（农产品加工及贮藏工程专业论文）QuEChERSGCMS快速检测柑橘农药多残留的方法研究.pdf

i i i i i ii ll l i i i i if i l liil y 18 8 15 6 5 独创性声明 学位论文题目：q 迪g 廷s ：鱼笾墨_ ：医速捡迩9 挝插壅药多毯留鲍婴究 本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。论文中引用他人已经发表或出版过的研究成果，文中已加了 特别标注。对本研究及学位论文撰写曾做出贡献的老师、朋友、同仁 在文中作了明确说明并表示衷心感谢。 学位论文版权使用授权书 刀日 本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规 定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允 许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院( 筹) 可以将学位 论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩 印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 ( 保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论文：口不保密，口 保密期限至年月止) 。 学位论文作者签名：彳、乍导师签名：多多子 二 、 一 签字日期： y 1 1 年) 月7 日 签字日期： 弘年厂月7 阿 西南大学硕七学位论文 目录 目录 英文缩略表i 摘 要i i a b s t r a c t i v 第一章文献综述1 1 1 农药多残留前处理新技术1 1 1 1 固相萃取法( s p e ) l 1 1 2 固相微萃取( s p m e ) l 1 1 3 凝胶渗透色谱法( g p c ) 1 1 1 4 超临界流体萃取( s f e ) l 1 1 5 其他2 1 2q u e c h e r s 方法及其在食品农药多残留分析中的应用2 1 2 1q l j e c 雠r s 方法的国内外的研究进展2 1 2 2q u e c l l e r s 方法的优势。3 1 3 基质效应3 1 3 1 基质净化法3 1 3 2 进样技术4 1 3 3 校正因子校准法4 1 3 4 加入分析保护剂法4 1 4 大体积进样气相色谱技术在农药残留分析中的应用4 第二章引言6 第三章q u e c h e r s 前处理条件优化。7 3 1 材料与方法7 3 1 1 材料与试剂7 3 1 2 仪器与设备7 3 1 3 试验条件8 3 1 4 试验设计与方案8 3 2 结果与分析9 3 2 1 待测农药定性和定量离子的选择9 3 2 2 样品量的优化1 2 3 2 3 萃取剂的选择1 2 3 2 4 干燥剂的选择13 3 2 5 净化剂的选择l3 3 3 结论。1 4 第四章基于q u e c h e r s 和p t v 大体积进样的g c m s 农药多残留检测方法的 建立15 两南大学硕士学位论文 目录 4 1 材料与方法15 4 1 1 材料与试剂。1 5 4 1 2 仪器与设备15 4 1 3 实验条件1 5 4 1 4 试验设计与方案1 5 4 2 结果与讨论1 6 4 2 1 分流排空时间1 6 4 2 2 分流排空流量1 7 4 2 3 进样口初温17 4 2 4 进样口终温18 4 2 5 程序升温18 4 2 6 吹扫流量和吹扫时间1 8 4 3 基质效应18 4 4 方法的线性范围、检出限、回收率和精密度2 0 4 4 1 方法的线性范围和检出限2 0 4 4 1 方法的准确度和精密度2 2 4 5 实际样品检测2 3 4 6 结论。：。2 4 第五章总结和讨论2 5 参考文献2 6 致谢。3l 在读期间发表的学术论文3 2 西南大学硕士学位论文英文缩略表 英文缩略表 a b b r e v i 加o n 唰9 s s s 一蜊i 乳。0 翠刮田弭8 0 l i a s 6 1 i i l 紧索劲回簖击丁士平啤婪山 三狲审掣鼬届m1 , 0 0 、缸届mz o 。0 、翘届i i is 0 0 0 翠歪翠牲伊翻 a me 0 、科届i 0 、鼬厣哪 s 乙o 0 翠蛭翠牲z 乙鼬暑t u 8 0 、钢届t u t , 0 、瓤厣m i 0 翠蛭翠牲6 i ：些酉酱髯。延抱身幂翠蚍裂 瞠砑犟辫朝器华艇冀勒学隧弭斜轻罐辑￥s 。3 0 孙船丁融髯甚骈骢朝g 吼驸翠( 分) 。耐驿髂敬雪霉单暂姑辨覃、疆辨和、桶辨妥骘三否的窜 释氍鼾彗霉搬班潮瞠搬莉三、莉盘衅、瓤蚌簧、瓤1 逝蓟簧、酱当、艳潮由辑2 串嚣。珂驿 氍鼾雪髯晕暂鹱母驹1 7 6 醣擎酱彰孺近。珂驿鹱戮疆酗鼾智霉当擎哥翠蛐艇畔甘滥髯静署 举明搿栾翠骚雪霉甲狲q 出磁阜冀犁磁驺霉明蛭翠刨坐上肇霉餮阜朝辫睥驾髯甘卷( ) 。珂碴琶瞰弭掣篱骚晕孵士壬掣普鼎 厅戮鼹弭( 加s ) 摹g 士掣斟黧髟 檠士疑飘犁繁勤士掣亚璐牲乙、士掣喜犁珊士掣朝犟毽翠车牲一出鹭士避喜犁、科犁勘 士掣牲替幕审圈崧舀明蛭翠牲每翠刨轴禺哿朝蛭翠牲每睡舍； 戥驾孵e 丰弓轻娶( 乙) 与。僻丁 l m i 豆荤犁( 厶：e ) 群巳虹哇鳗坠茸士攀繇迪静g 口 掣砍= 。s t u 0 、暑t u 0 9 紧暗4 4 喜目8 、v s d 晔驯砸2 i ：l r ：0 i 椠嘞羽朝瞄科葛暂貉孺避平里晔 堆潮与喜抖迪2 暑e 椠薯抖迪菅抖罂擀壬艇：些酉酱髯。兽茸哗矾嵌瞠旧羽哗平溯、哗戥冶 群飘鲁、喜抖迪朝娶号上军魄蛐猪朝酱骚孙嵌智妻 鞑( 日3 0 、v s d ) f 陛矾戢谣伯喜曾朝哗平别 、哗故碓群、菩抖璐羽辩娶。勒澎谣璩霉甑号朝嚣华醯骑鳟s 1 i a t l 3 肿0 上犁姚矾聊( i ) 。i 晦凿夥理 荤f i d 始抱益干。军5 华懈弭s m 3 0 s 硎3 田o 聃| j i j 砚目骚霉蛭翠审骅辩覃翟椠牲贬翠明e h 觋 銎1 咨审戥鼾国椠鞑桴m 翦明勃罾抖聚潍璐￥s i a i 3 0 谣攀图哟缮明餮华醢菊膊s l 1 3 丑n o 冉断益千茸砚卓。百霉近礁朝益重单曾串隧弭禺骚鳆擎晋毒母朝国錾士目珂箕智髯蟋晤 髯琳、半辑鹳￥朝餮- gs 删3 a n b 延地。嚣车裂掣明号酉垂矾歆磐溯哇( d v o v ) 笛爵髫 杀孙擗髟国￥椠搿荔召膊目幂碗上身取餮肇鎏牲冀卫 孺嚣华哇錾抱朝y 龆上聚葛目髫 杀擗髟将国半翻再照i 餮华耵目。餮华s 硎3 乎b 椠罐辘业图掣驸朝( 怠，晒) 弓摹瞠( p a 暑暑r l i ) 辈也0 a ! ，。钮a ) 驿单、( d b a q 。) 覃酊、( 瓜b 3 ) 责观、( 妒! n b ) 娶谢阜曾羽群靛辅雎智抖骑封与饕 毕姿半释醢辅蝉智抖朝缝牲一上印瞥翕疋m o q o l 哇s o t m t s s e l g e u v 僻亦母国饕匆e 0 0 乙 。辫目驹膳爵坍髟吾嗽弭曷骚雩朝驺雌睾副凝阜鹬谣翻 币喽簦酶螺拯、斟牢翠、责鲥、驻谢业益罂朝罨孺近m 砸哥骐鹑业西a 军5 华懈磷驹禺骚蛭 母髟爵一亩牲一眷鞑* 朝骑静。毖墅明第一举襄辫虹鞑轴刨可孵智朝辨群肆蛳猪毋坚华一 暂2 喜禾朝骅鼾掣瞥驿阜鹬堡华一目现明丁骅群翠鳆翠婆目。益垂髟+ 彭酉翠华膳珊髯 挺￥啤瞠延挫餮华隧弭禺骚鲤翠胚氍啤。器￥够搏￥j 哇u 勰墨l f 砸獬号陡荟雨髯草轴誓磁 斟群禺骚蛭翠留号觋琏券溢朝留葛口印檠智寻国挂唑茸现喜￥朝蛭翠飘素种壬甲半匆娶 董麟堕野 兽墨括占嘶舅蛳署旨群 銎兽下墨括干妊不辜孕i 婆嵇丁哗訾雄 延拽明禺骚琴蛭母骅擀嗽弭娶谢s i a i d d s h 1 9 1 3 n d 益辫茸砚玛杀+ 衄杀￥单盟 西南大学硕十学位论文 摘要 之间，定量限在2 3 8 0 t t g k g l8 8 9 0 p g k g 之间。 关键词：柑橘；q u e c h e r s ； g c m s ；多残留分析 h i 曲雨大学硕士学位论文 a b s t r a c t r a p i dd e t e r m i n a t i o no fp e s t i c i d er e s i d u e si n c i t r u sb yq u e c h e r s g a s c h r o m a t o g r a p h y w i t hm a s s s p e c t r o m e t r y d e t e c t i o n f i e l d ：m o d e mf o o dp r o c e s s i n gt h e o r ya n dt e c h o l o g y m a s t e r ：h u a n gx i a s u p e r v i s o r ：p r o f j i a ob i n i n g a b s t r a c t n o w a d a y s ，a l ll e v e l so fg o v e r n m e n ta n dt h eb r o a dm a s s e sp a yc l o s ea t t e n t i o nt op e s t i c i d e r e s i d u e si nf o o dd u et ot h ea b u s eo fp e s t i c i d e sa n dt h ep r o s p e r i t yo fi m p o r ta n de x p o r tt r a d ei no u r c o u n t r y p e s t i c i d e sr e s i d u e sh a da t t r a c t e dm o r ea n dm o r ea t t e n t i o ni np r e s e n ty e a r s p e s t i c i d e su s e d i nc i t r u se f f e c t i v e l yi m p r o v e dt h ep r o d u c i n gy i e l d ，b u ta l s oi n f l u e n c e dt h eq u a l i t yo ft h ec i t r u sa n d b r o u g h tp o l l u t i o nt ot h ee n v i r o n m e n t t r a d i t i o n a ld e t e r m i n a t i o nm e t h o do n l yf o rs i n g l er e s i d u ec o u l d n o tm e e tt h en e e do ft h en o w a d a y sl a b o r a t o r y af a s t ，s i m p l e 、i n e x p e n s i v e 、n o n p o l l u t i o nt o e n v i r o n m e n ta n de f f e c t i v em a t r i xc o m p o n e n tr e m o v em e t h o df o rd e t e r m i n a t i o nf o rm u l t i - r e s i d u e si s e s s e n t i a lf o rl a b o r a t o r y i n2 0 0 3 ，a n a s t a s s i a d e sa n dl e h o t a y , e ta 1 f r o mt h ee a s t e r nr e g i o n a lr e s e a r c hc e n t e ro fu n i t e d s t a t e s a g r i c u l t u r a ld e p a r t m e n td e v e l o p e d af a s ta n de a s ym u l t i r e s i d u em e t h o d e m p l o y i n g a c e t o n i t r i l ee x t r a c t i o n p a r t i t i o n i n ga n d “d i s p e r s i v es o l i d p h a s ee x t r a c t i o n f o rt h ed e t e r m i n a t i o no f p e s t i c i d er e s i d u e si np r o d u c e t h em e t h o d ，c o m p a r e dt oo t h e rm e t h o d sh a st h ea d v a n t a g eo fq u i c k , e a s y , c h e a p ，e f f e c t i v e ，r u g g e d ，a n ds a f ek n o w na sq u e c h e r sm e t h o d l a t e ro n ，t h i sq u e c h e r s m e t h o db e c a m ea o a co f f i c i a l a c c o r d i n g l y , s t u d yo nt h ec r i t i c a ls t e p si nq u e c h e r sm e t h o da n d i m p r o v ei t , m a d ei tf i tf o ro u rn e e d si nm u l t i p e s t i c i d e sr e s i d u eh a v ei m p o r t a n tm e a n s t h em a i n o b j e c ti no u rs t u d yi st od i s c u s st h ec r i t i c a lf a c t o ri m p a c tt h er e s u l t s ，c h o o s et h em o s tp o p u l a ru s e d p e s t i c i d e si no u rc o u n t ya n dt h ep e s t i c i d e so nt h er o u t i n em o n i t o r i n gl i s to fa g o - p r o d u c t sq u a l i t ya s o u rr e s e a r c ht a r g e t sa n dd e v e l o pa r ta d a p t i v em e t h o db a s e do nt h eq u e c h e r s m e t h o df o rt h e d e t e r m i n a t i o no fm u l t i p e s t i c i d e sr e s i d u ei nc i t r u s ，d e t a i l sa r ea sf o l l o w s ： ( 1 ) c o m p a r i n gw a sc o n d u c t e db e t w e e ne x t r a c ts o l v e n t s ，a m o u n to f s a l ta n dd i s p e r s i v es o r b e n t u s e di np r e t r e a t m e n ta n di t se f f e c to nc l e a n u p r e s u l t sa sf o l l o w s ：t h es a m p l ea m o u n t ：a n h y d r o u s m a g n e s i u ms u l f a t e ：s a l ti s 10 ：4 ：1 t h ed o s a g eo fa d s o r b e n tp s a g c bi s6 0 m ga n d0 m g 晰llm l w 西南大学硕七学位论文a b s t r a c t a c e t o n ea n dc y c l o h e x a n e ( 3 ：7 ) c a p a c i t ya f t e re x t r a c ts e c o n dc e n t r i f u g a l ( 2 ) p e s t i c i d er e s i d u e sw e r ed e t e r m i n e db yg c m s ，r e t e n t i o nt i m ea n dt o t a lc u r r e n t c h r o m a t o g r a m sw e r eo b t a i n e db ys c a np r o g r a m o n et a r g e ti o na n dt o wo rt h r e eq u a l i t yi o n sw e r e o b t a i n e d b ys i mp r o g r a mt om i n i m i z et h eb a c kg r o u n dt oi m p r o v et h es e n s i t i v i t yo ft h e d e t e r m i n a t i o n ( 3 ) m a t r i x - i n d u c e de f f e c t sw e r er e v i e w e db e t w e e ns t a n d a r da n dm a t r i xs t a n d a r d am e t h o df o r c o m p e n s a t i o nf o rm a t r i x - i n d u c e de f f e c t st or e d u c et h ee r r o rf o rq u a n t i t a t i v ea n a l y s i sw a sc a r d e do u t e x p e r i m e n t a lr e s u l t ss h o wt h a t9 4 o fp e s t i c i d e sh a sm a t r i xe n h a n c e d c e p h a t e 、d i m e t h o a t e 、 f e n i t r o t h i o n ，m e t h i d a t h i o n ，i m a z a l i l ，臼i a z o p h o s ，p h o s m e t ，f e n p y r o x i m a t e ，p r o p a r g i t ea n dd i c o f o l h a do b v i o u sm a t r i x i n d u c e de f f e c t ( 4 ) d e v e l o pag c m sm e t h o db a s e do i lt h eq u e c h e r sp r o c e d u r et od e t e r m i n a t e5 5k i n d so f p e s t i c i d er e s i d u e si nc i t r u s ；t h el i n e a r i t y , p r e c i s i o na n da c c u r a c yw e r ei n v e s t i g a t e d t h em e a n r e c o v e r i e so fa l lp e s t i c i d e sw e r ei nr a n g ef r o m71 t o119 ，r e l a t i v es t a n d a r dd e v i a t i o nw e r ef r o m 1 7 3 t o1 7 0 8 a tt h e1 9p e s t i c i d e si s0 1m g k g , o 4m e k ga n d 0 8 m g k g ：2 2p e s t i c i d e si s0 0 2 5 m e k g 、0 1m g ，k g 、0 2m e k g ，4p e s t i c i d e si s0 0 0 5m e k g 、o 0 2m e k g 、o 0 4m e 蝇s p i k el e v e l ， t h ep r e c i s i o na n da c c u r a c yo ft h i sm e t h o dm e e tt h er e q u i r e m e n to fr e s i d u ea n a l y s i s t h el i m i to f d e t e r m i n a t i o no f5 5k i n d so fp e s t i c i d e si sb e t w e e n0 7 51p e k g 5 5 5 6 “g k g , l i m i to fq u a n t i t yi s b e t w e e n2 3 8 0 9 e k g - 18 8 9 0 1 上e k g 。 k e y w o r d s ：c i t r u s ；q u e c h e r s ；g c m s ；m u l t i p l ep e s t i c i d er e s i d u ea n a l y s i s v 两南大学硕士学位论文第一章文献综述 第一章文献综述 1 1 农药多残留前处理新技术 据报道，目前美国已规定的农药残留最大允许限量眦) 有8 6 6 9 项，日本有9 0 5 2 项，联 合国标准有3 5 7 4 项，食品法典委员会( c a c ) 有2 5 7 2 项，欧盟有2 2 8 9 项，而我国国家标准和 行业标准只有4 8 4 项【l 】。我国是农药生产和使用大国，由于农药的不合理利用，农药使用监管 不力等原因，导致人们在食用被农药污染的食品后可能发生急性或慢性农药中毒，甚至可能 威胁人类健康或生命安全。同时国际上的农药残留限量标准作为技术壁垒影响了我国食品的 进出口贸易，成为我国出口果蔬、大米、茶叶等农产品的重大制约因素。我国柑橘种植面积 和产量为世界第一，其中9 5 作为鲜食，5 作为加工。然而，作为我国第一大水果产业，其 出1 2 1 贸易形势却不容乐观，突出表现为部分农残超标，且农残检测达不到发达国家水平【1 。】。 农药残 碧( p e s t i c i d er e s i d u e s ) 是指由于生产过程中农药的应用而残留于生物体、农产品和环 境中的农药亲体及其具有毒理学意义的杂质、代谢转化产物和反应物等所有衍生物的总称。 农产品组分比较复杂，农药残留又是痕量的，一般在p p m 和p p b ，且存在农药的同系物、异 构体、降解产物、代谢产物和轭合物影响，要想除去与目标物同时存在的杂质，减少检测过 程中的干扰峰，避免检测器和色谱柱污染，样品前处理十分重要，大约占工作量的2 3 左右。 现在常用的食品中农残预处理方法有： 1 1 1 固相萃取法( s p e ) 它基于液- 固色谱理论，利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基质 和干扰化合物分离，再利用洗脱液洗脱，也可选择吸附干扰杂质，让被测物留出，利用吸附 填料和洗脱液互相作用，实现组分分离净化。例如有机氯和有机磷农药预处理常用的f l o r i s i l 柱。但目前此种前处理方法仍然存在一些不足：一是处理复杂样品时有时会引起回收率的偏 低，对目标物有吸附作用：二是吸附剂选择性不强，提取液净化不完全，不能吸附某些基质， 造成检测的基质效应明显。 1 1 2 固相微萃取( s p m e l 通过萃取头涂液对目标物进行吸附，然后解吸、分析，不需溶剂。集萃取、纯化、浓缩为 一体，可以实现对固、液、气样品的分析。解决了传统固相萃取的一些缺点，如油性物质或固 体对吸附剂的堵塞等，同时缩短了分析时间，二次污染微小，广泛用于固体、液体和气体中 的挥发性、半挥发性物质的富集和检测，包括在粮食、蔬菜、水果、饮料等各类产品中的应 用。主要缺陷：纤维萃取针头寿命短，纤维上吸附一些杂质在后，难以清除，改变了涂层的 性质，对结果的准确性有影响。 1 1 3 凝胶渗透色谱法( g p c ) 利用多孔物质，依据不同组分的分子大小和形状不同进行分离、萃取和净化，特别适用 于有机污染物的痕量分析。优点是使用范围广、重现性好、可以重复利用柱子以及自动化程 度高，适用于多类食品提取液的净化，尤其对脂类和色素含量高的样品净化效果明显。主要 缺点是大分子的分析物会随着脂类干扰物提前流出，而小分子的干扰物会夹带洗脱到分析物 中，回收率受到影响。二是采用大内径柱时，有机溶剂消耗量大，净化时间长。 1 1 4 超临界流体萃取( s f e ) l 西南大学硕士学位论文第一章文献综述 利用超临界流体中不同组分溶解度不同，且不同压力下溶解能力会不同，改变萃取剂流 体压力，可将组分逐一萃取分离，最常用的超临界流体是c 0 2 ，可用于提取非极性或极性较 小的农药。优点是具有很好的萃取效力和速度，与分析仪器在线联机，大大提高灵敏度；缺点 是仪器设备昂贵，试验成本高；且萃取过程中需要优化较多参数。且不同样品的分析都要重 新优化萃取方法，样品基质对萃取结果影响较大。 1 1 5 其他 加速溶剂萃取( a s e ) ，具有溶剂用量少、萃取时间短、萃取效率高等优点，。根据分子印迹 聚合物的特殊优点，将其用做固相萃取的吸附剂材料，具有较高的特异性和选择性，对模板 分子有预定的识别性而且制备方法简单。 1 2q u e c h e r s 方法及其在食品农药多残留分析中的应用 1 9 8 9 年，美国b a r k e r 纠2 】首次提出可同时分散与萃取固体、半固体样品的基质固相分散 萃取( m s p d ) , 技术。该方法将涂渍有c 1 8 等多种聚合物的担体固相萃取材料与样品一起研磨， 将其作为填料装柱，并用不同的溶剂将各种待测物洗脱下来。该技术浓缩了传统样品前处理中 的样品匀化、提取、净化等过程，减少了组织匀浆、沉淀、离心、p h 调节和样品转移等操作步 骤，避免了样品的损失，并逐渐在各个领域得到广泛应用，其实质是基质分散固相萃取。2 0 0 3 年， a n 雒t a s s i a d e 、l e h o t a y 3 等开发了一种新的样品前处理技术q u e c l l e r s ( q u i c k ，e a s y , c h e a p , , ， e f f e c t i v e ，r u g g e da n ds a f e 的简称) ，顾名思义这种前处理方法快速、简单、便宜、有效、可靠 和安全。其实质是基质分散固相萃取，样品用有机溶剂快速提取后，经脱水剂、吸附剂净化 处理，定容上机。 1 2 1q u e c h e r s 方法的国内外的研究进展 q u e c h e r s 方法自诞生至今，因其独特的优势和快速、简易、价廉的特点，在农药残留分 析中广泛应用。虽然产生不久，但其方法应用屡见报道。 l e h o t a y 【4 】等研究能同时检测2 2 9 种不同极性农药的方法。采用q u e c h e r s 前处理方法， 经液相、气相和质谱联用分析蔬菜水果中的2 2 9 种农药。其平均回收率在7 0 - - 1 2 0 ，其中有 2 0 6 种农药回收率在9 0 旷1 1 0 ，r s d 均f 1 0 。那些极易降解的农药如磺草灵、达草特、百 菌清等的检测结果也较好。 n g u y e n t s 等采用q u e c h e r s 前处理方法，g c m s 分析水稻1 0 9 种农药，回收率均在 8 0 1 1 5 之间，, r s d 均 1 5 ，其定量限达到了韩国农药残留的限量标准。次年, n g u y e nt d t 6 】也 采用q u e c h e r s 样品前处理方法，并采用气相色谱质谱选择离子监测模式，对蔬菜中1 0 7 种多 农药残留进行检测，得到了满意的结果。其加标回收率为8 0 1 1 5 相对标准偏差均 9 3 ， r s d 均 1 0 ，只有两种农药的回收率不理想。 q u e c h e r s 方法不仅可运用于水果、蔬菜、谷物的分析检测，还可以分析基体更加复杂的 全血中的药物残副引。农业部胡西洲【9 】等是国内最早引进q u e c h e r s 方法的，他研究蔬菜中l1 种有机磷农药残留分析，用含分析保护剂1 乙酸的乙腈提取样品，以无水醋酸钠代替氯化钠作 2 西南大学硕士学位论文第一章文献综述 为除水剂，借助醋酸醋酸钠缓冲系统来控制水相和有机相的酸碱度在微酸性，以提高某些对碱 敏感农药的回收率。结果表明，回收率在6 7 7 0 1 0 5 3 之间，r s d 1 0 。6 ，证明该法适合蔬菜中 的农药残留分析。 q u e c h e r s 方法作为一种多农药残留分析方法不仅能检测含水量较高的样品，也能分析 含水量较低的样品。李剩1 0 】等利用改进过的q u e c h e r s 方法对低含水量的枸杞进行前处理， 气相色谱一质谱一选择离子监测模式检测1 2 种常用农药。1 2 种农药的检出限均在2 l s l 上g k g 范 围内，高中低三个水平的回收率在7 6 o 一1 1 4 0 ，r s d 均小于2 0 。 张秀尧【1 1 1 3 】等建立了的快速测定水果蔬菜中3 9 种有机磷农药的气相色谱火焰光度检测 方法，一位检测人员可在2 0 - 3 0m i n 内完成6 1 2 个预称量好的样品的前处理工作，每个样品 的消耗费用低于5 元人民币。结果显示3 9 种有机磷农药的加标回收率在7 4 3 , - - 1 1 4 ，相对 标准偏差在3 一1 2 之间，检出限小于0 0 1m g k g 。张秀尧1 1 2 1 习工作组又于次年先后建立了 快速测定蔬菜中常见的5 2 种含卤素农药残留的气相色谱电子捕获检测方法和对蔬菜和水果中 常见的2 1 种n 甲基氨基甲酸酯类农药及其代谢产物残留进行液相色谱柱后衍生荧光检测方法， 均得到满意的结果。 2 0 0 8 年董剃1 4 】工作小组建立一种动物组织中兽药残留量的q u e c h e r s h p l c 检测方法。 结果检测限分别为克球酚、磺胺类o 0 5m g k g 、地克珠利o 1 0m g k g 。在添加浓度为0 1 1 0 m g k g 范围内，回收率均可在6 5 0 , - - 1 0 0 ，相对标准偏差1 * * - - 1 0 。改良后的农药多残留检测 q u e c h e r s 样品处理技术在兽药残留检测的成功运用，说明q u e c h e r s 方法仍然有广阔的发 展空间。 1 2 2 q u e c h e r s 方法的优势 q u e c h e r s 是一种农药多残留分析的前处理方法，可测定含水量高( 8 0 * 0 - 9 5 ) 及干燥样 品中的农药。在农药多残留的分析中，存在的一个问题是不同种类的农药具有不同的化学性 质。食品样品的基质都较为复杂，含有大量的色素、油脂、甾醇以及其它成分，这些都可能 影响测定的结果。而q u e c h e r s 前处理方法可以通过不同的净化机针对性的减少这类问题的 影响：方法的稳定性好，精密度高，添加回收率高，对大量极性及挥发性农药品种的添加回 收率可以满足检测需要；可以采用内标法或外标法进行校正，精密度和准确度能满足要求； 分析时间短，能在3 0 4 0 m i n 内完成l o 2 0 个样品测定，比现有的国标方法节约2 3 的时间； 溶剂使用量少，成本低廉，污染小且不使用含氯化物溶剂；操作简便，无需良好训练和较高 技能便可很好的完成；试验过程中使用很少的玻璃器皿，样品制备过程中所使用的仪器设备 简单，所需空间小，在小的、可移动的实验室便可完成。 1 3 基质效应 从定义来看，“基质效应”是一个很广泛的概念，国际标准化组织对“基质效应”所作定 义是“除被测定物质以外样本的特征，它可以影响到被测物的检测及测定结果”。基质效应几 乎存在于所有的样品中，因为检测样品的任何一个组分时，都不可避免地要受到“周围的物 质”的影响消除基质效应的方法主要有以下几种： 1 3 1 基质净化法 就农药残留检测来说，基质净化是必须的。一方面它可以通过净化剂和不同的净化方法使 3 西南大学硕士学位论文第一章文献综述 量皇寡菖鲁曼曼! ! ! ! ! 曼詈鼍t i t 自, 皇葛! 曼皇皇詈暑喜蔓詈巴! 暑! 昌暑曼詈篁葛皇曼曼曼鼍詈皇皇詈鼍薯 农药和基质组分最大化分离；另一方面，可以减少难挥发性化合物或热不稳定化合物对仪器 系统的污染。如果试样不经净化而直接进行分析检测，将增加仪器的维护频率，从而导致样 品分析通量减少，分析效率降低。 1 3 2 进样技术 不分流进样方式仍是大多数实验室分析农药残留时采用的进样技术。热不分流进样技术 易于优化、耐用、可靠，适合脏样品的分析，因此有利于痕量农药残留的定量检测。程序升 温汽化( p t v ) 进样器在溶剂分流模式下，可以直接进大体积的复杂基质样品，克服了热汽化进 样的一些缺点。 1 3 3 校正因子校准法 在一个较长时间或一段时期内能保持仪器稳定的系统中，可以采用纯溶剂校准曲线校正 基质匹配校准曲线，并用纯溶剂校准曲线计算基质提取液中农药的准确浓度。 1 3 4 加入分析保护剂法 分析保护剂是仿效基质保护作用的单一化合物或简单的混合物。当往纯溶剂标准溶液和 样品溶液中加入相同量的保护剂时，它能同等程度地补偿标准溶液和样品溶液的基质效应。 1 4 大体积进样气相色谱技术在农药残留分析中的应用 大体积进样( l a r g ev o l u m ei n j e c t i o n ，l v i ) 技术是基于气相色谱进样技术发展起来的一 种更有效提高检测灵敏度的方法。它是一个操作灵活、功能强大的毛细管气相色谱进样系统， 可以有效提高分析的检出限，还可以减少样品的处理量，提高前处理速度。 p t v 进样器的基本结构，上端是载气入口和进样口，下端和毛细管色谱柱相连接，旁侧是 分流阀。进样器内置有衬垫管，衬垫管的内径自1m i l l 到4m m ，供不同进样量用，前者适用 于1 0 2 5ul ，后者适用于1 0 0 1 5 0l al ，p 1 r v 的基本结构示于图1 。 l i 置l t 避样 l 钢1人体积p tv 进榉瞒乏蠼l 削 大体积进样在样品注入后包括溶剂放空、不分流转移和色谱检测三个阶段。样品注入后 ( 时) ，分流阀打开( 图1 分流阀工作以虚线表示开，实线表示关) ，p t v 进样器温度先在溶剂的 4 西南大学硕十学位论文第一章文献综述 沸点温度以下( o 9 0 ) ，在大流量的载气吹扫下，溶剂蒸气放空，从分流阀逸出，高沸点的待 测物则留在衬垫管上；分流阀关闭，p t v 进样器快速升温，留在衬垫管上的待测物被全部转移 到色谱柱的顶端。转移结束后，分流阀再次打开，除去进样器内残留的溶剂和一些难挥发的 基体杂质，此时，色谱柱也开始程序升温，柱顶端的待测物开始进入仪器分析的工作状态。 袁家齐等【i5 】人研究了“胃袋式”大体积装置在农残检测中的应用，基于新型“胃袋式” 衬管之上，其特点是操作较简便，无需添加填充物。用此装置2 0 此进样分析西红柿、菠菜和 大米中1 6 种农药，与l 此不分流进样相比较，西红柿中的各农药的检测灵敏度可以提高1 0 倍以上；菠菜中的大部分农药的检测灵敏度可以提高2 l o 倍；大米中一部分可以提高2 l o 倍，一部分的检测灵敏度反而降低，因为增大迸样量后，基质也相应增加，影响检测灵敏度。 用这种装置可以通过增大进样量提高检测灵敏度，且大部分农药的线性和重复性良好，适合 分析基质简单物质中的农药残留。 李礼等i l6 l 利用微型固相萃取柱结合胃袋式大体积进样用g c m s 检测食品中2 0 5 种农药 残留进行测定，分别测定了菠菜、洋白菜、苹果、大米和大豆中，通过增加进样量提高检测 灵敏度，减少样品处理量，缩短前处理时间，采用在空白基质中加标的方法消除基质对准确 定量的影响。整个前处理过程只需5 0 6 0m i n ，部分农药如甲胺磷、草毒死、乐果、速灭磷、 落长灵等，由于熟稳定性差或者在前处理过程中极易损失，回收率较低，平均回 收率在8 0 1 2 0 之间，r s d ( n = 7 ) d 、于1 0 。 黄惠玲等l 7 1 建立了g c m s 与大体积进样技术结合测定果蔬中的1 7 种农药。样品经丙酮 提取，固相萃取小柱净化，丙酮定容，g c m s 的选择离子模式和大体积进样技术进行测定， 相对检出限降低1 2 个数量级。大多数农药的线性范围为0 1 0 5 1 0m g k g ，回收率范围在 7 7 一- 1 0 7 之间，相关系数为0 9 9 4 3 - - - 0 9 9 6 ，相对标准偏差为3 5 1 0 3 。 廖华勇掣1 8 】建立了g c i v i s 气相色谱一质谱法同时检测食品中毒鼠强和氟乙酰胺的方法， 重点讨论了具有溶剂排空模式的程序升温汽化( p t v ) 进样口对大体积进样的作用。通过对p t v 温度、最大进样体积、分流排空流量和吹扫时间等p t v 参数的优化，选择离子模式和大体积 进样将检出限提高1 0 2 0 倍，两种灭鼠药的回收率均为8 3 7 1 0 5 ，相对标准偏差为1 5 “2 。 王建华等【l9 】探讨了具有溶剂排空模式对程序升温蒸发( p t v ) 大体积进样的作用。通过对 分流排空量、吹扫时间、p t v 温度及其进样体积等p t v 参数的优化，提高了检测灵敏度并建 立了浓缩果蔬汁中农药多类多残留的l v i g c m s 法，农药品种包括有机磷类、有机氯类、拟 除虫菊酯类等共计5 8 种农药。实验所得的平均回收率在8 2 -