体内分离出1 4 株 气单胞菌并进行药敏试验发现，细菌氟苯尼考等药物为高度敏感，抗菌效果最佳。 廖昌容等( 2 0 0 5 ) 测定了氟苯尼考等4 种抗菌药对6 种常见海洋致病弧菌的最小抑 茵和杀菌浓度，氟苯尼考、氯霉素、土霉素、恩诺沙星的m i c 范围分别是2 。4 m g l 、 2 氟苯尼考在克氏原螯虾体内的药动学及残留研究 1 - 3 2m o s t , 、4 - 1 2 8m g l 、o 1 2 5 - 1m g l ，m b c 分别为4 - 8m g l 、2 1 2 8m g l 、8 - 1 2 8 m g l 、o 1 2 5 - 2 m g l ，氟苯尼考和恩诺沙星都显示较强的抗菌活性。吴亮等( 2 0 0 8 ) 研究了氟苯尼考和4 种中药对从病鳗鲡体内分离出来的2 4 株致病菌的最小抑菌和 杀菌浓度，结果表明，其中1 6 种菌对氟苯尼考敏感，3 4 种氟苯尼考和中药的联用 复方对1 5 株致病菌有协同和相加作用。刘永涛等( 2 0 0 9 ) 发现除爱德华氏菌外， 嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、点状气单胞点状亚种、鳗弧菌、荧光假单胞菌、柱 状嗜纤维菌这些常见的水产致病茵对氟苯尼考相当敏感。g a u n t 等( 2 0 0 3 ) 按不同 剂量以混饲投喂的方式用氟苯尼考治疗感染爱德华氏菌引起的肠道败血症，试验组 的死亡率为0 1 2 5 显著低于对照组的5 7 5 。从上述抑菌和治疗试验可以看出， 氟苯尼考对于动物细菌性疾病有良好的防治效果。 1 4 氟苯尼考的毒理学研究概况 目前，氟苯尼考毒理学研究主要集中在组织毒理和免疫毒理上。l u n d e n 等( 1 9 9 9 ) 研究发现虽然口服氟苯尼考对疖疮病和弧菌病免疫的虹鳟体内的抗体水平和循环白 细胞数量没有显著影响，但是虹鳟头肾t 、b 细胞分裂素诱导的扩增能力及噬菌能力 会受到抑制，在用灭鲑气单胞菌人工诱导的感染实验中，氟苯尼考组的相对成活率 为8 8 ，比对照组9 8 低。g a i k o w s k i 等( 2 0 0 3 ) 以推荐使用剂量( 1 0 m g ( k g d ) ) 的 3 倍和5 倍投喂2 0d ，造成鱼头肾、后肾及脾脏中造血组织或淋巴生成组织的减少。 徐力文等( 2 0 0 5 ) 研究氟苯尼考对杂色鲍稚鲍9 6 h 的毒性试验，其l c s o 为( 1 6 2 6 7 _ _ 1 7 4 1 ) m g l ( 9 5 置信限) ，鲍消化腺和肾脏损伤严重，而其他器官未见明显病变。张丽敏 等( 2 0 0 7 ) 以o 、5 、1 0 、2 0 m g k g l 拘氟苯尼考腹腔注射红笛鲷发现，2 0 m g k g 组红笛 鲷血清中碱性磷酸酶a k p ，超氧化物歧化酶s o d 活力、溶菌酶、抗体i g m 均受显著 性抑制( p 戊烷磺酸钠；荧光检测器相对于紫外可见检测器灵敏度更高。 1 6 氟苯尼考药动学研究概况 1 6 1 药动学概述 药力学全称药物代谢动力学( p h a r m a c o k i n e t i c s ) ，它是应用动力学原理与数学 模式，定量研究药物在动物体内分布和消除规律的- - 1 7 学科，其基本研究任务建立 理论模型，求解相应的药动学参数。药动学研究对临床给药方案的制定新药或新剂 型的开发就有重要的指导意义。 采用药动学分析模型对药时数据进行分析是药动学的核心内容。目前药动学普 遍应用的模型是房室模型，然而，非房室模型的统计矩原理和基于生理学的药动学 模型( p b p k ) 因客观性强，因此具有更大的应用潜力。经典房室模型是从速率论出 发，依据药物在各组织或器官的转运速率来划分房室，并不代表解剖学和生理上的 结构，却与生理学和解剖学特性存在一定联系( 血流量、膜通透性等) 。它可以较 6 氟苯尼考在克氏原螯虾体内的药动学及残留研究 多的反映药物在体内动态变化的药动学参数，有助于阐明药物作用的规律性，但限 制性假设多( 相对于非房室模型) ，而且实际数据与房室模型理论有时吻合很不理 想，导致模型的选择具有不确定性。非房室统计矩方法是以概率论和数理统计学中 的统计矩( s t a t i s t i c a lm o m e n t ) 方法为理论基础，解析药时数据。其最大优点是限制 性假设少，客观性强。基于生理学模型则是建立在机体的生理生化、解剖和药物热 力学基础上的一种整体模型，其优点是可将模型外推于其他条件和种类( 王广基等， 2 0 0 5 ；操继跃等，2 0 0 5 ) 。 1 6 2 氟苯尼考在畜禽体内的药动学研究概况 a d a m 等( 1 9 8 7 ) 按1 l m g k g 剂量和1 2 h 次给小肉牛静注和口灌氟苯尼考7 次， 静注后，t l 2 b 为2 2 2 8 m i n ，t 1 2 a 为7 9 4 m i n ，v d 和c l 分别为0 9 0 7 l k g 和 2 8 7 m l _ k g m i n ，因吸收率不同的影响，第一次口灌后的t 1 2 1 为1 6 7 4 5 3 4 9 m i n 小 于第七次口灌后的t l 2 6 1 9 0 8 0 8 8 m i n ，f 为8 8 8 8 。相比脑、房水( a q u e o u sh u m o r ) 、 脑脊液，氟苯尼考在尿、肾、胆汁中浓度较高。l o b e l l 等( 1 9 9 4 ) 研究发现，静注 给药后，牛的药时曲线符合三室模型，t l 2 b 、c l 、v d 分别为1 5 9 m i n 、3 7 5 m l m i n k g 、 7 6 1 m l j k g ，肌注给药组中因剂型和注射位点的影响，其t 1 2 b 为1 0 9 8 m i n 显著高于 静注组，f 范围为5 9 3 1 0 6 。在血药浓度为3 9 9 m l 的情况下，氟苯尼考与血浆 蛋白结合率为1 3 2 。 蒋红霞等( 2 0 0 1 ) 以2 0 m g k g 单剂量对猪静注、肌注、口灌氟苯尼考，高效液 相色谱法检测血药浓度、非房室模型统计矩原理分析处理。静注组药动学参数为 a u c 9 0 1 3 m g ( l h ) 、m r t 6 8 4 h 、c l 0 2 3 l ( k g h ) 、v s s l 5 3 l k g 、t l ，2 b 6 7 2 h ； 肌注组和口灌组的t l ，2 b 明显长于静注组，氟苯尼考在口灌给药下的利用度高于肌注 组。l i u 等( 2 0 0 3 ) 对健康和感染胸膜肺炎放线杆菌的猪体内氟苯尼考药动学进行 了研究。静注组给药组数据符合二室模型，t 1 2 a 、t l ，2 b 、a u c 、v d 分别为0 3 7 h 、 2 9 1 h 、6 4 8 6 9 9 m l 、1 2 l k g ：肌注组和口灌组数据分别符合一室模型和一级吸收的 二室模型，血浆中c 姒、t l 也、t 1 肋和f 分别为4 o o 和8 1 lp g m l 、o 1 2 和3 9 1h 、 1 3 8 8 和6 5 3h 、1 2 2 7 和1 1 2 9 。研究表明，氟苯尼考在猪体内吸收迅速和完全， 消除较慢，分布广泛，健康的猪与感染的猪体内的药时曲线并无统计学差异。 7 华中农业大学2 0 1 0 届硕士学位论文 s h e n 等( 2 0 0 2 ) 以单剂量3 0 m g k g 对健康和大肠杆菌人工诱导感染的肉鸡静注、 肌注、口灌氟苯尼考分别研究药动学特征。静注给药组中健康和感染的肉鸡都符合 二室开放模型，药动学参数c l 和a u c 的值相差不大，但感染的肉鸡t l 胁和v d 相应减小；肌注和口灌给药组药时数据符合一室开放模型，t 1 协分别为1 2 9 _ 1 3 m i n 、 1 0 4 _ 1 5 m i n ，f 分别为8 7 、7 1 。胡顶飞等( 2 0 0 2 ) 将3 6 只肉鸡分为4 组，分别 以1 5 m g k g 、3 0 m g k g 两种剂量静注、肌注氟苯尼考，静注组药时曲线符合二室开 放模型，肌注氟苯尼考药时曲线符合一室开放模型，同种给药方式不同剂量的曲线 下面积a u c 与剂量呈比例关系，其余各参数无剂量依赖性。 李秀波等( 2 0 0 3 ) 研究氟苯尼考在绵羊体内的药动学。静注组药时曲线符合三 室模型，主要动力学参数t l 伪、t l 肪、v d 、c l 、a u c 分别为1 5 4 - 0 0 6 h 、1 9 4 7 + 7 6 4 h 、 1 8 7 ：l - 0 2 6 l k g 、0 2 5 _ + 0 0 5 l k g h 、7 7 3 5 + 1 0 2 4 9 9 h m l 。肌注组药时曲线符合一室模 型，2 0 m g k g 剂量组与3 0 m g k g 剂量组a u c 与剂量成比例关系。s h e n 等( 2 0 0 4 ) 以2 0 、3 0 m g k g 单剂量给绵羊静注和肌注氟苯尼考，静注的两组数据都符合三室开 放模型，t l 2 a 分别为1 - 5 14 - 0 0 6 h 和1 5 9 o 1 0h ，t l ，2 b 为1 8 8 3 6 7 6 h 和1 8 7 14 - 1 8 5 h ，c l 为0 2 64 - 0 0 3 和0 2 5 - 4 - 0 0 1l k g h ，v d 为1 8 64 - 0 1 1 和1 7 14 - 0 2 0l k g ， a u c 为7 6 3 1 9 1 7 9 9 h m l 和11 9 2 1 2 0 5g g h m l ，除a u c 之外，两剂量组其 他相应药动学参数表现出无剂量依赖( p o 0 5 ) 。肌注组的药时数据符合一室开放 模型，t l 伽为0 2 7 0 0 3 和o 2 5 o 0 9h ，t l 2 b 为1 0 3 44 - 1 1 l 和9 5 74 - 2 8 4h ，c m a x 为4 1 34 - 0 2 9 和7 0 4 1 6 1 “g m l ，不同剂量的生物利用率分别为8 9 0 4 ( 2 0 m g k g ) 和8 5 5 2 ( 3 0 m g k g ) 。a l i 等( 2 0 0 3 ) 采用微生物法检测血药浓度， 二室模型和非房室模型统计原理计算药动学参数，研究2 0 m g k g 静注和肌注后，氟 苯尼考在骆驼、绵羊和山羊体内的药动学规律。数据表明，绵羊和山羊对氟苯尼考 的吸收和消除能力相似，骆驼的吸收比率和程度则更高。 a b de 1 a t y 等( 2 0 0 4 ) 研究3 0 m g k g 静注、口灌、肌注下氟苯尼考在兔体内的 药动学。采用微生物方法检测血浆浓度，非房室模型分析数据，静注组t l ，2 b 为1 5 4 h ， 短于肌注组和1 2 灌组的3 o l 和2 5 7 h ，v s s 为0 5 7 i j k g ，c l 为0 3 4 l k g h ，肌注组 的c m 缸分别为2 1 6 5 和1 5 1 4 p g m l ，对应的t m a x 为0 5 h ，f 分别为8 8 2 5 和5 0 7 9 ， 血浆蛋白结合度为1 1 6 5 ，在兔血浆中并未检测出任何活性代谢产物。p a r k 等 ( 2 0 0 7 ) 研究了以单剂量2 0 m g k g 静注和口灌氟苯尼考后，氟苯尼考及其主要代谢 8 氟苯尼考在克氏原螯虾体内的药动学及残留研究 产物氟苯尼考胺在兔体内的药动学规律。认为氟苯尼考的t 1 伽( 0 9 0 - ! - 0 2 0 h 、 1 4 2 _ + 0 5 6 h ) 低于氟苯尼考胺( 1 8 4 0 1 7 h 、2 3 5 _ - 4 - 0 9 4 h ) 可能是因为氟苯尼考胺更 易与体内大分子结合，而v s s 、c l ( 0 9 4 o 1 9l k g 、0 6 3 _ + 0 0 6 l & g g h ) 不同于e 1 - a t y 的研究结果主要源于不同的检测方法。m r 为6 3 0 3 1 2 6 2 ( 7 5 6 5 1 6 8 5 h ) ，表 明兔体内介导药物代谢的细胞色素酶p 4 5 0 较高，f 为7 6 2 3 1 2 0 2 。陈红伟等 ( 2 0 0 8 ) 对新西兰白兔单剂量( 3 0 m g k g ) 1 3 灌和肌注氟苯尼考，发现口灌组药时 数据符合一室开放模型( w = i c ) ，主要药动学参数为t l 伪、t l 2 b 、t 一、c 一、a u c 、 v f 分别为0 4 6 1 _ + 0 0 6 6 h 、2 0 1 3 0 1 9 5 h 、1 1 8 9 0 1 2 3 h 、7 3 3 2 _ _ 1 0 0 0 m g l 、 3 1 4 4 5 + _ 3 5 6 6 m g h l 、2 9 9 5 _ + 0 3 3 0 l k g ；肌注给药组也符合一室开放模型( w = i c 2 ) ， 与静注组的吸收和消除相似，然肌注吸收速率显著小于口灌。k o c 等( 2 0 0 9 ) 研究 氟苯尼考单次给药后在新西兰白兔体内药动学过程，按2 5 m g k g 剂量给药，血浆药 时数据符合一室开放模型。静注组氟苯尼考t