病毒感染的检查方法与防治原则医学幻灯片.ppt

,病毒学,病毒感染的检查方法与防治原则,.,教学目标,熟悉：人工主动免疫和人工被动免疫的常用生物制品。了解：病毒感染的实验室诊断方法。有效抗病毒药物的抗病毒机制及应用价值。,思考：,病毒如此之小和活细胞内寄生，我们如何分离培养及检查？血清学诊断和分子生物学检查的理论基础是什么？可通过什么方式预防病毒的感染？,对抗病毒有招-巴斯德在1889年发明了狂犬病疫苗病毒的面貌清晰地呈现在人们的眼前仅仅百余年的历史，但明确的病毒致病的记载早在四百多年前就有了。早在1566年，疯狗咬人致病的案例已经被记录下来，但直到1885年，人们还不知道狂犬病到底由什么引起。,.,在细菌学说占统治地位的年代，巴斯德的试验为狂犬病的防治开辟了新的路径。巴斯德发现，将狂犬病延髓提取液多次注射兔子后，再将这些毒性已递减的液体注射狗，狗就能抵抗狂犬病毒的侵染。1885年的一天，人们把一个被疯狗咬过的9岁男孩迈斯特尔送来求救，巴斯德给这个孩子注射了毒性减到很低的提取液，然后再逐渐用毒性较强的提取液注射。巴斯德的方法拯救了男孩的生命。,.,第一节病毒感染的检查,检测内容,查病毒,查特异性抗体,病毒颗粒病毒抗原病毒核酸病毒酶类：如逆转录酶,电镜直接观察光镜检查包含体分离培养,一、标本的采集与送检,原则基本与细菌相似，但应注意：1.标本用“双抗”或两性霉素B处理2.低温保存，尽快送检3.血清学诊断采双份血清,二、病毒的分离与鉴定,（一）病毒分离培养方法类型细胞培养（cellculture）鸡胚接种（egginoculation）动物接种（animalinoculation）,标本,无菌处理,细胞培养鸡胚培养动物接种,指标阳性指标阴性,病毒鉴定,盲传23代,指标阴性,病毒阴性,一般程序,1.动物接种最原始应用：尚无敏感细胞的病毒培养动物：兔、鼠、黑猩猩、猴等优点：结果易观察，可建立动物模型缺点：有饲养条件要求，费用高，动物体内常带有潜伏病毒,2.鸡胚接种孵化914天的鸡胚,3.细胞培养在一定条件下用离体的活组织或活细胞培养病毒的方法,证实病毒存在的方法：CPE红细胞吸附及凝集干扰现象pH值改变,细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落如腺病毒等多数病毒,腮腺炎病毒感染细胞,红细胞吸附（hemadsorption）,HA红细胞表面HA受体细胞吸附,病毒胞膜表面血凝素(HA)相应抗体红细胞吸附抑制,红细胞吸附抑制试验,干扰现象（interference）,风疹病毒人胚肾细胞病毒增殖，CPE(),埃可病毒人胚肾细胞病毒增殖，CPE(),人胚肾细胞,风疹病毒埃可病毒,CPE(-)风疹病毒(+)埃可病毒(-)CPE(+)风疹病毒(-)埃可病毒(+),（二）病毒的鉴定,1.形态学鉴定电子显微镜2.病毒的血清学鉴定鉴定病毒种、型、亚型血凝抑制试验、免疫标记3.病毒分子生物学鉴定,三、病毒感染的诊断（一）病毒形态学鉴定,电子显微镜：设备、操作复杂，应用受限光学显微镜：可见大病毒（痘类病毒）或包涵体，对一般病毒检测意义不大,（二）免疫学检查法检查病毒抗原ELISA血凝抑制试验、中和试验检查病毒特异性IgM风疹病毒、甲型肝炎病毒等（三）检查病毒核酸核酸杂交技术PCR技术,第二节病毒感染的防治原则,一、人工主动免疫常用生物制品,灭活疫苗、活疫苗；基因工程疫苗；亚单位疫苗；核酸疫苗,二、人工被动免疫常用生物制品,免疫血清血清丙种球蛋白细胞因子等,三、病毒感染的治疗,干扰素和干扰素诱生剂中草药基因治疗剂治疗性疫苗,抗病毒化学制剂,反义寡核苷酸干扰RNA核酶（ribozyme）,核苷类药物碘苷阿昔洛韦非核苷类反转录酶抑制剂蛋白酶抑制剂其他抗病毒药物,总结,病毒感染的检查方法与一般程序。病毒感染的特异预防病毒感染的治疗,思考题,1.分离病毒的标本和作血清学诊断