（内科学专业论文）营养性贫血中mcl1、bak蛋白的表达及其临床意义.pdf

目录 中文摘要o oo ooo 1 英文摘要4 研究论文营养性贫血中m c l 1 、b a k 蛋白的表达及其临床意义 前言 ”一”“一“一“一”一”o oe ooo oooooo ooo 9 9 刖舌 ”“一“一“一”“一” “ “” 材料与方法o oo oooooo ooo oooooooood ooooo 1 0 结果 1 5 附图 ooooodo o o 2 0 附表 ”一”o oooooooq ooo ooodoo 2 7 讨论”“3 4 结论3 9 参考文献4 0 综述b c l 2 家族成员m c l 1 的研究进展4 3 致谢4 9 个人简历5 0 中文摘要 营养性贫血患者m c l 1 、b a k 蛋白的表达及其临床意义 摘要 目的：营养性贫血是指因缺乏造血所必需的营养物质，使血红蛋白的 合成和或红细胞的生成不足所致的一种可治愈的疾病，包括缺铁性贫血、 巨幼细胞性贫血及混合性贫血。该类疾病在良性血液病中占有一定比例， 其发病机制除造血要素缺乏或不足使血红蛋白合成和红细胞生成减少外， 还与细胞凋亡调控有关。细胞程序性死亡( p r o g r a m m e dc e l ld e a t h ，p c d ) 即凋亡( a p o p t o s i s ) 是细胞自主性的死亡过程，具有时间性和空间性，是 维持多细胞有机体自身稳定的重要负调节机制，广泛参与了胚胎发生、组 织塑性、造血控制、生长发育以及衰老等过程。b 细胞淋巴瘤白血病2 ( b c e l ll y m p h o m a l e u k e l m i a - 2 ，b c l 2 ) 基因家族作为调节细胞凋亡重要 的基因家族之一，有研究证明其中的b c l 2 与b c l 相关x ( b c l a s s o c i a t e d x ，b a x ) 两种基因及其产物在营养性贫血的发生发展过程中起重要调节 作用，而与二者同家族的髓系细胞白血病1 ( m y e l o i dc e l l l e u k e l m i a 1 ， m c l 1 ) 基因与b c l 2 同源拮抗物( b c l 2 h o m o l o g o u sa n t a g o n i s t k i l l e r ，b a k ) 基因已被发现可调节多种实体肿瘤细胞的增殖及凋亡，但其在营养性贫血 中是否有作用尚未明了。本研究拟通过检测营养性贫血患者及健康体检者 血清中m c l 1 、b a k 蛋白的表达水平，分析m c l 1 、b a k 蛋白与营养 性贫血发生发展的关系及其临床意义。 方法：选择2 0 1 0 年3 月至2 0 1 0 年1 2 月间河北医科大学第二附属医 院血液门诊诊断为营养性贫血的患者6 6 例( 缺铁性贫血组2 9 例，巨幼细 胞性贫血组1 5 例，混合性贫血组2 2 例) 作为研究对象。所有病例确诊后 均接受1 个月造血营养要素的治疗。6 6 例营养性贫血患者中有4 4 例( 缺 铁性贫血组1 9 例，巨幼细胞性贫血组1 0 例，混合性贫血组1 5 例) 进行 治疗后复查。所有营养性贫血患者均按照张之南主编的血液病诊断及疗 效标准第2 版确诊。另选健康体检者1 8 例做为正常对照组。 治疗前及治疗后复查的病例进行如下检测：血常规( w b c 、i m c 、 h b 、p l t 、m c v 、m v h 、m c h c ) 、网织红细胞计数( r e t ) 、血清铁蛋白 ( s f ) 、血清铁( f e ) 、血清总铁结合力( t i b c ) 、血清不饱和铁结合力 中文摘要 ( u i b c ) 、叶酸及维生素b 1 2 ( v b l 2 ) 测定、血清m c l 1 蛋白及b a k 蛋白测定；正常对照组进行血常规、网织红细胞计数、血清m c l 1 及b a k 蛋白测定。上述指标检测均在我院实验室完成。血清m c l 1 、b a k 蛋白 测定采用酶联免疫吸附双抗体夹心法( e l i s a ) 完成。 所有数据运用s p s s l 3 0 统计软件处理。符合正态分布的计量资料数 据用均数标准差表示，多组间均数差异性比较采用单因素方差分析 ( o n e w a ya n o v a ) ，组间均数比较采用s n k 检验，治疗前后均数比较 采用t 检验，两因素相关分析采用p e a r s o n 相关分析。p 0 0 5 具有统计学 意义。 结果： 1 正常对照组m c l - i 及b a k 蛋白表达水平正常对照组m c l 1 蛋白表 达水平为( 1 7 4 8 8 士4 3 0 3 ) u g l ，b a k 蛋白表达水平为( 6 7 2 7 + 3 6 3 1 ) p m l 。 2 营养性贫血患者m c l 1 及b a k 蛋白表达水平治疗前的缺铁性贫血 组、巨幼细胞性贫血组、混合性贫血组m c l 1 蛋白表达水平分别为 ( 7 0 5 6 4 - 3 3 4 1 ) u g l 、( 5 18 0 土3 2 3 2 ) u g l 、( 5 2 8 4 4 - 2 9 0 5 ) u g l ，与正常对照组 比较均明显降低，有统计学意义( p o 0 5 ) ；治疗后营养性贫血组组间m c l 1 及b a k 蛋白表达水平间的差异 均不具统计学意义( p o 0 5 ) 。治疗前营养性贫血患者中，轻度贫血、 中度贫血、重度贫血病例的m c l 1 蛋白表达水平分别为 ( 9 9 2 4 4 - 1 9 9 1 ) u g l 、( 5 3 5 4 4 - 1 7 1 3 ) u g l 、( 2 1 3 6 + 0 9 5 0 ) u g l ，差异较大，具 有统计学意义( p o 0 5 ) ；b a k 蛋白表达水平分别为( 5 7 3 9 土2 5 1 8 ) p g m l 、 ( 1 0 3 3 7 + 2 2 3 7 ) p g m l 、( 1 4 2 6 7 4 - 1 8 4 9 ) p g m l ，差别具有统计学意义( p o 0 5 ) 。治疗后的营养性贫血患者复查血常规恢复正常的与未恢复正常 的m c l 1 蛋白表达水平分别为( 1 5 3 2 5 士4 1 3 6 ) u g l 、 ( 1 2 5 0 0 4 - 3 8 4 8 ) u g l ，差异有统计学意义( p 0 0 5 ) ；b a k 蛋白表达水平分别为 中文摘要 ( 5 0 2 3 + 2 0 9 6 ) p g m l 、( 7 9 6 4 + 2 2 0 0 ) p g m l ，差异具有统计学意义( p o 0 5 ) 。 4 营养性贫血患者治疗前后m c l 1 及b a k 蛋白表达水平缺铁性贫血 组患者治疗前与治疗后m c l 1 蛋白的表达水平分别为( 7 0 5 6 + 3 3 4 1 ) u g l 、 ( 1 4 5 0 6 + 4 3 3 7 ) u g l ，b a k 蛋白的表达水平分别为( 9 8 4 3 + 3 5 4 1 ) p g m l 、 ( 5 7 7 1 + 2 5 2 1 ) p g m l ，差别均有统计学意义( p o 0 5 ) ；巨幼细胞性贫血 组患者治疗前与治疗后m c l 1 蛋白的表达水平分别为( 5 1 8 0 4 - 3 2 3 2 ) u g l 、 ( 1 4 4 5 7 + 4 6 0 5 ) u g l ，b a k 蛋白的表达水平分别为( 1 1 3 9 9 4 - 4 2 4 4 ) p g m l 、 ( 4 9 6 6 + 2 1 2 2 ) p g m l ，差别均有统计学意义( p 0 0 5 ) ；混合性贫血组患 者治疗前与治疗后m c l 一1 蛋白的表达水平分别为( 5 2 8 4 + 2 9 0 5 ) u g l 、 ( 1 4 4 9 1 4 - 4 4 7 4 ) u g l ，b a k 蛋白的表达水平分别为( 9 1 9 4 4 - 4 1 7 3 ) p g m l 、 ( 5 9 7 2 4 - 2 3 9 0 ) p g m l ，差别均有统计学意义( p o 0 5 ) 。 5 营养性贫血患者m c l 1 及b a k 蛋白表达水平的相关性对营养性贫 血患者m c l 一1 及b a k 蛋白表达水平进行p e a r s o n 相关分析，结果显示： 营养性贫血患者m c l 1 蛋白与b a k 蛋白表达水平在p 0 0 5 呈负相关， r ：0 8 5 8 ，回归方程为y = 1 3 3 8 4 0 7 5 1 x 。 结论： 1 营养性贫血的发病及恢复过程中均有凋亡调节因子的参与，证明除营养 要素的相对或绝对缺乏外，细胞凋亡调节紊乱也与营养性贫血的发生有关 系。 2 营养性贫血中造血要素的缺乏使细胞凋亡调节紊乱，m c l 1 蛋白表达 降低，b a k 蛋白表达升高，细胞凋亡增强；造血要素的缺乏纠正后，两 种蛋白的表达均可回归到正常水平，提示在临床工作中对营养性贫血的诊 断提供新的诊断依据，根据m c l 1 、b a k 蛋白的表达水平可判断预后； 缺乏不同营养要素对m c l 1 及b a k 蛋白的表达无显著影响。 3 营养性贫血患者血清中m c l 1 蛋白与b a k 蛋白有相互拮抗作用，二 者共同调节细胞凋亡。 蛋白 关键词：营养性贫血；细胞凋亡；细胞凋亡调节；m c l 1 蛋白；b a k 英文摘要 t h ec l i n i c a ls i g n i f i c a n c eo ft h ee x p r e s s i o no fm c l 一1 ，b a ki n n u t r i t i o n a la n e m i a a b s t r a c t o b i e c t i v e ：n u t r i t i o n a la n e m i ai sac u r a b l e d i s e a s e ，i n c l u d i n g i r o n d e f i c i e n c ya n e m i a ，m e g a l o b l a s t i ca n e m i aa n dm i x e da n e m i a ，t h a ti sr e f e rt o h e m o g l o b i nb i o s y n t h e s i s o rr e db l o o dc e l l ( r b c ) f o r m a t i o ni n s u f f i c i e n t b e c a u s eo fl a c k i n go fh e m a t o p o i e t i cn e c e s s a r yn u t r i e n t s t h i sd i s e a s es t i l l a c c o u n tf o rs o m ep r o p o r t i o ni nb e n i g nh e m a t o n o s i s ，a n di t sp a t h o g e n e s i sm a y b er e l a t e dt oc e l la p o p t o s i sr e g u l a t i n gb e s i d e sl o ws u p p l i e so fh e m a t o p o i e t i c e l e m e n tl e a dt oh e m o g l o b i nb i o s y n t h e s i sd e c r e a s eo rr e db l o o dc e l l ( r b c ) f o r m a t i o ni n s u f f i c i e n t p r o g r a m m e dc e l ld e a t h ( p c d ) o ra p o p t o s i si sa n a u t o n o m o u sp r o c e s so fc e l ld e a t hw h i c hh a st i m i n ga n ds p a t i a l a sa n i m p o r t a n tn e g a t i v ea d j u s t i n gm e c h a n i s m ，a p o p t o s i si s r e l a t e dt oe m b r y o p r o d u c i n g ，t i s s u ep l a s t i c i t y ，h e m o p o i e s i sr e g u l a t i n g ，d e v e l o p m e n ta n da g i n go f h u m a n bc e l ll y m p h o m a l e u k e l m i a - 2 ( b c l 一2 ) g e n ef a m i l yi sa ni m p o r t a n t m e m b e ro fa d j u s t i n gc e l la p o p t o s i sg e n ef a m i l i e s ，a n di th a sb e e np r o v e db y s o m es t u d i e st h a tb c l - - 2a n db c l - - a s s o c i a t e dx ( b a x ) g e n e so fb c l 2g e n e f a m i l ya n di t sp r o d u c t sp l a ya ni m p o r t a n tr o l ei nt h ec o u r s ea n dd e v e l o p m e n t p r o c e s so fn u t r i t i o n a la n e m i a t h es a m ea s t h eb c l 一2a n db a xg e n e s ， m y e l o i dc e l ll e u k e l m i a - 1 ( m c l - 1 ) a n db c l - - 2 - - h o m o l o g o u sa n t a g o n i s t k i l l e r ( b a k ) g e n e sb e l o n gt ob c l 一2g e n ef a m i l y ，a n di th a sb e e nd i s c o v e r e dt h a t t h e yc a na d j u s tp r o l i f e r a t i o na n da p o p t o s i so fav a r i e t yo fs o l i dt u m o r sc e l l s ， b u ti ti sb e e nn o tk n o w nt h et w og e n e sa r ew h e t h e ru s e f u lf o rn u t r i t i o n a l a n e m i ao rn o t t h eo b j e c t i v eo ft h i ss t u d yi st od e t e c tt h ee x p r e s s i o nl e v e lo f m c l - 1p r o t e i na n db a k p r o t e i ni ns e r u mo fn u t r i t i o n a la n e m i ap a t i e n t sa n d n o r m a lc o n t r o lp e o p l e ，a n a l y z et h ec l i n i c a l s i g n i f i c a n c eo ft h er e l a t i o n s h i p b e t w e e nm c l 一1a n db a k p r o t e i n sa n dn u t r i t i o n a la n e m i ad e v e l o p m e n t m e t h o d s ：6 6p a t i e n t sd i a g n o s e df o rn u t r i t i o n a la n e m i aa tt h eh e m a t o l o g y d e p a r t m e n to ft h es e c o n da f j e i l i a t e dh o s p i t a lo fh e b e im e d i c a lu n i v e r s i t yf o r 4 英文摘要 t h et i m ep e r i o dm a r c h2 010t od e c e m b e r2 010w e r es e l e c t e df o rt h i ss t u d y ， t h e yw e r ed i v i d e di n t ot h r e eg r o u p s ：i r o nd e f i c i e n c ya n e m i ag r o u p 一2 9c a s e s ， m e g a l o b l a s t i ca n e m i ag r o u p 一15c a s e sa n dm i x e da n e m i ag r o u p 2 2c a s e s a l l c a s e sa f t e rd i a g n o s e dr e c e i v e d1m o n t ht r e a t m e n to fh e m a t o p o i e t i cn u t r i t i o n e l e m e n t s 6 6p a t i e n t sw i t hn o n n u t r i t i v ea n e m i ah a d4 4c a s e s ( i r o n d e f i c i e n c y a n e m i ag r o u po f19c a s e s ，m e g a l o b l a s t i ca n e m i ag r o u po f10c a s e s ，m i x e d a n e m i ag r o u po f15c a s e s ) r e v i e w e da tp o s tt r e a t m e n t a l ln u t r i t i o n a la n e m i a p a t i e n t s w e r ed i a g n o s e d a c c o r d i n gt o t h e b l o o dd i s e a s ed i a g n o s i sa n d c u r a t i v es t a n d a r d s e c o n de d i t i o n ，w h i c hi se d i t e d b yz h a n gz h i n a n 。1 8 h e a l t h yp e o p l ew e r er a n d o m l ys e l e c t e da sn o r m a lc o n t r o lg r o u p t h ep a t i e n t sb e f o r ea n da f t e rt r e a t m e n tw e r e g i v e nt h ef o l l o w i n g d e t e c t i o n s ：b l o o dt e s t ( w a c ，r b c ，h b ，p l t ，m c v ，m v h ，m c h c ) ， r e t i c u l o c y t ec o u n tt e s t ( r e t ) ，d e t e r m i n a t i o n so fs e r u mf e r r i t i n ( s f ) ，s e r u mi r o n ( f e ) ，t o t a li r o nb i n d i n gc a p a c i t y ( t i b c ) ，u n s a t u r a t e di r o nb i n d i n gc a p a c i t y ( u i b c ) ，f o l a t ea n dv i t a m i nb 12 ( v b12 ) ，d e t e r m i n a t i o n so fs e r u mm c l 1 p r o t e i na n db a kp r o t e i n ；t h en o r m a lc o n t r o lg r o u pw e r eg i v e nd e t e r m i n a t i o n s o fb l o o dt e s t ，r e t i c u l o c y t ec o u n t ，s e r u mm c l 一1a n db a k p r o t e i n s a i lt h i s d e t e r m i n a t i o n sw e r ef i n i s h e da to u rh o s p i t a l l a b o r a t o r y s e r u mm c l 一1 p r o t e i n ，b a kp r o t e i nd e t e r m i n a t i o n sw e r ec o m p l e t e du s i n ge n z y m e l i n k e d i m m u n es o r b e n ta s s a y ( e l i s a ) a l lt h es t a t i s t i c a l a n a l y s i sw a sd e a l tw i t hs p s s13 0s o f t w a r e t h e m e a s u r e m e n td a t ac o r r e s p o n d i n gs y m m e t r i cd i s t r i b u t i o nw e r ee x p r e s s e da s m e a n4 - s t a n d a r dd e v i a t i o n ( s d ) ，m e a n so f m a n y d i f f e r e n t g r o u p sw e r e c o m p a r e db yu s i n go n e w a ya n a l y s i so fv a r i a n c e ，m e a n so ft w og r o u p sw e r e c o m p a r e db yu s i n gs - n - kt e s t ，m e a n so fb e f o r ea n da r e rt r e a t m e n tw e r e c o m p a r e db yt - t e s t ，s t a t i s t i c a lc o r r e l a t i o nw e r ed o n eb yp e a r s o na n a l y s i s p 0 0 5h a d s t a t i s t i c a l l ys i g n i f i c a n td i f f e r e n c e r e s u l t s ： 1m c l - 1 ，b a kp r o t e i n se x p r e s s i o ni nn o r m a lc o n t r o lg r o u p ：i nn o r m a l c o n t r o lg r o u p ，t h ee x p r e s s i o nl e v e lo fm c l - 1p r o t e i nw a s ( 1 7 4 8 8 4 - 4 3 0 3 ) u g l a n db a k w a s ( 6 7 2 7 土3 6 31 ) p g m 1 5 英文摘要 2m c l - 1 ，b a kp r o t e i n s e x p r e s s i o n i nn u t r i t i o n a la n e m i a p a t i e n t s ： r e s p e c t i v e l y , t h ee x p r e s s i o nl e v e lo fm c l - 1p r o t e i ni ni r o n d e f i c i e n c ya n e m i a g r o u p ，m e g a l o b l a s t i ca n e m i ag r o u pa n dm i x e da n e m i ag r o u pb e f o r et r e a t m e n t w e r e ( 7 0 5 6 士3 3 4 1 ) u g l ，( 5 18 0 士3 2 3 2 ) u g l ，( 5 2 8 4 士2 9 0 5 ) u g l ，c o m p a r e d w i t hn o r m a lc o n t r o lg r o u pw e r es i g n i f i c a n t l yd e c r e a s e d ，w i t hs t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n td i f f e r e n c e ( p o 0 5 ) ；m c l - 1 ，b a kp r o t e i n se x p r e s s i o nd i d n th a v es t a t i s t i c a ld i f f e r e n c e i ne a c hg r o u po fn u t r i t i o n a la n e m i ap a t i e n t sp o s tt r e a t m e n t ( p o 0 5 ) t h e e x p r e s s i o nl e v e lo fm c l 一1p r o t e i ni n m i l da n e m i ag r o u p ，m o d e r a t ea n e m i a g r o u p ，s e v e r ea n e m i ag r o u po fn u t r i t i o n a la n e m i ap a t i e n t sb e f o r et r e a t m e n t r e s p e c t i v e l yw e r e ( 9 9 2 4 士1 9 91 ) u g l ，( 5 3 5 4 士1 713 ) u g l ，( 2 13 6 士0 9 5 0 ) u g l ， a n dt h ed i f f e r e n c ew e r es i g n i f i c a n t ，w i t hs t a t i s t i c a ld i f f e r e n c e ( p o 0 5 ) ；b a k p r o t e i ne x p r e s s i o nr e s p e c t i v e l yw e r e ( 5 7 3 9 士2 518 ) p g m l ，( 10 3 3 7 土2 2 3 7 ) p g r n l ，( 1 4 2 6 7 士1 8 4 9 ) p g m l ，t h ed i f f e r e n c ea l s oh a ds t a t i s t i c a ld i f f e r e n c e ( p o 0 5 ) i nh e m o g l o b i nn o r m a lg r o u pa n dh e m o g l o b i na b n o r m a lg r o u po f n u t r i t i o n a la n e m i a p a t i e n t sp o s tt r e a t m e n t ，m c l 一1p r o t e i ne x p r e s s i o n r e s p e c t i v e l yw e r e ( 1 5 3 2 5 1 4 1 3 6 ) u g l ，( 1 2 5 0 0 - a ：3 8 4 8 ) u g l ，w i t hs t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e ( p o 0 5 ) ；t h ee x p r e s s i o nl e v e lo fb a k p r o t e i nr e s p e c t i v e l yw e r e ( 5 0 2 3 2 0 9 6 ) p g m l ，( 7 9 6 4 士2 2 0 0 ) p g m l ，w i t h s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e ( p 0 0 5 ) 4m c l - 1 ，b a k p r o t e i n se x p r e s s i o ni nn u t r i t i o n a la n e m i ap a t i e n t sb e f o r e a n dp o s tt r e a t m e n t ：i ni r o n d e f i c i e n c ya n e m i ap a t i e n t sg r o u pb e f o r ea n d p o s t t r e a t m e n t ，m c l - 1p r o t e i ne x p r e s s i o nr e s p e c t i v e l yw e r e ( 7 0 5 6 士3 3 4 1 ) u g l ， 6 ( 1 4 5 0 似3 3 7 ) u g l ， b a k p r o t e i nw e r e ( 9 8 4 3 士3 5 4 1 ) p 咖l ， ( 5 7 7 1 士2 5 2 1 ) p g m l ，t h ed i f f e r e n c eh a ds t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e ( p o 0 5 ) ：i n m e g a l o b l a s t i ca n e m i ap a t i e n t sg r o u pb e f o r ea n d p o s tt r e a t m e n t ，t h ee x p r e s s i o n l e v e lo fm c l - 1 p r o t e i n r e s p e c t i v e l y w e r e ( 5 18 0 - 土3 2 3 2 ) u l ， ( 14 4 5 7 士4 6 0 5 ) u g l ，b a k p r o t e i n w e r e ( 1 1 39 9 士4 2 4 4 ) p 咖1 l ， ( 4 9 6 6 d ：2 12 2 ) p g m l ，w i t hs t a t i s t i c a ld i f f e r e n c e ( p 0 0 5 ) ；i nm i x e da n e m i a p a t l e n t s g r o u p b e f o r ea n d p o s tt r e a t m e n t ，m c l 1 p r o t e i ne x p r e s s i o n r e s p e c t i v e l yw e r e ( 5 2 8 4 + 2 9 0 5 ) u g l ，( 14 4 9 l 士4 4 7 4 ) u g l ，b a kp r o t e i nw e 陀 ( 9 19 钍4 17 3 ) p g m l ，( 5 9 7 2 士2 3 9 0 ) p g m l ，t h ed i f f e r e n c ea l s oh a d s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e ( p o 0 5 ) 5t h e r e l a t i o n s h i pb e t w e e ne x p r e s s i o no fm c l 1a n d b a k ：t h ep e a r s o n c o r r e l a t i o na n a l y s i sw a sd o n ef o rt h e r e l a t i o n s h i po fm c l 1 ，b a kp r o t e i n si n n u t r i t i o n a la n e m i a p a t i e n t s ，t h er e s u l tw a st h a tt h e r ew a san e g a t i v ec o n e l a t i o n b e t w e e nm c l - 1a n db a k w i t ht h es t a n d a r dp 9 0 9 l ) 者9 例， 中度贫血( 6 0 9 l h b 9 0 9 l ) 者1 5 例，重度贫血( 3 0 9 l h b 6 0 9 l ) 者5 例。1 个月内均未接受过任何含铁药物治疗。有1 9 例进行了治疗后 复查，其中男2 例，女1 7 例，年龄在15 - 4 3 岁之间，平均年龄3 0 7 5 岁。 病因为长期少食、素食者1 0 例，月经过多者5 例，胃大部切除者l 例， 无明确病因者3 例。经治疗血常规恢复正常者1 6 例，未恢复正常者3 例。 1 3 巨幼细胞性贫血组：共1 5 例，其中男5 例，女l o 例，年龄在18 7 8 研究论文 岁之间，平均年龄为4 7 5 3 岁。其中慢性胃炎患者2 例，素食及少食蔬菜 者4 例，妊娠期妇女4 例，无明确病因者5 例。轻度贫血者4 例，中度贫 血者7 例，重度贫血者4 例。1 个月内均未接受过叶酸及v b l 2 治疗。15 例中有1 0 例进行了治疗后复查，其中男3 例，女7 例，年龄在2 0 6 5 岁 之间，平均年龄4 3 6 9 岁。病因为素食及少食蔬菜者4 例，处于妊娠期者 3 例，无明确病因者3 例。经治疗血常规恢复正常者5 例，未恢复正常者 5 例。 1 4 混合性贫血组：共2 2 例，其中男6 例，女1 6 例，年龄在2 8 8 3 岁之 间，平均年龄4 0 9 4 岁。其中少食、偏食者7 例，月经过多者6 例，妊娠 期妇女2 例，慢性胃炎者3 例，无明确病因者4 例。轻度贫血者8 例，中 度贫血者1 l 例，重度贫血者3 例。1 个月内均未接受过任何含铁药物及 叶酸、维生素b 1 2 治疗。治疗前病例中有1 5 例进行了治疗后复查，其中 男3 例，女1 2 例，年龄在2 8 6 9 岁之间，平均年龄3 6 3 3 岁。病因为少食、 偏食者6 例，月经过多者5 例，处于妊娠期者2 例，无明确病因者2 例。 治疗后血常规恢复正常者1 0 例，未恢复正常者5 例。 以上所有观察对象均系河北医科大学第二附属医院血液内科门诊患 者，均参照张之南主编的血液病诊断及疗效标准第2 版确诊。统一 询问饮食习惯、肝肾疾病史、急慢性感染性疾病史、免疫系统疾病史、心 血管系统疾病史及手术史等，女性患者询问月经史、生育史及哺乳期。均 除外珠蛋白生成障碍性贫血、慢性病贫血、铁粒幼细胞性贫血、骨髓增生 异常综合征、溶血性贫血及其他血液系统疾病，除外各种急慢性感染性疾 病、各种肿瘤患者。 2 标本收集及检测仪器 2 1 血样采集所有受检者均采肘静脉血2 m l ，在我院实验室常规检测血 常规( w b c 、r b c 、h b 、p l t 、m c v 、m c h 、m c h c ) 、网织红细胞细胞 计数( r e t ) 、血清铁蛋白( s f ) 、血清铁( f e ) 、血清总铁结合力( t i b c ) 、 不饱和铁结合力( u i b c ) 、叶酸及维生素b 1 2 ( 1 2 ) 含量。剩余血样 置于4 。c 冰箱过夜后，常温离心机3 0 0 0 r p m 离心1 5 分钟，收集上清液( 血 清) ，分别置于两个o 5 u l d u f f 管中，8 0 冰箱保存，以备成批检测m c l 1 蛋白、b a k 蛋白含量。 2 2 治疗方法所有营养性贫血患者确诊后均接受如下造血营养要素的 研究论文 治疗：缺铁性贫血患者以琥珀酸亚铁片o 2 9 ，每日3 次1 2 1 服，维生素c 片 o 2 9 ，每日3 次口服治疗；巨幼细胞性贫血患者以叶酸片1 0 m g 每日3 次口 服，维生素b 1 2 注射液5 0 0 u g ，每日1 次肌肉注射；混合性贫血则同时联 合应用上述几种药物治疗，剂量及用法同上。治疗1 个月后采集外周血复 查血常规、网织红细胞细胞计数、血清铁蛋白、血清铁、血清总铁结合力、 不饱和铁结合力、叶酸及维生素b 1 2 含量、血清m c l 1 蛋白、b a k 蛋白 的含量。 2 3 主要检测设备仪器及试剂 2 3 1 设备仪器 l h 7 5 0 全自动血常规分析仪美国b e c k m a n 公司 7 6 0 0 0 2 0 全自动生化分析仪日本日立公司 e 1 7 0 化学发光检测仪，瑞士豪夫迈罗氏公司 c o b a s e 6 0 1 免疫分析仪瑞士豪夫迈罗氏公司 e l x 8 0 0 全自动酶标仪德国b i o t e k 公司 高精度加液器及吸头上海百赛生物技术有限公司 i e c c l 31 高速常温离心机美国t h e r m o 公司 m d f 3 8 2 e 8 0 超低温冰箱日本s a n y o 公司 海尔l c 1 5 9 冰箱青岛海尔集团 h h w 21 6 0 0 恒温水箱 天津泰斯特仪器有限公司 2 5 0 1 4 8 4 高精度加液器 德国e p p e n d o