（动物学专业论文）贵州瘰螈属物种的系统学研究.pdf

摘要 本文研究了贵州尾斑瘰螈( 雷山) 、尾斑瘰螈( 江口) 、瘰螈 心朋朋船d 斫幻刀s p ( 龙里) 和瘰螈砌朋m 酷d 以幻，zs p ( 织金) 两待定 种( 2 0 0 7 年采获) 外部形态和头骨形态，结合其它已报道种的相应 数据，对瘰螈属物种系统发育关系进行研究，结果如下： 1 雷山( 指名亚种) 和江口两地尾斑瘰螈存在着微小的差异，属种 内个体在地理和生殖上发生隔离初期所形成的群体，有一定的 形态特征和地理分布区，分布于江口的尾斑瘰螈应为尾斑瘰螈 的一亚种，应该命名为：尾斑瘰螈江口亚种尸矗m m 鲫d 们加 c 口“c 而窄“刀c f 以伽s 勉，楚如“；，z s 括s s p n 2 瘰螈待定种1 砌m m 田d 以勿刀s p ( 龙里) 符合瘭螈属模式种基 本特征，相较瘰螈属其它物种具有独特的性状：( 1 ) 犁骨齿列 长，后段与左右方骨在同一水平位置；( 2 ) 泄殖腔肿瘤状隆起， 朝后倾斜，肛裂横向成缝状；( 3 ) 背脊棱和背侧棱间及四肢背 面皮肤较光滑；( 4 ) 顶骨较高，呈肿胀状“v 形隆起；( 5 ) 全身背面紫黑色镶嵌有淡黄色斑纹；( 6 ) 腹面中间一行椭圆形、 长条形或哑铃型桔黄色斑纹或桔红色斑纹排列有序，腹背面交 界处成两行淡黄色花纹斑。该物种很有可能为瘰螈属的新种。 本研究建议将其定为瘰螈属一新种，并命名为：龙里瘰螈新种 p c | r a m e s o t n t o n1 0 n g l i e n s i ss p n q no 3 瘰螈待定种2 砌朋m 伽删勿刀s p ( 织金) 符合瘰螈属模式种基 本特征，但其具有独特的性状：( 1 ) 泄殖腔肿瘤状隆起，朝后 倾斜，肛裂纵向成缝状；( 2 ) 腹面正中有一条弯曲的桔黄色斑 纹在后肢基部弯向两侧；( 3 ) 左右鳞骨后突连线比枕髁后缘向 头骨前端缩进许多；( 4 ) 额鳞弧较细，额鳞窝圆大。该物种很 有可能为瘰螈属的新种。故建议将其定为瘰螈属新种，并命名 为织金瘰螈新种，切朋聊钌d 护泐，z 拍i 砌fs p n o v 。 4 雷山和江口两地尾斑瘰螈在聚类分析中最早聚合，与中国瘰螈 组物种构成姊妹群，从现有的文献资料看，并不能清楚的判断 尾斑瘰螈是亚属还是种组，本文暂按种组处理。 5 采自贵州织金和龙里的两待定种在聚类分析中最早聚合，两者 的相似性较高，与尾斑瘰螈形成姊妹群，同时聚类分析结果也 表明两待定种与尾斑瘰螈的相似程度高于其与中国瘰螈种组物 种的相似程度，应属尾斑瘰螈种组物种。 关键词：瘰螈属，尾斑瘰螈，待定种 a b s t r a c t t l l i s 础i c l er 印o r t e dm em o 印h o l o 酉c a l 觚dt l l es k u l lc h 锨c t 嘶s t i c so ft 、) i r o s p e c i e s 锄d 铆op e i l d i n gs p e c 硫o fm eg e n e r ap 口m ，”嚣d 删幻n ；m e a i l w l l i l e ，w e r c s e a r c h e dm ep h y l o g e n e s i so ft l l eg e l l e r a w h ic _ hc o m b i n e dm er e l a t i v ed a t ao fo m e r s p e c i e so f m i s 舀m e r a _ j ) 口朋m 瞄d 鲥幻以，m er e s u l t 嬲f o l l o w s ： 1 1 1 1 e r ew e r em i n o rd i f j 衙e n c e sb 咖e e i lm el o c a l p o p u l a t i o n o f r i 朋，z 嚣d 研幻刀猢咖，l c 纽现岱w h i c hd i s t r i b u t e di nl e i s h a i l gm o u n t a i na i l d j i a i l 啦0 u ，m e s e 押os p 鲥鼯b e l o n g e dt o m ec l i n ew i l i c hc a u s e db ym e g e o 鲫h i ca i l dr 印r o d u 嘶v ei s o l a t i o n ，a n dh a v es o m ec e n a i l lm o 叩h o l o 舀c a l a n d g e o 铲印l l i c d i s t r i b u t i o n 跗w e s u g g e s t e d 缸l e忍，口m 嚣d 川幻聆 “却“玎c 幻如岱w h i c hl i v e di 1 1j i a l l 班o us h o u l db eag e 0 伊印h i cs u b s p c c i 懿o f 鼢形聊钉d 斫幻肛“却“，z c 纪f 淞，a l l d s h o u l db en 锄e d 鹊， 口m m 酷d 们幻珂 c 口z 却“刀c f 口加砌，z ，功”p 以s 西s s p r l 2 。t h ep e i l d i n gs p 砌e sa l s oh a dt h eb a s i c 昀i t so ft l l em o d e ls p e c i e so f 砌朋聊甜d 州幻疗，w h i c hd i s t 舶u t e di nl o n 酉ic o u i l 劬b u ti th a dm eu 1 1 i q u e c h a r a c t e r i s t i c sc o m p a r c dw i t l lo m e rs p e c i e so fm es 锄eg e l l e r a ： ( 1 ) t l l e v o m 嘶n et e e t l lr o ww a sl o n g e r a n dm eb a c kp a r t si sa tt l l es 锄eh o r i z o n t a l l e v e lw i t ht l l e1 e ra l l d r i g h tq u a d r a t e ；( 2 ) t h e r ew a s as h 印eo f t u m o u r a l p o p h y s i so n l ec l o a c a eo fm i ss p e c i e s ，a n di n c l i n e db a c k w a r d s ， m e a l 】w h j l e ，m e 仃a 1 1 s v e r s ea n u sc r a c kw a sn a r r o ws l o ts h 印e ；( 3 ) t h es b n s b e 时e e i lm ev e n e b r a l 订d g e sa i l dt h el a t e m lr i d g e sa i l dt 1 1 eb a c ko fo u rl i n l b s w e r es m o o t h ；( 4 ) n ep 撕e t a lw a l sh i 曲e ra n dh a dav - s h 印ea p o p b y s i so ni t ；( 5 ) 1 1 1 ec o l o ro ft h ew h o l eb o d yb a c kw a sp u 印l ea i l d b l a c k ，t l l e r ew e r eb u f rc o l o r s t r i p e ss t u d d 咄( 6 ) n e r cw a sa i la 仃a yo fo v a l ，l o n g s t r i p e do rd 啪b b e u s h 印e ds t r i p e s0 nt l l em i d d l eo fi t sb e l l y 锄dt h e r ew e r et w ol i n e sb u f rs t i r p e s o nt h eb o u n d a ub e m e e i lt h ed o r s a la i l dv e i l t r a l 3 t h ep e n d i n gs p e c i e sa l s oh a dm et r a i t so ft h em o d e ls p e c i e so f p a r 锄e s o t r i t o n ，w - h i c hd i s t r i b u t e di nz h i j i nc o u n t y ，b u ti ta l s oh a dm es p e c i a l c h a r a c t 嘶s t i c s ：( 1 ) t 1 1 e r ew a sas h a p eo f t u m o u r a p o p h y s i so nt h ec l o a c a eo f m i ss p e c i e s ，a n di n c l i n e db a c k w a r d s ，m e a i l 、) l ，h i l e ，m e1 肌g t h w a y sa n u sc r a c k w a u sn 锄r o ws l o ts h a p e ( 2 ) t h e r cw a sa c u r v i n go r a n g es t r i p eo nt h em i d d l eo f i t sb e l l ya n db e n d i n gt ot h el a t e r a lo fm eb o d ya tt h eb a s eo ft h eh i n dl i m b ；( 3 ) t h ej o i n i n go ft h eb a c kp r o t i j b e r a n c eo fl e ra i l dr i g h ts q u 锄o s a lr e 眈c t e dt o t h e 舶n to ft h es k u nm o r et h a l lt h ec o n d y l u s o c c i p i t a l i s ；( 4 ) t h e 丘o n t s q u 锄o s a la r c hw a ss l e n d a i l dt h es h a p eo ff 如n t s q u 锄o s a ls o c k e tw 鹪 r o u n d n e s sa l l d 百g g 瓯 4 1 1 1 ef i r s ta g g r e g a t i o n o c c u r r e db e 研e e i lt l l e 铆o1 0 c a lp o p u l a t i o n so fl e i s h 肌g m o u n t a i n 觚dj i a i l 武o ua l l a l y z e db yc l u s t e ra 1 1 a l y s i s ，a 1 1 dt h e s e 觚op o p u l a t i o n s c o m ei m ob e i n gt l l es i s t e r 印u pw i t ht h ep 口m ，z 甜d 州幻刀c 伽e ，z s 啊c f 嚣 g r o u p a c c o r d i n gt 0t h ep r e s e n tr e f e r e i l c e s ，i tw 嬲u n c l e a rt l l a tw h e t l l e rt h e ，k 旭聊船d 以幻，1w 丛s u b g e i l e mo rs p e c i e sg r o u py e tn o t ，s ow ec o n s i d e r e dm e j k 旭m d 州幻甩a ss p e c i e sg r o u p 5 t h e 俩op e n d i n gs p e c i e sw e r ec o n v e 唱e di nc l u s t e ra 1 1 a l y - s i s ，w h i c hc o l l e c t e d 舶ml o n 哲ic o u n t ya n dz h i j i nc 0 吼t y ，t h e yh a dh i 曲e rc o m p a r a b i l i t ma n dc o m e i i l t ob e i n gt h es i s t e rg r o u p sw i t h 尸：口朋聊船d 所幻咒c 口“却“玎c 幻f 郴，m e a i 】w h i l e ， t h er e s u l to fc l u s t e ra n a l y s i ss h o w e dt l l e c o m p a r a b i l i t yb e t 、) i r e e nt h em o p e n d i n gs p e c i e sa i l d 砌m 所甜口们幻甩伽“却“刀c 细f 淞w a sh i 曲e rm a nt h e s e 俩o s p e c i e sw i t ht h ef 切m ，z 嚣d 护f 幻咒如砌e 珊五啤7 卯f 冒伊o u p ，s ow es u g g e s t e dt h e 铆op 肌d i n gs p e c i e ss h o u l db e l o n gt oj 切阳历钌d 圳幻，l “咖p 甜以c 砌f 螂印e c f 邸 目0 u p k e y w o r d ：p 猢n e s o t r i t o n ，切m 聊甜砷伽”“幽p “阼c 尬m ，p e n d i n gs p e c i e s l v 学位论文原创性声明和关于学位论文使用授权的声明 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下， 独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本 论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对 本文的研究做出重要贡献的个人或集体，均已在文中以明确的方 式表明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。 论文作者签名：镌、孚手 2 加方年岁 月争日 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解贵州师范大学有关保留、使用学位论文的规 定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和 电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权贵州师范大学可以将 本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采 用影印、缩印或其它复制手段保存论文和汇编学位论文。 ( 保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名：体、哥半 导师签名彳锄忑 占年f 月夕歹日 第一章前言 瘰螈属尸钮m ，l 嚣d 们幻以动物隶属于有尾目c a u d a t e 蝾螈科s a l 锄a i l d d d a e 。当 前被广泛接受的瘰螈属动物有六种，即：1 尾斑瘰螈p 口朋m 钌d 州幻疗 铭如p “以c 勉加，2 中国瘰螈a f 阳m 船d 删幻疗c 伽g 淞括，3 香港瘰螈 p 口朋朋嚣d 州幻刀j i l d 馏幻，礓节凇话，4 德氏瘰螈砌朋m 酷。州幻，l 比肠淞细矗，5 富钟瘰 螈尸c z 阳埘船d 们幻刀丘拍d ，楚y 胛s 括，6 广西瘰螈砌旭川嚣d 撕幻咒口俘f e 船缸。贵州 仅分布有尾斑瘰螈一种，分别见于贵州雷山县和江口县。s p a r r e b o o m ( 1 9 8 1 ) 认为 其外部形态、生殖行为和产卵方式均与属内其它5 种有较大差别。f r e ”a g ( 1 9 8 3 ) 将尾斑瘰螈订为一新属彳肋m 甜川幻刀。庞家庆( 1 9 9 2 ) 认为彳肋聊嚣护f 幻n 为瘰螈 属的亚属较为适宜。费梁( 2 0 0 6 ) 认为尾斑瘰螈作为瘰螈属的一个种组为宜。 总之，关于尾斑瘰螈的分类地位尚有较大争议。本实验室于2 0 0 7 年采到两种瘰 螈砌朋柳酷d 们幻以s p ( 织金) 和尸c z 朋研船d 州幻刀s p ( 龙里) 。本文对贵州这几种瘰 螈的分类和中国瘰螈属系统发育关系进行研究。属种的中文名均按照赵尔宓等 ( 1 9 9 8 ) 。 1 1 蝾螈科研究文献综述 蝾螈科s a l a m a i l d r i d a e 隶属于两栖纲a m p h i b i a 有尾目c a u d a t a ，由g o l d 觚s ( 1 8 2 0 ) 所建，模式属为真螈属s a l 锄a l l d r a 。现存1 5 属6 0 余种，中国有6 属2 0 种 ( 费梁2 0 0 5 ) 。 蝾螈科物种较多，多年来，中外很多学者从形态、行为、毒素、细胞学和线粒 体d n a 等多方面对其分类和系统发育进行了研究。现将中外学者的研究成果简 要的分述如下： 国外学者对蝾螈科动物的研究概况 s a l t h ( 1 9 6 7 ) 根据蝾螈科动物繁殖行为的进化趋势构建了该科的系统进化 树。w a k e h e 和z e t i ( 1 9 6 9 ) 根据舌骨和腮弓的解剖形状特征构建了蝾螈科动物 的系统发育图h 。m a r kb r o t h ( 1 9 8 9 ) 将翻译东美螈灯刷染色体上蛋白的c d n a ( s e 5 a ) 序列的拷贝输入去核的卵母细胞，可高效的翻译其相应的蛋白。 m a c g r e g o r ( 1 9 9 0 ) 对欧螈属所芒 “s 的研究是最系统最全面运用细胞遗传学的 典范。t i t u s 和l a r s o n ( 1 9 9 5 ) 以m t d n a 的1 2 s 和1 6 s r r n a 基因约1 1 8 k b 的部 分序列数据结合4 8 个形态和发育特征，构建了蝾螈科的系统发育树n 。l a u 咖m c h a i l ( 2 0 0 1 ) 研究结果表明：( 1 ) 瘰螈属物种为单系群，尾斑瘰螈是这单系 群里最基本的物种；( 2 ) 蝾螈科动物为并系群，肥螈和尾斑瘰螈与红腹蝾螈的 关系较蓝尾蝾螈密切；( 3 ) 肥螈和尾斑瘰螈在形态、繁殖习性和对环境的要求 上非常相似，具有较近的亲缘关系。d a v i dw w d s r o c k ( 2 0 0 1 ，2 0 0 6 ) 的研究结 果表明：高加索小默螈和伸舌螈属在中新世的早期分化为两个姊妹群，真螈与卢 氏小默螈在中新世的晚期分化为两个姐妹群；并对蝾螈科6 6 个物种中的6 1 个新 m t d n a 信息位点进行综合分析，认为：( 1 ) 卢氏小默螈应属于真螈属；( 2 ) 尾 斑瘰螈和欧螈显示为并系群外，强烈的支持其余各属均为单系群；( 3 ) 亚洲的蝾 螈、肥螈和尾斑瘰螈构成一支；( 2 ) 北美的东美蝾螈、滇螈构成一支；( 3 ) 欧 洲的普通欧螈种组构成一支；( 4 ) 欧洲的冠欧螈构成一支。w b a b i k ( 2 0 0 5 ) 研究表明普通欧螈和喀尔巴阡欧螈为形态分类上的姊妹群，普通欧螈分布广，在 每个冰期的避难所m t d n a 基因分枝进化，而喀尔巴阡欧螈仅分布于喀尔巴阡山 脉，形态单一，并发现普通欧螈基因不断渗入喀尔巴阡欧螈等。 我国学者对蝾螈科动物的研究概况 物种多样性研究：张孟闻先生和他的学生方炳文( 1 9 3 2 ) 等发现并描述了 鼍巷龟：j 琶 甄e c h i n o t r it o nc h i n h a i e n s i s 秀旺贵6 、氓疯螈t y i o t o t r it o nk 形e i c b d e n s i s h 。刘承钊先生( 1 9 5 0 ，1 9 6 2 ) 先后描述并报道了大凉疣螈彬d 于d 删手册 钯f 硼伊门s j s 、蓝尾蝾螈伽印s 册刀删4 川。费梁( 1 9 8 3 ，1 9 8 4 ) 先后描述了 蓝尾蝾螈一新种、海南疣螈新种明d 幻川亡鲫施j ，瑚鲫s 拈和细痣疣螈的新亚 种一文县亚种7 w d 幻棚芒伽a 印p r r f 耿，s 肥似j 舢鲫s j s 。杨大同( 1 9 8 3 ) 描述了蓝 尾蝾螈的新亚种一云南亚种劬9 声钞册“r 螂y “咒以口咒e 船括。寇治通和邢一玲( 1 9 8 3 ) 描述了新种呈贡蝾螈 ，z 唧幽p 馏g d 彬珊括。黄正一等( 1 9 8 3 ) 描述了新种广西瘰 螈砌朋聊甜d f 订扔以以，猡沈，z j 括。w 醯( 1 9 8 9 ) 描述了新种富钟瘰螈砌m ， z 嚣d 州幻，z 肚五d 咄淞缸【4 。邓其祥( 1 9 8 4 ) 报道了了四川省细志疣螈一新亚种一平武亚种 等。从已有的资料来看，有些物种尚有争议。 胚胎发育研究：耿家举( 1 9 6 0 ) 观察了东方蝾螈早期胚胎的发育过程。王朝芳 ( 1 9 8 0 ) 观察了蓝尾蝾螈的早期发育。武玮磷( 1 9 8 1 ) 用免疫酶标技术观察了东 方蝾螈胚胎肌肉t m 生成的时期和部位。高慧( 1 9 8 3 ，1 9 8 4 ) 研究了坦5 i 中胚层 诱导蛋白在东方蝾螈外胚层细胞内的作用部位，使用剂量及诱导时问和诱导强 2 度；研究了东方蝾螈外胚层细胞的细胞周期和细胞同步化；讨论了东方蝾螈外胚 层细胞在阻断细胞周期后的反应能力和不同时相的反应能力等。曾弥白( 1 9 8 4 ， 1 9 8 6 ，1 9 8 7 ) 报道了东方蝾螈早期原肠胚在异源诱导中，诱导物质是通过内吞作 用进入反应细胞的；用电镜观察了经受诱导作用之后胚胎细胞的冷冻蚀刻复型 膜，讨论了细胞间隙连接连接子在信息传递上可能起作用，东方蝾螈细胞连接在 神经管形成过程中紧密连接和间隙连接在各个时期一直存在，而且他们是处于持 续的形态变化之中。戴荣禧( 1 9 8 6 ) 研究了表皮细胞与中枢神经系统联系的问题， 讨论了r b 细胞的来源、数量变化和位置变动等，认为r b 细胞是原始的感觉 细胞。丁小燕( 1 9 8 9 ) 用间接免疫荧光法观察了结合蛋白在东方蝾螈胚胎发育过 程中的生成时期和分布部位。胡思玉( 1 9 9 8 ) 研究结果表明光照对贵州疣螈胚胎 发育的影响较小，水分影响较大，潮湿环境较宜。徐艳玲( 1 9 9 8 ) 报道了温度对 贵州疣螈胚胎发育的影响。张学军( 1 9 9 9 ) 讨论了东方蝾螈瓶状细胞在原肠形成 过程中的作用。谢锋( 2 0 0 1 ) 研究了镇海棘螈早期个体发育等。从上述文献可以 看出，对蝾螈科动物胚胎发育研究较多的物种为东方蝾螈，对其它物种研究的较 少或还没有研究，需进一步加大研究，比较其异同点，希望得出新的发现。 生理学研究：戴荣禧( 1 9 8 2 ) 研究了东方蝾螈表皮细胞自发电活动的振幅和 频率，及其出现和消失的变化过程等。庄孝德( 1 9 8 3 ，1 9 8 5 ) 研究了中胚层在胚 胎表皮传导中的作用，用异龄移植研究了有尾类胚胎表皮兴奋性传导能力的出现 和消失。陈艳华( 1 9 8 5 ) 研究了东方蝾螈胚胎表皮兴奋性在发育中的变化。武玮 磷( 1 9 8 5 ，1 9 9 0 ，1 9 9 5 ) 用细胞内记录技术研究了东方蝾螈胚胎表皮细胞动作电位 的粒子依赖性；研究了能量代谢抑制剂对胚胎表皮细胞兴奋性的影响；记录了东 方蝾螈胚胎表皮细胞膜的静息电位，输入电阻与其兴奋性的关系。费梁( 1 9 8 7 ) 研究了蓝尾蝾螈的肢体再生情况。范三川( 1 9 9 9 ) 观察了蓝尾蝾螈血液组织学。 马德滨( 2 0 0 3 ) 认为东方蝾螈红细胞和白细胞比爬行类的大，淋巴细胞比例最高， 而嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞比例极小等。 形态学研究：章菊明( 1 9 6 0 ) 观察了东方蝾螈的多精受精现象。曲韵芳( 1 9 6 4 ， 1 9 6 6 ) 研究了东方蝾螈的排精和纳精现象；观察研究了东方蝾螈生殖腺的周期性 变化，包括外形和内部结构两部分。苏星煌( 1 9 8 8 ) 观察了东方蝾螈胚胎早期发 育过程中细胞核超微结构。罗素元( 1 9 9 9 ) 用光镜和电镜观察了贵州疣螈精巢的显 微和超微结构。范三川( 1 9 9 9 ) 研究了无斑肥螈的骨骼系统。陆宇燕( 1 9 9 9 ) 对黑 斑肥螈、中国瘰螈、细志棘螈和东方蝾螈部分机能形态学进行了研究等。郑中华 ( 2 0 0 4 ) 研究报道了镇海棘螈的精子结构，镇海棘螈和大凉疣螈的精子形态，镇 海棘螈的精子结构与其生殖习性的关系。李顺才( 2 0 0 5 ) 对东方蝾螈的外形和内脏 进行了系统研究等。 细胞遗传分析研究：施立明( 1 9 7 9 ) 制备了蓝尾蝾螈灯刷染色体并对其活体 进行了观察。朱季美( 1 9 8 l ，1 9 8 5 ) 对东方蝾螈和黑斑肥螈的核型、c 带和免疫 过氧化物酶染色进行了分析研究，制备了东方蝾螈灯刷染色体并绘图。杨玉华 ( 1 9 8 6 ，1 9 9 0 ) 分别报道了红瘰疣螈、蓝尾蝾螈云南亚种、贵州疣螈、无斑肥螈 和中国瘰螈5 种蝾螈科动物的核型。谷晓明和高晓冬( 1 9 9 6 ，1 9 9 7 ，2 0 0 0 ) 先后 报道了贵州疣螈、细痣疣螈、无斑肥螈、蓝尾蝾螈和尾斑瘰螈的核型和c 带。 生态和行为学研究：费梁( 1 9 8 8 ，1 9 9 0 ) 研究了蓝尾蝾螈的繁殖生态；观察 了蓝尾蝾螈的食性和食量及耐饥时间。杨道德( 1 9 9 3 ) 对东方蝾螈的繁殖生态做了 研究。田应洲( 1 9 9 4 ，1 9 9 7 ) 报道了贵州疣螈的繁殖生态，对贵州疣螈的繁殖习 性作了较为系统的观察。辜永河( 1 9 9 4 ) 对贵州疣螈的夏季生态进行了研究。胡思 玉( 1 9 9 5 ，1 9 9 8 ) 对贵州疣螈野外繁殖群体作了观察：对贵州疣螈的捕食行为和 反捕食行为进行了初步的观察；对贵州疣螈繁殖群体进行了初步调查。王延斌 ( 1 9 9 5 ，1 9 9 9 ) 观察了贵州疣螈的繁殖习性；报道了贵州疣螈在贵州西部，西北 部的分布现状及环境影响。徐剑( 2 0 0 0 ) 对无斑肥螈生殖腺季节性变化进行了初步 研究。谢锋( 2 0 0 2 ) 报道了镇海棘螈的产卵位点及其对繁殖成功率的影响。徐剑 ( 2 0 0 2 ) 研究了无斑肥螈的种群结构和食性，对无斑肥螈的生态学进行了观察。谢 锋( 1 9 9 9 ) 报道了有尾类繁殖行为生态学研究的现状和未来等。 分子系统学研究：余平( 1 9 9 2 ) 用聚丙烯酰胺凝胶电泳比较分析了潮汕蝾螈 和东方蝾螈7 种组织的乳酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶同功酶谱。曾科文( 1 9 9 1 ) 对东 方蝾螈各组织l d h 同工酶的带谱分布进行了描述；探讨了蝾螈科演化及l d h 基因在各组织中的特意性表达，提供了生化方面的资料。谷晓明( 2 0 0 0 ) 对贵州5 种蝾螈几种组织的l d h 、e s t 同工酶进行了电泳分析等。 此外，张作干( 1 9 3 5 ) 先生对我国蝾螈科动物的变异进行了研究；费梁( 1 9 9 2 ) 简述了镇海棘螈的研究概况、外型特征、生活习性、研究价值及其濒危现状；庞 4 家庆( 1 9 9 2 ) 对东亚蝾螈科区系的起源和区系的演化进行了讨论；何晓瑞( 1 9 9 8 ) 分析了我国特有滇螈的灭绝及原因；周州( 2 0 0 4 ) 报道了两栖动物种群衰退的研 究进展等。 1 2 瘰螈属研究文献综述 自从1 9 3 4 年瘰螈属模式种报道至今，国内外学者对瘰螈属物种，尤其尾斑 瘰螈的一般生物学特征、行为学、细胞遗传学、分子系统学、驯养情况及系统发 育等做了大量的研究： s p a n c b o o m ( 1 9 8 1 ) 报道了尾斑瘰螈在饲养情况下的生殖行为和产卵方式，发 现：( 1 ) 雄体的交配行为有别于其它瘰螈；( 2 ) 卵常粘连成簇或成串，与属内其 它种在行为上有较大差异。 f r e y t a 甙1 9 8 3 ) 依据头骨狭长骨化较弱，头背骨质脊棱发育普遍较差，吻极宽 扁的鉴别特征结合s p a n e b o o m 的研究将尾斑瘰螈订为一新属彳踟朋嚣删幻刀。 庞家庆( 1 9 9 2 ) 认为彳肋，l 船撕幻以应为瘰螈属的亚属较为适宜，这是因为： ( 1 ) 尾斑瘰螈的性状特征符合以比肠螂细疗为模式种而给出的瘰螈属的特征；( 2 ) s p a n e b o o m 的报道是在饲养情况下的观察，缺乏在自然条件下的观察资料作证 实；( 3 ) 解剖研究表明，瘰螈属各种骨骼形态差异较大，因此不应过分强调这种 差异的系统发育意义。 费梁( 1 9 9 9 ，2 0 0 6 ) 对蝾螈科各属的外部形态和骨骼形态作了对比研究，认 为尾斑瘰螈作为瘰螈属的一个种组为宜。 s h u i l q i n gl u ( 2 0 0 4 ) 的研究表明尾斑瘰螈是这一单系起源组里的最基本物 种。 d a v i dw d s r o c k ( 2 0 0 6 ) 的分子系统学研究也支持s h u n q i n gl u ( 2 0 0 4 ) 的研究 结果，认为尾斑瘰螈是这一单系起源组里的最基本物种。并与其他中国瘰螈物种 形成姊妹群。 此外，我国学者对瘰螈属物种主要是尾斑瘰螈做了大量研究。 谷晓明( 1 9 9 7 ) 报道了尾斑瘰螈核型和c 带，染色体数为2 n _ 2 4 ，包括9 对 中部着丝粒染色体和3 对亚中部着丝粒染色体( n o s 7 、1 0 、1 1 ) ，其核型类似于 国产其它蝾螈科动物，都属单型的对称核型，再次证明蝾螈科动物的染色体进化 相对稳定。尾斑瘰螈与东方蝾螈、黑斑肥螈差异较小，与疣螈属、棘螈属的差异 5 较大。尾斑瘰螈的各染色体都显示弱的着丝粒带。 黄红武( 1 9 9 8 ) 报道了一起食用尾斑瘰螈肉而中毒致死的案例，说明尾斑瘰螈 为有毒动物，不可食用。 吕金海( 1 9 9 8 ) 研究了中国瘰螈的行为习性。 马军( 1 9 9 8 ) 的研究表明富钟瘰螈的舌和齿比广西瘰螈的略发达，雄性消化 道远比雌性的长，个体的两肺长度差异也较后者大。 袁志刚( 2 0 0 0 ) 对富中瘰螈和广西瘰螈六种组织乳酸脱氢酶同工酶进行了比较 研究。 谷晓明( 2 0 0 0 ) 用聚丙酰胺垂直板凝胶电泳技术对贵州疣螈、细痣疣螈、无 斑肥螈、蓝尾蝾螈和尾斑瘰螈的脂酶同工酶( e s t ) 和乳酸脱氢酶同工酶( l d h ) 比较研究分析，结果表明尾斑瘰螈和无斑肥螈有较近的亲缘关系，推测尾斑瘰螈 是蓝尾蝾螈和无斑肥螈之间的过渡类型。 王利民( 2 0 0 0 ) 报道了尾斑瘰螈的生活习性：尾斑瘰螈栖息在海拔10 0 0m 以上的山间溪流所形成的水流平缓或静水的水潭和湾塘中，水域处着生有较茂密 的矮小灌丛和以禾本科植物为主的草丛。在夏季其活动捕食的高峰期是每日的 2 0 ：0 2 1 ：0 0 ，活动场所多是它的捕食场所，尾斑瘰螈主要捕食鳞翅目、鞘翅目的 成虫和幼虫及螺、虾类等一些低栖动物。 李松( 2 0 0 0 ) 对尾斑瘰螈骨骼系统进行了系统的解剖与观察，并详细的描 述了尾斑瘰螈各部分的骨骼的形态结构，为瘰螈属的分类，演化及动物实验提供 完整的资料。 谢锋( 2 0 0 4 ) 报道了重庆地区酉阳县青华林场尾斑瘰螈新纪录，与贵州雷 山标本比较，酉阳标本尾的相对长度较短：贵州雷山标本腹面橘红色有黑斑，黑 斑的数目大小变异颇大，酉阳标本则腹面颜色相同，但黑斑的变化不明显；贵州 雷山标本雄性尾鳍弱，而酉阳标本显著高起。 s h u i l q i n gl u ( 2 0 0 4 ) 构建了中国瘰螈属的系统发育图，认为富钟瘰螈为有 效物种有别于庞家庆( 1 9 9 2 ) 的形态分类。 王延斌( 2 0 0 6 ) 模拟尾斑瘰螈的自然生境，以鱼虫干、金鱼颗粒饲料、水 丝蚓、昆虫幼虫等多样化食物为饲料，水温控制在1 5 2 2 左右，p h 值在5 7 之间，尽量满足其对流水的要求，可使其f 常存活与生长，但未见生殖现象。 6 宋玉赞( 2 0 0 6 ) 报道了中国瘰螈在江西分布的新纪录。 在这些研究中，关于尾斑瘰螈和富钟瘰螈的分类地位，争议较大，但尾斑瘰 螈的研究者所采标本多采自贵州雷山县，广西( 富川) 。关于尾斑瘰螈( 江口) 的分类学研究尚未见报道。 江口和雷山两地尾斑瘰螈生活在不同的栖息地，彼此不能相遇。阻碍了生物 的自由迁移、交配和基因交流，长时间的地理隔离将导致生殖隔离，此两地的尾 斑瘰螈是否已分化形成为独立的种或亚种? 另外我们于2 0 0 7 年在贵州省采到两 种新的瘰螈尸a m ，l 劣。驴泐珂s p ( 织金) 和r 【阳m 甜d 州幻刀s p ( 龙里) ，它们是否新 种? 本研究将贵州两地的尾斑瘰螈标本及螺螈属两待定种与其它已报道种进行 比较，以进一步确定其分类地位。 7 第二章实验材料 2 1 贵州3 种瘰螈生存环境及分布 2 1 1 尾斑瘰螈生存环境及分布 尾斑瘰螈主要栖息在海拔8 0 0 米以上的山问溪流所形成小水潭中，水质良 好，清澈见底，水底多有石块堆积，堆积石块的缝隙常是尾斑瘰螈的藏身之处。 水潭近岸处水底沉积腐烂的枝叶，溪流两岸着生着茂密的矮小灌木丛和以禾本科 植物为主的草丛。 尾斑瘰螈在国内分布于贵州( 雷山、江口) 、湖南( 江永) 、广西( 富川) 南 部和重庆( 酉阳) 。 本研究所用江口县的尾斑瘰螈标本采于梵净山，此处溪流较宽，水流较急， 周围数十罩无住户，游客罕至，溪流周围多矮小灌木丛和以禾本科植物为主的草 丛，而雷山县的尾斑瘰螈标本采于方祥乡乌马河，溪流较窄，水流较平缓，周围 不远处便是聚集的村庄，溪流周围多为田地。两地标本栖息地生境不同。 2 1 2 两瘰螈属待定种生存环境及分布 瘰螈砌m 研嚣d 研幻，zs p ( 龙里) ：生活在海拔1 1 0 0 1 2 0 0 m 水流平缓的大水塘 或有地下水流出的水塘中，水质清澈，水底多为石块、泥沙和水草。白天常隐伏 在溪底石下、腐叶堆或溪边草丛中，很少活动，有时在水中以摆动尾部游泳至水 面呼吸空气。目前仅在贵州龙里县水场乡发现。 瘰螈砌m 朋甜d 所幻刀s p ( 织金) ：栖息在水井周围泛起的小水塘内，水质清 澈，水底为大小不一的石块，水井四周散布着住户，很少见到禾本科植物在水塘 周围生长，只有晚上出来活动，目前仅在贵州织金县城关镇发现。 2 2 实验材料 我们于2 0 0 7 年4 7 月赴标本产地，将采到的新鲜标本带回，死去者浸泡于 8 0 的酒精中，并保存在4 c o 冰箱中。( 表1 ) 表1 实验材料 t i a blm a t e r i a lo fe x p e r i m e n t 种名采集地采集时间标本数( 早古)解剖数 9 第三章实验方法 3 1 外部形态观察 比较头体背脊棱、瘰粒、尾、指趾形态、腹面色斑和泄殖腔等外部形态性状， 并作好记录。 3 2 外形量度 用分规、线等量出以下指标相关长度，然后从游标卡尺读出数值并记录。 全长( t o t a ll e n 舀h = t o l ) ：自吻端至尾末端的长度。 头体长( s n o u t v e l l tl e n 舀h = s v l ) ：自吻端至肛孔后缘的长度。 头长( h e a d1 e i l g t h = h l ) ：自吻端至颈褶或口角( 无颈褶者) 的长度。 头宽( h e a dw i d t h = h w ) ：头或颈褶左右两侧之间的最大距离。 吻长( s n o u tl e n g t h = s l ) ：自吻端至眼前角之间的距离。 躯干长( 虮i i l l ( 1 e n 垂h _ t r l ) ：自颈褶至肛孔后缘的距离。 眼间距( i n t e r o r b i t a ls p a c c _ i o s ) ：左右上眼睑内侧缘之间的最窄距离。 眼径( d i 锄e t e ro fe v e = e d ) ：与体轴平行的眼之直径。 尾长( t a i l l e n 酉h _ t l ) ：自肛孔后缘至尾末端的长度。 尾高( t a i lh e i 曲t _ t h ) ：尾上下缘之间的最大宽度。 尾宽( t a i lw i d t h - t w ) ：尾基部即肛孔两侧之间的最大宽度。 前肢长( 1 e i l 加o f f o r e l e g = f l l ) ：自前肢基部至最长指末端的长度。 后肢长( 1 e n g t ho f h i n dl e g = h l l ) ：自后肢基部至最长指末端的长度。 腋至胯间距( s p a c eb e t w e e na x i l l a 锄dg r o i n _ a g s ) ：自前肢基部后缘至后肢基部 后缘之间的距离。 1 0 图l 有尾目( 山溪鲵属肋加幽印饥博) 成体 f i g 1 t h ea d u l ti n d i v i d u a lo fc a u d a t e 僻口f ，键c l 伊p ，w d 1 全长2 头长3 头体长4 头宽5 吻长6 h 艮径7 尾长8 尾高9 尾宽1 0 上眼睑 1 1 鼻孔1 2 口裂1 3 唇褶1 4 颈褶1 5 肋沟。 i 、i i 、i 、分别表示指和趾的顺序 3 3 头骨标本制作和头骨相关数据测量 3 3 1 头骨标本制作 1 ) 去皮、内脏和肌肉：将材料仰面放入解剖盘中，沿腹部正中线剪开5c m 的小口，小心剥去瘰螈外皮，如果强行去除，会引起骨骼损坏。接下来是挖眼球， 再摘除内脏。然后用解剖剪依次剪去躯干及四肢的肌肉。在除肉的过程中，需注 意骨连结处及踱骨、趾骨的肌肉不可剔的太干净，只需剔除7 8 成，保留少许， 以防在下一步的腐蚀脱脂中骨骼散架。最后用针头缠有棉花的解剖针向瘰螈的头 和躯干之间垂直刺入，然后把针转向前搅动，毁坏延髓；再把针向后插入椎管搅 动，破坏脊髓，接着用水冲净脑和脊髓。 2 ) 腐蚀与脱脂：传统的方法是将瘰螈骨骼放到质量分数o 6 的n a o h 溶 液中处理8 1 0h ，然后把瘰螈取出，放入质量分数0 4 0 5 的过氧化钠溶液 约l 周，并在此间更换过氧化钠溶液2 3 次。 3 ) 漂白：将瘰螈骨骼放到体积分数1 0 的双氧水中，漂白1 5m i n ，中间换 1 次液体。 4 ) 干燥及固定：做法是将漂白后的骨骼取出，用水冲洗3 5m i n ，吸水纸 吸掉骨骼表面的水分，然后放到温度控制在6 0 的干燥箱内干燥2 0m i n ( 用热 吹风机也可) 把骨骼烘至七八成干，取出后将其呈匍匐状放在底盘上，整好姿势， 用适当大小的泡沫板( 骨骼干燥后可取走) 支撑在头部，用乳胶把肱骨与桡尺骨的 关节，胫腓骨与跟距骨的关节，腕骨、趾骨、指骨分别粘贴在木制标座上。至此 一具完整的瘰螈骨骼标本制成了。制成后的标本放置到阳光照射的窗台上晾晒， 干透后即可。 3 3 2 头骨相关数据测量 头骨常用量度有：颅长( s l ( u nl e n 舀h ) ：头骨前颌骨最前端至枕髁后缘的直 线长度；颅宽( s k u l lw i d m ) ：头骨两方骨或两鳞骨之间的距离；颅高( s k u l lh e i 出) ： 副蝶骨腹面正中至额骨与项骨交界处的直线距离；眶间距( s p a c eb e t 、e e l le y e s o c k e t ) ：左右眼眶内缘的最小宽度。 用分规、线等量出以上项目相关长度，然后从游标卡尺读出数值并记录。 3 4 舌器制作 用镊子夹住上腮骨，小心剥离舌骨和下颌骨连接处的肌肉，取出舌器后，侵 入0 6 的n a o h 溶液中脱脂，当舌器上的肌肉变为果冻状时取出，然后从舌器 后端向前端慢慢剥离其上的肌肉，剥离干净后，放入1 0 的双氧水中漂白，最后 用蒸馏水冲洗晾干即可。 3 5 数据处理和聚类分析 3 5 1 t 检验 t 检验是检验两个样本平均数夏和x ：所属总体平均数。和：是否相等 的检验方法，适合两样方均为小样方时的平均数差异显著性检验。本研究根据李 春喜( 2 0 0 2 ) 的检验方法进行t 检验。 首先计算出样本物种研究性状的平均值，然后据公式( 1 ) 和( 2 ) 计算出所 研究样本性状的方差和标准差。 s 2 ：圣坚二三! ： 公式( 1 ) s 2 表示样方方差，x 表示观测样本性状的数量值，x 表示平均数，n 表示观 察样本的个数。 公式( 2 ) 盯表示标准差。 据公式( 3 ) 计算出样本方差加权处理后所求的平均数的方差。带入公式 1 2 ( 4 ) 求出两样本平均数的差数标准误。 差。 s 一1 ) + s i ( ，z ：一i ) ( 疗。一1 ) + ( 刀：一1 ) 公式( 3 ) s ；表示样本方差加权处理后求出平均数的方差，s 和s ：分别表示样本方 g 一一= u x l 一工2 s i i 表示两样本平均数的差数标准误。 公式( 4 ) 由公式( 5 ) 计算出t 值，结合自由度值查出所对应的概率值，取0 0 5 0 为显著水平，o 0 1 0 为极显著水平。 t = 五l 二查2 s r z 一五 公式( 5 ) 自由度计算公式为：矽= ( 刀，_ 1 ) + ( ，z 2 1 ) = ，l ，+ 甩2 2 3 5 2 聚类分析 对事物按一定的要求和规律进行区分和分类的数学方法，叫聚类分析。本研 究按杨纶标( 2 0 0 1 ) 的模糊聚类法和阳含熙( 1 9 8 1 ) 的组平均法两种方法对中国 瘰螈属物种进行聚类分析，以其性状的相似程度来推断其亲缘关系。 1 ) 性状的选取： 本文依据庞家庆( 1 9 9 2 ) 对性状选取的讨论，选取能代表形态学意义的部分 外形和部分头骨数据的比值分析其相似关系。本研究聚类分析涉及的性状有头长 头体长，尾长头体长，吻长眼径，前肢跨间距，后肢跨间距，尾高尾长，颅宽 颅长，吻长颅长，眼间距颅宽。 2 ) 相似性系数计算： 依据庞家庆( 1 9 9 2 ) 给出的加权公式( 公式6 ) ，对本研究所测出的9 个性 状的相应数据，融合庞家庆( 1 9 9 2 ) 报道的瘰螈属物种相应数据进行加权处理， f，1 得出加权的数据矩阵i x j ，再依据阳含熙( 1 9 8 1 )