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捅要 l 研究目的 通过观察运动训练和服用复方壮阳中药对股四头肌能量代谢和运动能力 的影响,探讨复方壮阳中药对提高机体能量代谢和运动能力的作用,为更好 的指导运动训练、增强运动能力提供科学依据,为有效提高能量代谢中成药 的开发提供一定的科学依据。 2 实验方法 选取雄性w i s t e r 大鼠1 1 2 只,随机分为四组:a 组( 安静对照组) 、b 组 ( 运动对照组) 、c 组( 安静服药组) 、d 组( 运动服药组) 。b 、d 组大鼠经8 周跑台训练,c 、d 组每天灌服中药制剂。8 周后,将每组随机分为4 个亚组, 即:安静组、定量负荷组、力竭即刻组、力竭恢复1 2 小时组。并于相应时 刻断头处死后取股四头肌测定肌糖原含量、h k 活性、l d h 活性、s d h 活性、 m d h 活性。所有数据用s p s s i o 0 统计软件进行独立样本的t 检验,显著性差 异为p o 0 5 。 3 实验结果 3 1 安静状态下,肌糖原含量,d 组极显著高于a 、b 、c 三组( p o 0 1 ) ,b 组和c 组显著高于a 组( p o 0 5 ) ;乳酸脱氢酶( l d h ) 的活性,b 、d 和c 组显著高于a 组( p o 0 5 ) ;己糖激酶( h k ) 的 活性,d 组显著高于其他各组( p 0 0 5 ) ,b 组显著高于a 组( p o 0 5 ) ;苹果酸脱氢酶( m d h ) 活性,d 组极显著高于a 组( p 0 0 1 ) 、显著高于b 、c 两组( p 0 0 5 ) ,b 组 与c 组无显著性差异,都显著高于a 组( p o 0 5 ) 。 3 2 定量负荷,肌糖原含量、l d h 的活性,与安静状态下类似;h k 活性,d 组显著高于h 组( p 0 0 5 ) ,b 组显著 高于a 组( p o 0 5 ) ;s d h 活性,a 组显著高于其他各组( p o 0 5 ) ;m d h 活性,d 组极显著高于a 组( p o 0 5 ) ,b 组显著高于a 组( p o ,0 5 ) ,c 组显著高于a 组( p o 0 5 ) 。 3 3 力竭即刻,肌糖原含量,d 组极显著高于a 组( p ( o 0 1 ) 、显著高于c 组 ( p o 0 5 ) ,b 组显著高于c 组 ( p o 0 5 ) 、极显著高于a 组( p o 0 5 ) ;m d h 活性,d 组显著高于a 组( p o 0 5 ) ,b 组显著 高于a 组( p o 0 5 ) ,c 组显著高于a 组( p o 0 5 ) 。 3 4 力竭恢复1 2 小时,肌糖原含量,d 组极显著高于a 组( p o 0 1 ) 、显著 高于b 、c 两组( p o 0 5 ) ,a 组显著低于b 组 ( p o 0 5 ) 、c 组( p o 0 5 ) 。 3 5 运动时间,d 组大鼠力竭时间相比另外三组极显著性延长( p 0 0 1 ) ;a 组比c 组和b 组显著性缩短,且a 组与c 组之问呈极显著性差异( p o 0 1 ) 。 4 结论 4 1 单纯服药和运动结合服用复方壮阳中药都促进肌糖原的合成,减缓运动 过程中其含量的降低,延长运动至力竭时间,增强运动能力。 4 2 单纯服药和运动结合服用复方壮阳中药都能够促进安静状态下无氧代谢 相关酶l d h 和h k 活性的升高,减缓运动过程中其活性的降低,提示复方壮 阳中药能够促进机体无氧代谢能力。 4 3 安静服药和运动结合服用复方壮阳中药对大鼠股四头肌安静状态下s d h 活性影响不大,增加安静状态下m d t t 活性,减缓运动过程中胞浆s d h 活性的 升高和m d h 活性的降低,提示复方壮阳中药能够提高有氧氧化能力,减缓运 动损伤,加快体内损伤的修复。 4 4 安静服药和运动结合服用复方壮阳中药都能加快能源物质和能量代谢相 关酶活性的恢复,改善机体疲劳状态。 关键词:能量代谢肌糖原乳酸脱氢酶琥珀酸脱氢酶 a b s t r a c t o b j e c t i v e b yi n v e s t i g a t i n g t h ei n f l u e n c eo f c o m p o u n d o fc h i n e s et r a d i t i o n a l s t u r d y p o s i t i v e - m e d i c i n ep r e s c r i p t i o n sa n de x e r c i s e so n t h ee n e r g ym e t a b o l i s mo f s k e l e t a lm u s c l ea n dm o v e m e n ta b i f i t yt od i s c u s st h ee f f e c tt h a tc h i n e s em e d i c i n e e n h a n c ee r e r g ym e t a b o l i s ma n dm o v e m e n ta b i l i t yo ft h eb o d y i tc a np r o v i d e s o m es c i e n t i c et h e o yb a s i so ns p o r tt r a i n i n ga n de n h a n c e i n gm o v e m e n ta b i l i t y i t a l s o np r o v i d es o m e :s c i e n t i c et h e o yb a s i so nu s i n gt h ec h i n e s em e d i c i n ea b o u t e n e r g ym e t a b o l i s m m e t h o d 1 1 2m a l ew i s t e rb i gm o u s ew e r er a n d o m l ys e l e c t e da n dd i v i d e di n t og r o u pa ( p e a c e f u lg r o u p ) ,g r o u pb ( m o v e m e n tg r o u p ) ,g r o u pc ( p e a c e f u l l yf o r t i f i e sy a n g g r o u p ) a n dg r o u pd ( m o v e m e n tf o r t i f i e sy a n gg r o u p ) a f t e rba n ddg r o u pw e r e t r a i n e df o r8w e e k s ,g r o u pca n ddw e r ef i l l e dw i t ht h ec o m p o u n do fc h i n e s e t r a d i t i o n a ls t u r d y - p o s i t i v e - m e d i c i n ep r e s c r i p t i o n se v e r yd a y e i g h tw e e k sl a t e r , e a c hg r o u pw a sr a n d o m l yd i v i d e di n t o4s u b u n i t s ,n a m e l y :t h ep e a c e f u lg r o u p , t h eq u o t al o a dg r o u p , t h ei n s t a n t l ye x h a u s t i n gg r o u pa n dt h er e n e w i n gg r o u p e x h a u s t i n gt i m ew a sr e c o r d e d g l y c o g e nc o n t e n t ,h ka c t i v i t y , s d ha c t v l t y , l d h a c t i v i t ym d ha c t i v i t y ,o ft h ec a r d i a cm u s c l eo r g a n i s m sf r o mb o d i e se x e c u t e d a t t h ec o r r e s p o n d i n g t h et i m ew e r ea l ld e t e r m i n e d a l ld a t aw a sh a n d l e dw i t ht e x a m i n a t i o nb ys p s s l 0 0s o f t w a r e t h es i g n i f i c a n c er e a c h e di sp o 0 5 r e s u l t 3 1t h ep e a c e f u lc o n d i t i o n , t h eg l y c o g e nc o n t e n t g r o u pdi so b v i o u s l yh i g h e r t h a ng r o u pa , b ,c 0 0 0 1 ) ;l d ha c t i v i t y , g r o u pb ,c dh i g h e rt h a ng r o u pa ( p 0 0 5 ) ;s d h a c t i v i t y , t h e r ei sn od i f f e r e n c ei ng r o u p s ;m d ha c t i v i t y , di so b v i o u s l yh i g h e rt h a n g r o u p a ( p 0 0 1 ) ,h i g h e rt h a ng r o u pb a n dc ( p o 0 5 ) ,b u t b o t h b a n d c h i g h e r t h a n g r o u p a ( p 0 0 5 ) 3 3 2t h eq u o t al o a dc o n d i t i o n ,t h e 舀y c o g e nc o n t e n ta n dl d h a c t i v i t ya r es i m i l a rt o t h ep e a c e f u lc o n d i t i o n ;h ka c t i v i t y , g r o u pd ,bi sh i g h c rt h a ng r o u pa ( p o 0 5 ) ;s d h a c t i v i t y , g r o u p ah i g h e rt h a no t h e rg r o u p s ( p 0 0 5 ) ,t h e r ea r en on od i f f e r e n c ei ng r o u p b ,c ,d ;m d ha c t i v i t y , g r o u pd i so b v i o u s l yh i g h e rt h a ng r o u p a ( p o 0 5 ) g r o u pbi sh i g h e rt h a n a ( p ,o 0 5 ) g r o u p c i s h i g h e r t h a n a ( p 0 0 5 ) 3 3a f t e re x h a u s t i n gi n s t a n t l y , g r o u pdi s o b v i o u s l yh i g h e rt h a ng r o u pa 伊 0 0 1 ) j i t t l eh i g h e rt h a ng r o u pb ,t h el a t t e ro b v i o u s l yh i g h e rt h a ng r o u pa ( p 0 0 5 ) :m d ha c t i v i t y , g r o u pdi sh i g h e rt h a ng r o u p a ( p 0 0 5 ) ,t h e r ea r e n on o d i f f e r e n c e b e t w e e n g r o u p b a n d c ( p ) ,o 0 5 ) ,g r o u p bh i g h e rt h a n a ( p 0 0 5 ) g r o u pch i g h e rt h a n a ( p 0 0 5 ) 3 4t h er e n e w i n gg r o u pa f t e rr e s t o r i n gf o r1 2h o u r s ,t h eg l y c o g e nc o n t e n t , g r o u p di s o b v i o u s l yh i g h e rt h a ng r o u pa 口 0 0 1 ) , h i g h e rt h a ng r o u pba n dc ( p 司0 0 5 ) ,g r o u p b h i g h e r t h a n c ( p o 0 5 ) ,g r o u p a l o w e r t h a n g r o u p b a n d c ( p = o 0 5 ) ;l d ha c t i v i t yi ss l m i l e rt ot h ep e a c e f u lc o n d i t i o n :h ka c t i v i t y , g r o u p d i s o b v i o u s l y h i g h e r t h a n g r o u p a ( p o 0 1 ) ,g r o u p c i s h i g h e r t h a n a ( p 0 0 5 ) ; s d ha c t i v i t y , g r o u pdi so b v i o u s l yl o w e rt h a ng r o u pa ,b ( p o 0 1 ) ,g r o u pai s h i g h e rt h a nc ( p 羽0 5 ) ;m d ha c t i v i t y , t h e r ea r en on od i f f e r e n c ei ng r o u p s ( p 0 0 5 ) 3 5c o m p a r e dw i t ho t h e rt h r e eg r o u p so f e x h a u s t i n g , g r o u pd s h o w e ds i g n i f i c a n t d i f f e r e n c ei ne x h a u s t i n gt i m e , g r o u pas h o w e ds i g n i f i c a n td i f f e r e n c e 口 o 0 5 ) c o m p a r e dw i t hg r o u pba n dc w h e nc o m p a r e dw i t hg r o u pcg r o u pas h o w e d l a r g e rs i g n i f i c a n c e c o n c l u s i o n 4 1b o t hc o m p o u n do fc h i n e s et r a d i t i o n a ls t u r d y - p o s i t i v e - m e d i c i n ep r e s c r i p t i o n s a n dt r a i n i n gc o m b i n e ds t u r d y - p o s i t i v e - m e d i c i n ec a np r o m o t et h et h eg l y c o g e n 4 c o n t e n t ,l o w e ri t se x h a u s t i n gt i m e ,e n h a n c em o v e m e n ta b i l i t y 4 2b o t hc o m p o u n do fc h i n e s et r a d i t i o n a ls t u r d y p o s i t i v e m e d i c i n ep r e s c r i p t i o n s a n dt m i n i n gc o m b i n e ds t u r d y - p o s i t i v e - m e d i c i n ec a np r o m o t et h ea c t i v i t yo ft h e l d ha n dh ki nt h e p e a c e f u l c o n d i t i o na n dl o w e ri t sd e c l i n ei nt h e m o v e m e n t t h a t p r o v e t h e c o m p o u n d o fc h i n e s et r a d i t i o n a l s t u r d y - p o s i t i v e - m e d i c i n ep r e s c r i p t i o n sc a np r o m o t et h ea n a e r o b i cm e t a b o l i s m a b i l i t yo f t h eb o d y 4 3b o t hc o m p o u n do fc h i n e s et r a d i t i o n a ls t u r d y - p o s i t i v e m e d i c i n ep r e s c r i p t i o n s a n dt r a i n i n gc o m b i n e ds t u r d y - p o s i t i v e m e d i c i n ec a nn o ta f f e c tt h es d ha c t i v h y b u tc a l lp r o m o t em d h a c t i v i t yi nt h ep e a c e f u lc o n d i t i o n 1 0 w e rt h ei n c r e a s i n go f t h em d ha c t i v i t ya n dt h ed e c l i n eo ft h es d ha c t i v i t yi nt h em o v e m e n t , t h a tp r o v e t h ec o m p o u n do fc h i n e s et r a d i t i o n a ls t u r d y - p o s i t i v e - m e d i c i n ep r e s c r i p t i o n sc a n e n h a n c et h ea e r o b i cm e t a b o l i s ma b i l i t yo ft h eb o d y ,l o w e rt h e d a m a g ea n d p r o m o t et h er e n e w i n g 4 4b o t hc o m p o u n do fc h i n e s et r a d i t i o n a ls t u r d y - p o s i t i v e - m e d i c i n ep r e s c r i p t i o n s a n dt r a i n i n gc o m b i n e ds t u r d y p o s i t i v e - m e d i c i n ec a l lp r o m o t et h er e c o v e r yo ft h e e n e r g ym a t e r i a l sa n dt h ea c t v i t yo fh k , m d ha n da t e i m p r o v i n gt h ea n t i - w e a r y a b i l i t y k e yw o r d s :e n e r g ym e t a b o l i s m ;g l y c o g e n ;l a c t a t ed e h y d r o g e n a s e ;s u c c i n a t e d e h y d r o g e n a s e ; 5 复方壮阳中药对大鼠股四头肌能量代谢 的影响 1 选题依据 人体是一个对立统一的整体,任何运动都是不同肌群协调有序地收缩和 舒张的结果,骨骼肌的这种收缩和舒张有赖于大量能量的充分供应。人体细 胞直接利用的能源来自于三磷酸腺苷( a t p ) i 约分解产生,而a t p 合成最终主 要来源于由耱的分解代谢,其次是脂肪,蛋白质。因此如何提高机体的能量 代谢水平特别是糖代谢水平,以保证正常训练和比赛中机体能量的供应始终 是运动生理学研究的重点之一。 现代随着竞技体育高速发展,竞争也愈来愈激烈,人们在引进和采纳先 进的训练方法和技术的同时,考虑到运用中药补剂充分挖掘人体的运动潜 能。根据中医学理论,脾主运化、主四肢肌肉,思虑过度或劳倦伤脾,致脾 运失常,精微不布,则肌肉疲惫、四肢倦怠无力。肝主疏泄,肝气条达有助 于脾主运化、主升清功能;若肝失疏泄,则可影响脾脏化生耩微、主四肢肌 肉的功能。故现在体育运动中关于中草药提高能量代谢的研究多集中在补脾 补肝等方面中医理论还认为,“阳”为人体气血生化的原动力,气是人体 机能的基本物质,。气虚”则气短乏力,精神不振易疲劳。因此选用益气助 阳药以固本扶正,提高身体机能状态,提高机体的能量代谢水平具有重要的 理论意义 本研究选用人参、黄芪、鹿茸、附子、肉桂等1 8 位中药配成中药制剂, 通过观察大鼠安静对照组、运动对照药组、安静服药组、运动服药组在安静、 定量负荷、力竭即刻、力竭恢复1 2 小时四种不同状态机体肌糖原的含量以 及与能量代谢相关酶活性的变化,认识此类中药对机体能量代谢的影响,探 讨复方壮阳中药制剂对机体能量代谢的作用机制,为合理应用中药提高人体 运动能力提供科学依据。 2 综述 2 1 能量代谢 生物体内物质代谢过程中所伴随的能量释放、转移和利用等,称为能量 代谢。机体所需的能量来源于食物中的糖、脂肪和蛋白质。这些能源物质分 子结构中的碳氢键蕴藏着化学能,在氧化过程中碳氢键断裂,生成c 0 2 和 h 2 0 ,同时释放出蕴藏的能量,这些能量的5 0 以上迅速转化为热能,用于 维持体温,并向体外散发,其余不足5 0 则以高能磷酸键的形式贮存于体内, 供机体利用。体内最主要的高能磷酸化合物是a t p ,机体利用a t p 合成各种 细胞组成分子、各种生物活性物质和其他一些物质;细胞利用a t p 去进行各 种离子和其它一些物质的主动转运,维持细胞两侧离子浓度差所形成的势 能;肌肉还可利用a t p 所载荷的自由能进行收缩和舒张,完成多种机械功。 机体内a t p 的储量很少,快速运动几秒钟就可能消耗掉,可通过无氧和有氧 两条途再生成。 2 2 运动对机体能量代谢的影响 运动对能量代谢的影响主要集中在a t p 再生成的两条主要途径。运动对 机体无氧代谢的影响主要是影响磷酸原系统、糖酵解供能系统的主要调控因 素运动对机体有氧代谢的影响主要是三羧酸循环的底物、限速酶和线粒体 呼吸链相关酶活性。 2 2 1 长期运动对机体能量代谢能力的影响 长期运动训练会引起骨骼肌产生适应性变化,这早已被大量研究所证实, 这种适应性主要表现在肌纤维体积和肌肉代谢酶活性等方面,且这种变化与 运动时间和运动强度密切相关刘洪1 1 等通过实施两种有氧运动处方,发 现两运动组于安静状态时和定量负荷运动后,血( 乳酸) l d 明显下降或呈 下降趋势,而乳酸脱氢酶( u h ) 活性在安静状态下和定量负荷、极量负荷 运动后均显著升高,这充分说明,有氧运动锻炼既能提高机体的有氧代谢能 力,又能提高机体的无氧代谢能力,并且在一定范围内运动强度较大者其效 果更好李开刚1 2 l 等采用2 6 米分、3 0 米分、3 6 米分和4 2 米分的训练强 度对大鼠进行了1 6 周跑台耐力训练,并用生化和组化的方法分别测定腓肠 肌苹果酸脱氢酶( 岫h ) 、磷酸果糖激酶( p f k ) 和l d h 活性和股四头肌深层 2 的琥珀酸脱氢酶( s d h ) 和l d h 活性的变化发现,不同强度的耐力训练后, 大鼠骨骼肌m d h 、s d h 活性变化出现了不同的适应性变化,其中中等强度的 训练对氧化酶的发展最有效,糖酵解酶p f k 和l d h 活性不变或降低。 魏守刚【3 l 等研究发现耐力训练和间歇高强度训练大鼠在力竭运动后2 4 小时,前糖原( p g ) 、大糖原( 淞) 以及总糖原的累计合成量均显著高于未训练 大鼠( p 0 0 5 ) 其中耐力训练可使力竭运动后肌糖原再合成量显著增加,主 要是p g 和m g 两种形式的糖原。间歇高强度训练也明显影响肌糖原的生物合 成,可使正常训练后安静状态下肌糖原储量及力竭运动后肌糖原再合成量显 著增加。主要是p g 增加。王荣辉【4 】等观察每天1 h 不负重游泳训练大鼠训练5 周后,大鼠腓肠肌l d h 活性没有显著性交化,而m d h 活性增加了3 0 3 。 说明这种运动强度能有效增加有氧代谢的能力而对无氧代谢能力影响不大。 2 2 2 一次性运动对机体能量代谢的影响 运动作为一种外界刺激施加于人体,根据运动时间、运动强度的不同会 对人体产生不同的影响,这种影响可能会打破机体的平衡状态。一次性低强 度运动,短时间,机体功率输出小,肌肉以有氧供能为主,a t p 消耗和生成 基本平衡,所以,a t p a d p 变化不大,各种酶的活性不变或者稍有增高,能 量代谢变化不大,随着时间的延长肌糖原含量逐渐降低,运动肌肉以很高的 速率摄取血糖来补偿肌糖原供能的下降这使血糖水平下降,运动中出现的 低血糖首先影响的是大脑,血糖水平下降使大脑供能不足发生中枢性疲劳。 中等强度运动,短时间,机体功率输出较大,糖有氧氧化与无氧酵解供能系 统同时发挥供能作用,a t p 的含量下降,a d p 含量增加,a t p a d p 的比值下降, 同时,运动引起磷酸肌酸消耗,a d p 含量增加运动引起磷酸肌酸( c p ) 下降 6 0 9 6 或高能磷酸化合物总量下降1 0 都将导致二磷酸腺苷( a d p ) ,一磷酸腺苷 ( a l j p ) ,磷酸( p i ) 等物质浓度上升,从而激活糖酵解系统,并促使p i 转移进 人线粒体,促进氧化磷酸化过程,提高有氧氧化合成a t p 的能力,以保证运 动持续进行研究发现,运动时当a t p 的利用率超过了氧化磷酸化和糖酵解 生成a t p 的能力时,磷酸肌酸可以作为缓冲通过肌酸激酶反应来维持a t p 的高 浓度。随着运动时间的延长三种供能系统都发挥作用,以有氧氧化供能为主, 线粒体是细胞有氧代谢合成a t p 的必要场所,其合成a t p 的效率可能是影响运 3 动能力、导致运动疲劳发生的关键因素【5 1 。一次性大强度运动,短时间,为 了满足机体的极限功率输出,无氧糖酵解在供能系统中的主导作用强化,无 氧糖酵解过程中相关酶如l d h 的活性增加,乳酸的产生快消除也快,随着时间 的延长,乳酸生成超过了其消除的速度,导致乳酸大量积累,乳酸在体内的 积累可导致机体内环境紊乱,进而影响肌肉收缩功能和运动能力,导致疲劳。 2 3 中药对机体能量代谢的影响 中医强调人体是一个对立统一的整体,健康状态则是阴阳平衡的结果, 人体通过气血在各个器官、组织之间进行物质、信息和能量的交流、协调和 统一。运动刺激引起某脏腑、组织、器官失去平衡,并且超出了人体适应的 范围,就会打破整个人体的平衡。中医理论认为“劳则气耗”即由劳动、运 动引起的气血亏耗,又因“脾外合肌肉”故肌肉运动易致脾气受损。大负荷 量运动引起机体的体力下降与脏腑功能下降必伴有机体能量的大量消耗,这 与中医的虚十分相似,多属“肾阳虚”之症。因而目前使用中药增强机体 能量代谢多从“补气”入手,以补气助阳,兼以调补气血的研究为主。许多 研究结果显示,补气助阳中药能够改善机体能量代谢。这些研究主要集中在 与能量代谢有关酶的活性和能源物质的储备两个方面。 与能量代谢有关的酶类多分布在线粒体及胞液中,如i l k 、l d h 、细胞色 素氧化酶( c c o ) 、辅酶i 、及a t p 酶等中草药可以通过提高这些酶的活性 增加机体能量供应延缓疲劳产生、增强运动能力。余谦1 6 】等通过小鼠及人体 实验证实,中药复方补剂与清剂均能提高骨骼肌及s d h 、c c o 、n a d h 、l d h 的 活性从而延缓体力性疲劳的产生;刘骁兰1 7 】等研究发现“消疲怡神口服液” ( 主要成分黄芪、枳壳、人参、柴胡、陈皮等) 能不同程度地促进动物肌糖 原、a t p 、s d h 的恢复,并能降低异常增高的l d h 的活性,说明该药有促进骨 骼肌能量代谢恢复,改善机体疲劳状态。蓝旭婵肄观察冬虫夏草提取液对肢 体缺血再灌注损伤的影响时发现再灌注组与对照组比较,骨骼肌能量代谢障 碍及其线粒体a t p 酶活性降低,使用冬虫夏草后,骨骼肌各项测定指标较再 灌注组相比明显改善,得出冬虫夏草对缺血再灌注损伤骨骼肌有保护作用。 杨维益p 烽塑造了大鼠脾气虚证模型,并采用健脾理气的中药进行治疗。对 治疗前后骨骼肌中与代谢有关的s d h ,n a d h - t r ,肼_ a t p a s e 等进行测定的结 4 果表明:大鼠脾气虚证模型具有骨骼肌能量代谢降低的特点,表现为i 型肌 纤维有氧氧化效率的显著下降,i 型肌纤维的糖原含量锐减,糖酵解能力下 降,g - a t p a s e 含量降低,导致肌肉的兴奋收缩偶联障碍,而健脾理气药物对 脾气虚导致的上述改变具有良好的恢复作用。孙常义等【1 0 l 采用细胞化学技术 及单细胞定量对运动疲劳小鼠股四头肌不同类型肌纤维的成分进行分析,实 验结果显示,服用四君子汤后三种肌纤维类型的糖原含量、s d h 、l d h 的活性 明显高于疲劳组,超微结构的改变则位于线粒体,提示四君子汤对解除骨骼 肌的高度疲劳、增强体质具有非常重要的作。刘晓薇【1 1 l 等实验也证实参芪颗 粒对保护线粒体、抗疲劳具有一定作用。贺洪1 1 2 】等人通过给小鼠腹腔注射人 参皂甙r g l 得出,人参皂甙能促进力竭游泳后小鼠体能的恢复。 能源物质的储备方面,咎俊平【1 3 】等观察红景天中药复方对缺氧运动大 鼠骨骼肌线粒体呼吸链酶活性及a t p 含量的影响,结果表明,红景天中药复 方能明显改善骨骼肌线粒体呼吸控制率和氧化磷酸化效率,提高骨骼肌a t p 含量。说明红景天中药复方可以明显改善缺氧机体骨骼肌能量代谢,进而提 高了机体在缺氧情况下骨骼肌作功时的a t p 供应。糖原是体内重要的能源物 质。目前研究发现某些中草药能够增加安静状态下糖原的含量、或减缓运动 过程中糖原含量的降低、或促进其他能源物质的动用节省糖原。有研究发现 1 4 1 人参及其提取物能够促进脂肪的动用,节省糖原,适当提高血液胰岛素的 水平,使血糖在运动中保持较长时间的稳定性唐晖【1 5 l 等报道,游泳前1 小时给大鼠腹腔注射2 m g 人参提取物l o o g 体重不影响安静时糖原含量,大 鼠游泳1 5 小时后即刻和游泳后3 小时,给药组大鼠糖原含量明显高于对照 组。应瑞春等1 1 6 l 研究发现服用中药红毛五加多糖组大鼠的糖原含量与运动组 相比明显增多。李先荣1 1 7 】实验表明,黄芪明显促进抗体形成,提高血c a m p 含量,具有良好的适应原样作用,并能明显改善微循环,提高动物耐缺氧能 力。五仁醇( 北五味子核仁的乙醇提取物) 对肝糖原合成具有明显的促进作用。 有研究【1 8 】结果表明小鼠禁食2 4 小时后灌胃五仁醇0 2 w k g 一次,1 小时后 腹腔注射l 葡萄糖2 0 m l k g ,再经2 小时测定肝糖原,无论对正常小鼠或去 肾上腺小鼠,五仁醇都能促进肝脏合成肝糖原,说明这种作用系药物直接对 肝脏影响而不经过肾上腺皮质系统。慢性实验结果说明五仁醇能增加肝糖原 5 储备,从五仁醇中迸一步分离得到的五味子乙素等单体也可显著促进肝糖原 合成。中医中药强调辩证旌治,从整体上改善机体的功能,中草药对机体 能量代谢的影响也是如此,不仅影响以上两个方面还影响机体的免疫系统、 心血管系统以及激素的分泌等。 综上所述,目前关于运动和中药对机体能量代谢的影响研究较多,并取 得了重大成果。但是,多数学者集中于短时间急性运动或者短时间服用中药 对机体能量代谢的影响,对长期运动训练和服用复方壮阳中药对机体在不同 运动状态下能量代谢的影响研究较少,而且单纯服药和单纯运动之间对比较 少本实验采用连续八周递增负荷的有氧训练结合服用壮阳中药的试验方 法,希望通过观察四组大鼠在四种不通状态下能量代谢的特点,总结出长时 间有氧训练结合服用壮阳中药对大鼠能量代谢影响的规律。 3 实验研究 3 1 实验对象与方法 3 1 1 实验对象 选取6 周龄雄性w i s t e r 大鼠1 1 2 只,体重1 5 0 克左右,购于山东鲁抗 医药股份有限公司。国家标准啮齿类动物干燥饲料喂养,自由饮食。随机分 为4 组: a 组安静对照组( 灌服纯净水) b 组运动对照组( 运动+ 灌服纯净水) c 组安静服药组( 灌服壮阳中药制剂) d 组运动服药组( 运动+ 灌服壮阳中药制剂) 3 1 2 实验方法 3 1 2 1 中药制剂及给药方案 壮阳中药制剂:附子、肉桂、鹿茸、蛇床予、麦冬等共1 8 味中药配制 而成,煎成制剂,按l o m l k g 体重的量于每天训练开始前1 小时灌胃服用。 3 。1 2 2 运动训练模型 动物房内保持安静、室温保持在1 8 2 5 度,湿度保持在4 0 5 0 左 右,a 、b 组每日按体重灌服纯净水,c 、d 组灌服壮阳中药制剂,a 、c 两组 大鼠安静饮食b 、d 两组大鼠采用国产电动大鼠跑台,进行定量负荷训练8 6 周,每周6 天,周日休息。适应性训练周后开始正式训练,训练强度( 见 表1 ) ,训练开始时,以l o r e r a i n 为起跑速度,在5 分钟内逐渐递增至预定的 训练速度,而后开始正式训练。训练过程中观察并记录大鼠体重、精神状态 及饮食情况,必要时调整大鼠的运动训练计划运动中使用声、光刺激或毛 刷刺激动物尾部,以保证运动强度,整个过程不使用任何电刺激。 表1 :大鼠训练模型 8 周后对大鼠进行取材,每组大鼠按表2 分为4 个亚组,分别于安静状 态下、定量负荷、力竭后即刻、力竭后恢复1 2 小时四种状态处死。( 力竭判 断标准:刺激大鼠后不能自主运动,后肢随转动带拖达3 0 秒或者先后滞跑 带后l 3 处达3 次或5 次,刺激驱赶无效) 迅速取出股四头肌,于冰生理盐 水中洗净血液,装入样品管中,并迅速将之放入一8 4 度超低温冰箱中。 表2 :实验动物分组情况 3 1 2 3 指标测定 3 1 2 3 1 组织匀浆液制备 从超低温冰箱中取出样品,解冻,用生理盐水洗净,滤纸吸干,用电子 天平称重,按i :9 的比例加入生理盐水后,在冰浴条件下用匀浆器匀浆,剪 取l g 左右组织,按w v = i 9 加入预冷的生理盐水,匀浆后放入4 的冷冻离 心机,以3 0 0 0 r p m 离心1 5 m n ,离心后取上清装入样品管中4 。c 冷藏待测。 3 2 4 2 测定指标、仪器与方法( 见表3 ) 7 表3 测定指标、仪器与方法 3 2 试验药品和试验仪器 3 2 1 试验药品 肌糖原检测试试剂盒、乳酸脱氢酶检测试试剂盒、己糖激酶检测试试剂 盒、苹果酸脱氢酶检测试试剂盒、琥珀酸脱氢酶检测试试剂盒、考马斯亮蓝 试剂盒。其他试剂如:浓硫酸、乙醇、生理盐水、双蒸水、等多种实验药品。 生理盐水、乙醇等多种实验药品。 3 2 2 试验仪器 国产电动鼠类跑台、m d f - u 2 0 8 6 s 型超低温冰箱、7 5 2 型紫外分光光 度仪、7 2 1 型分光光度仪、电动匀浆机、g l 2 0 一型高速冷冻离心机、h s - 4 型精密恒温浴槽、电子天平、超声清洗器、干燥箱、混匀器、离心管、百得 自动移液器、动物手术器械、大鼠断头器等。 3 3 统计方法 采用s p s s l 0 0 统计软件对所得数据进行统计分析,求平均数,标准差, 进行独立样本t 检验,显著性水平p 0 0 5 ,非常显著性水平p - - o 0 1 4 实验结果 4 1 不同状态大鼠股四头肌肌糖原含量的变化 从表( 表4 ) 可以看出,安静状态下,d 组极显著高于a 组( p 0 0 1 ) 、 b 组( p 0 0 1 ) 、c 组( p 0 0 5 ) ;定量负荷与安静状态下类似;力 竭即刻d 组极显著高于a 组( p 0 0 1 ) 、显著高于c 组( p o 0 5 ) ,b 组显著高于c 组( p 0 0 5 ) 、极显著高于a 8 组( p o 0 5 ) ;力竭恢复1 2 小时,d 组 极显著高于a 组( p 0 0 1 ) 、显著高于b 组( p 0 0 5 ) 、c ( p 0 0 5 ) ,a 组显著低于b 组( p 0 0 5 ) 、c 组 ( p 0 0 5 ) 。 表4 不同状态下各组大鼠肌糖原含量的变化f 单位m g g ) 安静定量负荷力竭即刻力竭恢复1 2 小时 1 8 34 - 0 5 71 2 1 4 - 0 2 60 3 土0 1 61 2 7 4 - 0 4 3 】7 a 1 7 2 2 0 1 4 o 6 土0 0 1 2 2 0 5 o 0 8 3 2 3 - - - - 0 3 2 $2 3 5 4 - 0 5 7 * 0 4 84 - 0 1 4 a1 9 7 4 - 0 1 8 5 0 0 4 - 0 4 a 4 1 4 - 0 3 3 0 7 14 - 0 2 1 o3 6 5 4 - 0 6 3 * a o 与安静对照比较p 0 0 5 ,与安静对照组比较p 0 0 l ,与运动对照组比较口 0 0 5 ,与运动对照组比较p o 0 1 ,o 与安静服药组比较p o 0 5 ,与安静服药比 较p 0 0 1 ,以下同 4 2 不同状态大鼠股四头肌己糖激酶( h k ) 活性的变化 从表( 见表5 ) 中可以看出,安静状态下h k 的活性,d 组显著高于其他 各组( p 0 0 5 ) ;定量负荷d 组显著高于a 组( p 0 0 5 ) ,b 组显著高于a 组 ( p m 0 5 ) ,a 组与c 组无显著性差异( n 娃0 5 ) ;力竭即刻,d 组稍商,与 表5 不同状态下己糖激酶活性的变化( 单位u 几) 其他各组无显著性差异( p 0 0 5 ) ;力竭恢复1 2 小时,d 组极显著高于a 组 ( p 0 0 1 ) ,与其他各组无显著性差异( p 0 0 5 ) ,c 组显著高于a 组( p 如0 5 ) , 与b 组无显著性差异( p o 0 5 ) ,a 组与b 组无显著性差异( p o 0 5 ) 4 3 不同状态大鼠股四头肌l o h 活性的变化 从表( 表6 ) 中可趴看出,安静状态下l d 的活性,d 组最高,显著高于 a 组( p 0 0 5 ) ,与其他两组无显著性差异( p 0 0 5 ) b 组次之,显著高于a 9 n 一7 7 7 7 麴a b 。 组( p 0 0 5 ) ,c 组显著高于a 组 ( p 0 0 5 ) ;定量 负荷状态、力竭即刻, 组显著高于其他各组( p ,0 0 5 ) ,b 组、c 组、d 组 无显著性差异( p 0 0 5 ) ;力竭恢复1 2 小时,d 组最低,与a 组、b 组具有显 著性差异( p o 0 1 ) ,与c 组差异不显著( p o 0 5 ) ,a 组最高,与c 组有显 著性差异( p 0 0 5 ) 。 表7 不同状态下琥珀酸脱氢酶活性的变化( 单位u g p r o t ) 4 5 不同状态大鼠股四头肌m d h 活性的变化 从表( 表8 ) 中可以看出,安静状态下d 组极显著高于 组( p 0 0 1 ) 、 显著高于b 组( p 0 0 5 ) 、c 组( p 0 0 5 ) , 都显著高于a 组( p 0 0 5 ) ;定量负荷

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