抗结核药物.ppt

（一）操作方法,抗结核药物！,1,研究背景,进入21世纪后，区域性结核病疫情的死灰复燃，又一次给人们敲响了警钟。据资料介绍：全球每年新发现结核病患者约1000万人，我国是世界上22个结核病高负担的国家之一，由于人口众多，其感染者居世界第2位，在现阶段，有3/4的患者来自农村及贫困地区。据2000年的调查显示我国受结核杆菌感染者较多，结核病患者约占了总人口的0.4%左右，其中传染性肺结核患者近200万人，年病死率约为3。随着我国卫生事业的发展，政府对结核病予以高度的重视，与此同时，抗结核药物市场也吸引了业内商家的目光。,2,全球抗结核病常用药物市场约占抗感染药物市场的12，2000年抗结核药物市场为4.7亿美元，并且平均每年以5的速度递增。安万特、诺华、惠氏、法莫西和Lupin公司占据了抗结核药物市场份额的59%，此外印度生产商占12，剩余的29由较小的厂商拥有。近两年，国内抗结核常用药物市场呈现出上升趋势，据SFDA南方医药经济研究所时每医药信息公司研究数据表明，2002年，抗结核药物在国内大城市重点医院的用量比上一年增长了18，估计全国抗结核类药物市场销售额为2亿-2.5亿元左右。,3,结核分枝杆菌介绍,4,结核分枝杆菌可发生形态、菌落、毒力、免疫原性和耐药性等变异。粘附在尘埃上保持传染性810d，在干燥痰内可存活68个月。结核分枝杆菌对湿热敏感，在液体中加热626315分钟或煮沸即被杀死。因结核杆菌体内含有大量类脂质，因其富脂外壁的疏水性之故，一般的消毒剂难以渗入，对外界条件有异常大的抵抗力，使通常的灭菌方法易失败，在阴暗潮湿的地方可生存数月，在阳光暴晒下能生存数小时，在-7以下可生存45年。,5,抗结核药的分类,（1）抗生素类：链霉素是主要抗结核药，还有卡那霉素、丁氨卡那霉素等氨基糖甙类抗生素。多肽类中的卷曲霉素，利福平类中的利福平，利福定等均为常用抗结核药。（2）合成抗菌素药：雷米封（异烟井）异烟腙等，乙胺丁醇，对氨基水杨酸（PAS）、吡嗪酰胺、乙硫异烟胺及类似物黄硫异烟胺等。氨硫脲虽有一定疗效，但因毒性较大而很少用。（3）中草药：一些中草药有抗结核菌的作用，如大蒜、百部、忽布（啤酒花）等。主要用作抗结核的辅助药物。由于结核杆菌抗药性较强，因此需要多种药物综合作用，本次我们介绍的是参照武汉市同济医院的药方。,6,常用抗结核药物的简介,盐酸乙胺丁醇片产品英文名为：EthambutolHydrochlorideTablets。结构式如下：,7,药理作用,本品主要由上海信谊药厂有限公司生产，为白色药片，为合成抑菌抗结核药。它可渗入分枝杆菌体内干扰RNA的合成，从而抑制细菌的繁殖，本品只对生长繁殖期的分枝杆菌有效。与乙硫异烟胺合用可增加不良反应；与氢氧化铝同用能减少本品的吸收；与神经毒性药物合用可增加本品神经毒性，如视神经炎或周围神经炎。,8,用法用量,1.成人常用量与其他抗结核药合用，结核初治，按体重15mg/kg，每日一次顿服；或每次口服2530mg/kg，最高2.5g,每周3次；或50mg/kg，最高2.5g，每周2次。结核复治，按体重25mg/kg，每日一次顿服，连续60天，继以按体重15mg/kg,每日一次顿服。非典型分枝杆菌感染，每日1525mg/kg，一次顿服；2.小儿常用量13岁以下不宜应用本品；13岁以上儿童用量与成人相同,9,含量检验方法,中国药典采用三氯甲烷多次提取的非水滴定法测定盐酸乙胺丁醇片含量，其中有机溶剂的大量使用易对人体造成危害，并且在提取液滤过时，取无水硫酸钠的量对结果也有一定的影响，不易得到平行结果，此法操作较烦琐。研究采用下述HPLC法测定盐酸乙胺丁醇片的含量，溶剂为水。经过方法学实验验证，该方法简便准确，灵敏度高，适用于盐酸乙胺丁醇片的质量控制。,10,实验条件,色谱条件：色谱柱：DiamondC18柱(46mm250mm，5m)；流动相：四氢呋喃-04庚烷磺酸钠(含有0016硫酸铜，用磷酸调pH至4505)(25：75)；检测器：紫外吸收检测器；检测波长：258nm；柱温：40；流速10mlmin；进样量2Ol。,11,准备及操作,1对照品溶液的制备：取盐酸乙胺丁醇对照品置干燥箱中105干燥2h后，精密称取987mg,置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含01974mg盐酸乙胺丁醇的对照品溶液。2供试品溶液的制备：取本品1O片，研成细粉，混合均匀，精密称取适量(约相当于含盐酸乙胺丁醇20mg)置于100ml量瓶中，加入水适量，振摇使主药溶解，再用水稀释至刻度，摇匀，过滤，作为供试品溶液。3操作：精密量取对照品溶液与供试品溶液各20l分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算样品中盐酸乙胺丁醇的含量,即得.,12,13,药理毒理,利福平为利福霉素类半合成广谱抗菌药，对多种病原微生物均有抗菌活性。该药对结核分枝杆菌和部分非结核分枝杆菌（包括麻风分枝杆菌等）在宿主细胞内外均有明显的杀菌作用。利福平对需氧革兰阳性菌具良好抗菌作用，包括葡萄球菌产酶株及甲氧西林耐药株、肺炎链球菌、其他链球菌属、肠球菌属、李斯特菌属、炭疽杆菌、产气荚膜杆菌、白喉杆菌、厌氧球菌等。对需氧革兰阴性菌如脑膜炎奈瑟球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟球菌亦具高度抗菌活性。利福平对军团菌属作用亦良好，对沙眼衣原体、性病淋巴肉芽肿及鹦鹉热等病原体均具抑制作用。细菌对利福霉素类抗生素有交叉耐药。利福平与依赖DNA的RNA多聚酶的亚单位牢固结合，抑制细菌RNA的合成，防止该酶与DNA连接，从而阻断RNA转录过程，使DNA和蛋白的合成停止.,14,用法用量,1.抗结核治疗成人：口服，一日0.45g0.60g，空腹顿服，每日不超过1.2g；1个月以上小儿每日按体重1020mg/kg，空腹顿服，每日量不超过0.6g。2.脑膜炎奈瑟菌带菌者：成人5mg/kg，每12小时1次，连续2日；1个月以上小儿每日10mg/kg，每12小时1次，连服4次。3.老年患者，口服，按每日10mg/kg，空腹顿服,15,药品鉴别,（1）取本品约1mg，加稀乙醇1ml溶解后，加1硫酸铜溶液23滴，2分钟后，应显深红色。（2）取本品约1mg，加稀乙醇1ml溶解后，加酸性硫酸铁铵试液23滴，即显深红色。（3）取本品与利福平对照品各适量，分别加乙醇制成每1ml含10mg利福平的溶液，作为供试品溶液与对照品溶液；另取利福平对照品和利福喷丁对照品适量，加乙醇制成每1ml含10mg利福平和10mg利福喷丁的混合溶液，作为系统适用性溶液,16,参照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各2l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯甲醇浓氨溶液（8:2:0.2）为展开剂,展开,晾干,日光下检视.系统用性溶液所显利福平和利福喷丁斑点应完全分离。供试品溶液所显主斑点的颜色和位置应与对照品溶液主斑点的颜色和位置相同。,17,含量检测步骤,1取本品适量，精密称定，用乙腈溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液，作为供试品溶液；2精密称取利福平对照品适量，用乙腈溶解并定量稀释制成每1ml中约含10g的溶液，作为对照品溶液（1）；3另精密称取醌式利福平、N-氧化利福平、3甲酰利福霉素SV对照品各适量，分别用乙腈溶解并稀释制成每1ml中含上述3种杂质对照品各10g的溶液，作为杂质对照品溶液（2）、（3）、（4）。,18,照含量测定项下的色谱条件，取对照品溶液（1）10l，注入色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰高约为满量程的2025%，再分别取对照品溶液（1）、（2）、（3）、（4）和供试品溶液各10l注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的4倍。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，含醌式利福平、N-氧化利福平、3甲酰利福霉素SV按外标法以峰面积计算，分别不得过1.5%、0.5%、0.5%，其余各杂质峰面积的和，不得大于对照品溶液（1）主峰面积的3倍（3.0）。,19,异烟肼,20,药理作用,本品可抑制敏感细菌分枝菌酸（mycolicacid）的合成而使细胞壁破裂。口服后迅速自胃肠道吸收，并分布于全身组织和体液中，包括脑脊液、胸水、腹水、皮肤、肌肉、乳汁和干酪样组织。并可穿过胎盘屏障。代谢主要在肝脏中乙酰化而成无活性代谢产物，其中有的具有肝毒性。乙酰化的速率由遗传所决定。慢乙酰化者常有肝脏N-乙酰转移酶缺乏，未乙酰化的异烟肼可被部分结合。主要经肾排泄（约70%），在24小时内排出，大部分为无活性代谢物。快乙酰化者中93%以乙酰化型在尿液中排出，慢乙酰化者为63%。快乙酰化者尿液中7%的异烟肼呈游离或结合型，而慢乙酰化者则为37%。本品易通过血脑屏障，亦可从乳汁排出，少量可自唾液、痰液和粪便中排出。相当量的异烟肼可经血液透析与腹膜透析清除。,21,用法用量,口服预防：成人一日0.3g，顿服；小儿每日按体重10mg/kg，一日总量不超过0.3g，顿服。治疗：成人与其他抗结核药合用，按体重每日口服5mg/kg，最高0.3g；或每日15mg/kg，最高900mg，每周23次。小儿按体重每日1020mg/kg，每日不超过0.3g，顿服。某些严重结核病患儿（如结核性脑膜炎），每日按体重可高达30mg/kg（一日量最高500mg），但要注意肝功能损害。,22,含量测定,1方法原理：供试品加水溶解后，加甲基橙指示液，用溴酸钾滴定液缓缓滴定至粉红色消失，根据滴定液使用量，计算异烟肼的含量。2试样制备：（1）溴酸钾滴定液（0.01667mol/L）配制：取溴酸钾2.8g，加水适量使溶解成1000mL，摇匀。标定：精密量取本液25mL，置碘瓶中，加碘化钾2.0g与稀硫酸5mL，密塞，摇匀，在暗处放置5分钟后，加水100mL稀释，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定至近终点时，加淀粉指示液2mL，继续滴定至蓝色消失。根据硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）液的消耗量，算出本液的浓度。室温在25以上时，应将反应液及稀释用水降温至约20。,23,（2）稀硫酸：取硫酸57mL，加水稀释至1000mL（3）.淀粉指示液取可溶性淀粉0.5g，加水5mL搅匀后，缓缓倾入100mL沸水中，随加随搅拌，继续煮沸2分钟，放冷，倾取上层清液，即得，本液应临用新制。（4）.硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）配制：取硫代硫酸钠26g与无水碳酸钠0.20g，加新沸过的冷水适量使溶解成1000mL，摇匀，放置1个月后滤过。,24,标定：取在120干燥至恒重的基准重铬酸钾0.15g，精密称定，置碘瓶中，加水50mL使溶解，加碘化钾2.0g，轻轻振摇使溶解，加稀硫酸40mL，摇匀，密塞，在暗处放置10分钟后，加水250mL稀释，用本液滴定至近终点时，加淀粉指示液3mL，继续滴定至蓝色消失而显亮绿色，并将滴定结果用空白试验校正。每1mL硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于4.903mg的重铬酸钾。根据本液的消耗量与重铬酸钾的取用量，算出本液的浓度。室温在25以上时，应将反应液及稀释用水降温至约20。（5）.甲基橙