（食品科学专业论文）赤霉病污染大麦作物中结合态脱氧雪腐镰刀菌烯醇检测体系构建研究.pdf

浙江大学博士学位论文中文摘要 摘要 赤霉病是大麦小麦以及其他小作物中常见的一种真菌病害，其流行不仅导致作物减产，更会 产生真菌毒素威胁人和动物的安全近年来研究表明，在大麦和小麦中存在着结合态真菌毒素， 由于这种形式的毒素，尤其是结合脱氧雪腐镰刀茵烯醇( d o n ) 不能被常规溶剂提取并检测其含量， 一旦在人和动物体内消化释放出这种毒素，将成为潜在的食品安全威胁 本研究比较了三种不同粉碎颗粒度对大麦中d o n 测定的影响，其中细颗粒的测定结果高于 粗颗粒，不过并不是所有样品都能够做出均匀响应；在三种不同提取条件的比较中，5 舻o m l 的 比率，较之其他两种能够减少取样误差，因而取得较理想的提取效果同时比较了三种d o n 的 测定方法：g c e c d ，g c m s 和e z t o x 试剂盒，试验结果发现g c 的优点是结果比较稳定，但日 常维护费用较高，对标准校正物的依赖性较强，样品处理以及测定时间也较长；e z t o x 测定结 果迅速，在测定范围内较结果理想，但是测定范围有限，而且每5 个样品的测定至少需要3 个标 准物绘制标准曲线，因而难免会影响结果的稳定性。通过比较木瓜蛋白酶，a 淀粉酶戊基葡糖苷 酶，纤维素酶木质素酶处理之后对大麦样品中d o n 测定的影响，在大麦样品中存在结合态d o n ， 而其中木瓜蛋白酶的处理效果较好，d o n 的值增加了1 6 2 8 采用三氯乙酸( t c a ) 溶剂水解污染大麦样品，发现样品中结合态d o n 普遍存在但是限于高 温条件下，t c a 水解的样品测定图谱噪音较大，干扰因素较多，直接影响到测定结果，因而选用 具有相似的水解效果( 试验过程中不需要加碱中和反应) ，测定图谱更优的t f a 水解处理样品。 采用d o c h l c r tm a t r i x 实验设计，对t f a 溶剂水解测定大麦中总d o n 的试验条件进行了优化，通 过p cs a s 以及专业的d e s i g n e x p e r t 软件分析，从不同角度对构建的模型进行了验证和确认，证 明该试验模型很理想，因变量总d o n 测定值在模型中得到了最大响应，即在优化条件为：反应时 间5 4 m i n ，温度1 3 3 。c ，t f a 浓度1 2 5 m 。经过反复重复实验验证，确认该方法对于测定不同大麦 麦芽样品的可行性同时还测定了优化条件下d o n 的回收率为9 0 9 8 ，说明了该定量方法的准 确性在该优化实验条件下比较了8 种不同净化柱对测定大麦中d o n 的影响，计算不同净化柱 对d o n 的回收率，并比较了每两种柱子测定样品的图谱与标准工作曲线的叠加图，在综合评价 上述两个指标之后，发现在该实验条件下，a l u m i n a ：c 1 8 和m y c o s e p 2 2 7 是8 种柱子中净化效果 最好的 同时在t f a 优化实验条件下还筛查了污染大麦中的结合态d o n 的情况，其中4 0 的大麦中 存在此结合化合物；在制麦芽的浸泡阶段，有大量的结合态d o n 流失，而其他过程则变化不明 显，表明结合态d o n 可溶于水也进一步证明这种测定方法的有效性和可观的应用前景。 关键词：赤霉病，真菌毒素，结合态脱氧雪腐镰刀茵烯醇，t f a 溶剂水解 浙江大学博士学位论文英文摘要 a b s t r a c t f u s a r i u mh e a db l i g h t ( f h b ) i saf u n g a id i s e a s ec o m m o n l yo c c u r r e di nb a r l e y , w h e a ta n ds o m e o t h e rs m a l lg r a i n s i tp r e v e l a n c er e s u l t si nn o to n l yt h er e d u c t i o no fq u a l i t ya n dq u a n t i t yo fc r o p s ，b u t t h ec o n t a m i n a t i o no f m y c o t o x i n s r e c e n t l y t h eb o u n d m y c o t o x i n s ，p a r t i c l a r l y b o u n d d e o x y n i v a l e n o l ( d o n ) h a sr a i s e dm o r ei n t e r e s ts i n c ei te s c a p e st h er o u t i n ed e t e c t i o n ，b u tc a l lb er e l e a s e d a f t e rd i g e s t i o ni nh u m a na n da n i m a l s ，w h i c hp o s e sp o t e n t i a lt h r e a to nt h ef o o ds a f e t y t h ei m p a c to fp a r t i c l es i z ea n de n z y m a t i ct r e a t m e n t sw e r ei n v e s t i g a t e do nt h ed e t e r m i n a t i o no f d e o x y n i v a l e n o l ( d o n ) i nf h b - i n f e c t e db a r l e ys a m p l e s t h er e s u l t ss h o w e dt h a tt h ef m e g n n ds a m p l e s g e n e r a l l yy i e l d e dh i g h e rr e u l t st h a nm e d i u ma n dc o a r s eg r i n d s t h r e ed e t e r m i n a t i o nm e t h o d s ( g c - e c d ， g c - m s ，e l i s a ) w e r eu s e dt oc o m p a r et h ea c c u r a c yt od e t e c td o n t h i sf i e n dw a sm o s tp r o n o u n c e di n s a m p l e sw i t hh i g h e rd o nc o n t e n t e n z y m et r e a t m e n t si n v o l v e de i t h e ra m y l o l y t i c ( a l p h a - a m y l a s e a m g ) ， p r o t e o l y t i c ( p a p a i n ) o rc e l lw a l ld e g r a d i n g ( c c l l u l a s e x y l a n a s e ) e n z y m e s p a p a i nt r e a t m e n tr e s u l t e di n s i g n i f i c a n ti n c r e a s e s ( 16 - 2 8 1i nt h ea m o u n to fd o nd e t e c t e di nf i v eo ft h es e v e ns a m p l e st e s t e dw h e n c o m p a r e dt ot h eu n t r e a t m e n ts a m p l e so re n z y m ec o n t r o l s t h er e s u l t ss t r o n g l ys u g g e s t e dt h a tf h b i n f e c t e db a r l e ys a m p l e sc a nc o n t a i nb o u n dd o n d o e h l e r tm a t r i xd e s i g nw a sp e r f o r m e dt od e t e r m i n et h e o p t i m a lc o n d i t i o n sf o r t h et i m e ， t e m p e r a t u r eo fh e a th y d r o l y s i sa n dt h ec o n c e n t r a t i o no ft f at od e t e r m i n et h et o t a ld o nc o n t e n ti n b a r l e ys a m p l e sw i t ht f ah y d r o l y s i s t h eo p t i m a lc o n d i t i o n sw e r e13 3 0 cf o rt e m p e r a t u r e ，5 4m i nf o r t i m ea n d1 2 5 mf o rt f ac o n c e n t r a t i o n s t a t i s t i ca n a l y s i ss h o w st h a tv a r i a b l et h et o t a ld o nh a dl a r g e s t r e s p o n s eo nt h eo p t i m a lp o i n ti nt h em o d e le s t a b l i s h e d v e r i f i c a t i o no ft h em e t h o dw a sa l s oi n v e s t i g a t e d o nd i f f e r e n tb a r l e ys a m p l e s r e c o v e r yt e s t so fd o n ，3 - a d o na n d15 - a d o na n da d d i t i o n a l v e r i f i c a t i o nt e s t sp r o v e dt h a tt h i sp r o c e d u r ec o u l db ea p p l i e df o ra n a l y s i so fo t h e rf h bi n f e c t e db a r l e y s a m p l e sw i t ht h i sm a t r i x w i t l lt h eo p t i m a lc o n d i t i o n so ft f ah y d r o l y s i s t h eo c c u r r e n c eo fb o u n dd o n i nf h bi n f e c t e d b a r l e ya n dm a l ts a m p l e so ng c - e c d t h ep r e s e n c eo fb o u n dd o nw a so b s e r v e di na l m o s t4 0 o f b a r l e ys a m p l e s t h er e s u l t so fb o u n dd o n i nm a l t i n gs a m p l e ss h o w e dt h a ta f t e rs t e e p i n gt h ec o n t e n to f f l e ed o nd e c r e a s e dd r a m a t i c a l l yt o g e t h e rw i t hb o u n dd o n t h ef a c tt h a ts om u c hb o u n dd o nw a s l o s td u r i n gs t e e p i n gs u g g e s t st h a tb o u n dd o na p p e a r sl i k e l yt ob ew a t e rs o l u b l ea n dd o n g l u c o s i d e s w o u l db ee x p e c t e dt ob ea tl e a s tp a r t i a l l yw a t e rs o l u b l e k e y w o r d s ：f u s a r i u mh e a db l i g h t ，m y c o t o x i n s ，b o u n dd o n ，t f ah y d r o l y s i s 1 1 1 浙江火学博士学位论文捅图清单 插图清单 标号插图名称 图1 1单端孢霉烯族化合物化学结构式 t h ec h e m i c a ls t r u c t u r eo f t r i c h o t h e c e n e s 图1 2脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其衍生物的分子结构 图1 3 图2 1 图2 2 图2 3 图2 - 4 图2 5 图3 1 图3 - 2 囹4 1 图4 2 图4 3 图4 4 图4 5 囹4 6 c h e m i c a ls t r u c t u r e so fd e o x y n i v a l e n o la n di t sd e r i v a t i v e s 3 ，1 5 - a d o n 化学合成d o n 糖苷产物的示意图 c h e m i c a ls y n t h e s i so fd o n - g l u e o s i d e sf r o m3 15 一a d o n 大麦样品不同粉碎度分布图( 其中粗、中粗，细颗粒分别用r o m e r 、p e r t e n 、u d y 磨研磨而得到) 。 d i s t r i b u t i o no fb a r l e yg r i n d s ( c o a r s e ，m e d i u m ，f i n eg r i n d sw e r eo b t a i n e df r o mm i l l s r o m e r , p e r t e n ，u d y , r e s p e c t i v e l y ) 5 个大麦样品中不同粉碎度对真菌毒素d o n 的测定影响( 试验为3 个平行) i m p a c to fb a r l e yg r i n d so nt h ed e t e r m i n a t i o no fd e o x y n i v a l e n 0 1 大麦样品及其研磨处理对脱氧雪腐镰刀菌烯醇( d o n ) 测定的相互作用 g r a p h i c a lr e p r e s e n t a t i o no ft h ei n t e r a c t i o nb e t w e e nb a r l e ys a m p l ea n d g r i n d ( m i l l i n gt r e a t m e n t ) f o rd e o x y n i v a l e n o l ( d o n l 2 0 0 2 年大麦调查样品在低温冷库中储存5 年后的脱氧雪腐镰刀菌烯醇d o n 的 变化 c o m p a r i s o no fd e t e r m i n a t i o no fd e o x y n i v a l e n o lc o n t e n ti nb a r l e ys u r v e ys a m p l e s s t o r e di nc o o lr o o mf o r5y e a r s 三种不同溶剂提取条件对大麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇d o n 测定的影响 t h ei m p a c to fe x t r a c t i o n r a t i ow i t ha c e t o n i t r i l eo nt h ed e t e r m i n a t i o no f d e o x v n i v a l e n o li nb a r l e ys a m p l e s 比较g c e c d ，g c m s ，e x t o x 三种方法对大麦d o n 的测定影响 g r a p h i cc o m p a r i s o no fr e s u l t sd e t e r m i n e di nb a r l e ys a m p l e sw i t hg ca n d e z t o xm e t h o d s 比较g c e c d ，g c m s ，e x - t o x 三种方法对麦芽d o n 的测定影响 g r a p h i cc o m p a r i s o no fr e s u l t sd e t e r m i n e di nm a l ts a m p l e sw i t hg ca n de z t o x m e t h o d s 7 个大麦样品中三种酶处理方式与大麦样品的交互作用比较 i n t e r a c t i o no f t h r e ee n z y m et r e a t m e n ta n db a r l e ys a m p l e si n7s a m p l e s 大麦样品与三种酶处理对脱氧雪腐镰刀菌烯醇d o n 测定的交互作用 g r a p h i ci n t e r a c t i o nb e t w e e ne n z y m et r e a t m e n ta n dt h ed e t e r m i n a t i o no f d c o x v n i v a l e n o li nb a r l e ys a m p l e s 木瓜蛋白酶处理对大麦中d o n 和1 5 - a d o n 测定的影响比较( 所有样品结果都 是在3 个平行的基础上得到的平均值) 。 e f r e c to fp a p a i nt r e a t m e n to nt h ed e t e r m i n a t i o no fd e o x y n i v a l e n o la n d l5 - a c e t y l d e o x y n i v a l e n o li nb a r l e yr d a t ai ne a c hs a m p l e sw e r et h em e a nv a l u e so f t h r e er e p l i c a t e s ) n 淀粉酶戊基葡糖苷酶处理对大麦中d o n 和1 5 - a d o n 测定的影响比较( 所有 样品结果都是在3 个平行的基础上得到的平均值) 。 e f r e c to fa a m y l a s e a m v l 0 2 i u c o s i d a s et r e a t m e n to nt h ed e t e r m i n a t i o no f d e o x y n i v a l e n o la n dl5 - a c e t y l d e o x y n i v a l e n o li nb a r l e y ( d a t ai ne a c hs a m p l e sw e r e t h em c a nv a l u e so ft h r e er e p l i c a t e s ) 纤维素酶木质素酶处理对大麦中d o n 和1 5 - a d o n 测定的影响比较( 所有样品 结果都是在3 个平行的基础上得到的平均值) e f f e c to fc e l l u l a s e x y l a n a s et r e a t m e n to nt h ed e t e r m i n a t i o no fd e o x y n i v a l e n o la n d 15 - a c e t y l d e o x y n i v a l e n o ii nb a r l e y ( d a t ai ne a c hs a m p l e sw e r et h em e a nv a l u e so f t h r e er e p l i c a t e s ) 大麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇d o n 与1 5 - a d o n 含量的比较( 所有结果都是基于三 i v 页码 5 7 1 8 1 9 2 9 3 0 3 6 3 9 4 0 浙江大学博士学位论文 捅图清单 图5 1 图5 2 图5 3 图5 - 4 图5 5 图5 - 6 图6 1 图6 - 2 图6 3 图6 4 图6 5 图7 1 图7 2 图7 3 图8 1 个平行的测定结果。) c o m a p r i s o no fr e s u l t so fd e o x v n i v a j e n o ia n d l5 - a c e t y l d e o x v n i v a i e n o li n21 b a r l e ys a m p l e s ( d a t ai ne a c hs a m p l e sw e r et h em e a nv a l u e so f t h r e er e p l i c a t e s ) 4 l t c a 水解大麦提取物的脱氧雪腐镰刀菌烯醇( d o n ) 及其衍生物( 1 5 a d o n ) i 搠4 定比较( 每个点为三个平行样的平均值) 。 c o m p a r i s o no fd e t e r m i n a t i o no fd e o x v n i v a l e n o la n dl5 - a c e t y i - d e o x y n i v a l e n o li n l i q u i dh y d r o l y s i sw i t ht c ai nb a r l e y 斗。 大麦样品残渣中d o n 含量的比较 c o m p a r i s o no fd e o x y n i v a l e n o lc o n t e n td e t e r m i n e di nb a r l e yr e s i d u eh y d r o l y s i s w i t h t c a 4 7 t c a 水解时酸的浓度对测定大麦中总d o n 量的影响 e f f e c to fc o n c e n t r a t i o no ft c ao nt h ed e t e r m i n a t i o no ft o t a ld e o x y n i v a l e n o ld u r i n g h y d r o l y s i sp r o c e d u r e 4 7 在不同反应时间下，t c a 浓度对测定大麦中d o n 的影响 e f r e c to ft c ac o n c e n t r a t i o no nt h ed e t e r m i n a t i o no fd e o x v n i v a l e n o lu n d e r d if f e r e n tr e a c t i o nt i m ei nb a r l e y 4 7 大麦原料样品( 蓝色) ，t c a 水解处理样品( 红色) ，t f a 水解样品( 绿色) 图谱比较 c h r o m a t o g r a p h i cc o m p a r i s o no fo r i g n i n a ib a r l e ys a m p l e s ( b l u e ) ，s a m p l e st r e a t e d w i t ht c a ( r e d ) o rt f a ( g r e e n ) 51 大麦样品中原料样品( 蓝色) - 5t f a 处理样品( 红色) 的图谱比较 c h r o m a t o g r a p h i cc o m p a r i s o no fo r i g i n a lb a r l e ys a m p l e ( b l u e ) a n ds a m p l et r e a t e d w i t ht f a ( r e d ) 5 1 t f a 水解脱氧雪腐镰刀菌烯醇( d o n ) 的实际测定值与采用多项式模型的预计值。 o b s e r v e dd e o x v n j v a l e n o l ( d o n lr e s p o n s ef o l l o w i n gt f ah y d r o l y s i sv s d o n p r e d i c t e db yt h ep o l y n o m i a lm o d e l 6 2 响应面i 琴l ( a ) - 5 轮廓图( b ) 显示时间和温度在固定酸浓度( 1 5nt e a ) 下，对总 d o n 测定的交互影响 r e s p o n s es u r f a c ep l o t ( a 1a n dc o n t o u rp l o t ( 鳓o ft h ec o m b i n e de f f e c t so ft i m e a n dt e m p e r a t u r eo nt h ed e t e r m i n a t i o no ft o t a ld o nu n d e rc o n s t a n tc o n c e n t r a t i o n 0 f1 5mt f a 6 2 响应面图( a ) 与轮廓图( b ) 显示t f a 浓度和时间在固定温度( 1 3 5 0 c ) 下，对总 d o n 测定的交互影响 r e s p o n s es u r f a c ep l o t ( a ) a n dc o n t o u rp l o t ( b ) o ft h ec o m b i n e de f f e c t so ft f a c o n c e n t r a t i o na n dt i m eo nt h ed e t e r m i n a t i o no ft o t a ld o nw i t hc o n s t a n t t e m p e r a t u r e ( 13 5 0 c ) o j 响应面图( a ) - 5 轮廓图( b ) 显示时间和温度在固定时间( 5 5m i n ) 下，对总d o n 测 定的合并影响。 r e s p o n s es u r f a c ep l o t ( a ) a n dc o n t o u rp l o t ( b ) o ft h ec o m b i n e de f f e c t so ft f a c o n c e n t r a t i o na n dt e m p e r a t u r eo nt h ed e t e r m i n a t i o no ft o t a ld o nw i t hc o n s t a n t t i m e ( 5 5r a i n ) 一 6 4 内部t 化残差的正态分布概率 n o r m a lp r o b a b i l i t yo fi n t e r n a l l ys t u d e n t i z e dr e s i d u a l s 6 5 测定的相对标准偏差与测定值之间的关系示意图( 其中两条曲线代表两种不同 的分析物) s c h e m a t i cr e p r e s e n t a t i o no fr e l a t i v es t a n d a r dd e v i a t i o n ( r s d ) a n dd e t e r m i n a t i o n c o n c e n t r a t i o n ( t w oc u r v e sr e p r e s e n tt w od i f f e r e n ta n a l y t e s ) o 真菌毒素标准工作曲线测定的色谱图。 c h r o m a t o g r a mo f t h ed e t e r m i n a t i o no fm y c o t o x i n sf o rs t a n d a r dc u r v eo ng c e c d 7l 脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准工作曲线示意图 s t a n d a r dc u r v eo fd e o x y n i v a i e n o lo ng c e c d 71 a l u m i n a ：c 1 8 ( 蓝色) - 5c 1 8 m a x ( 红色) 柱子的图谱比较( 绿色为标准工作曲线图) c 。m p a r i 5 。n o f c h r o m a t 。g r a m s 。f b a r l e ys a m p l e 5p u r i f i e dw i t ha i u m i n a ：c 18 79(blue)and c18m a x ( r e d ) c o l u m n s v 浙2 i ：人学博士学位论文插图清单 图8 2 图8 3 图8 4 图9 1 图9 2 图9 3 a m b e r l i t e ( 蓝色) 和c h a r c o a l ( 红色) 柱子的图谱比较( 标准工作曲线为绿色) c o m p a r i s o no fc h r o m a t o g r a m so fb a r l e ys a m p l e sp u r i f i e dw i t ha m b e r l i t e ( b l u e ) ， c h a r c o a l ( r e d ) c o l u m n st ot h a to fs t a n d a r dc u r v e ( g r e e n ) m y c o s e p2 2 7 ( 红色) 和m y c o s e p2 2 5 柱子( 绿色) 的比较( 蓝色为标准工作曲线) 。 c o m p a r i s o no fc h r o m a t o g r a m so fb a r l e ys a m p l e sp u r i f i e dw i t hm y c o s e p2 2 7 ( r e d ) a n dm y c o s e p2 2 5 ( g r e e n ) c o l u m n st ot h a to fs t a n d a r dc u r v e ( b l u e ) c a t i o n x ( 蓝色) 和a n i o n x ( 红色) 的图谱比较( 其中绿色为标准工作曲线) 。 c o m p a r i s o no fc h r o m a t o g r a m so fb a r l e ys a m p l e sp u r i f i e dw i t hc a t i o n - x ( 蓝色) 和 a n i o n - x ( 红色) c o l u m n st ot h a to fs t a n d a r dc u r v e ( g r e e n ) 比较大麦样品中测定的总脱氧雪腐镰7 j 菌烯醇( t f a 水解测定) 与可提取脱氧雪 腐镰刀菌烯醇( 标准方法测定) 。 c o m p a r i s o no ft h ed e t e r m i n a t i o no fe x t r a c t a b l ed e o x v n i v a i e n o l ( n o r m a lm e t h o d ) a n dt o t a id e o x v n i v a l e n o l ( t f ah y d r o l y s i s ) i nb a r l e ys a m p l e s 8 l 8 8 比较样品a 大麦与麦芽中总d o n ( t f a 水解测定) 与可提j 双d o n ( d o n 标准测定) 含量 g r a p h i cc o m p a r i s o no fe x t r a c t a b l ed e o x y n i v a l e n o l 州o r m a lp r o c e d u r e ) a n dt o t a l 9 0 d e o x v n i v a l e n o l ( t f ah y d r o l y s i s ) i nb a r l e yaa n di t sm a i rs a m p l e s 比较样品b 大麦与麦芽中总d o n ( t f a 水解测定) 与可提取d o n ( d o n 标准测定) 含量 g r a p h i cr e p r e s e n to fe x t r a c t a b l ed e o x y n i v a l e n o l ( n o r m a lp r o c e d u r e ) a n dt o t a l y u d e o x y n i v a l e n o l ( t f ah y d r o l y s i s ) i nb a r l e yba n di t sm a l ts a m p l e s v l 浙江大学博士学位论文附表清单 标号 表1 1 表1 2 表1 - 3 表1 4 表2 i 表2 - 2 表3 1 表3 - 2 表3 - 3 表4 1 表4 - 2 表4 - 3 表4 4 表5 1 表6 1 表6 2 表6 3 附表清单 表格名称页码 主要单端孢霉烯族化合物( a 型和b 型) 的取代基及其分子量 m a i nt y p e so f t r i c h o t h e c e n e sa n dt h e i rm o l e c u l a rw e i g h t s6 2 0 0 5 年公布的欧盟对谷物及其谷物制品中d o n 的限量标准规定 r e g u l a t o r y l e v e l so fd e o x v n i v a l e n o li ng r a i n a n dt h e i rp r o d u c t si s s u e d b y e u r o p e a nc o m m i s s i o ni n2 0 0 5 9 美国f d a 公布的食品和饲料中的d o n 限量标准 f d aa d v i s o r yl i m i t so fd e o x y n i v a l e n o li nf o o d sa n df e e d s 9 加拿大卫生安全部公布的食品中d o n 的限量指导标准 t h ea d v i s o r yl i m i t so fd e o x y n i v a l e n o li nf o o d si s s u e db vt h ef e d e r a lh e a l t h p r o t e c t i o nb r a n c hi nc a n a d a 9 不同粉碎度大麦样品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇( d o n ) 含量测定结果f t e s t 的方差 分析 a n a l y s i so fv a r i a t i o no fd e o x v n i v a l e n o lc o n t e n ti nb a r l e ys a m p l e sw i t hd i f f e r e n t g r i n d sr f t e s t ) 1y 大麦粉碎度对其中脱氧雪腐镰刀菌烯醇( d o n ) 平均含量的影响作用l m e a nd e o x y n i v a l e n o l ( d o n ) c o n c e n t r a t i o na se f f e c t e db yp a r t i c l es i z e 2 0 不同仪器方法在测定单端孢霉烯族化合物中的优点卑 t h ea d v a n t a g e so fd i f f e r e n t a n a l y t i c a lm a c h i n e so nt h ed e t e r m i n a t i o n o f d e o x y n i v a l e n o l 2 4 采用g c e c d ，g c m s ，e z t o x 三种方法测定的大麦和麦芽样品结果，i d o nd e t e r m i n a t i o ni nb a r l e ya n dm a l ts a m p l e sb yu s i n gt h em e t h o d so fg c e c d g c m sa n de z t o x r e s p e c t i v e l y 2 8 g c e c d ，g c m s ，e z t o x 三种测定方法的统计分析 s t a t i s t i c sa n a l y s i so fr e s u l t sd e t e r m i n e dw i t ht h em e t h o d so fg c e c d g c m sa n d e x t o x 2 9 三组样品比较：d o n 在原料大麦，酶处理大麦，以及对照组中的测定值 c o m p a r i s o no fd e o x y n i v a l e n o lv a l u e si nb a r l e ys a m p l e sp r e t r e a t e dw i t ht h r e e e n z y m et r e a t m e n t 3 5 三种酶处理对大麦样品中脱氧雪腐镰刀茵烯醇( d o n ) 含量测定结果f - t e s t 的方 差分析 a n a l y s i so fv a r i a t i o no fd e o x y n i v a l e n o lc o n t e n ti nb a r l e yo b t a i n e dw i t ht h r e e j ) e n z y m et r e a t m e n t 三种酶处理作用对大麦样品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇平均浓度的影响 e f f e c to ft h r e ee n z y m et r e a t m e n to nt h ed e t e r m i n a t i o no fm e a nd e o x y n i v a l e n o l v a l u e si nb a r l e y 3 7 三种酶处理方式测定大麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇d o n 平均浓度的比较 c o m p a r i s o no fm e a nd e o x y n i v a l e n o lc o n t e n ta sd e t e r m i n e da f t e rt h r e ee n z y m e t r e a t m e n t 3 8 t c a 水解大麦测定总d o n 的d o e h l e r t 实验设计及其结果奉 d o e h l e r tm a t r i xd e s i g na n dt h er e s u l t sf o r1 o t a ld e o x v n i v a l e n o li nb a r l e ya f t e r h y d r o l y s i sw i t ht c a 4 9 三变量不同水平的d o e h l e r t 实验设计 d o e h l e r tm a t r i xd e s i g nf o rt h r e ef a c t o r so nd i f f e r e n tl e v e l s 5 4 t f a 水解实验条件 f a c t o r sa n dt h e i rl e v e l si nt h eh y d r o l y s i se x p e r i m e n tw i t ht f a 5 6 t f a 水解处理大麦样品测定总脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量的d e o h l e r t 试验设计( 第 一次) a f i r s t e x p e r i m e n to fd o e h l e r tm a t r i xd e s i g n f o r t h ed e t e r m i n a t i o no ft o t a l ， d e o x y n i v a l e n o li nb a r l e yw i t ht f ah y d r o l y s i st r e a t m e n t v l i 浙江大学博十学位论文附表清单 表6 4 表6 5 表6 - 6 表6 7 表6 8 表7 1 表7 - 2 表7 3 表7 4 表8 1 表9 1 表9 - 2 表9 3 第一次t f a 实验设计的方差分析 a n a l y s i so fv a r i a t i o no fr e s u l t sf r o mt h ef i r s te x p e r i m e n tw i t hd o e h l e r tm a t r i x d e s i g no f7 7 爿h