（有机化学专业论文）皇冠苷a的提取及其衍生物的合成.pdf

郑州大学硕士论文 摘要 皇冠( m a h k o t aa e w a ) 属瑞香科( p h a l e r i a m a c r o c a r p a s c h e f f b o e r l ) 植物，盛 产于印尼。皇冠的叶子、果实、树茎等都有明显的药理作用，在印尼民间，已有 许多病例说明它具有治愈肾病、肝炎、癌症、心脏病、糖尿病、关节炎、前列腺 病、高血压、身虚和精神萎靡等重病症的奇特疗效。本论文对皇冠的化学成分进 行研究，在提取分离的基础上设计合成了以皇冠苷撇o s i d ea ) 为先导化合物 的系列衍生物，并对其衍生物活性进行了初步研究 一、通过硅胶柱、大孔吸附树脂、o d s 反相柱等分离手段，对皇冠果籽化 学成分进行了系统研究，共分离得到5 个化合物，通过光谱分析鉴定了它们的结 构，分别是十四碳酸、争胡萝卜苷、皇冠苷a 、芒果素、蔗糖。 二、为建立皇冠果籽中皇冠苷a 的提取方法，采用超声和回流两种提取方 法，利用分光光度法测定了皇冠果籽中的皇冠苷a 的含量。通过两种提取方法 的对比实验得出，超声提取的效果较好，本法操作简便，可行，重现性好。对皇 冠苷a 的提取工艺进行研究，确定了提取皇冠苷a 的方法，该提取条件具有方 法简便、提取效率高等优点。 三、皇冠苷a ( m a h k o s i d ea ) 属于二苯甲酮类化合物。由于二苯甲酮化合物 具有广泛的生物和药理作用，比如抗氧化剂、细胞毒活性、消炎、抗菌药、抗真 菌、是黄嘌呤氧化酶和单胺氧化酶的抑制剂。为研究皇冠苷a 的构效关系，合 成生物活性更高的化合物，以皇冠苷a 为先导化合物，通过选择性保护，水解， 再与二溴乙烷反应，然后用不同的氨基化合物进行取代，最后脱去苄基保护，得 到每位不同氨基醚的衍生物。另外，利用相转移催化法，用化合物4 b 与弘m 1 溴乏3 ，6 - - - - 乙酰基4 氯- 4 脱氧半乳糖反应，得到化合物4 h ，然后脱除保护基， 得到目标化合物4 i 。 四、共合成得到1 2 个化合物，其中l o 个为新化合物，并对皇冠苷a 衍生物 进行了活性研究。在生物体外活性测定中，化合物柚和4 e 对人食管癌e e 9 7 0 6 的细胞有明显的生长抑制作用，i c 5 0 值分别为：3 0 0 和1 2 5i x g m e 1 。 本论文在研究皇冠果籽化学成分的基础上，对其中主要化合物皇冠苷a 进 郑州大擘硕士论文 行了含量测定，比较乙醇回流和超声提取两种方法；对皇冠苷a 进行了初步的 结构改造；共提取分离和合成化合物1 7 个，其中新化合物1 0 个，他们的结构均 经红外光谱、核磁共振谱、高分辨质谱等鉴定；并对衍生物进行了活性测定。 关键词：皇冠苷a ；芒果素；挥发油；二苯甲酮；结构鉴定；4 氯- 4 脱氧廿d - 半乳糖；k o e n i g s - k n o r r 反应 i i 郜州大学硕士论文 a b s t r a c t m a h k o t ad e w a ( p h a l e r i am a c r o c a r p a s c h e f f jb o e r ow a sw i d e l yd i s t r i b u t e di n i n d o n e s i a , e m p i r i c a l l y , t h es t e m s 、l e a v e sa n df r u i t so fw h i c hw g f eu s e dt oc o n t r o l m a n yd i s e a s e ss u c ha sc u a c e r 、i m p o t e n c y 、h e m o r r h o i d 、d i a b e t e sm e l l i t u s 、a l l e r g i e s 、 l i v e ra n dh e a r td i s e a s e s 、k i d n e yd i s o r d e r s 、b l o o dd i s e a s e s 、r h e u m a t i s m 、h i g hb l o o d p r e s s t 鹏、s t r o k e 、m i g r a i n e 、v a r i o u ss k i nd i s e a s e s 、a g i l e ，a n ds o f o r t h i nt h i s d i s s e r t a t i o n , t h ec h e m i c a lc o m p o n e n t so fm a h k o t ad e w ah a db e e ni n v e s t i g a t e d s y s t e m a t i c a l l y s o m ed e r i v a t i v e so fm a h k o s i d eaw e r ed e s i g n e da n ds y n t h e s i z e d b a s e d0 1 1t h ee x t r a c t i o na n di s o l a t i o no f t h ep l a n t t h ev i t r ob i o a e t i v i t yo f t h e m m s t t l d i e s 1 f i v ec o m p o u n d sw e r ei s o h t e df r o mt h ef n h mo fm a h k o t ad e w g lb yu s i n g v a r i o u sc b 舳哦。印ma n dw e r ee l u c i d a t e db yn m 腿m s ，e ta 1 1 ks 劬】曲珊1 o f t b ec o m p o u n d sw e f e ：m y r i s t i ca c i d 、9 - s i t o s t e r o l - 3 - o p d - g l u c o s i d e 、m a h k o s i d e a 、m a n g i f e r m , g l u c o s e 2 t od e v e l o p eam e t h o do fe x t r a c to ft h ec o n t e n to fm a h k o s i d eai nt h es e e d o fm a h k o t ad e w a 1 1 蟛m a h k o s i d eaw a sd e t e r m i n e db ys p c c t r o p h o t o m c t r yw i t h m a h k o s i d eas t a n d a r d , u s i n gu l t r a s o n i c & x t r a c t i o l la n dr e f l u xe x t r a c t i o n , r e s p e c t i v e l y n 略u l l z a s o n i ca 【h 弼吐o nw a sb e t t e rt h a nr e f l u xe x u l 础o na n dw a ss i m p l e , r e p r o d u c i b l ea n ds u i t a b l ef o rt h e 出糖棚1 i n a 矗o no fm a h k o s i d ea 1 1 bm e t h o do f i s o l a t i o no ft h ec o n t e n to fm a h k o s i d eai nt h es e e do fm a h k o t ad e w aw a ss t u d i e s b a s e do nt h ea n a l y s e so ft h ec h e m i c a lc o m p o n e n t s m a h k o s i d eaw a si s o l a t e da n d p u r i f i e d 田地m e t h o dw a ss i m p l ea n d h a db i g he x t r a c l i o ny i e l d 3 m a h k o s i d eaw a san 跚d e l i v a t i v eo f b e n z o p h e n o n e ，w h i c ho f t e ne x h i b i t e da w i d er a l l g eo fb i o l o g i c a la n dp h a r m a c o l o g i c a la c t i v i t i e s , e g ，a n t i o x i d a n t , e y t o t o x i c ， a n t i i n f l a m m a t o r y , a n t i m i c r o b i a l ，a a t i f u n g a l ，a n di n h i b i t o r ye f f e c t s0 1 1x a n t h i n eo x i d a s e a n dm o n o a m i n eo x i d a s e i no r d e rt os t u d yt h es t r u c t u r e - a c t i v i t yr e l a t i o n s h i po f m a h k o s i d ead e r i v a t i v e s ，t h et a r g e tc o m p o u n d6 - o - a l k y l a m i n ed e r i v a t i v e sw 佻 s y n t h e s i z e d v i as e l e c t i v e p r o t e c t i o n , h y d r o l y z e , r e a c t i n gw i t l i d i b r o m o c t h a n e i 郑州大学硕士论文 s u b s e q u e n ts u b s t i t u t i o no f b r o m og r o u pw i t hd i f f e r e n ta m i n og r o u p sa n dd e p m t e c t i o n o nt h eo t h e rh a a d , w ea t t e m p t e dt ol l s ct h eb a s i cp t cc o n d i t i o n s ( b u 4 n b r , k 2 c 0 3 c h c i 撕1 2 0 ) i nt h eg l y c o s y l a t i o no fb c n z o p h e n o n e4 bw i t h2 ，3 ，6 - t r i 一0 - e 碰4 c h l o r o - 4 - d e o x y 吨- d g a l a c t o p y r a n o s i d y l b r o m i d ea n ds u c c e s s f u l l y g a v e4 h t h e s t r u c t u r e so ft h ed e r i v a t i v e sw e r ec o n f u m e db yi r , h r - m ss p e c w 扎t h e4 ， 4 - d i 一0 - b e n z y lg r o u po n4 hw e r et h e nc o m p l e t l yc l e a v e db yh y d r o g e n o l y s i si nt h e c a t a l y s i so fp d - cu n d e rn o r m a lp r e s s u r ea n dt h ea c e t a t eg r o u p so bt h es u g a rm o i e t y w b ”- er e m o v e dw i t hn a o hi nm e t h a n o lt oa f f o r dn e wg l y c o s i d e4 i 4 1 2c o m p o u n d sw o r ep r e p a r e da n dt e no f t h e mw e r e1 1 0 wc o m p o u n d s t h ev i t r o b i o a e t i v i t yo fm a h k o s i d ea d e r i v a t i v e sw e r es t u d i e s p r e l i m i n a r y 蛐a c t i v i t y r e l a t i o n s h i ps t u d ys h o w e dc o m p o u n d s4 da n d4 eh a v i n go b v i o u sc y t o t o x i ca c t i v i t i e s ( i c s 0 ：3 0 0a n d1 2 5p g m l 1 ，r e s p e c t i v e l y ) i nc o n c l u s i o n , t h em e t h o do f e x t r a c to f t h ec o n t e n to f m a h k o s i d ea i nt h es e e do f m a h k o t ad e w aw a ss t u d i e sb a s e do nt h ea n a l y s e so f t h ec h e m i c a lc o m p o n e n t s ，u s i n g u l t r a s o n i c & x l l - a c t i o na n dr e f l u xe x t r a c t i o n , r e s p e c t i v e l y t h ed e r i v a t i v e sw c r e d e s i g n e da n ds y n t h e s i z e d 1 7c o m p o u n d sw e r ei s o l a t e da n ds y n t h e s i z e da l t o g e t h e r , a n d1 0o ft h e mw e r en o wc o m p o u n d s t h e i rs t m o t u r a sw e r ec o n f i r m e db yn 乙n m i l h r - m ss p e c a 乱t h ev “r ob i o a c t i v i t yo f t h e mw a ss t u d i e s k e y w o r d s ：m a h k o s i d ea ；m a n g i f e r i n ；v o l a t i l eo i l s ；b e n z o p h e n o n e ；i d e n t i f i c a t i o n ； 删o r 洲e o ) 叮- d g a l a c t o s i d e ；k o e n i g s - k n o r rr e a c t i o n 癖州大学硕士论吏 第一章绪论 1 1 天然药物研究概况 1 1 1 开发天然药物的必要性 二十一世纪是生物学的世纪。著名科学家杨振宁认为，2 1 世纪4 0 年代将是生 命科学、医药产业在全球成熟发展的时代。当前人类基因组研究的不断深入，人 类后基因组( 功能基因) 的研究，将带动批新的产业飞跃地向前发展。由于西药 普遍具有毒、副作用及其对某些疑难杂症无能为力的特点，从中药中开发新药越 来越受到人们重视。随着“回归自然”的兴起，从2 0 世纪后2 0 年兴起的天然药物 研究热潮，将持续发展到2 l 世纪5 0 年代l 。 药用植物是开发新药重要来源。1 9 8 3 1 9 9 4 年间全球被批准的新药有5 2 0 种。 其中3 9 种是天然药物或以天然药物作前体开发而成的药物。特别是在抗生素及抗 癌药物领域，有近6 0 - 8 0 种的药物来自天然产物。又如，1 9 9 9 年全球销量最好的 2 0 种非蛋白类药品中有9 种来自天然药物。现今，世界上还有近6 0 的人口还完 全依靠植物药来防治疾病国。 在现代新药研究和开发方面，我国在创新药物前期的基础性研究和后期i 临 床研究，及企业进行创新研究风险投入等方面起步较晚，与发达国家相比还存在 较大差距。但是在天然药物开发方面，我国有着明显的资源优势。调查显示，我 国共有中药资源1 2 8 0 7 种，其中植物药有l l l 4 6 种( 分布在3 8 3 科、2 3 0 9 属中) ，动 物药有1 5 8 1 种( 分布在4 1 5 科、8 6 1 属中) 。矿物药1 2 类8 0 种。因此，如何充分利 用自身的优势来进行新药研究和开发，实现薪药开发从以仿制为主迈向以创新为 主的战略跨跃。是摆在国人面前的严峻课题 3 1 。 1 1 2 天然药物的提取方法 中药中的化学成分复杂，提取中药的有效成分是中药研究现代化的关键，同 时也是保证中药质量和疗效的前提。目前，提取中草药化学成分的方法主要采用 热提取法( 煎煮法，回流提取法) 和浸泡提取法( 渗流法、冷浸法) 等常规提取法【4 1 。 热提取法虽然可以工业化生产，但是溶媒用量很大，耗时长，且容易破坏热敏成 分和氧化成分；渗流法虽然不用加热，但是周期长；冷浸法则是最原始的提取方 郑州大擘项士论史 法，溶媒用量大，耗时太长，提取率也很低。除经典的提取方法外，超临界流体 萃取、亚临界水萃取、加速萃取、微波辅助萃取、超声波辅助萃取、逆流提取等 一批新技术、新设备，已开始应用于中药有效物质的提取研究之中。这些新技术、 新方法既符合中医传统理论，又能极大地提高有效成分的收率和纯度以及中药制 剂的有效性、稳定性。 l 1 3 天然化合物结构鉴定 天然化合物结构鉴定技术得到飞速发展，随着波谱手段的不断进步，未知化 合物的结构测定工作越来越高效、准确，h r - m $ 、3 d n m r 、x 射线单晶衍射 f x - p a yc r y s t a la n a l y s i s ) 在设备、性能及测试技术方面均得到了显著的改善，结 构测定样品量已降低到几毫克就可以完成测定工作。分子量1 0 0 0 以下的大多数天 然化合物，可不经过任何化学降解，仅用常规n m r 技术就可以决定其分子结构。 尤其是高场磁体和梯度场探头的广泛应用，多维n 1 v 吸脉冲技术的开发变得随心 所欲，许多高分子化合物，包括生物蛋白的三维结构通过n m r 就可能测定其结 构。例如，对蛇毒蛋白的结构测定就是其中有代表性的实例阿。 1 1 4 活性天然产物的研究方法 对活性显著的天然化合物进行结构改造，可以降低其毒性、改善生物利用度、 增强天然化合物的活性。如来自于水飞蓟的水飞蓟宾是具有很强抗自由基活性的 天然物质，但由于水溶性差、生物利用度低，影响生物活性的应用。孙铁民旧 等从引入水溶性集团、一定体积基团干扰平面结构减少分子间相互作用力等角 度，设计合成水飞蓟宾衍生物，并采用m d a - t b a 比色法，进行了抗脂质过氧化 实验，结果表明半数以上的化合物具有与水飞蓟宾相似或略强的活性。同时， 对天然活性化合物进行结构改造、合成理想的新药也决非易事，需要天然药物化 学、合成药物化学、药理学、毒理学工作者全力合作、周密设计和长年坚持不懈 地努力才有可能成功。 1 2 瑞香科植物的研究进展 瑞香科植物在世界上约有5 0 属5 0 0 余种，主要分布于热带和温带地区，尤以 非洲最多，我国有9 属9 0 余种植物，它们主要分布于长江以南各地饥。该9 属分剐 是瑞香属( d a p h n e ) 、荛花属( w i k s t r o e m i a ) 、狼毒属( s t e l l e r a ) 、沉香属( a q u i l a r r i a ) 、 2 寿州大擘硕士论文 结香属( 酗咖r 棚回、鼠皮树属( 1 t h a m n o n e u r o n ) 、假狼毒属( s t e l l e r o p s i s ) 、栗庥属 ( d i a t h r o n ) 和毛花瑞香属( e r i o s o t e n a ) 。在中国高等植物图鉴i s 中，根据花的 形态按经典分类学将瑞香科分为荛花亚族( t v i k s t r o e m i i n a e ) 、瑞香亚族( d a p h n i e a e ) 和狼毒亚族( p a s s e r i n i n a e ) ，在我国分布的各属中荛花属属于荛花亚族；瑞香属、 结香属、鼠皮树属和毛花瑞香属属于瑞香贬族；栗麻属、狼毒属和假狼毒属属于 狼霉亚族。瑞香科植物具有较显著的生理活性，也有一定的毒性，所以一直为各 国药学及化学工作者重视。在我国，该科的主要药用植物有荛花( d a p h n eg e n t w a s i e b e tz u c c ) l g j 。了哥王( 职跆f 印d p m 妇i n d i c al i n n ，又名i n d i a ns t r i n g b u s ) 埘。及狼 毒( s t e l l e r ac h a m a e j a s m ed j 近二、三十年来各国学者对瑞香科植物进行了大 量的化学及药理活性的研究。从中分离得到许多类化合物。主要化学成分有香豆 素、黄酮、二萜原酸酯和木脂类化合物等类型【埘，其中瑞香烷型二萜具有较强的 抗肿瘤作用【1 3 6 1 。双黄酮类为各种不同类型的黄酮二聚体，该类化合物主要分布 于裸子植物中，但近来在苔藓，蕨类及被子植物中也不断发现。对瑞香科植物中 的双黄酮类的研究始子上世纪s d 年代初，到目前为止从该科6 种嬗物( d a p h n e o d o r a , d g e 稳七峨aa c u t i l o b a , w i k s t r o e m i ai n d i c a , 形s i k o k i a n a , s t e l l e r a c h a m a e j a s m ed 中分离得到了3 6 个双黄酮类化合物n 1 1 2 1 瑞香科植物中化合物的结构类型 ( 1 ) 香豆素类【l s 4 1 ，4 2 1 h 0 异西璃譬蠢 拿形花内魔 d a p b n o r e 西n 郑州大学硕士论文 h 3 c 国扩 西瑶香素 ( 2 ) 黄酮类协1 乒3 6 1 w i k s t r o l a r - o h d s p b a o d o r i nd ir # h d a p b n o d o r i na r - h d a p b n o d o r t nb r = o h h 一。h 帅一洲 d a p h n o d o r j n e r 蝴 d a p h n o d o r i ng r = o h o h d a p h n o d o r i nj 4 0 h d a p h n o d o r i ncr = h d a p h n o d o r i n1r = o h 郑州大学硕士论文 d s p h n o d o r i nm r = h p n k w a n o ! br = 0 h 啪一 o h o i h l 矽、h 弋 。h u e o c b s m a e j s s m i n 且i ，r pr 产h e h m s e j s s m i n e r f = h , r j 产m e e b t m u e j u m i n er l 。r r 产m e s i k o k i a n i nar l ，r ，m e , 禽觚 7 - m e t b o z y c h s m j e j s s m l nr i = m e r 勘玛# h c b s m s e j s s m i n e 嗍 7 m e t h o x y c h s m s e j s s m i n er 舢 芜花素 酆，i l 大学碛士论文 芫花酯甲 芫花醑乙 芫花酯丙 芫花酯丁 瑞香毒素 - c h = c h c h = c h ( c h 2 ) 4 c h 3 一c 喊h c h = c h ( c h 2 ) 4 c h 3 唐古特瑞香甲素 唐古特瑞香丙素 唐古特瑶香己素 ( i ，2 饱和) c ( 5 i - i s - c 6 h r c 6 , i 1 5 - c , h ，- c 疆1 5 0 c 6 h 5 - c 龇c o o - c h 3 c 0 0 - c h 3 c o o - c 6 h s c o o - h o o c c h ：宅h ( c h h ) 2 ( c h 2 ) 筘h ， c 棚a h = c h c o - h g n i c i d i nc 6 h 5 - c 6 i h s c h = c h c o o - 土沉香毒紊- c h = c h c h = c h ( c h 2 ) 4 c h 3 h h h h h h c h “c h 2 ) j 4 c o - h h h h ( 4 ) 木脂素类【3 知4 0 1 罗汉松树磨酚 6 拉自黔p 郑州大学硕士论文 牛蒡甙a r c t i i a 1 2 2 瑞香科植物的药理活性 ( 1 ) 毒性 瑞香科植物大多数具有一定毒性。对皮肤和粘膜刺激强烈，观朝李时珍的 本草纲目中记载“狼毒根有大毒，可杀飞鸟走兽”瑞香狼毒水提物和精油 对小鼠急性i = 1 服的l d s o 分别为7 ，5 - 1 2 5 眺g 和1 2 5 3 0 0 啦g 。即毒性和副作用并不 大州。但用0 0 5 9 k g 瑞香狼毒根石油醚提取物注射小鼠腹腔，引起惊厥死亡； 用0 4 9 k g 瑞香狼毒根氯仿提取物注射小鼠腹腔，四肢无力，伏地惊厥死亡f 4 5 】。 瑞香狼毒全草有毒，但以根的毒性最大【1 1 】牛羊易发生误食中毒，马和其它家畜 很少发生中毒。每年早春，牛羊抢青误食瑞香狼毒，常造成死亡牛羊误食中毒 后，能引起呕吐、腹痛、腹泻、四肢无力、卧地不起、全身痉挛、头向后弯、心 悸亢进、粪便带血，严重时虚脱或惊厥死亡，母畜接触后可导致流产人接触时， 可引超过敏性皮炎，根粉、花粉对入眼、彝、喉有较强烈而持久的辛辣性刺激【1 1 1 ( 2 ) 药理活性 瑞香狼毒有逐水祛痰。散结杀虫的作用主治水肿腹胀、心腹疼痛、各种皮 肤病、肺结核、恶性肿瘤、滴虫性阴道炎、慢性气管炎、坐骨神经痛掣1 1 】永 类钤方记载：“治久年干疥干癣及一切癞疮”。本经记录：。主咳逆上气、 破积聚、饮食、寒热、水气、恶疮、鼠瘘疽蚀、蛊毒”。瑞香狼毒有抗癌作用， 其抗肿瘤成分主要存在于瑞香狼毒水溶物中，采用水一醇法制成永溶性注射液及 以蒸馏法制成的精油注射液制剂，这两种制剂对小鼠移植性肿瘤具有一定的抑制 作用。另外，瑞香狼毒腹腔注射和口服均能抑制i 席w i s 肺癌，并对小鼠移植肿瘤 s - 1 8 0 ，u - 1 4 肿瘤有抑制作用，临床试用也证实它有抗癌性。从瑞香狼毒中用甲 醇提取的二萜化台物尼地吗啉( g n i d i m a c r i n ) 有较强的抗癌活性。它是瑞香狼毒抗 7 邦州大学硕士论文 癌作用的主要成分嘲。瑞香科植物芫花( d a p h n eg e n k w as i e b e tz i l c c ) 的枝条俗称 “芫花条”，芫花条与绿豆组成抗风湿疼痛中成药“消络痛”的主要处方，对某 些因风湿而引起的关节疼痛具有一定的疗效【4 8 】。从芫花条中提取得到的西瑞香素 ( d a p h n o r e t i n ) ，据报道它对实验小鼠营养性血流量有明显的改善作用，并具有抗 肿瘤活性嗍。7 0 年代初，s c h i l d n e c 和s t o u t 等首先从瑞香科植物中分得活性成分 欧亚瑞香素( m e z e r e i n ) 和瑞香毒素( d a p h n o t o x i n ) ，结构分析属于二萜原酸酯类化合 物。研究表明这一类化合物具有抗肿瘤作用。我国学者先后从芫花中分离得到四 种新的二萜原馥醅类化合物，药理实验证弱他们具有较强的抗生育作用i 姗。中国 科学院上海药物研究所对瑞香科植物的二萜类化合物唐古特瑞香甲素、乙素、丙 素和己素、瑞香毒素、土沉香毒素、g n i d i t r i n ，g n i d i c i n 和芜花丁酯的抗生育活性 及其构效关系进行了研究。从动物和临床实验证明芫花甲酯和乙酯具有良好引产 作用【4 3 】 ( 3 ) 对昆虫的生物活性 瑞香科中以下植物有杀虫活性，它们分别是瑞香狼毒、芫花( d a p h n e g e n k w a ) 、河朔荛花( w i k s t r o e m i ac h a m a e d a p h n e ) 、南岭荛花( w i k s t r o e m i a i n d i c a ) 、 凹叶瑞香( d a p h n er e t u a a ) 、唐古特瑞香( d a p h n et a n g u t i c a ) 以及尖瓣瑞香( d a p h n e a c t - t i l o b a ) 。将瑞香狼毒根晒干研成细粉，翻地时放入沟内，可杀死地下害虫； 其水浸液喷洒可防治菜粉蝶幼虫、猿叶虫及蚊子幼虫；用其做成人工毒饵可诱杀 粘虫、苍蝇。其茎叶加水煎熬后，浸出液倒人厕所，可杀死苍蝇幼虫。张国洲等 就瑞香狼毒粗提取物及其4 种活性成分对昆虫的生物活性进行了深人地研究，结 果如下：谷甾醇、伞形花内酯、瑞香亭、狼毒色原酮主要存在于瑞香狼毒植物根 乙醇提取物中。茎和叶乙醇提取物中存在的量少，且狼毒色原酮不存在于该植物 茎和叶乙酵提取物中湖。对谷甾酵、瑞香亭和狼毒色原酮这3 种活性成分的作用 机理研究表明：它们破坏了昆虫中腑的组织结构，抑制了昆虫血淋巴酯酶的大部 分主酶带，加强了少部分主酶带。诱导出了个别新酶带，在一定程度上影响了昆 虫中肠酯酶活力、整体昆虫的糖原、血淋巴总糖含量、血淋巴蛋白质含量等。从 而干扰了昆虫体内正常的物质合成与能量转化【1 1 l 。芜花的浸取液对棉蛉虫、稻螟 虫、莱青虫、班蝥等害虫具有较好的杀虫效果，且对人畜无害，是一种理想的无 公害农药。从芜花枝条中提取得到的化合物5 ，4 ，二羟基7 甲氧基黄酮是芫花中 8 郑州大学硕士论文 杀虫有效成分翻。 1 3 皇冠研究概况 皇冠( m a h k o t ad e w a ) 属瑞香科( p h a l e r i am a c r o c w t ，c t 【s c h c f f 】b o c r l ) ，生长于 海拔1 0 - 1 2 0 0 米的山地灌木丛中，最适宜的海拔高度为1 0 0 0 米。主要分布于印 度尼西亚。树高一般约1 s 也5 米，最高可达5 米，寿命1 0 - 2 0 年。枝广展。树 顶冠状形。树皮外层棕绿色，内层树茎白色。根直长达l m ，溢出树汁。叶对生 或互生。外观椭圆形，里细长状，7 1 0 c m 长，2 c m 宽，嫩时浅绿色，老时深绿 色花白色，芳香，呈喇叭状，花2 - 4 朵成一团。果实长在树干上，大小不等， 有独果，也有一串约2 - 4 个成团。未成熟时为绿色，成熟时为红色。果肉和果皮， 味涩，生时有苦味，成熟后有甘味果壁，白色，厚约2 m m ，味涩，微苦果 籽为白色圆形，毒性最大，食后头晕，嘴麻f 5 。 皇冠树来源于印尼巴布要，又由于果子大而取名p h a l e r i am a c r o c a r p a 由于 其神奇的药效，印尼人通俗取名皇冠仙树，帝王仙树。在中瓜哇名叫神奇皇冠树， 有的地方叫药王，英文俗名为t h e c 警o v i n o f g o d 。 在印尼民间，平民百姓用它治疗很多种病症。已有许多病例说明了它具有治 愈肾瘸、肝炎、癌症、心脏病、塘尿病、关节炎、前列腺病、高血压、身虚和精 神萎靡等重病症的奇特疗效。也有治疗轻病的例子，如脚气【5 n 。皇冠神树不仅可 以作为内服药，吃或饮，也可以作为外敷药擦搓皮肤动物实验表明皇冠具有抗 组胺、抗氧化、抗癌的作用【5 1 1 。据报道，该树的叶子，果实，树茎等都有药效作 用，特别对果实用药的使用例子更多。果肉、果壳( 果核与果肉之问的一层) 可药 用。至于对树茎药用的报道很少。其副作用仅是瞌睡和晕醉。据报道，叶子捣碎， 萃取( 用水) 后可治疗痢疾、关节炎和肿瘤。果肉和果皮作为药用是分不开的。味 涩，生时稍微有苦味，成熟后有甘味。即使已成熟了，生吃嘴会发麻，嘴晕。故 要处理才可服用。方法是先捣碎或切成0 5 c m x 0 5 c r u x 0 5 c m 大小，晒干后会收缩、 卷曲，或烤干果肉、果壳都是在果子成熟交红后才可药用，并且要分开处理后 或晒干、炮制浓缩、磨成粉、甚至可以制成速溶饮料。所有的治疗疾病应用病例 都是民阃的，但其化学成分研究尚未见报道。至于临床应用更没有报道。我们考 虑可能是与印尼那些名医、药理专家们大都留学西方，习惯用西药，轻视印尼本 国土药。这与我国“洋为中用，中西医结合，西学中，中学西”的治疗指导思想 9 郑州大擘硕士论文 不同。另外，从其命名也说明了皇冠树的疗效奇特，印尼人自豪地称皇冠神树是 “我们的树”。 虽然皇冠在民间已广泛应用并有显著的药理作用，但到目前为止，尚未发现 关于此植物化学成分的研究报道。为探索其药理作用机理、阐明其作用的物质基 础，对这一植物进行了化学成分的提取、分离和结构鉴定，为此类植物的进一步 开发、应用和研究奠定基础，因而具有重要的现实意义和诱人的应用前景。 1 3 1 皇冠植物化学成分提取方法【5 l 】 由于国外对皇冠的研究很少，并且国内对它的研究几乎没有报道。因此，我 们课题组选用皇冠果籽进行研究，初步确立了皇冠果籽化学成分的提取方案： 皇冠果耔 卜碍般旅缩 菠膏 上大孔吸 s e h e m e l 1 0 癖，i l 大擘项士论文 1 3 2 皇冠化学成分研究 ( 1 ) 皇冠果籽中提取的化合物 5 3 1 现已从皇冠果籽中分离得到十四碳酸( 1 ) 、软脂酸( 2 ) 、硬脂酸乙酯( 3 ) 、4 , 4 二羟基2 一甲氧基二苯甲酮每o b - d 葡萄糖苷，命名为皇冠苷a ( 4 ) 、山萘酚 - 3 n b d 葡萄糖( 5 ) 、p 一胡萝卜苷( 6 ) 、芒果素( 7 ) 和蔗糖( 8 ) 。结构式如下： c h 3 ( c h z ) n c o o hc h 3 ( c h 2 ) 1 4 c o o hc h 3 ( c h 2 ) 1 6 c o o c h 2 c h 3 化台物1 化合物2化合物3 化台钧4 化合钧6 化舍钫0 ( 2 ) 挥发油成分【5 4 1 化台暂5 表1 皇冠果瓤挥发油成分及相对含量 化含物7 编号 l 2 出蜂时间( 秒) 化合物名称百分含量( ) 1 3 8 5 1 4 5 0 4 - 辛烯，2 酮 2 甲基3 乙基戊烯 o 0 1 0 0 4 参洲穆洲 郑州大学硕士论文 1 4 5 8 1 5 4 2 2 1 8 3 3 1 6 7 3 4 0 8 3 9 5 0 4 1 1 7 4 8 1 7 5 4 8 3 6 2 3 3 6 3 5 7 甲苯 毗啶 环己酮 丙二酸二乙酯 十三烷 丁二酸= 乙酯 十四烷 羟基丁二酸二乙酯 十六烷 ( z ) 3 ，7 ，1 1 一三甲基- l 6 ，l o - 十二碳三烯- 3 醇 肉桂酸乙酯 0 o l 1 2 8 0 1 4 o 0 5 0 2 9 0 1 0 o 1 3 0 3 0 o 2 4 0 2 4 o 。4 9 l 2 3 4 5 6 7 8 9 加n 郑州大学硕士论文 1 4 论文研究的目的方法及意义 1 4 1 研究工作的目的及意义 虽然皇冠在民间已广泛应用并有显著的药理作用，但到目前为止，尚未发现 关于此植物化学成分的研究报道。为探索其药理作用机理、阐明其作用的物质基 础，为此类植物的进一步开发、应用和研究奠定基础，因而具有重要的现实意义 和诱人的应用前景。本论文研究工作目的是对有药理活性植物皇冠果籽进行化学 研究及其化学成分的分离、提取和结构的鉴定，确定其活性成分及活性部位，为 皇冠植物资源的进一步开发利用提供理论依据和实验方法。 1 4 2 研究内容和方法 ( 1 ) 提取及分离纯化：对皇冠果籽，用9 5 乙醇回流提取，浓缩回收乙醇， 得到浸膏。用不同的柱填料如硅胶、大孔吸附树脂、o d s 反相硅胶等色谱层析 法或重结晶法分离纯化，得到不同的化学成分。 ( 2 ) 结构鉴定：利用现代分析测试手段进行化合物的结构鉴定，如质谱、红 外光谱、紫外光谱、核磁共振谱等，确定所分离、提纯化合物的结构。 ( 3 ) 对皇冠苷a 进行结构改造，考察其活性变化，为构效关系的研究奠定了 基础。并对所合成的衍生物进行了体外活性测定。 郑州大学硕士论文 参考文献： 1 刘志民欧洲三国天然药物研究的新进展乒夯谚窟与借赢2 0 0 2 ，4 ( 8 ) ：1 5 - 1 8 2 g r a b l e ys ，t h i c c b & d r u gd i s c o v e r yf r o mn a t u r e b e r l i n ，g e r m a n y ：s p r i n g e r ，1 9 9 9 3 赵昱，胡季强天然药物研究开发的未来发展趋势旃红文学学赧俘第囝2 0 0 2 ，3 1 ( 6 ) ：4 7 9 - 4 8 2 4 刘辉琳，唐明林，安莲英等中草药化学成分提取新技术川厂瑚饴 专2 0 0 3 ，6 ，2 8 ( 2 ) ：5 9 - 6 4 5 王金辉天然药物化学的研究现状手夯劢莞与蔗蛊2 0 0 2 ，4 ( 8 ) ：5 - 6 孙铁民水飞蓟宾衍生物的合成及抗脂质过氧化活性的研究功用药鸦吠学博士趁屯 1 9 9 8 7 侯宽昭中国种子植物科属词典( 修订版) 口幢】北京：科学出版社，1 9 8 2 8 中国科学院植物研究所中国高等植物图鉴嗍北京：科学出版社，1 9 7 2 ，9 4 8 - 9 6 2 9 刘长欣，刘思全，贾素贞，王秋芬瑞香科植物芜花杀虫有效成分研究p e s t i c i d e s , 2 0 0 2 ，4 1 ( 3 ) ：2 0 - 2 1 1 0 任海，彭少膀，戴志明，粱晓东，蔡锡安，林永标了哥王( 阡i b w m 面i n d i c a ) 的生态生物 学特征应期r 竺茗学掘2 0 0 2 ，1 3 ( 1 2 ) ：1 5 2 9 - 1 5 3 2 1 1 张国洲，陈于年，王亚维，徐汉虹瑞香科杀虫植物瑞香猿毒华垆舻癌走笋擎扳r 茸 擀群 钧秽2 0 0 0 , 3 4 ( 3 ) ：3 2 6 - 3 3 0 1 2 刘延泽。冀春如，冯卫生译瑞香科植物的化学成分与药理作用【j 】尹掌览1 9 8 7 ，1 8 ( 2 ) ： 3 2 4 1 1 3 杨伟文，邢有权，宋茂森等7 - 甲氧基狼毒素的分离与结构鉴定m 序孝学苈纪学笋掘 1 9 8 4 ，5 ( 5 ) ：6 7 1 - 6 7 3 1 4 t a t e m a t s uh ，k u r o k a w am ，n i w am ，e ta 1 p i s c i c i d a lc o n s t i t u e n t so f s t e l l e r ac h a m o e j m m e l c h e mp h a r mb u l l ，1 9 8 4 ，3 2 ( 4 ) ：1 6 1 2 - 1 6 1 3 1 5 j i nc d ，r o n a l dg m m o h s e nd a n e s h t a l a b p h e n y l p r o p a n o i dg l y c o s i d e sf r o ms t e l l e r a c h a m o e j a s m e j p h 3 n o c h e m ，1 9 9 9 , 5 0 ：6 7 7 - 6 8 0 1 6 冯宝民，裴月湖瑞香狼毒中的黄酮类化合物们乒萎蔹2 0 0 1 ，3 2 ( 1 ) ：1 4 - 1 5 1 7 冯宝民，裴月湖，王永奇六种瑞香科植物中双黄酮类化合物的分布尤蓬走学学撼2 0 0 3 ， 2 4 ( 1 2 ) ：9 5 - 11 2 1 8 郑维发，石枫芫花根中新双香豆素的分离与鉴定药学期：2 0 0 4 ，3 9 ( 1 2 ) ：9 9 0 - 9 9 2 1 4 郑州大学碛士论文 1 9 b a b ak i m i y e , t a k e u c h ix a a 聩k o z a w am i t s u g i t h r e eb i f l a v o n o i d sf r o m 诡胁御l 缸 s i k o l d a n p l o , t o c t n ，1 9 9 4 , 3 7 ( 3 ) ：8 7 9 - 8 8 3 2 0 h uk e ，k o b a y a s h ih i s a y o s h ld o n ga i j o