（动物学专业论文）pfos对剑尾鱼抗氧化系统影响的研究.pdf

t h ee f f e c to fp e r f l u o r o o c t a n es u l f o n a t e so n a n t i o x i d a n ts y s t e mt ox i p h o p h o r u she l l e r i j i n gz h a n g s p e c i a l t y ：z o o l o g y c o l l e g e ：c o l l e g eo fl i f es c i e n c e s u p e r v i s o r ：p r o f e s s o rz h a n - q i a n gf a n g s u b m i t t e dd a t e ：m a y5 ，2 0 1 0 摘要 摘要 p f o s 对剑尾鱼抗氧化系统影响的研究 专业：动物学申请人：张晶导师：方展强教授 本研究以剑尾鱼( x i p h o p h o r u sh e l l e r ih e c k e l ) 为实验动物，采用静水暴露 染毒实验方法，在高浓度p f o s 短期暴露后，分别从蛋白和核酸水平对剑尾鱼肝 脏中的相关抗氧化指标进行测定，分析高浓度p f o s 对剑尾鱼氧化损伤的程度， 从自由基学说探讨p f o s 对鱼类的致毒机理，弥补此类物质在水生生物毒性资料 上的缺乏，为其生态风险评价提供科学依据。结果表明： 1 、p f o s 急性暴露能够引起剑尾鱼肝脏抗氧化物酶活性的变化。p f o s 暴露 1 2h 后，除2 8 0r n g l o 组s o d 活性被显著性抑制外，其余各组与对照组均无显 著性差异( 矿0 0 5 ) ，7 0m g l 1 组和1 4 0m g l 以组在2 4h 被极显著诱导0 0 1 ) ， 并且这种上升趋势一直保持至9 6h ，表明其组织在防御氧化损伤方面作出的一 种更为主动有效的反应。其中，2 8 0m g l 以组在不同时间表现出先升高后降低再 升高的变化趋势，这与p f o s 在生物体内通过肠肝循环进行消除的机制有关。 2 、同一实验时间，c a t 活性随p f o s 浓度的升高而降低，1 2h 时，除3 5m g l 。1 组外，其余各组c a t 活性被显著或极显著抑制，至2 4h 时，各组c a t 活性有 上升趋势，但仍低于对照组，4 8h 后，各组呈不断下降趋势，一直持续至9 6h ， 其c a t 活性恢复到1 2h 水平。 3 、g s h p x 活性变化与c a t 活性变化趋势相似，其中2 8 0m g l q 组在不同 时间均被显著性抑制，并在9 6h 时抑制率达到最高值6 4 8 。 4 、s o d 的高活性是由于机体中超氧阴离子的存在，而高浓度的超氧阴离子 能够灭活c a t 和g s h p x 活性，因此，c a t 和g s h p x 活性始终低于对照组。 g s h p x 对p f o s 的敏感性高于c a t 。 5 、m d a 含量在1 2h 时呈小幅下降趋势，推断这是生物体内代谢或其它生 理因素发生改变而非氧化应激的结果。随着暴露时间的延长，各处理组m d a 含 摘要 量呈连续上升趋势，并在9 6h 时达到最高点，诱导率分别为7 1 2 、7 0 1 和 8 5 1 。m d a 含量持续升高反映出细胞组织已经遭受到氧化损伤。 6 、鱼类在体( i nv i v o ) 组织对p f o s 的致毒敏感性高于离体( i nv i t r o ) 组织 对p f o s 的敏感性，表明在生物体内更为复杂的生理环境下，p f o s 的作用更能 引起生物体的氧化应激反应。 7 、成功克隆包含7 9 4b p 核苷酸和编码1 5 4 个氨基酸的c u z n - s o d 全序列。 通过与已发表的其它鱼类c u z n - s o d 的核苷酸序列和氨基酸序列相似性比较发 现，核苷酸和氨基酸序列相似性分别达到7 7 8 3 和7 9 8 8 。 8 、高浓度p f o s 暴露后，剑尾鱼肝脏中与应激相关的各种基因发生不同程 度的变化。通过r t - p c r 技术检测c u z n - s o dm r n a 表达在剂量效应上不显著， 推断是其它类型的s o d 基因在p f o s 暴露下发挥更为重要的作用。但是随着暴 露时间的延长呈不断上升趋势，该基因的转录水平变化趋势与s o d 活性变化及 h s p 7 0 1m r n a 表达相一致，表明h s p 7 0 通过提高剑尾鱼体内s o d 水平保护机 体免受氧化损伤。 9 、h s p 7 0 2m r n a 水平比h s p 7 0 1m r n a 表达更加敏感。但是这一亚型变 化趋势与c u z n - s o dm r n a 表达相关性不强，其相关机制有待进一步研究。 1 0 、g s tm r n a 表达呈不断上升趋势，这与n r f 2 信号传导途径有关，也可 能是机体在应对p f o s 进入鱼体后的一种防御措施。g s tm r n a 和h s p 7 0 2 m r n a 表达可以作为p f o s 暴露的敏感生物标志物。 本论文发现，剑尾鱼在体的实验表明p f o s 能够诱导肝脏氧化应激反应，氧 化损伤是p f o s 致毒的主要途径之一。 关键词：剑尾鱼全氟辛烷磺酰基化合物( p f o s )抗氧化物酶系统分子 克隆 a b s t r a c t t h ee f f e c t s0 fp e r f l u o r 0 0 c t a n es u l f o n a t e s0 n a n t 姒d a n ts y s t e m 弋qx | p h o p h o r u sh e l l e r | m a j o r ：z o o l o g yn a m e ：j i n gz h a n gs u p e r v i s o r ：z h a n - q i a n gf a n o a b s t r a c t a ss t a t e dp r e v i o u s l y , m o s ts t u d i e sf o c u s e do nt h em o l e c u l a rl e v e lo f t r a n s c r i p t i o n a n d 加v i t r oe x p e r i m e n t s - - - c e l ll e v e l h o w e v e r , i tc o u l dn o tr e f l e c ta c c u r a t e l yt h et o x i n r e s p o n s ei nt h ec o m p l e x i t yo ft h eb o d yu n d e rt h ep h y s i o l o g i c a lc o n d i t i o n s s ot h e m a i np u r p o s eo ft h i ss t u d yw e r et oe m p l o y e ds w o r d t a i l sl i v e ra sa ni nv i v om o d e lt o e x a m i n et h e t o x i c i t y o fs h o r t t e r m e x p o s u r eo fp f o so no x i d a t i v es t r e s sb y m e a s u r i n g t h ea n t i o x i d a n ti n d i c a t o r sf r o mt h e p r o t e i n a n dm o l e c u l a rl e v e l p r e l i m i n a r ys t u d yo nt h et o x i ce f f e c t so fp f o si nf i s hf r o mt h ef i e er a d i c a lt h e o r y , m a k eu pf o rt h es h o r t a g eo ft h i ss u b s t a n c ei na q u a t i ct o x i c i t yd a t a , a n dp r o v i d et h e s c i e n t i f i cb a s i sf o re c o l o g i c a lr i s ka s s e s s m e n t t h er e s u l t sa r ea r el i s t e db e l o wp o i n t b yp o i n t ： ( 1 ) t h ea c u t ee x p o s u r eo fp f o sc o u l dc a u s et h ec h a n g e so fa n t i o x i d a n t e n z y m ea c t i v i t i e si ns w o r d t a i l s l i v e r a f t e r12he x p o s u r et op f o s ，t h e2 8 0m g 。l 。 e x p o s u r eg r o u pe x h i b i t e ds i g n i f i c a n ti n h i b i t i o ni ns o da c t i v i t y b u tc o m p a r et ot h e c o n t r o lg r o u p ，t h e r ew e r en os i g n i f i c a n td i f f e r e n c ei no t h e rt h r e eg r o u p s ( p o 0 5 ) t h et w oe x p o s u r eg r o u p s ( 7 0a n d14 0m g l d ) w e r es i g n i f i c a n t l yi n d u c e da t t e r2 4h e x p o s u r e ，a n dt h i su p w a r dt r e n dh a sb e e nm a i n t a i n e dt o9 6h t h i sc o n t i n u i n g i n c r e a s ei ns o da c t i v i t yh a dac e r t a i ne f f e c to nr e d u c i n gt h ep f o st o x i c i t yt o o x i d a t i v ed a m a g et ot h et i s s u e ，a n di tm a yw e l lb eap r o - a c t i v ea n de f f e c t i v ew a yi n d e f e n s eo fo x i d a t i v es t r e s s i tw a sn o t e dt h a ts o d a c t i v i t yi nt h e2 8m g 。l 1e x p o s u r e g r o u pw a si n c r e a s e dd u r i n ge a r l yh o u r s ，r e a c h e dam a x i m a lv a l u ea tt h e2 4 hs h o w i n g s i g n i f i c a n td i f f e r e n c ef r o mc o n t r o l , a n dt h e nd e c r e a s e dg r a d u a l l y , b u te v e n t u a l l y r e - e l e v a t e da tt h e9 6h t h i ss u g g e s t e dt h a ti tm a yb er e l a t e dt op f o si nt h eb i o l o g i c a l b o d yt h r o u g ht h ee n t e r o h e p a t i cc i r c u l a t i o no f t h em e c h a n i s m st oe l i m i n a t e ( 2 ) a tt h es a m et i m ec a ta c t i v i t yd e c r e a s e dw i t ht h ec o n c e n t r a t i o no fp f o s m a b s t r a c t i n c r e a s e d t h et h r e eg r o u p s ( 7 0 ，1 4 0a n d2 8 0m g 。l _ ) w e r ei n h i b i t e ds i g n i f i c a n t l ya t t h e12h t h ea c t i v i t yo fc a to fe a c hg r o u ph a sas l i g h t l yu p w a r dt r e n d ，b u ts t i l l l o w e rt h a nt h ec o n t r o lg r o u pa f t e rt h e2 4he x p o s u r e a f t e r4 8hi ne a c hg r o u ps h o w e d d e c r e a s i n gt r e n dc o n t i n u e du n t i l9 6l l ，a n dt h e i rl e v e lo fc a ta c t i v i t yr e t u r n e dt o121 1 ( 3 ) t h eg s h - p xa n dc a ta c t i v i t i e sh a v eas i m i l a rc h a n g et r e n d b u tt h e g s h p xa c t i v i t yo f2 8m g l 1e x p o s u r eg r o u pe x h i b i t e ds i g n i f i c a n ti n h i b i t i o na te a c h t i m ep o i i 】：t ( 4 ) a ni n c r e a s ei nt h es o da c t i v i t yi n d i c a t e da ni n c r e a s ei ns u p e r o x i d ea n i o n p r o d u c t i o n f u r t h e r m o r e s u p e r o x i d e a n i o nc o u l di n a c t i v a t ec a ta n dg s h - p x a c t i v i t y s oc a ta n dg s h - p xa c t i v i t i e si nt h ep r e s e n c eo fh i g hc o n c e n t r a t i o n so f s u p e r o x i d ea n i o nm u s tb em a i n t a i n e da tal o wl e v e l c o n c l u s i o nc o u l db es h o w e dt h a t g s h p xw a sm o r es e n s i t i v et h a nc a tw h e ne x p o s u r et op f o s ( 5 ) m d ac o n t e n td e c r e a s e ds l i g h t l ya t12he x p o s u r e i ti n d i c a t e dt h o s e b i o m e t a b o l i c c h a n g e s o ro t h e rp h y s i o l o g i c a lf a c t o r s ，r a t h e rt h a nt h er e s u l to f o x i d a t i v es t r e s s b u ta st h ee x t e n s i o no fe x p o s u r et i m e ，m d ac o n t e n to fe a c hg r o u p w a sc o n t i n u o u si n c r e a s e d ，a n dr e a c h e dam a x i m a lv a l u ea tt h e9 6h m d al e v e l sw e r e o nt h er i s er e f l e c t e dt h et i s s u eh a sb e e ns u b j e c t e dt oo x i d a t i v ed a m a g e ( 6 ) t h et o x i c i t yt e s t si n d i c a t e dt h a tf i s hc e l ll i n e sm i g h tb el e s ss e n s i t i v et o a c u t et o x i cc o n c e n t r a t i o n so fc h e m i c a l st h a nw h o l ea n i m a l s t h u s ，t h er e a s o nm a yb e m o r ec o m p l e xi nv i v op h y s i o l o g i c a le n v i r o n m e n ta n dt h er o l eo fp f o sw a sa b l e rt o c a u s e do x i d a t i v es t r e s s ( 7 ) t h ec u z n - s o de d n aw a sc l o n e d ，w h i c hh a d7 9 4b pn u e l e o t i d e sa n d e n c o d i n g15 4a m i n oa c i d s t h ec o m p a r i s o na m o n g t h es i m i l a r i t yn u c l e o t i d es e q u e n c e a n da m i n oa c i ds e q u e n c eo f c u z n - s o di np u b l i s h e db yo t h e rf i s hs h o w e dt h a t n u c l e o t i d ea n da m i n oa c i ds e q u e n c es i m i l a r i t yw e r e7 7 - 8 3 a n d7 9 8 8 ， r e s p e c t i v e l y ( 8 ) a f t e re x p o s u r et oh i g hc o n c e n t r a t i o n so fp f o s ，av a r i e t yo fs t r e s s - r e l a t e d g e n e si nx i p h o p h o r u sh e l l e r il i v e rw e r ec h a n g e di nd i f f e r e n td e g r e e s t h ee x p r e s s i o n o f c u z n - s o dm r n ai nt h ed o s e - e f f e c tw a sn o ts i g n i f i c a n tb yr t - p c r , a n dw i t hn o c o r r e l a t i o nb e t w e e nt h es o da c t i v i t ya n dt h ee x p r e s s i o no fc u z n - s o dm r n a i t m a yb eo t h e rt y p e so fs o dg e n ep l a y e dam o r ei m p o r t a n tr o l eu n d e rt h ep f o s a b s t r a c t e x p o s u r e b u tw i t ht h ee x p o s u r et i m et oi n c r e a s ec o n t i n u o u s l y , t h eg e n ec h a n g e sw e r e c o n s i s t e n tw i t ht h es o d a c t i v i t ya n dt h ee x p r e s s i o no f l i s p 7 0 - lm r n a t h u sh s p 7 0 b yi n c r e a s i n gt h el e v e lo fs w o r d t a i lf i s hs o dp r o t e c tt h eb o d yf r o mo x i d a t i v e d a m a g e ( 9 ) h s p 7 0 2m r n aw a sm o r es e n s i t i v et h a nt h el e v e l sofh s p 7 0 1m r n a e x p r e s s i o n h o w e v e r , t h ec h a n g e so ft h i ss u b t y p ew e r en o tr e l e v a n tw i t hc u z n - s o d m r n a e x p r e s s i o n 1 1 1 eu n d e r l y i n gm e c h a n i s mn e e d e dt h ef u r t h e rm u d y ( 10 ) g s tm r n ae x p r e s s i o nw a sc o n s t a n t l yi n c r e a s i n g ，w h i c hi t m a yh e r e l e v a n tw i t ht h en r i 2s i g n a lt r a n s d u c t i o np a t h w a y s ，m a ya l s ob eaf o r mo fd e f e n s ei n f i s hw h e np f o se n t e r e dt h eb o d y t l l ee x p r e s s i o no fg s tm r n aa n dh s p 7 0 2 m r n ac o u l db ea c ta ss e n s i t i v eb i o m a r k e r so fp f o se x p o s u r e i nc o n c l u s i o n , s w o r d t a i l si nv i v oe x p e r i m e n t ss h o w e dt h a tp f o sc o u l di n d u c e o x i d a t i v es t r e s si nt h el i v e r p f o s i n d u c e do x i d a t i v ed a m a g ei sam a j o rr o u t eo ft o x i c e f i e c t k e y w o r d s ：s w o r d t a i l s ( x i p h o p h o r u sh e l l e r i ) p e r f l u o r o o c t a n es u l f o n a t e ( p f o s ) a n t i o x i d a n te n z y m es y s t e mm o l e c u l a rc l o n i n g v 英文缩略词 p f o s s o d c a t g s h p x m d a g s t h s p 7 0 r t p c r p f c s l c s o n m d a n o e c a l t a s t r o s g s h l d h x s d h 英文缩略词 p e r f l u o r o o c t a n es u l f o h a t e s u p e r o x i d ed i s m u t a s e c a t a l a s e g l u t a t h i o n ep e r o x i d a s e m a l o n d i a l d e h y d ea m e h y d e g l u t a t h i o n es t r a n s f e r a s e h e a ts h o c kp r o t e i n 7 0 r e v e r s et r a n s c r i p t i o np o l y m e r a s e c h a i nr e a c t i o n p e r f l u o r i n a t e dc o m p o u n d s m e d i a nl e t h a lc o n c e n t r a t i o n n - m e t h y l - d a s p a r t a t e n oo b s e r v e de f f e c te o n c e n t r a t i o n a l a n i n ea m i n o t r a n s f e r a s e a s p a r t a t ea m i n o t r a n s f e r a s e r e a c t i v eo x y g e ns p e c i e s g l u t a t h i o n e a c t a t ed e h y d r o g e n a s e i s o e n z y m e s s o r b i t o ld e h y d r o g e n a s e 全氟辛烷磺酰基化合物 超氧化物歧化酶 过氧化氢酶 谷胱甘肽过氧化物酶 丙二醛 谷胱甘肽转移酶 热应激蛋白7 0 逆转录聚合酶链式反应 全氟化合物 半数致死浓度 n 甲基d 天冬氨酸 无可观察效应浓度 丙氨酸转移酶 天冬氨酸转移酶 活性氧自由基 谷胱甘肽 乳酸脱氢酶同工酶 山梨醇脱氢酶 目录 目录 第一章前言l 1 1p f o s 对环境的污染及暴露水平2 1 2p f o s 对野生动物体内的暴露水平3 1 3p f o s 毒理学研究进展6 1 3 1p f o s 对陆生动物毒性效应的研究6 1 3 2p f o s 对水生动物毒性效应的研究8 1 4p f o s 对水生动物抗氧化物酶系统的影响1 1 第二章p f o s 急性暴露致剑尾鱼体内氧化应激反应的研究1 4 2 1 材料与方法。1 4 2 1 1 实验试剂1 4 2 1 2 实验仪器1 4 2 1 3 实验动物1 5 2 1 4 实验药品1 5 2 1 5 染毒浓度设计l5 2 1 6 样品酶液制备1 5 2 1 7 抗氧化物酶活性测定1 5 2 2 实验结果2 1 2 2 1p f o s 对剑尾鱼肝脏s o d 活性的影响2 1 2 2 2p f o s 对剑尾鱼肝脏c a t 活性的影响2 2 2 2 3p f o s 对剑尾鱼肝脏g s h p x 的影响2 3 2 2 4p f o s 对剑尾鱼肝脏m d a 的影响2 4 2 3 讨论2 5 2 3 1p f o s 浓度对剑尾鱼暴露期间死亡率的影响2 5 2 3 2p f o s 对剑尾鱼肝脏抗氧化物酶活性的影响2 6 2 4 结论2 9 第三章剑尾鱼c u z n - s o d 基因的克隆及p f o s 致肝脏应激基因m r n a 水平的 表达3 0 3 1 材料和方法3 1 目录 3 1 1 实验动物及用品3l 3 1 2 剑尾鱼肝脏总r n a 的提取3 2 3 1 3r n a 样品的完整性检测3 3 3 1 4 引物设计3 3 3 1 5 剑尾鱼肝脏c d n a 第一链的合成3 4 3 1 6c u ，z n s o d 核心片段的扩增3 4 3 1 7 半定量r t - p c r 3 9 3 1 8 数据分析3 9 3 2 实验结果3 9 3 2 1 剑尾鱼肝脏总r n a 提取质量一3 9 3 2 2c 以n s o d 基因的序列分析4 0 3 2 3p f o s 暴露下c u z n - s o dm r n a 在剑尾鱼肝脏中的表达一4 4 3 2 4p f o s 暴露下h s p 7 0 1 和h s p 7 0 2m r n a 在剑尾鱼肝脏中的表达4 5 3 2 5p f o s 暴露下g s tm r n a 在剑尾鱼肝脏中的表达4 6 3 3 讨j 沧4 8 3 4 结论5 3 参考文献5 4 致谢6 4 附勇乏a 6 5 第一章前言 第一章前言 2 0 世纪6 0 年代，美国3 m 公司将电化学氟化反应方法应用于全氟辛烷磺酰 基化合物( p e r f l u o r o o c t a n es u l f o n a t e 。p f o s ) 等全氟化合物( p e r f l u o r i n a t e d c o m p o u n d s ，p f c s ) 的生产以来，这类化合物就以优良的化学惰性和高稳定性被 广泛应用于民用和工业的各个领域，包括作为表面保护材料应用在地毯、皮革、 造纸和纺织领域，还可作为中间体生产地板上光剂、香波、农药、泡沫灭火剂 等领域( f l o r i se ta 1 ，2 0 0 2 ) 。随着大规模的工业生产和应用，全球范围内各种环境 介质，野生动物体内，甚至是人体中都被检测到p f o s 的存在。同时，通过对环 境、野生动物和人体监测发现p f o s 等全氟化合物具有难降解性、广泛分布性， 并能通过食物链传递而被生物积累的特性( e w a ne ta 1 ，2 0 0 6 ；n a k a t ae ta 1 ，2 0 0 6 ) 。 2 0 0 2 年1 2 月经济合作与发展组织( o e c d ) 将p f o s 定义为“持久存在于环境、 具有生物储蓄性并对人类有害的物质 。2 0 0 6 年底欧盟通过关于限制全氟辛 烷磺酸销售及使用的指令( 2 0 0 6 1 2 2 e c ) ，旨在限制使用、销售p f o s 。因此， p f o s 作为一类新型的持久性有机污染物，其环境行为，生态安全评价和毒性研 究将成为环境科学和毒理学领域的研究热点。 - 。 p f o s 是多种全氟化合物的重要前体及最终降解产物。p f o s 在常温常压下 为固态，由1 7 个氟原子和8 个碳原子组成的烃链( 图1 1 ) 。烃链末端连接一 个磺酰基。由于碳氟键是自然界中键能最大的共价键之一( 键能大约为4 6 0 k j m 0 1 ) ，这种特殊的化学特性使p f o s 能够经受强的加热、光照、化学作用、 微生物作用和动物的代谢作用而很难降解( n a k a t ae ta 1 ，2 0 0 6 ；j i ne ta 1 ，2 0 0 6 ) 。另 外，多氯联苯、有机氯农药和二噫英等持久性有机污染物通过蒸发、扩散等方 式造成全球性生态系统污染，而p f o s 几乎不具有挥发性，但已造成全球性污染。 科学家推测可能是一些具有挥发性的前体物质扩散到大气中，在向全球传播的 过程中或进入特定环境后发生降解最终生成p f o s 。 华南师范大学硕十学位论文 下面对国内外p f o s 的环境污染现状及毒性研究进展分别进行介绍。 图1 1 全氟辛烷磺酰基化合物的分子结构 f i g 1s t r u c t u r eo fp e r i l u o r o o c t a n es u l f o n a t e ( p f o s ) 1 1p f o s 对环境的污染及暴露水平 p f o s 长期以较低浓度存在于环境中，它们的普遍分布已经对全球生态系统 造成严重污染。随着检测技术的不断改进，检出限的不断降低，在越来越多的 环境介质中发现了p f o s 的存在。 水体是p f o s 进入自然界的主要介质。因此，p f o s 在水体中环境行为和污 染现状日益受到人们的关注。到目前为止，现有数据中水体p f o s 污染最严重的 是多伦多e t o b i c o k e 河，其浓度达到2 2 1 0 6 n g l ，造成p f o s 高浓度的原因是 由于该地区曾发生过泡沫灭火剂的泄露( m o o d ye t a l ，2 0 0 2 ) 。e w a n 等( 2 0 0 6 ) 对美 国纽约九个湖泊水样测定中发现，p f o s 浓度范围在1 6 5 5n g l d 之间，其中 奥内达加湖河水中p f o s 高达7 5 6n g l 一，这主要是由于该湖附近存在工业区， 大量工业污水排放造成的。t a k a g i 等( 2 0 0 8 ) 测定日本大阪自来水和未净化水中 p f o s 等全氟化合物浓度。未净化水样本中p f o s 浓度范围为0 2 6 2 2n g l 一。自 来水样本中p f o s 浓度范围为0 1 6 2 2n g l 。e r i c s o n 等( 2 0 0 8 ) 对西班牙卡塔卢 尼亚地区的饮用水( 包括自来水和瓶装水) 及河水中p f o s 等全氟化合物暴露水 平进行调查。该地区自来水中p f o s 浓度范围为0 3 9 - 0 8 7n g l ，瓶装水中未检 测到p f o s ，在河水样本中p f o s 浓度范围为 肾脏 脑 心脏 肌n ( o l i v e r o v e r b e le ta 1 ，2 0 0 8 ) 。l i 等( 2 0 0 8 ) 利用h c l c m s m s 技术检测哈尔滨野生动物园内孟加拉虎和非洲狮血 清中p f c s 含量。结果表明，p f o s 在所测定的p f c s 中含量最高，孟加拉虎血清 中p f o s 平均浓度为1 1 8n g m l 1 ，非洲狮中为2 6 9n g m l 1 。虽然两种虎血清p f o s 浓度存在差异，但是p f o s 浓度不会对其健康构成威胁。另外，该研究团队还利 用东北虎作为实验对象，来验证工业区和非工业区饲养的东北虎血清中p f c s 含 量是否存在差异。结果发现在工业区p f c s 含量明显高于非工业区。其中p f o s 含量随着虎龄的增加而增长。但是，我国东北虎体内的p f c s 含量要低于其他国 家，这可能与我国使用p f c s 年限短有关( l ie ta 1 ，2 0 0 8 ) 。y o o 等( 2 0 0 8 ) 对韩国 s h i h w a 湖周围的鸟类，包括白鹭、小环颈鹆和鹦鹉卵黄中的p f c s 进行了调查。 s h i w a 湖长期接纳来自附近工业区排放的污水。p f o s 平均含量在1 8 5 3 1 4n g g 以 w w ( 湿重) 。 相对于p f o s 在陆生动物体内暴露水平的调查，水生动物暴露水平方面的研 究报道较多。e w a n 等( 2 0 0 6 ) 对采自明尼苏达州密西西比河上游的3 0 个鲤鱼样本 中p f c s 浓度进行了测定。其中，位于圣克芬德市河水中鲤鱼体内p f o s 浓度的 中值为8 il a g g dw w ( 湿重) ，但在下游两处河水中p f o s 浓度显著上升，其中 值分别为2 6n g g dw w 和4 0n g g w w 。在哥伦比亚北部海域中胭脂鱼胆汁中也 发现p f o s 和其它全氟化合物的污染。测定结果表明，p f o s 存在于所有胭脂鱼 胆汁样品中。其中采自喀他赫那湾和t o t u m o 湿地的胭脂鱼胆汁样本中p f o s 平 均浓度分别为3 6 7 3n g l 以和713n g l 吐( o l i v e r o v e r b e le ta 1 ，2 0 0 8 ) 。h a r t 等( 2 0 0 8 ) 调查了太平洋沿岸及开放海域中金枪鱼肝脏中p f c s 浓度。采样区域包括日本海、 中国东海、印度洋及太平洋西北部。p f o s 是主要污染检出物之一，在金枪鱼肝 脏中浓度范围为 鲤鱼 鲶鱼 白鳞 罗非鱼，并且所测定的p f c s 中p f o s 浓度最高，其在血清中的浓度范围为5 7 4 6 4 2n g m l 一。除罗非鱼外，i n