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摘要 微生物气溶胶与空气污染、环境质量以及人们的健康状况密切相关。垃圾卫生填埋场在运行 过程中会产生微生物气溶胶,对周边的大气环境有着重要的影响。本研究在国家自然科学基金项 目“城市生活垃圾堆填区大气环境生物源性污染特性的研究”的资助下,在北京市六里屯垃圾卫 生填埋场填埋区、渗滤液处理区、生活区分别选定1 个监测点,利用安德森六级微生物采样器, 通过系统地定点取样,研究了垃圾卫生填埋场空气微生物的群落结构、浓度和粒径分布及动态变 化特征,研究结果表明: 垃圾填埋场填埋区空气细菌革兰氏阳性菌明显多于革兰氏阴性菌。垃圾填埋场三个功能区共 出现了1 4 属空气真菌,优势菌属依次为枝孢属、曲霉属、青霉属,无孢菌群,交链孢属和尾孢 菌。其中,曲霉属含量远高于普通城市环境。 垃圾卫生填埋场空气微生物浓度填埋区 渗滤液处理区 生活区。填埋区和生活区空气微生物 总数有显著性差异。填埋区不同时段空气微生物浓度不相同。但从全年平均来看,空气微生物上 午和下午都没有显著性差异( t 8 2 t j m ) 最高,空气真菌分布主要集中在i v 级 ( 1 0 6 0 9 r n ) ,空气放线菌粒径分布高峰在第级( 2 o 3 0 9 m ) 。不同功能区空气微生物粒子 的中值直径不同填埋区和生活区空气细菌的中值直径约为5 5 t t m ,空气真菌和空气放线菌粒子 的中值直径约为3 0 9 m 。空气细菌的中值直径显著大于空气真菌和空气放线菌粒子的中值直径。 环境温度为2 0 左右空气微生物含量较高。空气环境中湿度对空气微生物浓度的影响不明 显。空气细菌含量与t s p 浓度呈极显著相关;总的空气微生物含量与t s p 浓度呈显著相关。空 气细菌含量与p m i o 浓度呈极显著相关。 关键诃:垃圾填埋场,空气微生物,浓度分布,粒径分布 a b s t r a c t a i r b o r n em i c r o b e sh a v ec l o s e dr e l a t i o n s h i pw i t ha i rp o l l u t i o n , e n v i r o n m e n t a lq u a l i t ya n d p u b l i ch e a l t h m i c r o b i a la e r o s o lh a sb e e np r o d u c e dd u r i n gt h eo p e r a t i o no f m u n i c i p a ll a n d f i l l ,a n d i th a ss i g n i f i c a n ti m p a c to na t m o s p h e r i ce n v i r o n m e n to fa l la r o u n d t h ew o r kw a ss u p p o r t e db y t h en a t i o n a ln a t u r a ls c i e n c ef o u n d a t i o no fc h i n a s t u d ys i t ew a sa to n es a n i t a r yl a n d f i l l ,t a k i n g m o s t l ym u n i c i p a lw a s t e s ,i nb e i j i n g a i r b o r n em i c r o b e sw e r ec o l l e c t e db ya n d e r s e ns i xs t a g e s s a m p l e r t h es t u d yo nt h ec o m m u n i t ys t r u c t u r e c o n c e n t r a t i o na n dp a r t i c l ed i s t r i b u t i o na n d d y n a m i c so fa i r b o r n em i c r o b e sw e r ec a r r i e do u ti nd e t a i la tl a n d f i l ls i t eb ya n n u ls a m p l i n g t h e r e s e a r c hr e s u l t ss h o w e da sf o l l o w i n g : g r a m - p o s i t i v eb a c t e r i ao f a i r b o r n eb a c t e r i aw e r ed i s t i n c t l ym o r et h a ng r a m - n e g a t i v eb a c t e r i a f o u r t e e ng e n e r ao fc u l t u r a b l ef i l n 西w e r ei d e n t i f i e di nt h i ss t u d y t h ed o m i n a n tf u n g iw e r e c l n d p 0 r i t n t ,a s p e r g i l l u s , p e n i c i l b u m ,n o n s p o r i n g 。a l t e r n a r i aa n dc e r o s p o r a t h ep r o p o r t i o no f a s p e r g i l l u sw a sh i g h e rt h a nu r b a ne c o s y s t e m c o n c e n t r a t i o no f a i r b o r n em i c r o b e si nl i v i n ga r e aw a ss i g n i f i c a n t l yl o w e rt h a ni nt h el a n d f i l l 铷c “t h e r ea l s oe x i s t e dg r e a td i f f e r e n c e so f a i r b o r n em i c r o b e s c o n c e n t r a t i o ni nd i f f e r e n ts a m p l i n g t i m e b u tt h e r el i dg r e a td i f f e r e n c e sb e t w e e na m a n dp m i nay e a r , t h eh i g h e rc o n c e n t r a t i o n so f b a c t e r i aw e r e c o r d e di na u t u m na n dl o w e ri nw i n t e r , a i r b o r n eb a c t e r i ai nt h r e ef u n c t i o n a la r e a sw e r em o s t l yd i s t r i b u t e di ns t a g eip 8 2 w n ) t h e h i g h e s tp r o p o r t i o n so fa i r b o r n ef u n g ip r e s e n t e di ns t a g ei i i v ( 1 0 6 o r t m ) a i r b o r n e a e t i n o m y c e t ew e r em a i n l yd i s t r i b u t e di ns t a g ev i ( 2 o 3 0 岬) t h e r ee x i s t e dd i f f e r e n c e so f a i r b o r n em i c r o b e sc m d ( c o u n t e dm e d i a nd i a m e t e r ) i nd i f f e r e n tf u n c t i o n a la r e a s a i r b o r n eb a c t e r i a w a sr e c o r d e dw i t h5 5 p ma p p r o x i m a t e l yi nl a n d f i l la r e aa n dl i v i n ga r e a , a n d4 0 r u ni nl e a c h a t e t r e a t m e n ta l e a a i r b o r n ef u n g ia n da c t i n o m y c e t ei nt h r e ef u n c t i o n a la r e a sw e r er e c o r d e dw i t h 3 0 ) u n t h ec m do fa i r b o m eb a c t e r i aw a ss i g n i f i c a n tl o n g e rt h a nt h a to fa i r b o m ef u n g ia n d a c t i n o m y c e t e c o n c e n t r a t i o no f a i r b o r n ew a sh i g h e rw h e ne n v i r o n m e n t a lt e m p e r a t u r ew a sa b o u t2 0 ,b u t h u m i d i t yh a du n c o n s p i c u o u si n f l u e n c et oi t c o r r e l a t i o no fa i r b o r n eb a c t e r i ac o n t e n ta n dt s p f r o ms u s p e n d e dp a r t i c l e ) w a ss i g n i f i c a n ta lt h eo o ll e v e l w e l l 鸹a i r b o r n eb a c t e r i ac o n t e n t a n dp m i o ( i n h a l a b l ep a r t i c l em a t t e r ) c o r r e l a t i o no f a i r b o r n em i c r o b e sa n dt s pw s i g n i f i c a n ta t t h e0 0 5l e v e l k e yw o r d s :l a n d f i l ls i t e ,a i r b o r n em i c r o b e s ,c o n c e n t r a t i o nd i s t r i b u t i o n ,p a r t i c l es i z ed i s t r i b u t i o n 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书 而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明 确的说明并表示了谢意。 研究生签名 纭埔 时间:阳7 年名月f j ,日 关于论文使用授权的说明 本人完全了解中国农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留 送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复 制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、 传播学位论文的全部或部分内容。 ( 保密的学位论文在解密后应遵守此协议) 研究生签名:狠惰 翩虢霭k v 时间:了钾7年石月出日 时间:0 司年莎月岱f 1 中国农业大学硕士学位论文 第一章研究背景 第一章研究背景 微生物在自然界的分布极为广泛。可谓。无处不在,无时不有”无论是在8 5 k m 的高空还是 在l l k m 的海底或在1 2 k i n 的土层深处均可以发现微生物的踪迹。每克土壤中含菌可达1 0 0 亿, 每克海水中有8 7 0 1 2 0 0 个,即使是在没有微生物生长条件的空气中,每立方米也有成千上万( 沈 德中,2 0 0 3 ;r a i n am m a i e r ,2 0 0 0 ) 空气中没有微生物生活必须的介质,不是微生物生存的理想环境,但是空气微生物中的一些 病原菌,能够在空气中进行繁殖,并且能够向周围的环境中扩散,导致人类过敏反应,对免疫力 低下的人群造成严重的健康威胁( c h a n g c 2 0 0 1 ) 空气中的微生物分布很不均匀,人口稠密的地区上空微生物数量较多空气中微生物浓度过 高,会增加人们的呼吸道感染,哮喘气喘、皮肤过敏、慢性肺部疾病和心血管疾病等的发病几率 同时空气中大量存在的植物病原真菌能导致城市绿化植物和观赏植物产生病害,而且空气微生物 还能够腐蚀用于建设的金属材料及用于科研生产的精密仪器,造成重大的经济损失。空气中广泛 分布的真菌孢子与城市空气污染、城市环境质量和人体健康密切相关( w upc ,2 0 0 0 ) 。现代流 行病学研究表明,真菌粒子,尤其是真菌小粒子能够引起真菌性疾病,甚至造成死亡空气中真 菌孢子浓度和数量的增加,能够降低人的肺功能,增加感冒、呼吸急促、哮喘等呼吸性疾病和慢 性肺部疾病,心血管疾病和肺癌等患病的几率( h a r g r e a v e sm ,2 0 0 3 ) 。居民各种呼吸系统疾病的 危胁因素有空气微生物、吸烟、年龄等,其中,空气微生物污染是首要的危险因素( 阚海东,1 9 9 9 ) 空气中真菌孢子浓度的增加,能降低人的肺功能,增加感冒、呼吸急促、哮喘等呼吸性疾病和慢 性肺部疾病的患病几率( l e ej ,2 0 0 5 ) 2 0 0 3 年非典型肺炎和2 0 0 4 、2 0 0 5 连续两年流行的禽流感也是这方面的实例。摸清特定区域 和环境的空气微生物状况及变动规律具有很重要的现实意义 1 1 空气微生物的来源 空气中没有固有的微生物群系,一般情况下,空气中缺乏微生物生长繁殖所需要的营养物质 和水分、温度变化幅度大,紫外线的照射对微生物也有致死作用,这些特点决定了空气不是微生 物生长繁殖的良好场所。但是,空气中仍然会含有相当数量的微生物,土壤、水体、各种腐烂的 有机物以及人和动物,植物体上的微生物,都可随气流的运动被携带到空气中另外人和动物呼 吸道中所含的微生物通过咳嗽、打喷嚏等方式也可以进入空气中。人在每次咳嗽或打喷嚏可排放 达1 0 4 1 旷个带菌粒子 此外污水处理、动植物饲养、发酵过程和农业活动等也是空气微生物的重要来源( o u t i t o l v a n c n ,2 0 0 5 :z 0 6 ap r a z m o ,2 0 0 3 :f r a n zf ,1 9 9 7 ;s u r e s hd p i l l a i ,2 0 0 2 ) 近年来,由于废 水农业利用,垃圾综合处理等发展,增加了空气微生物的污染。微生物在空气中存活的能力较差, 但是与尘埃,液滴等固液体颗粒附着形成胶体颗粒后存活能力增强( 于玺华) 微生物附着在固 液颗粒上进入空气中形成微生物气溶胶( m i c r o b i o l o g i c a l a e r o s 0 1 ) 。微生物气溶胶的每个气溶胶粒 1 中国农业大学硕士学位论文第一章研究背景 子所含的细菌数可达2 4 个或更多( 陈宁庆,1 9 8 9 ) 1 2 微生物气溶胶的危害 微生物气溶胶对生物圈生态平衡的作用目前研究的不多,许多问题正在探讨但是其广泛的 分布可造成环境污染及某些传染病和其他疾病的爆发流行 1 2 1 微生物气溶胶对人体的影响 微生物气溶胶对人类的生命健康有极大影响,全球因空气微生物引起的呼吸道感染率达 2 0 微生物气溶胶可以通过粘膜、皮肤损伤、潞化道及呼吸道侵入机体,主要是经呼吸道传播。 有些微生物气溶胶可引起中毒、呼吸道传染病、变态反应及其他慢性呼吸道疾病,如流感、肺结 核,白喉,麻疹,哮喘、风疹等。有的人畜共患病如曲霉病、球孢子菌病、炭疽、0 热等也可通 过空气由动物传给人( 于玺华,2 0 0 2 ) 微生物气溶胶粒子的直径在4 5 l m 的可以通过上呼吸道,到达支气管粘膜。当微生物的数 量达到足以引起消化道感染的菌量时,则消化道传染病( 如霍乱) 就也可以通过微生物气溶胶经 空气传播了消化道传染病的菌通过胃部,胃酸对有的菌起不到杀菌作用,此时空气传播就将成 为可能了在l 5 z m 的微生物气溶胶粒子中,大部分可直接到达肺泡,有的可造成初发感染, 即可构成呼吸道感染,形成肺部感染灶 一般情况下,每人每天吸入约5 q u g 的生物性粒子,其中有些可引起中毒、呼吸道传染病、 变态反应及其它慢性呼吸道疾病。大家所熟悉的流感、肺结核、白喉、麻疹、哮喘等均是此种情 形大量资料证明,微生物空气污染可使肝炎,痢疾,流感和一些过敏性疾病发病率增加。还有 许多人畜共患病如曲霉病、球孢子菌病、q 热等也可通过气溶胶由动物传播给人( 于玺华,2 0 0 2 ) h y r i j a l a 等报道了5 3 例农工吸入兔热杆菌感染的病例,其中7 2 有呼吸道症状,2 6 例肺门 淋巴结肿大病人吸入感染的气溶胶主要来源于打谷,铡草( 干和湿) 等活动。此外有些致病微 生物如炭疽杆菌芽孢,口蹄疫病毒和q 热立克次氏体等可借助空气传播1 0 k i n 乃至几十公里造成 人畜的吸入感染。在肉食和皮革加工厂车间和其周围常常可以发现吸入感染的病例。 1 2 2 微生物气溶胶对植物及动物的影响 微生物气溶胶对农作物和动物的污染在世界范围内有着巨大的经济影响。随着地球上人口的 增长,更大量且更加稳定的食物供应变得越来越急迫。水稻和小麦的主要病原体是小麦锈病真菌。 这些形成孢子的真菌引发的病害是小麦和其它谷类作物所有病害中晟严重的一种在1 9 9 3 年, 一种小麦锈病( 叶锈) 仅在美国坎帕萨斯州和内布拉斯加州就造成了超过4 千万公顷的小麦损失 即使在小麦种植中选育一些抗病种,叶锈病仍连续产生重要的经济影响。小麦锈病孢子在大气中 可以传播几百至数千公里。任何一种锈病感染了植物,都会产生成千上万个孢子。这些孢子被释 放到空中,这种释放是收获过程中由于空气扰动或机械运动而产生的。一旦进入空气,这些孢子 就会在长距离内扩散,它可沉降到下风向的其它敏感的小麦作物上这种小麦锈病的流行性传播 2 中国农业大学硕十学位论文 第一章研究背景 和所造成的经济破坏表明,空气携带的微生物病原体对农业的影响是十分严重的 空气携带的病原微生物的传播对动物饲养业也十分重要口蹄疫的发生是微生物气溶胶在空 气传播疾病方面的一个重要例子很久以来,人们认为微生物气溶胶传播的主要是呼吸系统病原 体但是,有逐渐增多的证据证明:在空气传播的动物疾病中胃肠道病原体也是重要的。肠胃病 原体的微生物气溶胶传播的一个例子是伤寒沙门氏菌在骆驼间的传播。 1 3 国内外不同功能区域微生物气溶胶污染研究进展 目前,国内众多学者多数采用自然沉降法研究大气中细菌总数污染现状,个别学者对大气中 真菌数量进行了分离统计,并对细菌总数和真菌总数的动态变化规律进行了探讨。 一般在住宅、办公室、医院和学校内,每立方米空气中的细菌和真菌的菌落数( c f u ) 达到 成百至数万个( 刘国强,2 0 0 4 ;尹湘毅,2 0 0 5 ;张进,2 0 0 1 ) 在工作场所环境中,空气污染更 为严重,例如在养猪场、养兔场室内细菌和真菌的浓度大1 0 6c f u m 3 ( 朱森树,2 0 0 0 | 段会勇, 2 0 0 5 ) 在农业生产中真菌达1 0 ic f u m 3 在谷物和土豆仓库,空气真菌的浓度可高达1 0 ” c f u m 3 污水处理过程中空气微生物达到1 0 3c f u m 3 ( 王昌玺,2 0 0 0 5 唐玉明,1 9 9 9 ) 1 3 1 城市环境大气中的微生物污染 我国一些科研工作者还集中研究了大尺度城市空间微生物气溶胶的来源、分布、转化和消亡 规律对部分大气污染严重的地区进行了对微生物气溶胶调查,如对北京、沈阳、上海、兰州、 南京、重庆等城市污染现状有了初步了解( 方治国,2 0 0 4 ) 但空气中细菌和真菌的研究工作较 多,放线菌的研究甚少。在目前的研究报道中,空气微生物群落变化的研究都是采取一段时间取 样,随着各种复杂因素的变化,空气中的微生物群落结构变化很大,尤其是长期定位研究较少。 城市空气中的微生物含量是城市空气环境质量的重要指标空气中的微生物主要是非病原型 的腐生菌( 于玺华) 由于受到各种环境因素的影响,不同地区空气中微生物种类不同。 方治国等2 0 0 3 2 0 0 4 年对北京市的空气微生物进行了调查。结果发现。空气中革兰氏阳性 菌明显多于革兰氏阴性( 方治国,2 0 0 4 ) 空气细菌含量约为2 0 0 0 3 0 0 0 ( c f u m 3 ) ,总的空气 微生物含量约为5 0 0 0 7 0 0 0 ( c f u m 3 ) 。经济发达、流动人1 3 较多的地区微生物数量高、种类多, 容易传播和发生流行性疾病。 大气中微生物与人类活动、每天的不同时间、每年的不同季节以及气象状况都有密切的关系。 王学良等( 王学良,1 9 9 4 ) 在一气象观测场对空气中微生物含量进行观测,一年中夏、秋季多于 春、冬季胡庆轩( 胡庆轩,1 9 9 7 ) 对北京、天津,沈阳大气微生物污染研究时发现,京、律春 季大气细菌浓度高,夏季低;沈阳秋季大气细菌浓度高,冬季低。 一天内,各地区大气微生物含量也存在一定规律。王文义( 王文义,1 9 9 4 ) 观察重庆市7 个 监测点位1 月和7 月大气微生物每日变化规律,每日出现2 次高峰( 1 1 :0 0 和1 9 :0 0 ) 和2 次污染低峰 ( 2 :0 0 和2 3 :0 0 ) 。胡庆轩( 胡庆轩,1 9 9 7 ) 对北京、天津、沈阳3 个城市大气微生物污染研究时发现, 天中大气细菌粒子浓度呈双峰型变化,6 :0 0 7 :0 0 和1 8 :0 0 浓度最高,1 1 :0 0 1 3 :0 0 和1 :0 0 2 :0 0 浓度最低 3 中国农业大学硕十学位论文 第一章研究背景 1 3 2 畜禽舍的微生物污染 畜禽舍的空气质量是一个非常关键的问题。它对于卫生条件,生物的成长都有很重要的影响。 在畜禽舍微生物气溶胶的含量很大。明显高于其他功能区随着我国集约化养殖场的增多和规模 的不断扩大,大气气溶胶污染愈加严重,细菌性疫病明显增多。微生物气溶胶( 悬浮于空气中的 微生物所形成的胶体) 对动物的健康,特别是集约化养殖的动物的健康具有巨大的影响在畜禽 养殖舍空气中除了大气自然微生物外,还有畜禽特有的各类病原体近千种。动物吸入一定量的细 菌直接导致呼吸道或消化道的感染。 动物舍内外由于空气微生物数量过高,特别是致病菌和选择性致病菌构成对任何动物的感染 威胁柴同杰研究了鸡舍中空气微生物及向环境传播的状况,结果表明,鸡舍内的微生物能够向 舍外环境传播,使舍外环境在一定的范围内受到动物源性污染,影响范围大于1 0 0 m ( 柴同杰, 2 0 0 3 ) 1 3 3 医院的微生物污染 医院的空气微生物研究大多采用自然沉降法( 平皿暴露法) 在医院感染中,有很多是由空 气中的细菌所引起。因此,对医院空气含菌量各国多制定最低限量。我国对医院内各类场所的空 气含菌量也制定了相应的国家标准( g b1 5 9 8 2 - 1 9 9 5 ) 然而从目前国内监测情况看,医院空气细 菌达标率普遍很低医院周围的大气气溶胶中的细菌污染来源分析如下: ( 1 ) 人体捧菌 人体可不断从呼吸道消化道皮脸毛发等处排出细菌,其中有些细菌可在空中悬浮一段时间 ( 数小时数天) 。人在咳嗽,打喷嚏或谈笑时,可由口腔鼻孔喷出很多微小飞沫,它包含有呼 吸道粘膜的分泌物及病原微生物。一次咳嗽或喷嚏可产生飞沫颗粒1 0 个以上,多数颗粒较大很 快沉降,但干燥后可形成菌尘而飞扬空中。有的飞沫非常小,粒径 8 知m 的大气细菌粒子百分比明显降低,随着降雨量的增大,大气细菌粒度分布的高峰向小粒子方向移 动( 胡庆轩,1 9 9 5 ) 。降雨能减少大气真菌粒子,空气真菌粒经越大,被降雨冲刷的就越多( 胡 庆轩,1 9 9 4 ) 雪对空气微生物同样有净化作用,并且能覆盖地表,有效阻止微生物从土壤进入 空气中,降低空气中微生物的浓度( i j ,1 9 9 4 ) ( 7 ) 大气污染物的影响空气微生物的种类和数量肯定受污染物的类型和浓度的浓度的影 响,童咏仪( 童咏仪,1 9 8 8 ) 观察了n 0 2 对粘质沙雷氏菌和枯草杆菌芽孢气溶胶存活的影响,指 出l q t h 对粘质沙雷氏菌的影响与环境中的r h ( 相对湿度) 有关,r h 为9 0 时,6 0 m g m 3 的n 0 2 对该菌有杀灭作用空气微生物与空气主要污染物之间含量存在正相关关系,相关系数大小排列 为:t s i 降尘 s 0 2 n 0 2 ( 覃长华,1 9 9 6 ) 。但是污染物对各种微生物的影响小于气象因子( g i o r g i o c ,1 9 9 6 ) 1 6 空气微生物采样技术与分析方法 1 6 1 采样方法 空气微生物采样方法可分为两大类:自然沉降法和仪器采样法常用的空气微生物采样器可 分为撞击式采样器和过滤式采样器。 ( 一) 自然沉降法 自然沉降法,又称平皿暴露法,是利用空气微生物粒子的重力作用,在一定时间内,让所处 区域的微生物粒子逐步沉降到带有培养介质的平皿内( 于玺华,2 0 0 2 ) ,对在适宜温度下培养形 8 中国农业大学硕士学位论文第一章研究背景 成的菌落进行观察和研究,在我国被广泛利用( 覃长华,1 9 9 6 ;孙会升,2 0 0 5 ;许筱英,2 0 0 5 ) 这种方法利用奥姆斯基公式将平皿上长出的菌落数,换算成一定体积空气中的微生物含量。 奥姆斯基根据经验设定:1 0 0 r e 2 营养琼脂上暴露5 m i n 后生长的菌落相当于1 0 l 空气中的微生物颗 粒计算公式为:c = 5 0 0 0 0 n a t ,其中c 为每立方米空气中菌落数( c f u m 3 ) ,a 为平皿面积( c m 2 ) , t 为暴露时间( m i n ) ,n 为培养后平皿上生长的菌落数。 这种方法简单易行,可以对环境空气中微生物污染情况作初步了解,但可靠性差,收集到的 只是空气中因重力作用沉降下来的较大的粒子,小粒子很难在短时间在采集到,特别是对呼吸道 感染有重要意义的l 5 z m 的粒子,在空气中沉降速度极慢,用自然沉降法很难捕获。此外,受外 界气流的影响较大,会造成很大的误差( 胡庆轩,1 9 9 6 ) ( 二) 仪器采样法 仪器采样法是利用抽气装置,在一定时间内以恒定的气流,将微生物粒子收集到带有培养介 质的平皿内,经过培养或直接进行观察和研究。 常用的仪器采样法有固体撞击式采样器、液体冲击式采样器、过滤式采样器。各种采样器的 优缺点见表1 - 2 表1 - 2 常用的空气微生物取样器类型 t a b l e l - 2 c o m m o n l y u s e ds a n i p l e r t y p e s o f a i r b o r n e m i c r o b e s 1 6 2 分析方法 空气微生物的分析方法分为培养基法和非培养基法。 ( 一) 培养基法 培养基法是将采集到的活的空气微生物,在半固态的培养基上经过培养繁殖长成菌落,用目 9 中国农业大学硕士学位论文第一章研究背景 视鉴别和技术,结果以菌落形成单位。c f u ( c o l o n yf o r m i n gu n i t ) ”表示 培养基法只能测定经过培养能够繁殖的微生物,在一种培养基上只能生长出适合的活的微生 物,而不是全部获得微生物都能经培养繁殖长成菌落。培养基法不能测定空气中不能培养和死亡 的微生物 影响培养基法的因素:微生物本身的活性、培养介质、培养条件计数以每皿3 0 3 0 0 c f u 比较合适 ( - - ) 非培养基法 非培养基法是采样后,样品不经过培养就可以进行微生物鉴别和计数的方法不论微生物是 否能够培养,所有的微生物粒子都可被分析在采样过程中。由于采样条件和环境因素都会造成 微生物死亡,因此非培养基方法能全面反映空气中微生物的状况,更适合检测空气中的微生物气 溶胶( 陈烈贤,2 0 0 3 ) 空气微生物研究的非培养基法主要有p c r 法p c r 技术是对特定的d n a 片段在体外进行快速扩增的方法,已经被广泛应用到微生物学各个研究领域,具有特异性强、敏 感度高,快速、可定量分析的特点,能够检测到低浓度的微生物但必须事先知道被检物的一段 特异的基因序列,不能检出未知的新病原菌,影响因素多、要求条件严格,稳定性差( 于玺华, 2 0 0 2 ) 目前采用p c r 技术对于空气中的微生物检测,只处在实验室模拟阶段,实验费用较高,还未 用到不同环境中大量样品的检测( 陈烈贤,2 0 0 3 ) 1 0 中国农业大学硕士学位论文 第二章研究意义与研究内容 第二章研究意义与研究内容 2 1 研究目的及意义 垃圾卫生填埋场是固体废弃物稳定化、无害化的处理处置场所到目前为止,垃圾的混合收 集仍是大城市普遍采用的垃圾收运方式,填埋是我国目前大多数城市解决生活垃圾出路的最主要 方法,占8 5 ( 建设部2 0 0 6 年统计资料) ;近年来也有报道称,垃圾填埋场旁边出现了高发病村 落,半数以上的人患有肺气肿,哮喘等疾病,9 0 的年轻人都有呼吸道问题垃圾填埋场的空气 微生物问题逐渐受到关

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