实验四渗出性炎症病例的复制及炎性细胞的观察.ppt

实验四渗出性炎症病例的复制及炎性细胞的观察,附：豚鼠的尸体剖检,一、实验目的通过复制急性渗出性炎病理模型，观察急性炎症时的外观特征，掌握白细胞的渗出过程和吞噬作用。二、实验内容1.炎症外部症候的观察；2.炎症渗出现象的观察；3.炎性细胞的吞噬现象的观察。,三、实验方法,豚鼠腹腔内注射15蛋白胨3mL，使之形成异物性急性腹膜炎。812小时后，再向豚鼠腹腔内注射10鸡红细胞混悬液1mL。30min后，将豚鼠断颈处死，仰卧固定，剪开腹壁一小口（切勿使内容物流出）。用滴管伸入腹腔吸取1滴腹腔渗出液，推片。自然干燥后，瑞氏染色，显微镜观察。,豚鼠腹腔注射给药的方法,先用右手抓住鼠尾提起，放在实验台上用左手的母指和食指抓住豚鼠两耳和头颈皮肤，将鼠体置于左手心中把后肢拉直，用左手无名指和小指按住尾巴与后肢，前肢可用中指固定即可在腹部后1/2处的一侧注射。进针勿过深，否则易损害肝及血管等，造成出血致死,瑞氏染色步骤,1.取病料涂片、自然干燥2.滴加瑞氏染液染1分钟，染液需覆盖涂片，使标本被其中甲醛所固定3.加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或超纯水)轻轻晃动玻片，均匀静置5分钟4.勿倾倒染液，直接水洗、吸干、镜检,豚鼠的尸检,豚鼠(即天竺鼠,海猪或荷兰猪)是一种重要的实验动物在微生物学和传染病学教学和科研工作中，其尸检技术特别重要。,尸体剖开的方法,将尸体放在瓷盘中或木板上，背卧用剪刀(可手术刀)割离二前肢和二后肢内侧皮肤与肌肉等组织，轻压二前肢和二后肢躺下，使其比较稳定。沿腹部白线经胸骨下至下颌剪开皮肤，并向两侧剥皮，观察皮下组织的变化,沿腹中线切开腹壁，同时从剑状软骨向腰部横切到两侧，腹腔即剖开。割离膈，在胸腔两侧背缘自后向前剪断肋骨和肋间肌,以暴露胸腔器官。分离并割断胸骨舌肌，气管和食管即可显示。,器官的摘出和检查,胸腔剖开后，视检腔体、浆膜和各种器官的变化、位置。剪破心包，使心暴露，摘出，检查。肺与气管一起摘出，按常规检查。尔后摘出脾、肝、消化道。注意对肾上腺的检查，并摘出肾和膀胱。然后摘出并检查生殖器官。,豚鼠的解剖特点,消化道分为食管、胃、小肠和大肠,在小肠中,十二指肠较短,略呈U字形,其间为胰。空肠长而弯曲,主要位于腹腔中部和右侧。回肠自右向左进入盲肠,其入口即为结肠的起始部(盲肠口和回盲口部)。盲肠粗大,略弯曲,其小弯有盲结口,而大弯则附着升结肠前段。盲肠粘膜有灰白色的小区(直径为1cm)即淋巴集结。结肠依次分为升结肠,横结肠和降结肠。升结肠在右侧形成盘旋。降结肠延续到直肠,其末端称肛管。肛管的外口就是肛门。,实验结果观察,豚鼠腹部肿胀、发热腹腔内多量炎性渗出液，较浑浊镜检，大量巨噬细胞游出，并吞噬鸡红细胞（有核）和细小红染蛋白胨颗粒作图，完成实验报告，对渗出性炎症病理模型的复制和原理进行分析讨论。,各组分工配制试剂,一组:0.9%Nacl1000mL,留100mL配鸡红细胞取900mL调至PH6.4(染色用)二组:4%柠檬酸三钠:0.4g+10mL蒸馏水三组:15%蛋白胨:3g+20mL蒸馏水四组:10%鸡红细胞五组:采血(先加抗凝剂),15蛋白胨悬液的配制,称取蛋白胨3g于50mL烧杯加入20mL生理盐水混匀悬液，备用注射时摇匀，3ml/只腹腔注射,10鸡红细胞的配制,1取健康鸡，颈动脉或腋下静脉采血，4%柠檬酸三钠抗凝（提前准备抗凝剂于10mL离心管）。2以3000转离心10min，弃去血浆。