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文档简介
实验二、微量吸管及计数板的使用,一、微量吸管的使用,【目的】掌握微量吸管的使用方法。【原理】利用微量吸管的虹吸作用吸取血液。【器材】微量吸管、乳胶吸头、一次性棉签、试管、试管架、采血针。【试剂】洗涤液:生理盐水。【标本】采集末梢血,【操作】1准备吸管及试管:2加稀释液取试管1支,加生理盐水2ml。3持管吸血4拭净余血用干脱脂棉沿吸管口方向拭净余血,并检查血量是否达到规定刻度。5释放血液将吸管插入含生理盐水的试管底部,慢慢排出吸管内的血液,再用上清液冲洗管内余血3次。,二、改良牛鲍计数板的使用,【目的】掌握改良牛鲍计数板计数池的基本结构及使用方法。【原理】一定倍数稀释的血液或体液,混匀后滴入具有固定体积和精密划分刻度的改良牛鲍计数板中,在显微镜下对所选择区域中的细胞进行计数,再乘以稀释倍数,即可换算成单位体积内的细胞数。,【器材】1改良牛鲍计数板及盖玻片2其它试管、试管架、吸管、微量吸管、乳胶吸头、绸布、显微镜。【标本】同上【操作】1准备计数板先用流水冲洗计数板和盖玻片除去所有残留物,然后用乙醇洗涤,最后用绸布拭净,采用推压法从计数板下缘向前平推盖玻片,将其盖在计数池上。,2.先用低倍镜(10倍物镜)观察,通过调节显微镜光栅减少光线进入量以便观察整个计数板的结构(大、中、小方格)及特征。再用高倍镜(40倍物镜)观察红细胞计数区域。3.充池充分混匀溶液,用微量吸管将稀释血液滴入计数板和盖玻片交界处,利用虹吸作用让液体顺其间隙充满计数池;同样方法再给另一侧计数板充池。4静置计数板充池后应平置于桌面上静置3min,待细胞下沉后计数。5.计数原则需遵循一定的方向逐格进行,以免重复或遗漏。对压线的细胞采用数左不数右,数上不数下的原则。记录所数5个中方格的红细胞数和4个大方格的白细胞数。,2019/12/13,7,可编辑,血细胞计数板的构造,24200.6mm,计数池划线,1mm,1mm,计数池划线,美国国家标准局(NBS)1941年规定:计数池大方格每边长度的误差应在1%内(100.01mm);血盖片与计数池间缝隙深度应在2%以内(0.10.002mm)。,计数池的参数,区域边长(mm)面积(mm2)深度(mm)体积(mm3)计数池390.10.9大方格110.10.1计WBC中方格0.250.06250.10.00625计RBC中方格0.20.040.
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