（微生物与生化药学专业论文）复合诱变和原生质体融合选育s腺苷甲硫氨酸酿酒酵母高产菌株.pdf

娜删 学位论文数据集 中图分类号 q 9 3 3学科分类号 3 5 0 论文编号 1 0 0 1 0 2 0 1 1 1 2 6 6 密级公开 学位授予单位代码 1 0 0 l o 学位授予单位名称北京化工大学 作者姓名封晓霞学号 2 0 0 8 0 0 1 2 6 6 获学位专业名称微生物与生化药学获学位专业代码 1 0 0 7 0 5 课题来源自选研究方向微生物育种 论文题目 复合诱变和原生质体融合选育s 一腺苷甲硫氨酸酿酒酵母高产菌株 关键词s 一腺苷甲硫氨酸，酿酒酵母，复合诱变，原生质体融合 论文答辩日期 2 0 1 1 0 5 2 4宰论文类型 基础研究 学位论文评阅及答辩委员会情况 姓名职称工作单位学科专长 指导教师王雅琴副教授北京化工大学生物工程 评阅人1袁其朋教授北京化工大学生物化工 评阅人2张博润研究员中国科学院微生物研究所遗传育种 评阅人3 评阅人4 评阅人5 答辩委员会主席 袁其朋教授北京化工大学生物化工 答辩委员1阎爱侠 教授 北京化工大学计算机模拟 答辩委员2 乔仁忠 教授北京化工大学化学合成 答辩委员3喻长远教授北京化工大学中药提取 答辩委员4王文雅副教授北京化工大学生物化工 答辩委员5 注：一论文类型：1 基础研究2 应用研究3 开发研究4 其它 二中图分类号在中国图书资料分类法查询。 三学科分类号在中华人民共和国国家标准( g b t1 3 7 4 5 9 ) 学科分类与代码中 查询。 四论文编号由单位代码和年份及学号的后四位组成。 。 复合诱变和 s 腺苷蛋 转氨丙基、转 疾病，在国内 在我国还没有实现工业化生产。本文利用复合诱变和原生质体融合技术选 育s a m 的酿酒酵母菌株。主要工作如下： 1 比较了冻融法、乙醇提取法和高氯酸法对酿酒酵母细胞破碎提取 s a m 的不同效果，发现东融法和乙醇法对s a m 的稳定性有很大影响，容 易造成s a m 的损失，不利于s a m 的提取。高氯酸法细胞破碎效果最好， 释放的s a m 量最多，选为s a m 的提取方法。研究并建立了s a m 的分析 测定方法，选择精确而高效的h p l c 法进行测定，s a m 的保留时间在7 m i n 左右，每个样品约1 0 m i n 就可测定完毕。 2 对1 3 个出发菌株进行了生孢鉴定并测定了它们的生物量和s a m 产量，从中选择出s a m 产量高的出发菌株r 1 进行单倍体分离，得到6 0 株单倍体。对其中s a m 产量较高的单倍体h r l o 进行u v 和d e s 复合诱 变，在含有1 0 p g m l 制霉菌素的平板上进行筛选，最后获得4 株s a m 产 量有明显改善的菌株d r l 3 、n m l 4 、n m 3 9 、n m 4 5 ，与各自的出发菌株 相比s a m 产量分别提高了3 4 3 、l o 9 、1 4 1 、1 8 7 。 3 以d r l 3 、n m l 4 、n m 3 9 、4 5 为亲本，通过双亲灭活法进行 北京化工大学硕士学位论文 标记，运用p e g 诱导亲本的融合，在含有2 0 幽n l 制霉菌素的双层平板 上进行筛选，共得到9 0 个融合子，对它们的生物量及s a m 产量进行测 定，最后筛选到一株s a m 产量有明显提高的融合子f 3 5 ，其s a m 产量 为2 2 5 m l ，与出发菌株r 1 相比提高了1 0 3 ；s a m 含量为 1 9 7 m g d c w ，是出发菌株r l 的近2 倍，并且遗传稳定性实验表明其 f 3 5 的s a m 高产性状稳定。 4 优化了融合子f 3 5 发酵生产s a m 的培养基及发酵条件。结果表明， 以麦芽糖为碳源、蛋白胨为氮源，p h 为6 ，培养温度在3 0 时有利于f 3 5 的生长和s a m 的发酵生产。最后用正交实验寻求发酵培养基成分及发酵 时间的最优组合，确定各因素对s a m 发酵产量的影响大小顺序为：蛋白 胨 n h 4 c 1 麦芽糖 发酵时间 n h 4 h 2 p 0 4 ；优化的培养基配方为麦芽 糖1 0 ，蛋白胨1 ，n h 4 h 2 p 0 4o 4 ，n h 4 c 1o 5 ，m g s 0 4o o l 、k h 2 p 0 4 o 6 ；发酵时间为7 2 h 。 关键词：s 腺苷甲硫氨酸；酿酒酵母；复合诱变；原生质体融合 u a b s t r a c t b r e e d i n go f 鲥c c ：日彳r d m y c e sc e 足e 纥s 纠ew i t h h i g h e ry i e l ds a d e n o s y l l m e t h i o n i n eb y c o m p o s i t em u t a g e n e s i sa n dp r o t o p l a s tf u s i o n a b s t r a c t s - a d e n o s y l l - m e t h i o n i n e ( s a m ) i sa 虹n do fi n t r a c e l l u l a rp h y s i o l o g i c a l a c t i v a t o r ， i th a sm a n yp h y s i o l o 百c a l如c t i o n ss u c ha st m s m e t h y l a t i o n ， t r a n s a m i n o p r o p y l a t i o n a n dt r a n s s u l f e n y l a t i o n d o m e s t i ca n di n t e m a t i o n a l m a r k e t sn e e di n u c hm o r es a mb e c a u s es a mc a np r e v e n ta n dc u r ea 吡r i t i s ， d e s p r e s s i o n a n dl i v e rd i s e a s e h o w e v e r ， s a mc a nn o tb e p r o d u c e d i n d u s t r i a l l yi no u rc o u n t 巧d u et os t r a i np r o b l e ma n di n u n a t u r et e c l u l o l o g y t h i se x p e r i m e n ta i m st oi m p r o v et h e 如e l do fs a m 行o ms c p 例括施pw i t h c o m p o s i t em u t a g e n e s i s a n dt h et e c h n i q u eo fp r o t o p l a s t如s i o n m 旬o r a c h i e v e m e n t sl i s ta sf o u o w s ： 1 t h e 骶e z et h a w i n g ，e t h a n o la n dp e r c h l o r i cm e t h o dh a dd i 仃e r e n t e f r e c t st oe x t r a c ts a mb yc e nd i s c r u p t i o n t h e 丘e e z et h a w i n ga n de t h a n o l m e t h o di n n u e n c e dt h es t a b i l i t yo fs a ms e r i o u s l ya n dm a d em u c hl o s so f s a m ，s ot h e yw e r en o tb e t t e rw a y st o e x t r a c ts a m t h er e s u l to fc e n d i s c m p t i o nb yp e r c h l o r i cm e t h o dw a st h eb e s t ，i tc o u l d 角e e dm o s tq u a n t i 妙o f s a ma n db es e l e c t e dt oe x t r a c ts a m 1 1 1t h es t u d yo fs a ma n a l y t i c a lm e t h o d s ， h p l ct oa n a l y s es a mw a sa c c u r a t ea n dh i 曲一e f j i c i e n c mt h er e t e n t i o nt i m e i i l 北京化工大学硕士学位论文 w a sa b o u t7 t h 觚n u t e ，o n es a m s a i n p l ec a nb ed e t e m i n e di n1om i n u t e s 2 t h i r t e e ns t a r t i n gs t r a i n sw e r ei d e n t i f i e dt os t u d yw h e t h e rm e y c a nb e a r s p o r e ，t h e i rb i o m a s sa n d 如e l do fs a mw e r ed e t e m i n e d ，t o o t h e ns e p a r a t e d h a p l o i df 如mt h es t r a i nn a m e dr lw i t hg o o dg r o w c hc o n d i t i o na n d h i g hy i e l d o fs a m ，6 0h a p l o i d sw e r eo b t a i n e d a p p l i e dc o m p o s i t e 瑚l u t a g e n e s i so fu v a n dd e st ot r e a t 胀l ow h i c hh a dh i g h e r 姐e l do fs a m ，4s t r a i n sn 锄e d d r l 3 ，n m l 4 ，n m 3 9 ，n m 4 5w e r es c r e e n e di ns o l i dm e d i u mc o n t a i n i n g 1o 肛m lo fi q ，s t a t i n i nc o i l l p a r i s o nw i mt h a to ft h e i ro w n s t a n i n gs t r a i n s ， t h e 姐e l do f s a mi n c r e a s e db y3 4 3 ，1 0 9 ，1 4 1 ，1 8 7 r e s p e c t i v e l y 3 t h ep a r e n t a ls t r a i l l sd r l 一3 、n m l 4 、n m 3 9 、n m 4 5w e r es i g n e dw i t h p a r e n t - i n a c t i v a t i o n ，t h e nt h e i rp r o t o p l a s t sr e a l i z e d 如s i o nu n d e rt h ei n d u c t i o n o fp e ga n d9 0f h s a n t sw e r eo b t a i n e di ns o l i dm e d i u mc o m a i n i n g2 0 p 舢o f n y s t a t i n ，a r e rd e t e r m i n i n gt h e i rb i o m a s sa n ds a mc o n t e n t ，a 向s a n tc a l l e d f 35w i t hi m p r o v e dy i e l do fs a mw e r es e l e c t e d t h e y i e l do fs a mp r o d u c e d b yf 3 5r e a c h e d2 2 5 m g l ，w h i c hw a si n c r e a s e db y10 3 i nc o m p a r i s o nw i t h t h a to ft h es t a n i n gs t r a i nr1 s a mc o n t e n ti nd 巧c e l lw a s1 9 7 m g d c w ： w h i c hw a st w i c ea si i m c ha st h a to fr1 t h es u b c u l t u r ee x p e r i m e n t si n d i c a t e d t h a tt h e h e r e d i t a 巧c h a r a c t e ro fh i g hp r o d u c i n gw a ss t a b l e 4 s i n g l ef a c t o re x p e r i m e n t sw e r ed o n et oo p t i l n i z et h em e d i u ma n d c o n d i t i o n so ff e r m e n t a t i o nf o rf 35p r o d u c i n gs a m t h er e s u l t ss h o w e dt h e o p t i m a l 诧r m e n t a t i o nc o n d i t i o n sw e r e ：m a l t o s ef o rc a r b o ns o u r c e ，p 印t o n ef o r n i t r o g e ns o u r c e ，p h6 ，c u l t u r et e m p e r a t l l r ef o r3 0 i h e nt h ec o m p 盎e n t so f o 5 o fm 臣c l ，o o1 o fm g s 0 4 ，o 6 o fk h 2 p 0 4 ，a 1 1 d7 2 ho ff e m e n t a t i o n t i m ew a ss u i t a b l ef o rs a mp r o d u c t i o nb yf 3 5 k e y w o r d s ： s a d e n o s y l 一l - m e t h i o n i n e ， s c 甜州s 缸2 ， c o m p o s i t e m u t a g e n e s i s ，p r o t o p l a s t 向s i o n v 北京化- t 大学硕士学位论文 目录 目录 第一章绪论1 1 1s a m 简介l 1 1 1s a m 的性质、生理功能及临床应用l 1 1 2s a m 的市场分析及应用前景3 1 2s a m 的制备方法3 1 2 1 化学合成法4 1 2 2 酶催化合成法4 1 2 3 微生物发酵法5 1 3s a m 的稳定性研究8 1 4s a m 发酵生产的代谢途径分析9 1 4 1 腺苷甲硫氨酸合成酶的调控9 1 4 2 胱硫醚b 一合成酶的调控9 1 4 3 甲叉四氢叶酸还原酶的调控9 1 4 4 一2 4 一固醇一c 一转甲基酶的调控1 0 1 5s a m 的分析测定1 0 1 5 1s a m 的提取1 0 1 5 2s a m 的测定方法1 1 1 6 论文立题背景及主要研究内容1 1 第二章s 州含量测定方法的研究1 3 2 1 实验材料1 3 2 1 1 菌株1 3 2 1 2 培养基1 3 2 2 实验方法1 3 2 2 1 发酵培养1 3 2 2 2 细胞破碎1 3 2 2 3s a m 含量测定方法1 4 2 3 结果与讨论1 5 2 3 1 细胞破碎方法的比较i 1 5 i 北京化工大学硕士学位论文 2 3 2s a m 含量测定方法的建立1 6 2 4 小结1 7 第三章单倍体分离和复合诱变1 9 3 1 实验材料1 9 3 1 1 菌株1 9 3 1 2 培养基及溶液1 9 3 2 实验方法2 0 3 2 1 生孢鉴定实验2 0 3 2 2 单倍体分离2 0 3 2 3u v 和d e s 复合诱变2 1 3 3 结果与讨论2 2 3 3 1 出发菌株的生孢鉴定2 2 3 3 2r 1 的单倍体分离2 3 3 3 3 单倍体h r l 0 的复合诱变2 5 3 4 小结2 7 第四章酿酒酵母细胞原生质体融合2 9 4 1 实验材料 4 1 1 菌株 4 1 2 培养基及溶液 4 2 实验方法 4 2 1 原生质体融合 4 2 2 融合子s a m 产量遗传稳定性研究 4 3 结果与讨论 4 3 1 原生质体融合条件的研究 4 3 2 原生质体融合结果 4 3 3 融合子f 3 5 遗传稳定性研究 4 4 小结 第五章融合子f 3 5 发酵条件优化3 9 5 1 实验材料3 9 v i l i 9 9 9 0 o 2 2 2 5 6 7 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 3 目录 5 1 1 菌株3 9 5 1 2 培养基3 9 5 2 实验方法3 9 5 2 1 活化培养3 9 5 2 2 发酵培养3 9 5 2 3 生物量及s a m 含量的测定3 9 5 2 4 碳源的优化4 0 5 2 5 氮源的优化4 0 5 2 6 培养温度的影响4 0 5 2 7p h 的优化4 0 5 2 8 正交实验设计4 0 5 3 结果与讨论4 l 5 3 1 碳源的优化4 1 5 3 2 氮源的优化4 1 5 3 3 温度对融合子f 3 5 生产s a m 的影响4 2 5 3 4p h 的优化4 2 5 3 5f 3 5 发酵培养基主要成分的正交试验设计4 3 5 4 小结4 4 第六章结论4 7 参考文献4 9 附录5 3 致谢6 l 作者和导师简介6 3 北京化工大学硕士学位论文 x c o n t e n t s co n t e n t s c h a p t e r li n t i o d u c t i o n 1 1 1s i m p l yi i l 们d u c t i o no fs a m l 1 1 1c h a r a c t e r ，p h y s i o l o 百c a l 矗m c t i o na n dc l i l l i c a la p p l i c a t i o no fs a m 1 1 1 2m 砌( c ta i l a l y s i sa n dp e r s p e c t i v eo fs 舢。3 1 2p n 印a r a t i o nn l e t l l o d so fs a l 订。3 1 2 1c h e m i c a ls ) 砒e s i s 4 1 2 2e m 【y m ec 删y s i s s y n t l l e s i s 4 1 2 3m i c l o o 理a 1 1 i s mf 锄e n t a t i o n 5 1 3s t a b i l i t vo f s a m 8 1 4m e t a ：b o l i cp a n l w a yo fs amf e 眦饥t a t i o n 9 1 4 1r e g u l a t i o no fs a m s y n a s e 9 1 4 2r e g u l a t i o no 邛- c y s t a n l i o i l i n es y n 嬲e 9 1 4 3c o n t r o l0 fm e t l l v l e l l et e m l l l v d r o f 0 1 i ca c i dr e d u c t a u s e 9 1 4 4c o n t r o lo f 2 4 s t e r 0 1 c m e t h v l f 醯a u s e 1o 1 5a s s a vd e t e r i n i n a t i o no fs a ! 1o 1 5 1e x 仃a c t i o no fs a m 10 1 5 2d e t e n l l i n a t i o no fs a m 1 1 1 6b ac _ k 田o u n da n dm a i nr e s e a r c hc o n t e l l t so f “sw o f k 11 c h a p t e r 2s t u d ym e t h o d so fd e t e r m i n i n gs a m 。l3 2 1m a t 甜a l l s 13 2 1 1s t r a i n s 13 2 1 2c u l t u r em e d i u m 13 2 2l e m o d s 1 3 2 2 1fe r r n e n t a t i o n 13 2 2 2c e l ld i s 唧t i o n l3 2 2 3e i e t e n n i n a t i o no fs a mc o n t e n t 1 4 2 3r e g u l t sa n dd i s c u s s i o n 15 2 3 1c o m p a r i s o no f d i f l e r e l l tc e ud i s c l l 】p t i o nm e t l l o d s 1 5 x i 北京化工大学硕士学位论文 2 3 2e s t a b l i s h m c i l to f s a md e t e n n i n a t i o nm e m o d 1 6 2 4c h a p t c r 跚【n m l a r y l7 c h a p t e r3h a p l o i ds e p a r a t i o na n dc o m p o s i t em u t a g e n e s i s 1 9 3 1 i a t 谢2 l l s 。1 9 3 1 1s 砌n s 1 9 3 1 2c u l t i 】r em e d i 啪a 1 1 ds o l u t i o n 1 9 3 2l 订e t h o d s 2 0 3 2 1 i d e n t i f i c a t i o no fs p o r eb e a 血g 。2 0 3 2 2h a p l o i ds 印a r a t i o n 2 0 3 2 3c o m p o s i t ei n l l t a g e n e s i so f u v 锄dd e s 2 1 3 3r e s m l t sa n dd i s c u s s i o n 2 2 3 3 1s p o 伦b e 撕n gi d e l l t i f i c a t i o no f s t 砷i i l gs 缸n s 2 2 3 3 2s 印a r 撕o no f r lh a p l o i d 。2 3 3 3 3c o m p o s i t em u t a g e n e s i so f 瓜1 0 。2 5 3 4c h a p t e r 驯l m m 孤y 2 7 c h a p t e r4p r o t o p l a s tf u s i o no f & 化m 心缸pc e l l 2 9 4 1m a “斑a l s 。2 9 4 1 1s 慨i l s 2 9 4 1 2c u l t u r em e d i 啪a n ds o l u t i o n 2 9 4 2i 订e m o d s 3 0 4 2 1p r o t o p l a l s tm s i o n 3 0 4 2 2g e n e t i cs t a b i l i 够o f 缸a n ti ns mo u t p u t 3 2 4 3r e s u l t sa i l dd i s c u s s i o n 3 2 4 3 1c o n d i t i o n a ls t u d yo f p r o t o p l a s t 如s i o n 3 2 4 3 2r e s u l t so f p r o t o p l 弱tf i l s i o n 3 5 4 3 3g 肌e t i cs t a b i l i t ) ro f f 3 5 3 6 4 4c h a p t e r 鲫i i i m l a i ) ，3 7 c h a p t e r5o p t i m i z i n gf e r m e n t a t i o nc o n d i t i o n so ff 3 5 3 9 5 1m a t e r i a l s 3 9 i 竺q 型堡垒! 兰 一 _ - _ - - _ - - _ _ - - _ _ - _ _ _ _ - - - _ - 一一一 5 1 1s 打a i n s 3 9 5 1 2c u l t u r em e d i 啪3 9 5 2m e t h o d s 3 9 5 2 1 a c t i v a t ec u l t u r e 3 9 5 2 2f e n i l 髓t a t i o n 3 9 5 2 3d 酏e m l i n a t i o no f b i o m a s sa r l ds a mc 0 n t e n t 3 9 5 2 4o p t i i i l i z a t i o no fc a r b o ns o u r c e 4 0 5 2 5o p 血i z 撕o no f l l i 缸o g e i ls o u r c e 4 0 5 2 6 ( ) p t i m i z 撕o no f 叫t i l r ct e n 叩e r 砷肛e ：”4 0 5 2 7o p t i i i l i z 撕o no f p h 4 0 5 2 8o m l o g o n a ld e s i 印4 0 5 3r e s u l t sa n dd i s c u s s i o n 4 l 5 3 1s e l e c t i o no fc a f b o ns o 愀4 1 5 3 2s e l e c t i o no f i l i 仃o g e ns o u r c e 4 1 5 3 3e 脏c to f t e i 】叩e r 砷j r eo nf h s a n tf 3 5p r o d u c i n gs a m ”4 2 5 3 4s e l e c t i o no f p h 4 2 5 3 5o m l o g o n a ld e s i 印o f b 硒i s m p o n e n t si nf 3 5 胁e n 枷o n m e d i u m 4 3 5 4c h a p t e rs 硼【l i l l a 巧4 4 c h a p t e r 6c o n c l u s i o n 4 7 r e f b r e n c e s 4 9 a p p e n d i x 5 3 a c k n o w l e d g e m e n t s 6 l b r i e fi n t r o d u c t i o no fa u t h o ra n dt u t o r 6 3 北京化工大学硕士学位论文 x 符号说明 s a m k 踺 s h a m e t p e g u v d e s p b s s c e e v i s i n e d c w h p l c 耶i m e d t a n a 2 符号说明 s 腺苷甲硫氨酸，s a d e n o s y l - l m e t h i o i l i n e 三磷酸腺苷，a d e l l o s i n e 嘶p h o s p h a t e 腺苷高半胱氨酸，s a d e i l o s y l - l - h o m o c y s t e i l l e 甲硫氨酸，m e “o n i l l e 聚乙二醇，p o l y e m y l e i l e 西y c 0 1 紫外线，u l t r a v i o l e t 硫酸二乙酯，d i e m y ls u l f a t e 磷酸缓冲液p h o s p h a t eb u 妇衙s 0 1 u t i o n 酿酒酵母菌，勋c c 以，d 彬y 五皤卯例西缸p 细胞干重，d 巧c e l lw e j 班 高效液相色谱h i 曲p e 晌咖a i l c e “q u i dc l d m a t o 伊a p h y 转每分钟，r e v o l u t i o n sp e rm i n u t e 乙二胺四乙酸二钠，e m y l e i l ed i a 皿n et e 仃砚c e t i ca d ds o d i 啪s a l t 北京化工大学硕士学位论文 第一章绪论 1 1s a m 简介 第一章绪论 1 1 1s a m 的性质、生理功能及临床应用 s 腺苷甲硫氨酸( 又称s 腺苷蛋氨酸，s - a d e i l o s y l l m e m i o l l i n e ，简称s a m ) 是 一种生物体内能改善细胞代谢的生理活性物质，其化学结构如图1 1 。1 9 5 2 年，s a m 首先由c a i l t o n i 【1 1 发现，在腺苷甲硫氨酸合成酶作用下消耗a t p ，催化【广甲硫氨酸合 成，其生物体内的代谢途径如图1 2 。 h ： v o n h 2 舡5 i n h 2 图1 1s a m 的化学结构 f i g 1 一lc h 锄i c a ls 缸1 l c t l l i eo fs 朋 璺m z ：要“自l 慷舟曩 二 | 亚糟驻i 、 甲善硗t 毛臻蕾 图1 2s m 代谢途径示意图 f i g 1 - 2m e t a b o l i cp a m w a yo fs a m s a m 无论是在原核细胞还是在真核细胞内，都是极为重要的中间代谢物质，参 与众多生理生化反应【2 1 。首先，s a m 作为最重要的甲基供体在细胞内大多数的甲基化 反应中起着不可替代的作用。在许多生物细胞中都存在s a m 转甲基酶，这些酶专一 性地将甲基转移到s 、n 、c 、o 等原子上参与体内的生理生化反应。例如：在肌氨酸 的生物合成过程中，s a m 在转甲基酶的作用下将甲基提供给氨基乙酸；在卵磷脂的 髓垮甲l，愀兰裂漱 面 卜一毽 髫 讣 北京化工大学硕士学位论文 形成过程中，转甲基酶将s 舢的甲基转移给磷脂酰乙醇胺；去甲肾上腺素获得s 。蝴 提供的甲基生成肾上腺素发挥生理功能。每个细胞内都有催化专一甲基化反应的 s a m 转甲基酶，它们催化甲基化反应的产物都是腺苷高半胱氨酸( s a h ) 【3 1 。并且， 在蛋白质功能的修复过程中，将蛋白质的羧基甲基化是必不可少的，这个甲基化反应 的甲基就来自于s a m ，特别是在中枢神经系中这种反应更普遍【4 】。除了转甲基功能外， 硫基和氨丙基转移作用也是s a m 的重要生理功能。s a h 的水解产物高半胱氨酸有两 种代谢途径，一种是再次被甲基化生成s a m 的前体甲硫氨酸，进而合成s a m ，这个 过程的甲基由甲基四氢叶酸( t h f a ) 提供；另一种途径就是转硫基作用，通过转硫 反应和一些水解反应后最终的产物是谷胱甘肽( g s h ) ，而g s h 能够解毒、抗氧化， 还能减缓细胞的衰老进程。高半胱氨酸的两种代谢方式并不是同等程度地进行，而是 受到细胞内底物浓度、效应器代谢物以及一些酶的精细调节【5 卅。多胺的合成是s a m 的另一个重要代谢途径，该过程就是通过转移s a m 的氨丙基来实现的，反应同时生 成甲基硫代腺苷。甲基硫代腺苷是腺苷高半胱氨酸水解酶的抑制剂【7 1 ，反应后可以生 成蛋氨酸，这个途径既可以快速地补充细胞内甲硫氨酸的浓度，又能解除对腺苷高半 胱氨酸水解酶的抑制作用【8 】。 因为s a m 有上述重要的生理功能，所以当人体内某项功能不能正常发挥时，s 川 就可以预防和治疗这些疾病。生物细胞的必需氨基酸甲硫氨酸只有在被激活形成 s a m 时才能发挥某些关键的生理功能。在机体病理状态下，激活功能难以进行，此 时单单补充蛋氨酸是无法起到恢复作用的，必须摄入激活状态的甲硫氨酸即s a m 才 能发挥正常代谢作用。所以，s a m 有很高的临床应用价值。人体中s a m 主要由肝脏 细胞合成，它是肝脏内生物反应的重要甲基供体【9 】。肝脏是s a m 发挥生理功能的主 要器官，其解毒功能就与s a m 转硫基代谢产生的g s h 有密切联系。当体内肝脏受损 时，s a m 合成酶的能力下降，s a m 合成量减少，蛋氨酸积累，使许多代谢反应无法 进行，导致机体产生病理变化。外源补充s a m 可以使肝脏代谢由于s a m 合成酶功 能的恢复和自身合成s a m 能力的提高而正常进行，加快患者肝脏功能的恢复进程。 目前，s a m 已经被临床应用于肝硬化、慢性肝炎等肝病的治疗，还能有效地预防肝 癌的发生，对由酒精、化学药物和癌症化疗引起的肝脏受损也有一定的改善作用。 此外，s