（药理学专业论文）复方硼酸含漱液的药理毒理学研究.pdf

l _ _ _ _ _ - 。 较以及患者的反馈信息，效果不及复方硼酸含漱液或者与其相当。 为了使复方硼酸含漱液能为更多患者服务，现通过本实验，确认复方硼酸 含漱液的药理毒理作用，为复方硼酸含漱液的临床应用提供理论依据和复方硼 酸含漱液作为国家新药的再开发奠定基础。 目的： 复方硼酸含漱液的处方成分包含消毒防腐药，有一定毒性。为验证复方硼酸 含漱液的安全性和有效性，我们进行了复方硼酸含漱液的急性毒性试验、局部 毒性实验、以及药效学方面的实验，为复方硼酸含漱液的临床应用提供理论依 据和将复方硼酸含漱液从医院制剂向国家新药的再开发奠定基础。 研究方法： 采用二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶所致大鼠足趾炎症模型、热板 i 性 复 漱 行 用 利 用s p s s l 3 0 统计软件。多组问方差齐采用单因素方差分析，两两比较采用l s d ； 方差不齐采用w e l c h 检验，两两比较采用t a m h a n e 方法。 实验结果： 在药效学实验中，我们发现复方硼酸含漱液对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀 和角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀有显著的抑制作用，提示其有抗炎作用，与对照 组比较差异有显著性( f = 4 1 4 2 9 ，p - - 0 0 0 0 ) 。复方硼酸含漱液低、中、高剂量组 提高小鼠痛阈百分率，与对照组比较差异有显著性( f - - 9 6 6 3 5 ，- 4 ) 0 0 0 ) 。复方 硼酸含漱液高、中、低剂量组抑制由冰醋酸引起的小鼠扭体次数与对照组比较 差异有显著性( f = 2 0 6 8 8 ，t - 4 ) 0 0 0 ) ，提示复方硼酸含漱液有显著的镇痛效果。 体外抑菌实验证实对甲型链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、乙型链球菌、 肺炎克雷伯菌、白假丝酵母菌、变形链球菌、衣氏放线菌及乳酸杆菌具有较好 的抑制或杀灭作用。这些药理作用为复方硼酸含漱液用于牙龈炎、牙周炎、口 腔糜烂、口腔肿瘤术后辅助治疗提供了实验依据。 急性毒性试验中，我们发现复方硼酸含漱液的小鼠口服灌胃l d 5 0 为3 9 5 g k g ，死亡时间多数在1 2 小时内，但尸检未发现心、肝、脾、肺、肾等组织器 官有异常。尽管该含漱液口服有一定毒性，但该l d 5 0 的剂量外推到成人剂量， 为2 3 7g 人，而本品临床应用为口腔外用含漱剂，浓度只有2 ，一天用量约6 0 面，给药量小且可吸收至全身的量少，用药在安全范围。大鼠口腔内给药，在 硕士学位论文 最大给药量为3 1g k g 时( 为临床成人用量的11 0 倍) ，其全身状况、饮食、摄水 和体重增长均正常，各组织器官无病理学改变，说明作为口腔外用含漱剂，正 常使用是安全的。 局部口腔黏膜刺激试验和过敏试验表明，大鼠口腔给予复方硼酸含漱液， 未发现口腔黏膜组织异常，证明复方硼酸含漱液对口腔黏膜无刺激性。同时， 豚鼠过敏实验结果也显示，复方硼酸含漱液在皮肤用药，不引起过敏反应。 结论： 药效学实验表明，复方硼酸含漱液有抑菌及抗炎镇痛作用，急性毒性试验 表明小鼠口服灌胃的l d s o 为3 9 5g k g ，大鼠口腔内给药在最大给药量3 1g k g 仍能耐受，局部用药毒性试验表明无口腔黏膜刺激性和致敏性。以上结果表明， 复方硼酸含漱剂在口腔局部用药是安全的，其具有抑菌、抗炎及镇痛作用的药 效学实验为其良好的临床效果提供了数据支持。本研究为该含漱液在医院临床 使用，以及进一步开发成牙病外用新药提供了参考依据。 关键词： 复方硼酸含漱液；抗炎作用；镇痛作用；牙科用药；药效学；毒理学 n i 硕士学位论文 p h a r m a c o l o g i c a l a n d t o x i c o l o g i c a l ys t u d i e s o o lc o m p o u n dd o n ca c i dm o u t n r i n s e ( c b a m ) s t u d e n t ：l uy o n g - t a o s u p e r v i s o r ：p r o f l i us h u w e n a b s t r a c t m o u t h r i n s e sa r eu s e di nm o u t ho d o rr e m o v a l ，r e d u c t i o no fo r a lb a c t e r i aa n d p r e v e n t i n gt o o t hd e c a y t h e yu s u a l l yh a v eg o o da n t i - i n f l a m m a t o r ya n da n a l g e s i c e f f e c t s m o u t h r i n s ew a sr e g a r e da sa na d j u v a n tt h e r a p yf o ro r a ld i s e a s e s ，s u c ha s p e r i o d o n t i t i s ，g i n g i v i t i s ，p e f i c o r o n i t i sa n do r a lm u c o s ad i s e a s e ，e t c t h e s ec o m p o n e n t s i nt h em o u t h r i n s ep r e p a r a t i o nc a ne f f e c t i v e l yi n h i b i tt h ep l a q u ef o r m a t i o n , i m p r o v e t h es t a t u so f g i n g i v a li n f l a m m a t i o n c o m p o u n db o r i ca c i dm o u t h r i n s e ( c b a m ) w a su s e di ng u a n g d o n gp r o v i n c i a l s t o m a t o l o g i c a lh o s p i t a la sah o s p i t a lp h a r m a c yp r e p a r a t i o n t h ep r e s c r i p t i o no ft h e m o u t h r i n s ew a sb a s e do nt h et r a d i t i o n a lo r a lc o m p o u n db o r a xs o l u t i o n ( d u o e r s o l u t i o n ) ，i nw h i c ht h eg l y c e r i n , t h y m o l ，p r o c a i n ea n do t h e rc o m p o n e n t sw e r e a d d e d c b a mi sah o s p i t a lp h a r m a c yp r e p a r a t i o ni no u rh o s p i t a lf o rs e v e r a ly e a r s t h e c l i n i c a le f f e c ti so b v i o u sa n ds i n g n i f i c a n t n os e r i o u sa d v e r s er e a c t i o n sw e r es h o w n c o m p a r e mt ot h o s em o u t h r i n s e sa v a i l a b l ei nt h em a r k e ts a l e s ，a l s of r o mt h ea sw e l la s f e e d b a c ko ft h ep a t i e n t st r e a t e db yc b a mi n0 1 1 1 h o s p i t a l ，t h ee f f e c to fc b a mi s h i g h e rt h a nt h et r a d i t i o n a lb o r i ca c i dg a r g l ea n do t h e r s t om a k et h ec b a ms e r v ef o rm o r ep a t i e n t s ，a n dt op r o v i d et h et h e o r e t i c a lb a s i s a n dc l i n i c a la p p l i c a t i o no fb o d ea c i da sam o u t h r i n s e ，t h ee x p e r i m e n tw a sc o n d u c t e d a b s t r a c t a n dt of u r t h e rd e v e l o p m e n tc b a ma sn e w d r u gf o ro r a ld e n t a lu s a g e o b j e c t i v e s ： t h ec o m p o n e n t so fb o r i ca c i dn l o u t b n s ep r e p a r a t i o nc o n t a i n ss o m ea n t i s e p t i c a n dd i s i n f e c t a n ti n g r e d i e n t s ，w h i c hm a yh a v es o m e t o x i c i t y t ov e r i f yt h es a f e t ya n d e f f i c a c y o fc b a m ，w ec o n d u c t e dt h ea c u t e t o x i c i t y , t o p i c a lt o x i c i t y , a n d p h a r m a c o d y n a m i ce f f e c t ss t u d i e s t h e s ee x p e i m e n t sm a yn o to n l yp r o v i d et h et h e o r y b a s i so fc b a mc l i n i c a la p p l i c a t i o n , b u ta l s op r o v i d et h eu s e f u ld a t af o rd e v e l o p i n g c b a ma san a t i o n a ln e w d r u gf r o mt h ep r e s e n th o s p i t a lp h a r m a c yp r e p a t i o n m e t h o d s ： a n a l g e s t i ce f f e c t so fc o m p o u n db o r i ca c i dm o u t h r i n s ew e r eo b s e r v e d 、析廿lp a i n m o d e lo fm i c ei n d u c e d 、析t l la c e t i ca c i do rh o tp l a t e t h ea n t i i n f l a m m a t o r ye f f e c t s w e r es t u d i e dw i t ha c u t ee a re d e m ai n d u c e d 、析md i m e t h y l b e n z e n ei nm i c ea n dr a tf o o t e d e m ai n d u c e d 、析mc a r r a g e e n t h em i n i m a li n h i b i t o r yc o n c e n t r a t i o n ( m i c ) a g a i n s t n i n ec l i n i c a li s o l a t e sw a sd e t e r m i n e dw i t ht u b ed i l u t i o nt e s t t h em i n i m a lb a c t e r i c i d a l c o n c e r t r a t i o n ( m a c ) w a sm e a s u r e d 、杭t l lt h ea g a rd i l u t i o nm e t h o d a c c o r d i n gt od r t l gr e 昏s t r c l l i o nr e g u l a t i o n sa n d t h er e l a t e d r e g u l a t o r y r e q u i r e m e n t s ，t h ea c u t et o x i c i t yo fc b a mw a st e s t e di nr a t sa n dm i c e ，r e s p e c t i v e l y t h em a x i m u r nt o l e r a t e dd o s ea n dt h em i c ea d m i n i s t e r e do r a lm e , a nl e t h a ld o s e ( l d 5 0 ) w e r ec a l c u l a t e du s i i 培s o f t w a r e i nt h e s ee x p e r i m e n t s ，ac o n d e n s e dc b a m s o l u t i o n ( 1 0 6 4m g n d ) w a su s e di nr a t sb yo r a la d m i n i s t r a t i o n , w h i l et h en o r m a l c b a ms o l u t i o n ( 2 0 7 5m g m 1 ) w a su s e do r a l l yt om i c e s e v e r a lp a r a m e t e r sw e r e o b s e r v e db e f o r ea n da f t e ra d m i n i s t r a t i o n t h el o c a lo r a lm a c o ni r r i t a t i o nt e s t sa n da l l e r g yt e s t so fc b a mw e r gd o n eo n r a t sa n dg u i n e ap i g s ，r e s p e c t i v e l y n o r m a ls a l i n ew a su s e da sp l a c e b oi nt h eo r a l m u c o s a li r r i t a t i o nt e s t f o ra l l e r g yt e s t i n g , 2 , 4 一d i n i t r o c h i o r o b e n z e n ew a sa d d e da s 硕士学位论文 p o s i t i v ec o n t r 0 1 s p s s13 0s t a t i s t i c a ls o t h 一, a r ew a su s e df o rs t a t i s t i c a la n a l y s i s h o m o g e n e i t yo f v a r i a n c ea m o n gg r o u p sw a sa n a l y s i s e db ya n o v a t h ep a i r w i s ec o m p a r i s o n sw a s c o n d u c t e du s i n gl s ds o f t w a r e w e l c ht e s tw a su s e dt oa n a l y s i z et h ev a r i a n c e a r r h y t h m i a t h ec o m p a r i s o no dt w og r o u p sw a sc o n d u c t e db yt a m h a n em e t h o d r e s u l t s ： i nt h e p h a r m a c o d y n a m i cs t u d y , w e f o u n dt h a tb o d ea c i d r i n s eo n x y l e n e i n d u c e d m o u s ee a re d e m aa n de a r r a g e e n a n - i n d u c e d p a we d e m aw a s s i g n i f i c a n t l yi n h i b i t e d , s u g g e s t i n gt h a tt h e r ea r ea n t i - i n f l a m m a t o r ye f f e c t c o m p a r e d 诵也t h ec o n t r o lg r o u p ，t h e r ew e r es i g n i f i c a n td i f f e r e n c e s ( f = 4 1 4 2 9 ，p = o o o o ) a l l o ft h el o w , m e d i u ma n dl l i g hd o s eg r o u p so fc b a m ，g a l li n c r e a s et h ep a i nt h r e s h o l d c o m p a r e d 诵t ht h ec o n t r o lg r o u p ，t h e r ew e r ea l s os i g n i f i c a n td i f f e r e n c e s ( f = 9 6 6 3 5 ， p = o 0 0 0 ) c b a ma th i g h , m e d i u ma n dl o wd o s e sc o u l di n h i b i tw r i t h i n gt i m e s i n d u c e db ya c e t i ca c i di nm i c e c o m p a r e dw i t ht h ec o n t r o lg r o u pt h e r ew e r e s i g n i f i c a n td i f f e r e n c e s ( f22 0 6 8 8 ，p = o o o o ) i ts u g g e s t st h a tc b a mh a ss i g n i f i c a n t a n a l g e s i ce f f e c t nv i t r oa n t i b a c t e r i a lt e s tc o n f l r m e dt h a tc b a m c a l li n h i b i to rk i l lt h e g r o w t h o f s t r e p t o c o c c u s ，s t a p h y l o c o c c u sa u r e u s ，s t r e p t o c o c c u sp n e u m o n i a e ， s t r e p t o c o c c i , k l e b s i e l l ap n e u m o n i a e ，c a n d i d aa l b i c a n s , s t r e p t o c o c c u sm u t a n s ， a c t i n o m y c e sa n dl a c t o b a c i l l i t h e s ep h a r m a c o l o g i c a le f f e c t so fc b a mp r o v i d et h e e x p e r i m e n t a lb a s i sf o ri t se f f e c to ng i n g i v i t i s ，p e r i o d o n t i t i s ，o r a le r o s i o n , a d j u v a n t t h e r a p ya f t e ro r a lc a n c e rd e p l e t i n go p e r a t i o n i na c u t et o x i c i t yt e s t s ，w ef o u n dt h a tt h em o u s el d s oo fc b a mi s3 9 5g k g t h ed e a t ht i m ea f t e rd r u ga d m i n i s r t r a t i o na l eu s u a l l y1t o2h o u r s ，b u tt h ea u t o p s y f o u n dn oa b n o r m a lc h a n g ei nh e a r t , l i v e r ，s p l e e n , l u n g ，k i d n e ya n do t h e ro r g a n s a l t h o u g ht h eo r a lm o u t h r i n s ch a ss o m et o x i c i t y , b u ti fw ee x t r a p o l a t e dt h em i c el d 5 0 d o s et ot h eh u m a na d u l td o s e ，i s2 3 7g p e r s o n t h ec l i n i c a la p p l i c a t i o no fc b a mf o r i i i d a t af o rd e v e l o p i n gc b a ma san a t i o n a ln e wd r u gf r o mt h e p r e s e n th o s p i t a l p h a r m a c yp r e p a t i o n k e yw o r d s ：c o m p o u n d b a r i ca c i dm o u t h r i n s e ( c b a m ) ；a n t i - i n f l a m m a t o r y ； a n a l g e s i c ；t o p i c a lm e d i c i n e ；p h a r m a c o d y n a m i c s ；t o x i c o l o g y 硕士学位论文 目录 摘要i a b s t r a c t i 前言一l f l u舌1 一、含漱液复方中添加的主要成分l 二、复方硼酸含漱液的研究状况6 三、本研究的目的和研究内容7 第一章复方硼酸含漱液主要药效学实验8 1 1 试验材料8 1 2 方法8 1 3 实验结果1 l 1 4 讨论13 第二章复方硼酸含漱液急性毒性实验1 4 2 1 材料和方法1 4 2 2 实验结果1 5 2 3 讨论16 第三章复方硼酸局部用药毒性研究18 3 1 材料18 3 2 实验结果2 0 3 3 讨论2 3 本文结论。2 5 参考文献。2 6 目 录 文献综述3 0 附录4 3 论文发表情况4 4 致谢4 5 原创性声明及版权使用授权说明4 6 统计学证明4 7 硕士学位论文 上j l h u茜 漱口是一种简便易行的口腔自我保健方法，能清除口腔中的食物残渣和部分 松动的软垢。漱口在人类历史上已经被应用超过2 0 0 0 年了，不过只是3 0 多年 前市售的含漱液( m o u s e r i s e s ) 的出现，这一古老的口腔自我保健方法才广泛地 推广开来i l 】。漱口一般用清洁水或盐水含漱，而这些市售的漱口液中加入了一定 的化学药物成分，能有效减少口腔致病微生物的数量，是机械性控制菌斑方法 的补充。含漱液在清除口腔异味、减少口腔细菌、防止龋齿、抗炎镇痛方面有 很好效果，常作为牙周炎、牙龈炎、冠周炎、口腔黏膜疾病等口腔疾病的辅助 治疗药品。这些药物含漱液口腔护理能够有效地抑制菌斑形成，改善牙龈炎症 状况i h 】。 全世界至少有上千种含漱液在市场销售，用来预防和治疗各种口腔不适和疾 病。这些含漱液根据其功能( 临床效果) 可以分为抗微生物含漱液、菌斑抑制 含漱液、抗菌斑含漱液、抗牙龈炎含漱液和抗牙周炎含漱液【l 】。 可以将不同的化学成分加入到含漱液中，起到不同的效果。譬如：添加氟 化钠用于防龋，添加高锰酸钾、洗必泰、呋喃西林来抑菌、杀菌、消炎；添加 硼酸、过氧化氢液来清洁、防腐、除臭；添加柠檬来增加唾液的分泌；有时还 添加普鲁卡因来止痛m 。 一、含漱液复方中添加的主要成分 1 、微量元素 含漱液中最常使用的微量元素是氟( f l u o r i n e ) 。氟对牙齿和骨组织的正常发 育和矿化起到非常重要的作用，采用氟素来防龋已得医学界的公认，尤其是在 饮水低氟使用采用0 0 3 o 0 5 氯化钠溶液含漱液的重要性已经得到证实。氟 元素防龋的机理主要是有效氟离子与牙釉质钙离子反应生成氟化钙，增强防酸 能力。另外，一种含漱液的配方，洁口液( 含0 0 5 氟化钠，0 0 2 醋酸洗必泰， 前言 o 0 5 薄荷油等) ，经临床应用，对治疗预防各种口腔炎症和抑制龋齿病有较好 疗效1 6 j 。 含氟含漱液( f l u o r i d a t e dm o u t h r i n s e ) 通常为有0 0 1 0 2 的氟化钠溶液， 也可用磷酸缓冲液调节其酸度- 至p h = 5 ，使氟离子更容易与牙面结合，促进再矿 化。含氟含漱液的防龋效果与含氟浓度、与牙面接触的时间和年龄有关，文献 报道可使龋齿的发生率大约降低3 5 t 7 1 。 2 、消毒剂 在含漱液中使用低毒的消毒剂，如洗必泰，是含漱液发展历史上的里程碑 【1 】。一直到如今，洗必泰还是含漱液的金标准嘲。 2 1 洗必泰 洗必泰，学名氯苯双胍己烷，又名氯己定，为双胍类消毒剂。洗必泰是一 种毒性、腐蚀性和刺激性都很低的安全消毒剂，是应用最广、抗菌斑能力最强 的消毒剂。洗必泰为无色或白色粉末，无气味、不吸湿、消毒作用好、成本低 廉、性质稳定、使用方便、合成简单。含漱液中洗必泰的浓度为0 1 o 1 5 ， 能完全抑制菌斑形成。洗必泰对革兰阳性菌的抑制效果更强于革兰阴性菌。洗 必泰的缺点是引起牙面和舌粘膜着色，味苦，还可能引起味觉障碍陟】。国内含 有洗必泰的含漱液有“口泰含漱液和“洗必泰碘含漱液”等。李耀华等采用 双盲随机对照法观察口泰含漱液对牙龈炎及控制菌斑的疗效，发现实验组的牙 龈指数、龈沟出血指数及菌斑指数在含漱5 天后均有明显的改善俨 o 0 1 ) ，与对 照组的比较也有明显的差异( p ，o 0 1 ) ，且毒副作用较小。 2 2 三氯新 三氯新( t r i c l o s a n ) 是一种比洗必泰更温和的消毒剂，化学名三氯羟苯醚，又 名玉洁纯、d p 3 0 0 、三氯生。三氯新与洗必泰相比，具有广谱、高效、不沾染产 品、无任何刺激味等突出优点，是当今世界首屈一指的消毒剂。三氯新于对口 腔中有害菌具有高效的抑制作用，并能直接抑制炎症介质的产生，且安全、无 2 硕士学位论文 刺激感、无苦味，目前已成为西方国家上市的含漱液中使用最多的非离子型消 毒剂。三氯新具有控制菌斑、保护牙本质、改善牙周健康状况、减少牙结石形 成、控制呼吸气味、不干扰口腔菌群生态平衡等作用，其对牙龈炎、牙周炎及 口腔感染具有显著疗效，还可消除口臭，不会导致牙齿变色，无不良口感，从 而确认了其在1 ：3 腔护理用品中的崭新地位1 2 1 。 “益口含漱液”是一种由三氯新、茶多酚、甘草甜素等组成的复方含漱液， 能有效防治牙龈炎，改善牙龈状况，使口气清新。莫静等通过对6 4 例牙龈炎患 者洁治后与生理盐水对照的临床护理观察，发现采用“益口含漱液 的护理效果 明显优于对照组【1 3 - 1 5 1 。 3 、抗生素 在含漱液中使用抗生素旧，其目的是为了防治口腔疾病，减少龋病、牙石 和牙龈炎的发生。一般都是由医生处方开的，是为了某种特殊的疾病或目的而 配制的，不能长期使用。最常用的抗生素含漱液有0 0 1 - 0 0 3 的甲硝唑和 0 0 6 的四环素。甲硝唑为专性厌氧菌的特效药，能有效抑制菌斑形成，改善牙龈 炎症状况。四环素对共生放线菌有特效，对牙龈类杆菌也有一定效果。 3 1 甲硝唑 甲硝唑具广谱抗厌氧菌和抗原虫的作用 6 1 ，临床主要用于预防和治疗厌氧 菌引起的感染，如呼吸道、消化道、腹腔及盆腔感染，皮肤软组织、骨和骨关 节等部位的感染以及脆弱拟杆菌引起的心内膜炎、败血症及脑膜炎等。此外， 甲硝唑还广泛应用于预防和治疗口腔厌氧菌感染。厌氧菌通常是口腔内的条件 致病菌，当机体局部或全身因多种原因受损时，就可能导致厌氧菌感染。甲硝 唑是世界卫生组织批准的治疗厌氧菌感染的有效药物，能作用于厌氧细胞的 d n a ，使d n a 的螺旋结构断裂，引起一系列生化功能损伤，最后导致厌氧菌死 亡。 3 2 替硝唑 替硝唑( t i n i d a z o l e ，t n z ) 是继甲硝唑后新研制的一代疗效更高1 6 1 、疗程更短、 3 前言 耐受性更好的硝基咪唑类抗厌氧菌和抗原虫药，具有疗效高、疗程短、耐受性 好、体内分布广等特点。替硝唑的抗菌活性为甲硝唑的2 4 倍，对各种常见的 致病厌氧菌及滴虫均有明显的杀灭作用，生物利用度高，半衰期为1 2 - 1 4 d 、时， 组织分布广，应用方便，副作用较轻。国际上对替硝唑评价很高，在国内外有 逐步取代甲硝唑的趋势，成为抗厌氧菌的首选药。 将替硝唑和醋酸氯己定( 洗必泰) 制成“复方洗必泰含漱液 ，治疗口腔厌 氧菌感染及其他细菌引起的咽峡炎及口腔溃疡等，疗效显著。实验结果表明， 其原液作用5m i l l ，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的杀灭率分别为9 9 9 8 、 9 9 9 1 。作用1 5r a i n 对白色念珠菌的杀灭率达9 9 9 9 。孙伟等将0 1 2 替硝唑、 0 1 2 的醋酸洗必泰、5 甘油、矫味剂适量制成“复方替硝含漱液”，临床试验 结果表明该含漱液对牙周炎、冠周炎、牙周脓肿等均有良好的疗效【1 6 1 。 4 、化学制剂 一些含漱液中还含有一些化学制剂，如双氧水、碘伏、硼砂、高锰酸钾等， 在适宜的剂量下使用，可有效地抑制菌斑，但应注意其安全性1 7 ，1 8 1 。另外，通 常还需要现用现配，不适合作为商品含漱液进行研究和销售。 4 1 双氧水 双氧水( 过氧化氢) 为一种强氧化剂【6 】，具有防腐、灭菌、除臭和清洁功 能。含漱液浓度为0 3 0 5 ，能有效抑制菌斑形成，特别是专性厌氧菌，如梭 杆菌、真杆菌和螺旋体等，能抑制其繁殖和集聚。但是，双氧水长期应用可产 生牙面脱钙和黑毛舌等副作用。 4 2 碘伏 碘伏是碘与表面活性剂结合而成的不稳定络合物 6 1 ，其中表面活性剂起载 体与助溶作用。碘与菌体蛋白质中的氨基酸结合使其变性，并可在治疗创面形 成极薄的杀菌薄膜，缓慢持久地释放有效碘，对各类细菌、芽胞、病毒、真菌 和原虫均有较强的杀灭作用，性质温和、无毒、无味、无致敏性、对粘膜无刺 激性，此外还有清洁作用等。碘伏不但具有杀菌、消肿的作用，而且可使溃疡面 4 硕士学位论文 渗出减少、创面收敛快、促进新生肉芽生长。碘伏特别对口臭、口腔溃疡、牙 龈肿胀者效果极佳。对口腔粘膜无刺激性，不着色，无味，亦未见不良反应， 病人易于接受，药源广，经济简便，是一种较好的口腔护理方法。由于稀释后 的碘伏不稳定，放置2 天，其中的有效碘可减少5 0 以上，因而碘伏含漱液应现 用现配。 4 3 硼砂 复方硼砂液为传统的含漱液【6 j ，主要成份是硼砂、碳酸氢钠。对损伤皮肤、 粘膜和伤口处的细菌、真菌有弱的抑菌作用，不易穿透完整皮肤，吸收后排泄 缓慢，反复应用可产生蓄积中毒。不同适应症需用不同浓度，应用时要按医嘱 调制。原料性质稳定，但水溶液久置易氧化失去作用，所用溶液必须即配即用。 肉眼观察时溶液应呈淡淡的粉红色，浓度高、颜色深，可引起局部烧伤、碳化。 5 、天然植物成份 口腔疾病都是多因素引起的细菌性疾病，其致病菌是人口腔中的常在菌， 当菌群失调时某种致病菌较强的病菌过度繁衍引起疾病。长期使用广谱抗菌素 和化学合成药，在清除致病菌的同时也破坏口腔的微生物平衡。开发能控制而 不是消灭致病菌或消除特异致病菌机制的药物具有重要意义。 有较强抗菌作用的天然物质有良好的应用前景。徐竺婷1 9 1 等从文献报导的 有抗致龋菌、抗菌斑作用，或者已被加入声称有防龋或牙周病作用的口腔保健 品中的中草药中，选择了茶多酚、川芎嗪、龙胆苦甙、绿原酸、厚朴酚、山姜 素、大黄素、连翘甙、鞣酸、植酸等1 0 种天然产物口腔致病菌进行药敏试验。 结果发现对于变链菌，茶多酚和鞣酸较敏感；对于乳杆菌和粘性放线菌，茶多 酚及鞣酸和厚朴酚较敏感；对于坏死梭杆菌、牙龈卟啉菌，鞣酸、茶多酚和厚 朴酚较敏感。证实了在抑菌和杀菌方面茶多酚和鞣酸优于其它药物。 茶多酚( t e ap o l y p h e n o l ，t p p ) 是从天然植物茶叶中分离提纯出来的多酚类化 合物的复合体。它大约占茶叶干重的2 5 左右，它包括有儿茶素类、黄酮及黄酮 醇类、花色素类、酚类及缩酚酸类等四大物质。大量的研究表明，茶多酚具有降 5 二、复方硼酸含漱液的研究状况 我们研制的“复方硼酸含漱液 是在原硼酸含漱液的基础上进行改进的， 其处方由硼酸、甘油、麝香草酚、普鲁卡因、酒精、薄荷等组成，为广东省口 腔医院的医院制剂，临床上主要用于牙龈炎、牙周炎、口腔糜烂、口腔肿瘤术 后辅助治疗，效果明显。 我们曾比较了“复方硼酸含漱液 与“口泰含漱液一及安慰剂在智齿冠周 6 硕士学位论文 炎的临床治疗疗效【3 l 】，其中安慰剂除未含硼酸外，其它成分与复方硼酸含漱液 一样。1 2 0 个志愿者随即发放三种含漱液，要求患者每天用发放的漱口水含漱3 至5 次，每次1 5m l ，含溉3r a i n 。治疗中不能使用抗菌药物，不接受其他口腔治 疗，患者5d 后复诊，由同一医生再次进行口腔检查。观察治疗前后患者疼痛程 度，冠周肿胀大小，张口受限及功能障碍情况，有无冠周溢脓，有无毒副作用 等。结果表明，“复方硼酸含漱液 与“口泰含漱液对智齿冠周炎的临床治疗 疗效相当，但与安慰剂相比有显著差异( 刚0 5 ) 。本试验中无一例患者有明显 的不适或过敏反应，而大多数患者对复方硼酸含漱液轻度的气味可以接受，因 此复方硼酸含漱液是一种优质、有效、廉价的为患者所接受的含漱液。 从“复方硼酸含漱液 与安慰剂的不同疗效可以看出，复方硼酸含漱液的 主要有效成分是硼酸。硼酸具有弱酸性，能与菌体蛋白质中的氨基结合，对细 菌和真菌有弱的抑制作用。硼酸的水溶液虽然呈酸性反应，但无刺激性，具有 广谱抗菌、消毒防腐及收敛、清洁黏膜及溶化黏稠分泌物等作用，可以有效地 减轻冠周炎盲袋内的炎症，同时抑制口腔内的致病菌繁殖1 3 。 三、本研究的目的和研究内容 随着我们国家对医院制剂管理的日趋严格，目前我院的“复方硼酸含漱液 的应用受到了限制。为了使“复方硼酸含漱液 这一经多年临床证明能有效治 疗多种口腔疾病的医院制剂能为更多患者服务，我们从2 0 0 6 年起，将“复方硼 酸含漱液 作为新药进行开发。 本论文的主要内容为“复方硼酸含漱液”药理毒理学研究，希望通过这些 研究，能够明确复方硼酸含漱液的药效和毒性，为复方硼酸含漱液的临床应用 提供理论依据和复方硼酸含漱液作为国家新药的再开发奠定基础。 7 第一章复方硼酸含漱液主要药效学实验 第一章复方硼酸含漱液主要药效学实验 复方硼酸含漱液，由硼酸、麝香草酚、普鲁卡因等组成，具有广谱抗菌、 消毒防腐及收敛、清洁黏膜及溶化粘稠分泌物等作用，临床上主要用于牙龈炎、 牙周炎、口腔糜烂、口腔肿瘤术后辅助治疗【3 。根据其功能主治，本文对该药 的药效学进行了研究，现报告如下。 1 1 试验材料 1 1 1 药物 复方硼酸含漱液，由广东省口腔医院提供，规格：2 0 0 m l 瓶( 质量浓度为 2 0 7 5 m g m 1 ) ，批号：2 0 0 3 0 1 1 5 ；二甲苯：化学纯，武汉有机合成化工厂，批号： 9 9 0 3 1 9 0 1 ；角叉菜胶：s i g m a 公司产品；阿司匹林：桂林制药厂，批号0 0 0 1 0 1 ； 氧氟沙星：第一制药北京有限公司，批号0 0 0 2 1 1 0 8 。 1 1 2 菌种 金黄色葡萄球菌 a t c c 6 5 3 8 】、甲型链球菌【3 2 2 1 3 ( 6 ) 】、乙型链球菌 n i c p b 3 2 2 1 0 、肺炎链球菌 3 1 1 0 8 ( 3 ) 、肺炎克雷伯菌【广临检- 5 7 、变形链球菌 【1 9 2 4 6 、乳酸杆菌标准菌株由广东药学院微生物教研室提供并经鉴定确定。 1 1 3 仪器 n i h 小鼠( 合格证号：2 6 - 2 0 0 3 a 0 0 1 ) ，s d 大鼠( 合格证号：2 6 2 0 0 3 a 0 0 3 ) 由广东省医学实验动物中心提供。 1 2 方法 1 2 1 抗炎试验 3 2 1 1 2 1 1 复方硼酸含漱液对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 n i h 小鼠7 5 只，雌雄各半，体质量1 8 - - 2 2 9 ，随机均分5 组，即生理盐水 组、阿司匹林阳性对照组、复方硼酸含漱液低、中、高3 个剂量组。各实验组 小鼠每日灌胃给药一次，给药容积为2 0 m l k g ，对照组给以等量生理盐水，连续 8 硕士学位论文 给药3 d ，末次给药后l h ，各组小鼠右耳涂二甲苯0 0 5 m l 只，左耳作对照，3 0 m i n 后处死小鼠，用直径6 m m 的打孔器将双耳同部位等面积切下，用电子天平分别 称重，以两耳片质量差值作为肿胀程度指标，并求出抑制率。 抑制率= ( 生理盐水组肿胀度给药组肿胀度) 生理盐水组肿胀度x 1 0 0 ( 公式2 1 ) 1 2 1 2 复方硼酸含漱液对角叉菜胶所致大鼠足趾肿胀的影响 s d 大鼠5 0 只，雌雄各半，体质量1 5 0 - 1 6 0 9 ，随机均分5 组，即生理盐 水组、阿司匹林阳性对照组、复方硼酸含漱液低、中、高3 个剂量组。于致炎 前每天灌胃给药1 次，给药容积为1 0 m l k g ，连续3 d 。实验当日各给药组给药 l h 后，先用无弹性软皮尺测定各组大鼠左后肢足趾正常周长，然后在各组大鼠 左后肢足跖皮下注射1 的角叉菜胶0 1 m l ，测量致炎后1 h 、2 h 、3 h 、4 h 、6 h 的 左后肢足趾周长，以各大鼠致炎前后左后肢足跖周长之差为肿胀度，比较各组 肿胀度的差异，进行f 检验。 足肿胀度( 衄) = 肿胀后各时间点足周长肿胀前足周长 ( 公式2 2 ) 1 2 2 镇痛试验【3 2 】 1 2 2 1 热板法 取雌性n m 小白鼠7 5 只，体质量1 8 - - 一2 2 9 ，随机分成5 组，即生理盐水组、阿 司匹林阳性对照组、复方硼酸含漱液低、中、高3 个剂量组。采用热板法，热板 温度为( 5 5 o 5 ) ，给药前先测定各鼠的正常痛反应( 放入热板至小鼠舔后足 时间，