牛传染性胸膜肺炎的流行和防控PPT课件.ppt

牛传染性胸膜肺炎（CBPP)流行与防控,刘恒贵博士,2018年8月21日,联系方式：QQ:364591113,手机号中国农业科学院哈尔滨兽医研究所HARBINVETERINARYRESEARCHINSTITUTE.CAAS,CBPP全球疫情概况流行病学临床症状剖检病变实验室诊断防控措施牛支原体肺炎的流行与防控,介绍内容,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所HARBINVETERINARYRESEARCHINSTITUTE.CAAS,病原：是由丝状支原体丝状亚种（Mycoplasmamycoidessubsp.Mycoides，Mmm）引起的一种亚急性或慢性、接触性传染病。特征：纤维素性肺炎和浆液性纤维素性胸膜炎。地位：被世界动物卫生组织（OIE）列为须报告传染病。,一、CBPP全球疫情概况,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所HARBINVETERINARYRESEARCHINSTITUTE.CAAS,流行历史16世纪该病只局限于欧洲的阿尔陴斯山和比利牛斯山;19世纪由于战争和国际贸易导致该病在欧洲大陆迅速扩散;1850年CBPP从英国迅速蔓延到斯堪第那维亚半岛、美国和澳大利亚；1854年由英国或荷兰传入南部非洲；19世纪晚期和20世纪早期CBPP由澳大利亚传播到新西兰、印度、中国、蒙古、朝鲜和日本。,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所HARBINVETERINARYRESEARCHINSTITUTE.CAAS,1）20世纪90年代新感染的地区包括：乌干达大部分地区，肯尼亚部分地区，刚果民主共和国和坦桑尼亚绝大部分地区；另外在卢旺达（1994年），博茨瓦纳（1995年），布隆迪（1997年）和赞比亚（1997）最近又受到感染；,目前流行情况,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所HARBINVETERINARYRESEARCHINSTITUTE.CAAS,2）在亚洲，CBPP最近在印度阿萨姆邦，孟加拉国和缅甸报道了数次，中东地区也有零星疫情发生。3）在欧洲，葡萄牙和西班牙在1951和1957年分别重新出现了该疾病。1984年在法国南部也有几次爆发。1990年在意大利重新出现了该疾病，但到1993年被根除。,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所HARBINVETERINARYRESEARCHINSTITUTE.CAAS,传播途径：呼吸道是最主要的传播途径；但被污染的饲料、垫草、粪便、牧草、饮水或管理人员也可能传递感染。,二、流行病学,自然宿主：Mmm仅感染牛属反刍动物，主要是黄牛，牦牛和瘤牛等各种牛类；山羊、绵羊及骆驼在自然情况下不易感染，其他野生动物在本病的流行病学中作用不大。,传染源：病牛和带菌牛是主要传染源。,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所HARBINVETERINARYRESEARCHINSTITUTE.CAAS,4、病原的致病性包括病菌的毒力强弱、牛易感性高低、饲养管理的细致程度、气候和外界环境变化等；本病原感染后的发病率为60%70%，病死率约30%50%，但是不同品种的牛对该病的易感性不同，奶牛和朝鲜犏牛一般发病率较高，病死率也高，蒙古黄牛则低。,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所HARBINVETERINARYRESEARCHINSTITUTE.CAAS,急性：约占患病动物的20%。1）突然出现40C或以上的高烧，2）干咳，呼吸加快而有呻吟声，鼻孔扩张，前肢外展，呼吸极度困难。由于胸部疼痛不愿行动或下卧，呈腹式呼吸。咳嗽逐渐频繁，常是带有疼痛短咳，咳声弱而无力，低沉而潮湿。有时流出浆液性或脓性鼻液，可视黏膜发绀。,三、临床症状,潜伏期短则5-8d，长的可达4个月。,超急性：大概占一次疫情暴发的10%左右，表现为突然死亡，往往没有任何其它迹象；,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所HARBINVETERINARYRESEARCHINSTITUTE.CAAS,3）呼吸困难加重后，叩诊胸部，患侧肩胛骨后有浊音或实音区，上界为一水平线或微凸曲线。听诊患部，可听到湿性罗音，肺泡音减弱乃至消失，代之以支气管呼吸音，无病变部分则呼吸音增强，有胸膜炎发生时，则可听到摩擦音，叩诊可引起疼痛，急性病程一般在症状明显后经过58d，约半数死亡。,亚急性：出现得最频繁，约占感染动物40-50%。症状类似于急性型，但没有那么严重，发烧是断断续续的。,慢性：是急性和亚急性的自然演变，但在一些动物可以直接发展。临床症状消失，但牛群仍然出现间歇性发烧伴有食欲减退，体重减轻。,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所HARBINVETERINARYRESEARCHINSTITUTE.CAAS,临床表现,A）病牛表现为消瘦、呼吸困难；B）急性感染导致关节肿胀、疼痛和跛行,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所HARBINVETERINARYRESEARCHINSTITUTE.CAAS,肺部解剖病变典型病例是肺部呈现大理石样肺和浆液纤维素性胸膜肺炎，在肺部出现大量黄色或乳白色干酪状的堆积物。,四、剖检病变,大理石样肺,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所HARBINVETERINARYRESEARCHINSTITUTE.CAAS,肺部解剖病变,四、剖检病变,2016年非洲牛肺疫现地剖杀照片,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所HARBINVETERINARYRESEARCHINSTITUTE.CAAS,在肺部产生黄色或乳白色干酪状的堆积物。,肺部解剖病变,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所HARBINVETERINARYRESEARCHINSTITUTE.CAAS,A）打开胸腔，见有大量黄色液体。这些液体足以阻碍呼吸。,B）在晚期病例中，胸腔中的多数液体凝结成一个大凝块。眼观有黄色纤维素被覆在严重感染的肺脏表面和肋骨内侧的膜上。,胸腔解剖病变,胸腔非常大量的黄色的液体（多达30升），类似煎蛋的外衣（纤维）覆盖在胸部内壁和肺表面（胸膜）。胸膜增厚浑浊。纤维蛋白在胸膜的积累导致肺和胸壁粘连在一起。,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所HARBINVETERINARYRESEARCHINSTITUTE.CAAS,病原诊断：病原分离、形态和生化试验、免疫学鉴定和分子生物学鉴定；已经建立了几种PCR方法快速鉴定病原；血清学诊断（OIE推荐）：补体结合反应（CFT）：适用于无疫认证；竞争ELISA试验：适用于大量样品的检测。,五、实验室诊断,国外有三种策略屠宰所有病牛和与病牛相接触的牛。19世纪末英国和美国所采用。屠宰病牛并给相关牛接种疫苗；但这种方法总是不能彻底消灭CBPP。暴发CBPP时给健康牛进行预防接种并屠宰病牛和/或冒险给病牛再度接种,六、防控措施,我国采取的防控策略：检疫、隔离、扑杀病牛和易感牛进行免疫接种；使用的主要疫苗包括：兔化弱毒苗、兔化-绵羊化适应菌苗、兔化-藏系绵羊适应菌苗。1989年扑杀最后1头阳性牛；1992年停止疫苗免疫；2002年-2009年在全国范围内进行流行病学调查，没有发现CBPP感染牛；2011年获得OIE颁发的无疫证书。,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所HARBINVETERINARYRESEARCHINSTITUTE.CAAS,最近CBPP引起了我国农业部的高度关注,2017年的流行病学监测结果显示，CBPP传入我国的风险加大。,从2008年开始国内开始流行牛支原体肺炎，其与CBPP非常相似；,2017年牛传染性胸膜肺炎流行病学监测,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家牛传染性胸膜肺炎检测实验室自2003年起开始承担牛传染性胸膜肺炎流行病学监测任务，每年对全国重点地区送检的20000头份血清和300份疑似肺脏分别进行血清学和病原学检测。2017年11月20日-22日我们实验室对来自西南某省的血清和肺脏样品进行检测，发现部分血清样品呈现阳性。甘肃的送检血清也呈现阳性，后来被排除。,进一步开展了流行病学调查并采集了16份血清样品，结果显示仍有1份为阳性。,可能原因：牛传染性胸膜肺炎在我国毗邻的东南亚国家仍然没有得到有效控制，经由这些国家非法入境的牛极有可能是潜伏感染牛或携带病原的牛，长途运输或与其他牛群混群后，导致牛传染性胸膜肺炎流行的风险极大。,检测方法：血清学检测是牛传染性胸膜肺炎流行病学监测工作中一项非常重要的技术手段，血清学阳性并结合病理检查和病原检测后即可做出最终确诊。本次血清学检测中使用IDEXX试剂盒是一种非常有效的血清学检测手段，该方法也是OIE推荐使用的方法。,结果总结分析,应高度重视：由于我国自1989年起，已经28年没有发现牛传染性胸膜肺炎疑似病例和感染病例，因此应高度重视牛传染性胸膜肺炎血清阳性结果的出现，必须采取有效措施来预防该病在我国的死灰复燃。,针对突发的疫情，建议采取的措施,2、对血清呈阳性牛的周边地区进行监测：对检测阳性牛所在地周边5公里地区的牛进行样品采集和临床检查，采集的样品包括血清、鼻拭子；,1、隔离扑杀阳性牛：对血清学检测为阳性牛限制移动，并进行扑杀处理，通过病理学和病原学检查进行最终确诊；,4、牛传染性胸膜肺炎抗体检测试剂盒的研制：鉴于进口的c-ELISA检测试剂盒价格非常昂贵，目前检测成本为20元/头，而且供货不及时，建议开展牛传染性胸膜肺炎血清抗体检测试剂盒的研制工作，满足长期大量的牛传染性胸膜肺炎流行病学监测工作需要。,3、扩大流行病学监测范围：建议增加江西、湖北、湖南、广东、四川、广西、青海、甘肃、宁夏、内蒙古、陕西、重庆、湖北的血清学样品采集，进行大范围排查；,针对突发的疫情，建议采取的措施,牛支原体肺炎的流行与防控,牛支原体肺炎的病原,牛支原体肺炎是由牛支原体（Mycoplasmabovis,M.bovis)引起的以呼吸系统疾病为主并伴发关节炎、乳腺炎、角膜结膜炎的一种传染病，给世界养牛业造成了非常严重的经济损失。,一、牛支原体肺炎的流行及危害,我国1983年首次报道从乳腺炎牛乳中牛分离到牛支原体,此后只有零星临床报道证实牛支原体导致奶牛乳腺炎；2008年爆发流行：2008年3月，湖北随州市和新洲市分别从山东省嘉祥县和济宁县引进601头犊牛，共发生不明原因肺炎200余头，死亡38头；2008年6月，扩散至湖北11个地市，有2476头犊牛发病，死亡572头犊牛；2008年宁夏从山东嘉祥引进40头牛，在隔离期发现类牛肺疫症状，死亡1头，其余剖杀。本实验室检测其中32头为牛支原体血清学阳性；2008年贵州从山东嘉祥引进65头牛，隔离期发现类牛肺疫症状，死亡33头，其余剖杀，死牛肺脏中分离出牛支原体。,2009年-2010年，河北、黑龙江、吉林、辽宁、山东、山西、陕西、甘肃、湖南、江西、江苏、安徽、内蒙古、广西、广东、重庆、四川、青海、福建等各地都有牛支原体送样检测为阳性。,2013-2017年内蒙古某地区牛支原体血清学检测结果,在英国，每年约有157000头小牛死于肺炎和相关疾病，经济损失约为9900万英镑，在这些呼吸道感染牛中，至少有1/4-1/3是由牛支原体引起的；在美国，每年由于牛支原体感染而引起增重缓慢造成的损失高达3200万美元，而由于牛支原体导致奶牛乳房炎引起的损失每年约为1.08亿美元；在日本，以支原体感染为基础的混合感染性犊牛肺炎比较常见，很难治愈、死淘率高，而且成为其它病原体的温床。,牛支原体肺炎在英国、美国和日本的流行情况,二、牛支原体感染引起的临床症状与病理变化,病理变化牛支原体肺炎的临床特征表现为支气管肺炎或间质性肺炎，在肺脏表面经常可以发现广泛的珍珠状结节，切面突起内含有纤维状物或红白相间干酪样物。,牛支原体肺炎发病牛胸腔积液,三、实验室诊断技术,1、病原分离：成功分离病原是确诊的金标准。,M.bovisHubei-1分离物的菌落(40 x)Fig1:ColonyofHubei-2isolation(40 x）,三、实验室诊断技术,C：培养基的选择：对培养基要求较高，需要加入10%-20%的血清才能保证生长，37、CO2浓度为510%条件下静置培养至少48h，而在琼脂糖固体培养基中至少要生长3天。,影响病原分离成功的原因：,A：病料是否新鲜：病料在运输过程中需要冷藏并且保证在24小时内到达实验室；如果不能则需要将病料保存在运输培养基中冻存或在-70冰箱中保存以防止病原体失活。,B：采样部位：采集有明显病变的部位；下呼吸道拭子或者支气管灌洗液,2、核酸检测：早期PCR技术的靶基因基于M.bovis16SrRNA，很难区分M.bovis和无乳支原体；荧光定量PCR方法并结合杂交探针或产物退火温度分析可以区分M.bovis和无乳支原体；基于oppD/F基因和p81基因为靶点建立的多重PCR可以鉴别无乳支原体和M.bovis；以该方法为基础已经制定了牛支原体PCR检测行业标准。,图2特异性检测结果M：Marker1:阴性对照；2：牛支原体阳性对照；3：大肠杆菌；4：R株（MG）；5：S6株（MG）；6:Mmm；7:无乳支原体,基于OppD/F基因的PCR方法可以区分Mmm和M.bovis,图1敏感性检测结果1，2：阳性对照；3:1012CCU4:1011CCU5:1010CCU6:109CCU7:108CCU8:107CCU9:106CCU10:105CCU11：104CCU12：103CCU13：102CCU14101CCU,左图可见