不同植物激素对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的比较研究.doc

不同植物激素对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的比较研究 陶兴魁陈峰赵志祥张曼曼操莉 （宿州学院生物与食品工程学院，安徽宿州234000） 【摘要】本文以蓝莓茎段为外植体，以WPM为基本培养基，通过添加不同配比的TDZ、ZT、6-BA、2,4-D植物激素，探讨蓝莓外植体诱导愈伤组织。研究结果表明：2,4-D对蓝莓茎段诱导愈伤组织效果最佳，最适浓度为1.0mg/L。 关键词植物激素；蓝莓幼茎；愈伤组织诱导 基金项目：安徽省大学生创新创业项目（xx10379045）；宿州学院特色种植业苗种生产工程技术研究中心开放课题（xxXKF19）。 作者简介：陶兴魁（1983），男，安徽淮北人，硕士，研究方向为植物生物技术。 0引言 蓝莓（Blueberry）又名越橘、蓝浆果，属杜鹃科（Ericaceae）越橘属（Vainium）。蓝莓果实风味独特，营养丰富，含有丰富的维生素、矿物质和抗氧化物质，特别是其中所含的花青素、儿茶酸，有防治高血压、疏通毛细血管和缓解视力疲劳的作用，被誉为“浆果之王”，被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一1-2。对于蓝莓茎段诱导植株再生的研究比较多，并且获得了丰厚的成果，技术比较成熟3-5，但以蓝莓外植体诱导愈伤组织的研究几乎没有。韩婷婷等以WPM1/2为适宜培养基使矮丛蓝莓Blomidon品种的试管苗叶片诱导愈伤率高达100%6。因此，本实验以蓝莓幼茎作为外植体，研究不同植物激素诱导蓝莓愈伤组织的情况，为蓝莓组培快繁提供参考。 1材料与方法 1.1材料 以高丛蓝莓瑞卡幼茎作为外植体，以改良WPM培养基为培养基，设定蔗糖浓度为30g/L，琼脂8g/L，PH为5.5，在宿州学院东区组培室内进行培养。 1.2方法 1.2.1材料处理 剪下蓝莓幼茎后流水冲洗2h，之后在无菌操作台上进行消毒和灭菌。用70%酒精消毒30s，无菌水冲洗3次，0.05%氯化汞灭菌68min，无菌水冲洗8次，然后将幼茎用无菌滤纸吸干水分，备用。 .2.2愈伤组织的诱导 将幼茎的两端分别减去一小部分，横放于含有不同浓度激素组合的改良WPM培养基中，每瓶接种56个茎段，分别添加TDZ，ZT，6-BA，2,4-D各0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L、2.0mg/L、2.5mg/L五个浓度梯度做单因素五水平实验，每种浓度接种10瓶，45d后统计出愈率和愈伤组织长势，旨在选出幼茎诱导愈伤组织最适宜的植物激素，并探讨每种植物激素对愈伤组织诱导的影响。 2结果与分析 2.1不同浓度的TDZ对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的影响 统计结果表明，TDZ对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的效果不好，愈伤率很低，而且基本全部褐化。 2.2不同浓度的ZT对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的影响 实验结果表明，ZT对蓝莓茎段诱导愈伤组织效果不好，当浓度大于1.0mg/L时开始出芽，当浓度大于1.5mg/L时愈伤组织褐化现象严重。 2.3不同浓度的2,4-D对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的影响 实验结果表明，当2,4-D浓度为0.51.0mg/L时诱导处的愈伤组织均为绿色、疏松颗粒状愈伤组织，当浓度大于1.5时，随着2,4-D浓度的增大愈伤率随之提高，但褐化率也随之增大。 2.4不同浓度的6-BA对蓝莓幼茎愈伤组织诱导的影响 统计结果表明，当6-BA浓度为0.5mg/L时，无愈伤组织诱导产生，当6-BA浓度大于1.0mg/L时有愈伤组织产生，但有芽诱导产生而且还有褐化现象。 从以上实验得知：TDZ对蓝莓幼茎诱导愈伤组织时褐化现象严重，并且浓度越大褐化越严重，当其浓度在1.0mg/L以上时褐化率超过50%，同时愈伤率也不高；低浓度的ZT对蓝莓幼茎诱导愈伤组织效果不好，高浓度时出现出芽和褐化现象；使用6-BA时对愈伤组织诱导作用最小，愈伤率很低，褐化率也较低。使用2,4-D时愈伤率最高，褐化率也较低，当其浓度为1.0mg/L时诱导效果最好，诱导出的愈伤组织为淡黄色的疏松颗粒状较大的愈伤组织。 参考文献 修英涛,常凤英,姜河,等.我国蓝莓(越橘)栽培研究现状及发展措施J.辽宁农业科学,xx(3):21-23. 刘庆忠,赵红军,郑亚芹,等.高灌蓝莓微体繁殖技术研究初报J.落叶果树,xx(5):1-3. 王连润,马钧,胡忠荣,李坤明.蓝莓离体快速繁殖研究J.红河学院学报,xx(10):17-18. 周历萍,王淑珍,来文国.蓝莓组织培养技术研究J.杭州农业与科技,xx(3):30-31. 王淑珍,来文