（农药学专业论文）咪鲜胺在番石榴保鲜中的消解动态及残留量研究.pdf

y 1 7 9 必 海南大学学位论文原创性声明和使用授权说明 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取 得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写 过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。 本声明的法律结果由本人承担。 论文作者签名：张世季高 日期：9 o i d 年口乡月口日 学位论文版权使用授权说明 本人完全了解海南大学关于收集、保存、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向 国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权海南大 学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫 描等复制手段保存和汇编本学位论文。本人在导师指导下完成的论文成果，知识产权归属海 南大学和中国热带农业科学院。 保密论文在解密后遵守此规定。 论文作者签名：歌故瑞 日期：2 0 l o 年o 月口日 导师签名：弘凌， 日期：工o o 年口月形日 ， 本人已经认真阅读“c a l l s 高校学位论文全文数据库发布章程”，同意将本人的学位论 文提交“c a l l s 高校学位论文全文数据库”中全文发布，并可按“章程”中规定享受相关 权益。同意论文提交后滞后：口半年：口一年：口二年发布。 论文作者签名：涨世瑞 日期：2 0 l o 年d f 月，参日 导师签名：锨凌， 日期：2 t 9 l o 年。舌月d 日 摘要 本文以气相色谱质谱联用( g c - m s ) 为检测手段，研究了眯鲜胺在番石榴防 腐保鲜中的残留消解动态规律及最终残留量，并对咪鲜胺( p r o c h l o r a z ) 残留量 的检测方法进行了研究和优化，同时对咪鲜胺防腐保鲜番石榴的安全性进行了初 步分析评价。研究结果如下： 1 咪鲜胺残留量气质联用检测方法研究 采用正交试验对番石榴中咪鲜胺残留的提取进行研究，结果表明乙腈对咪鲜 胺的提取率高于丙酮和甲醇的，且对番石榴中的色素和杂质的提取率较低，故本 实验采用乙腈为番石榴中咪鲜胺残留提取的提取溶剂，用量为2 5 9 番石榴样品中 加入5 0 m l 乙腈，匀浆时间为2 m i n 。采用向番石榴基质储备液中加标的方法研究 了氨基柱、l c 1 8 柱、硅胶柱、石墨化碳氨基柱、弗罗里硅土柱五种固相萃取柱 对番石榴中咪鲜胺提取液的净化效果，结果表明，氨基柱、石墨化碳氨基柱、弗 罗里硅土柱三种固相萃取柱对番石榴中咪鲜胺提取液的净化效果较好，氨基柱在 各1 5 m l 9 9 ：l 、9 5 ：5 的丙酮+ 二氯甲烷、9 9 ：1 的乙腈+ 甲苯、9 9 ：1 、9 5 ：5 的乙腈+ 二氯甲烷溶剂洗脱下对咪鲜胺的回收率分别为1 0 5 3 7 、9 5 5 0 、 9 3 1 5 、9 0 8 3 、9 1 9 1 ，石墨化碳氨基柱在各2 5 m l9 9 ：1 、9 5 ：5 的丙酮+ 二氯甲烷、9 5 ：5 的乙腈+ 甲苯、9 9 ：1 、9 5 ：5 、9 0 ：1 0 的乙腈+ 二氯甲烷溶剂 洗脱下对咪鲜胺的回收率分别为9 6 7 l 、9 9 5 6 、9 7 7 0 、9 3 3 8 、9 2 5 6 、 9 0 1 1 ，制备弗罗里硅土柱在各2 5 m l 9 5 ：5 的丙酮+ 二氯甲烷、9 9 ：1 的乙腈+ 甲苯、9 9 ：1 的乙腈+ 二氯甲烷溶剂洗脱下对咪鲜胺的回收率分别为9 1 8 7 、 9 5 2 1 、9 0 1 5 ，均可以满足番石榴净化的需求，但考虑经济因素选用价格最 低的制备弗罗里硅土柱为净化柱，洗脱溶剂为9 9 ：l 的乙腈+ 甲苯，用量为2 5m l 。 咪鲜胺气质联用检测的仪器检测条件为：柱温1 2 0 。c ( 保留l m i n ) 一2 8 0 ( 1 5 m i n ，保留l o m i n ) ；不分流进样；进样口温度2 6 0 ( 2 ；传输线温度2 8 0 ； 离子源温度2 5 0 。c ：载气：氦气，纯度 9 9 9 9 9 ；流量：1 o m l m i n 。咪鲜胺的 s i m 离子：1 8 0 ( q ，定量离子) 、2 6 6 、3 0 8 。在此条件下咪鲜胺的保留时间为 1 5 5 5 m i n 。 2 常温和低温贮藏的番石榴中咪鲜胺残留消解动态 按照一次浸泡多次采样的方法对4 5 咪鲜胺水乳剂在番石榴防腐保鲜中的残 留消解动态进行研究。结果表明，在常温贮藏的经浓度为5 0 0 m g k g 、1 0 0 0m g k g 、 1 5 0 0 m g k g 浸泡处理的番石榴和在低温贮藏的经浓度为1 0 0 0 m g k g 浸泡处理的番 石榴中咪鲜胺消解动态方程依次为：c = 2 1 6 5 2 e n 0 6 4 舢，c = 3 7 1 4 5 e o 0 5 2 乱， c = 6 2 0 5 9 e - 0 0 3 8 6 t ，c = 4 1 6 5 2 e 0 0 5 0 吼，相关系数r 依次为一0 9 7 1 6 、一0 9 2 9 0 、一0 9 3 0 3 、 一0 9 9 0 1 ，残留降解半衰期依次为：1 0 8 d 、1 3 2 d 、1 8 0 d 、1 3 6 d 。各残留降解 动态均符合一级动力学反应模式，且都具有较高的相关性，在常温和低温条件下， 在番石榴中降解都较快，属于易降解农药。 3 常温和低温贮藏的番石榴中咪鲜胺最终残留量 在室内常温贮藏的经浓度为5 0 0 m g k g 、1 0 0 0 m g k g 、1 5 0 0 m g k g 的咪鲜胺药 液浸泡2 次的番石榴和在低温条件下贮藏经1 0 0 0 m g k g 药液浸泡2 次的番石榴， 在贮藏l o 天后其咪鲜胺残留量分别为2 5 2 3 7 m g k g 、5 2 8 5 8 m g k g 、7 7 9 8 l m g k g 、 5 4 5 2 3 m g k g ；在贮藏1 5 天后其咪鲜胺残留量分别为2 0 6 3 0 m g k g 、4 4 3 2 2m g k g 、 6 1 9 1 0 m g k g 、4 8 6 5 1 m g k g ；在贮藏2 5 天后其咪鲜胺残留量分别为1 1 7 6 6m g k g 、 3 3 9 3 2 m g k g 、3 9 9 6 7 m g k g 、3 5 1 5 5 m g k g 。在室内常温贮藏的经浓度为5 0 0 m g k g 、 1 0 0 0 m g k g 、1 5 0 0 m g k g 的咪鲜胺药液浸泡3 次的番石榴和在低温条件下贮藏的 经1 0 0 0 m g k g 药液浸泡3 次的番石榴，在贮藏1 0 天后其咪鲜胺残留量分别为 3 4 6 2 8 m g k g 、7 3 6 5 3m g k g 、1 1 3 4 8 7 m g k g 、7 4 1 ll m g k g ；贮藏1 5 天后其咪 鲜胺残留量分别为3 0 4 7 3 m g k g 、5 7 7 3 4 m g k g 、8 4 4 6 0 m g k g 、6 0 0 2 7 m g k g ； 贮藏2 5 天后其咪鲜胺残留量分别为2 1 0 4 6 m g k g 、3 8 3 7 4 m g k g 、4 5 1 0 3 m g k g 、 3 8 7 9 2 m g k g 。咪鲜胺在番石榴中的残留量为：高浓度药液浸泡的番石榴其咪鲜 胺残留量大于低浓度的，浸泡3 次的番石榴其残留量大于浸泡2 次的。低温贮藏 的番石榴中咪鲜胺残留量稍大于常温贮藏的番石榴。 4 咪鲜胺防腐保鲜番石榴的安全性评价 4 5 咪鲜胺水乳剂在番石榴上按正常推荐浸药浓度9 0 0 倍液( 5 0 0 m g k g ) ，每 季最多使用次数1 次浸果，安全间隔期为7 天，在番石榴上使用后残留量为 1 2 7 9 3 m g k g ，对番石榴的食用是安全的。按4 5 0 倍液( 1 0 0 0 m g k g ) ，浸果1 次， 间隔1 5 天采样，常温和低温贮藏的番石榴中的残留量测定值分别为 1 6 1 9 8 m g k g 、1 9 3 8 4 m g k g ，对番石榴的食用也是安全的。 关键词：咪鲜胺番石榴气质联用消解动态最终残留量 h a b s t r a c t i nt h i sp a p e r , t h ed e g r a d a t i o nd y n a m i c sa n dt h ef i n a lr e s i d u e so fp r o c h l o r a zi n t h eg u a v ap r e s e r v a t i o nw e r ed e t e r m i n e db yg a sc h r o m a t o g r a p h ym a s ss p e c t r o m e t r y ( g c - m s ) ，a n dr e s i d u ed e t e c t i o nm e t h o do fp r o c h l o r a zw a ss t u d i e da n do p t i m i z e dw i t h i t ，w h i l et h es a f e t yo fp r o c h l o r a zu s e df o rg u a v ap r e s e r v a t i o nw a sb r i e f l ya n a l y z e da n d e v a l u a t e d t h er e s u l t sa r ea sf o l l o w s ： 1 m e t h o do fp r o c h l o r a zr e s i d u e sd e t e r m i n e db yg c - m s t h ee x t r a c t i o nm e t h o do f p r o c h l o r a z r e s i d u e si n g u a v aw a ss t u d i e db y o r t h o g o n a lt e s t ，t h er e s u l t ss h o w e dt h a tt h er a t eo fp r o c h l o r a ze x t r a c t e db ya c e t o n i t r i l e w a sh i g h e rt h a na c e t o n ea n dm e t h a n o l ，a n di m p u r i t i e sa n dp i g m e n ti ng u a v ae x t r a c t e d b ya c e t o n i t r i l ew a sl o w e r ，s oi nt h i ss t u d y , a c e t o n i t r i l ew a sc h o s e nt ob et h ee x t r a c t i o n s o l v e n to fp r o c h l o r a zi ng u a v a ，t h ea m o u n tw a st h a t2 5 9s a m p l ew a sa d d e d5 0 m l a c e t o n i t r i l e ，h o m o g e n i z e dt i m ew a s2 m i n p u r i f i c a t i o ne f f e c to fa m i n oc o l u m n ，l c - l8 c o l u m n ，s i l i c a g e lc o l u m n ，c a r b o na n da m i n oc o l u m n ，f l o r i s i lc o l u m nt oe x t r a c tl i q u i d o fp r o c h l o r a zi ng u a v aw a ss t u d i e db ya d d i n gs t a n d a r dp r o c h l o r a zt og u a v a ，t h er e s u l t s s h o w e dt h a tp u r i f i c a t i o ne f f e c to fa m i n oc o l u m n ，c a r b o na n da m i n oc o l u m n ，f l o r i s i l c o l u m nt oe x t r a c tl i q u i do fp r o c h l o r a zi ng u a v aw e r eb e a e r ，f o ra m i n oc o l u m n ，u n d e r e a c h15 m l9 9 ：l ，9 5 ：5a c e t o n e + d i c h l o r o m e t h a n e ，9 9 ：1a c e t o n i t r i l e + t o l u e n e ，9 9 ： l ，9 9 ：5a c e t o n i t r i l e + d i c h l o r o m e t h a n es o l v e n t ，r e c o v e r i e so fp r o c h l o r a zw e r e 1 0 5 3 7 ，9 5 5 0 ，9 3 1 5 ，9 0 8 3 ，9 1 9 1 ；f o rc a r b o na n da m i n oc o l u m n ，u n d e r e a c h2 5 m l9 9 ：1 ，9 5 ：5a c e t o n e + d i c h l o r o m e t h a n e ，9 5 ：5a c e t o n i t r i l e + t o l u e n e ，9 9 ： 1 ，9 9 ：5 ，9 0 ：10a c e t o n i t r i l e + d i c h l o r o m e t h a n es o l v e n t ，r e c o v e r i e so fp r o c h l o r a zw e r e 9 6 7 1 ，9 9 5 6 ，9 7 7 0 ，9 3 3 8 ，9 2 5 6 ，9 0 1 1 ；f o rf l o r i s i lc o l u m n ，u n d e re a c h 2 5 m l9 5： 5a c e t o n e + d i c h l o r o m e t h a n e ，9 9 ： 1 a c e t o n i t m e + t o l u e n e ， 9 9 ： 1 a c e t o n i t r i l e + d i c h l o r o m e t h a n e s o l v e n t ，r e c o v e r i e s o fp r o c h l o r a zw e r e9 1 8 7 ， 9 5 21 ，9 0 15 ，a l la b o v ea r et om e e tg u a v ap u r i f i c a t i o nn e e d s ，b u tc o n s i d e rt h e e c o n o m i cf a c t o r s ，w ec h o s ef l o r i s i l ，e l u t i n gs o l v e n tw a s9 9 ：1a c e t o n i t r i l e + t o l u e n e ， t h ed o s a g ew a s2 5m l g c - m st e s tc o n d i t i o n so fp r o c h l o r a z ：c o l u m nt e m p e r a t u r e12 0 ( h o l dlm i n ) _ 2 8 0 ( 15 m i n ，h o l dl0m i n ) ；n o ts p l i ti n j e c t i o n ；i n j e c t o rt e m p e r a t u r e2 6 0 ； t r a n s m i s s i o nl i n et e m p e r a t u r e2 8 0 ；i o ns o u r c et e m p e r a t u r e2 5 0 ；c a r r i e rg a s ： h e l i u mg a s ，p u r i t y _ 9 9 9 9 9 ，f l o wr a t e ：1 o m l m i n p r o c h l o r a zs i mi o n ：l8 0 ( q ， q u a n t i t a t i v ei o n ) ，2 6 6 ，3 0 8 u n d e rt h e s ec o n d i t i o n s ，r e t e n t i o nt i m e o fp r o c h l o r a z 15 5 5 m i n 2 。r e s i d u a ld y n a m i c so f p r o c h l o r a zo fg u a v as t o r e di nr o o ma n dl o wt e m p e r a t u r e r e s i d u a l d y n a m i c s o f4 5 p r o c h l o r a ze m u l s i o n o i li nw a t e ri n g u a v a p r e s e r v a t i o nw e r es t u d i e da c c o r d i n gt os p r a y i n go n c e ，s a m p l i n gt i m ea f t e rt i m e t h e r e s u l t ss h o wt h a t ：d e g r a d a t i o nc u r v ee q u a t i o n so fp r o c h l o r a zi ng u a v as t o r e di nr o o m t e m p e r a t u r ea n ds o a k e di n5 0 0m g l ( g ，10 0 0 m g & g ，1 5 0 0m g l ( gl i q u o ra n ds t o r e di n l o w t e m p e r a t u r ea n ds o a k e di n 10 0 0m g l ( g l i q u o rw e r e ：c = 2 16 5 2 e 。o 0 6 撕， c = 3 7 1 4 5 e 。o 0 5 2 4 ，c = 6 2 0 5 9 e o 0 3 8 6 t ，c = 4 1 6 5 2 e 。o _ 0 5 0 9 ，a n dt h ec o l l r e l a t i o nc o e f f i c i e n t r w e r e - 0 9 7 1 6 ，- 0 9 2 9 0 ，一0 9 3 0 3 ，- 0 9 9 0 1 ，a n dt h eh a l fl i v e sw e r e1 0 8 d ，1 3 2 d 18 o d ，1 3 6 d r e s i d u a ld e g r a d a t i o nd y n a m i c so ft h e ma l la c c o r d e dw i t hc = c o e - k t a n d a l lh a dh i 曲r e l a t i v i t y , a n di nt w os t o r a g e c o n d i t i o n s ，d e g r a d a t i o n sw e r ev e r yf a s t 3 f i n a lr e s i d u e so f p r o c h l o r a zo fg u a v as t o r e di nr o o ma n dl o wt e m p e r a t u r e s t o r e di nr o o m t e m p e r a t u r e f o r10 d a y sw i t h i n5 0 0 m g k g ，10 0 0 m g k g ， 15 0 0 m g k gl i q u o rs o a k e d2t i m e sa n di nl o w t e m p e r a t u r ew i t hi n l0 0 0 m g k gl i q u o r s o a k e d2t i m e s ，t h ep r o c h l o r a zr e s i d u e so fg u a v aw e r e2 5 2 3 7 m g k g ，5 2 8 5 8m g & g ， 7 7 9 81 m g & g ，5 4 5 2 3 m g k g ；f o r15d a y s ，t h er e s i d u e sw e r e2 0 6 3 0m g k g 4 4 3 2 2 m g & g ，6 1 910 m g k g ，4 ，8 6 5lm g k g ；f o r2 5d a y s ，t h er e s i d u e sw e r e1 17 6 6 m g k g 3 3 9 3 2 m g k g ，3 9 9 6 7 m g k g ，3 515 5 m g k g a n ds t o r e di nr o o mt e m p e r a t u r ef o r1 0 d a y sw i t hi n5 0 0 m g k g ，10 0 0 m g k g ，15 0 0 m k gl i q u o rs o a k e d3t i m e sa n di nl o w t e m p e r a t u r ew i t hi n l0 0 0 m g k gl i q u o rs o a k e d3t i m e s ，t h ep r o c h l o r a zr e s i d u e so f g u a v aw e r e3 4 6 2 8 m g k g ，7 3 6 5 3m g k g ，1 1 3 4 8 7m g k g ，7 4 1 1 1m g k g ；f o r1 5d a y s ， t h er e s i d u e sw e r e3 0 4 7 3 m g k g ，5 7 7 3 4 m g k g ，8 4 4 6 0 m g k g ，6 0 0 2 7 m g k g ；f o r2 5 d a y s ，t h er e s i d u e sw e r e2 1 0 4 6 m g k g ，3 8 3 7 4 m g k g ，4 5 1 0 3 m g k g ，3 8 7 9 2 m g k g p r o c h l o r a zr e s i d u e si ng u a v aa r ea sf o l l o w s ：r e s i d u e ss o a k e di nh i g hc o n c e n t r a t i o n l i q u o ri sh ig h e rt h a ni nl o wc o n c e n t r a t i o n ，s o a k e d3t i m e sh i g h e rt h a n2t i m e s s t o r e d i nl o w t e m p e r a t u r es l i g h t l yh i g h e rt h a ni nr o o mt e m p e r a t u r e 4 s a f e t ye v a l u a t i o no fp r o c h l o r a zi ng u a v ap r e s e r v a t i o n d i p p i n gi nn o r m a lr e c o m m e n d e dc o n c e n t r a t i o no f9 0 0t i m e sd i l u t i o n ( 5 0 0 m g k g ) f o r1t i m e ，i n t e r v a lo f7d a y s ，t h er e s i d u eo f 4 5 p r o c h l o r a ze m u l s i o no i li nw a t e ri n g u a v ai s1 2 7 9 3 m g k ga n di ti ss a f ef o rc u s t o m e r , d i p p i n gi nc o n c e n t r a t i o no f4 5 0 t i m e sd i l u t i o n ( 10 0 0 m g k g ) f o r1 t i m e ，i n t e r v a lo f15d a y s ，t h er e s i d u e sa r e 1 619 8 m g k ga n d1 9 3 8 4 m g k ga n di ti sa l s os a f ea sf o o df o rc u s t o m e r k e yw o r d s ：p r o c h l o r a zg u a v ag c - m sd e g r a d a t i o nd y n a m i c sf i n a lr e s i d u e s i v 曰习 摘要i a b s t r a c t i i i 1 前言1 1 1 农药残留分析研究概况2 1 1 1 农药残留分析样品前处理技术。2 1 1 2 农药残留检测技术7 1 1 3 农药残留分析方法建立依据分析l l 1 2 咪鲜胺残留研究现状14 1 2 1 咪鲜胺简介1 4 1 2 2 咪鲜胺的应用1 5 1 2 3 咪鲜胺的代谢降解16 1 2 4 咪鲜胺的残留检测1 7 1 3 选题依据和主要研究内容18 1 3 1 选题依据及目的意义l8 1 3 2 研究内容1 9 2 材料与方法二2 0 2 1 材料与设备2 0 2 1 1 供试样品2 0 2 1 2 供试药品及试剂2 0 2 1 3 设备2 l 2 1 4 咪鲜胺标准溶液的配制2 1 2 1 5 弗罗里硅土的活化和弗罗里硅土净化柱的制备2 1 2 1 6 番石榴储备基质液的制备2 2 2 2 试验方法2 2 2 2 1 咪鲜胺残留量检测方法的研究2 2 2 2 2 咪鲜胺对采后番石榴防腐保鲜药效试验2 4 2 2 3 咪鲜胺在番石榴中的消解动态及残留量研究2 5 3 结果与分析2 7 3 1 咪鲜胺残留量检测方法的研究结果与分析。2 7 3 1 1 气质联用仪器条件参数的确定结果2 7 3 1 2 净化方法的粗筛选结果2 8 3 1 3 净化方法的细筛选结果3 0 3 1 4 提取方法的研究结果3 3 3 1 5 标准工作曲线及检出限3 3 3 1 6 回收率实验3 4 3 2 咪鲜胺对采后番彳i 榴防腐保鲜药效试验结果与分析3 8 3 2 1 不同浓度药剂对番石榴防腐保鲜的影响3 9 3 2 2 不同浸泡次数对需石榴防腐保鲜的影响3 9 3 2 3 不同贮藏温度对岙石榴防腐保鲜的影响3 9 3 3 咪鲜胺在番彳i 榴中的消解动态及残留量研究结果与分析4 0 v 3 3 1 室内常温贮藏的番石榴中咪鲜胺残留降解动态4 0 3 3 2 低温贮藏的番石榴中咪鲜胺残留降解动态4 2 3 3 3 室内常温贮藏的番石榴中眯鲜胺最终残留量4 4 3 3 4 低温贮藏的番石榴中咪鲜胺最终残留量4 6 4 讨论4 6 4 1 咪鲜胺残留量检测方法的研究讨论4 6 4 1 1 制各弗罗里硅土柱稳定性的探讨4 6 4 1 2 提取溶剂的选择4 7 4 。1 3l 古l 相萃取柱和洗脱溶剂的选择4 8 4 2 咪鲜胺在番石榴中的消解动态及残留量研究讨论4 8 4 2 1 咪鲜胺对番石榴防腐保鲜的药效探讨4 8 4 2 2 咪鲜胺在番石榴防腐保鲜中的残留消解动态变化4 9 4 2 3 影响农药残留量的因素5 0 4 2 4 安全性评价5 0 5 结论51 5 1 咪鲜胺残留量检测方法的研究结论5 l 5 1 1 番石榴中咪鲜胺残留量检测的前处理方法5 l 5 1 2 番石榴中咪鲜胺残留量检测的检测方法5 2 5 2 咪鲜胺在番石榴中的消解动态及残留量研究结论。5 2 5 2 1 咪鲜胺对番石榴防腐保鲜的药效5 2 5 2 2 咪鲜胺在常温和低温贮藏的番石榴中的残留消解动态5 2 5 2 3 眯鲜胺在番石榴中的最终残留量与浸药浓度、浸药次数的关系5 3 5 2 4 咪鲜胺在番石榴防腐保鲜中使用的安全性评价5 3 参考文献5 4 致谢5 9 v i 1 前言 农药是用于防治农林牧业病、虫、草、鼠害和其它有害生物，调节植物、昆 虫生长的特殊生物活性物质。农药的广泛应用对人类社会的进步和生产力的发展 起到了巨大的促进和推动作用。农药不仅提高了农业生产力和农产品的品质，减 少了农产品在运输、贮存等过程中的损失，而且通过应用农药控制传播人类传染 疾病的媒介昆虫而挽救了上千万人的生命。据统计，如果不使用农药，因病、虫、 草害的影响，每年全世界粮食产量将减少1 3 【i 】。在我国，每年发生病虫害0 4 7 亿公顷1 8 7 亿公顷，施用农药防治面积达1 5 3 亿公顷左右，通过化学防治每 年挽回粮食损失2 0 0 亿公斤3 0 0 亿公斤【2 1 ，挽回直接经济损失达6 0 0 亿元【 j 。 随着农药广泛、大量、长期以及不合理地应用，不可避免地产生了农药残留 问题。农药残留引起的食品安全和生态安全问题，严重影响着人们的身体健康、 生态平衡和生物多样性。近几年食用受到农药和药物严重污染的东西而造成中毒 的事件屡有发生，据卫生部统计，2 0 0 2 年全国共发生农药化学物中毒事件1 2 9 起，2 3 3 2 人中毒，3 6 人死亡。我国出口的农产品也因农药残留超标而屡屡发生 被拒收、扣留、退货、索赔和撤消合同等事件，造成了巨大的损失。如2 0 0 2 年 由于日本一些媒体大肆渲染中国蔬菜的农药残留量超标，导致日本的一些大型超 市联手拒卖中国的冷冻蔬菜，使当年我国出口日本的蔬菜量急剧下降。以菠菜为 例，2 0 0 2 年出口量比2 0 0 1 年下降了1 3 4 1 。由农药残留引起的致癌、致畸、致 突变问题以及对生物链的破坏更是人类健康和生态安全的隐形杀手。因此，农药 污染的严重现状越来越受到人们的关注，食品安全问题也越来越引起世界各国的 重视。为了保障消费者的健康，必须加强农药残留的检测。 我国的农药残留分析始于上世纪5 0 年代，但方法仅限于化学法、比色法和 生物测定法。检测方法缺乏专一性，灵敏度也不高。上世纪6 0 年代初，气相色 谱法被应用于农药残留分析，此后推动了农药残留分析技术的飞速发展，大大提 高了农药残留的检测水平。高效能的色谱柱可将被测组份与干扰物分离，高灵敏 度和高选择性的检测器解决了早期不能检出微量农药、代谢物和降解产物的分析 问题。8 0 年代，在农药残留分析中，高效液相色谱法广泛应用于热不稳定和离 子型农药及其代谢物的分析。进入上世纪9 0 年代，农药残留分析技术取得了重 要进展。在样品提取与净化方面实现了简易化、微型化和自动化，如固相萃取 ( s p e ) 、超临界流体萃取( s f e ) 、基质固相分散萃取( m s p d e ) 、自动索氏萃取( s e ) 、 微波辅助萃取( m a e ) 和免疫亲和色谱柱( i a c ) 。在定量分析上涌现出包括现代光谱 分析技术、现代波谱分析技术、波谱和色谱联用技术、免疫分析技术和生物传感 器在内的众多新技术1 5 喵j 。 1 1 农药残留分析研究概况 现代农药残留量分析方法通常包括样品前处理和测定两部分。农药残留量分 析的前处理步骤主要包括对待测成分的提取、净化、浓缩。农药残留物的提取指 使用适当溶剂将待测物连同样品基质从固态( 或液态、气态) 样品中转移至易于净 化和分析的溶剂中。农药残留提取液的净化是指将提取液中的待测物与干扰物质 分离。浓缩是指将去除干扰物质后的提取液蒸发溶剂，提高农药在提取液中浓度 的过程。现在，有些方法提取、净化一步完成，提取净化的界限已十分模糊。 1 1 。1 农药残留分析样品前处理技术 1 1 1 1 常用的样品前处理技术 1 1 1 1 1 提取方法及提取溶剂 1 1 1 1 1 1 提取方法 目前普遍采用的提取方法主要有：浸渍漂洗法、消化法、振荡法、匀浆法、 索氏提取法、超声波提取法【8 删。 ( 1 ) 浸渍漂洗法 将样本浸渍在提取液中，或用提取液漂沈样本。此法对附着在样本表面的农 药有很好的提取效果。 ( 2 ) 振荡法 在盛有样本的容器中加入提取剂，振荡数小时。此法简便并且提取效果好， 较普遍采用。 ( 3 ) 匀浆法 将样本放在匀浆杯( 捣碎杯) 中，加入提取剂，快速匀浆( 捣碎) 几分钟。此 法简便，快速，效果好，普遍采用。 ( 4 ) 索氏提取法 用适当的提取溶剂在索氏提取器中连续回流提取几个小时，获得提取液。此 法为经典提取法，也叫完全提取法，为国际上的标准方法，提取效果好，但需时 间过长，干扰物质较多。 ( 5 ) 消化法 用消化液把试样消煮分解后，再用溶剂提取的一种方法。此法多用于不易匀 浆，不易捣碎的动物组织样本。 ( 6 ) 超声波提取法 样本经粉碎或匀浆捣碎后，加入提取剂，在超声波仪中提取一定时间。此法 2 现已普遍采用。 1 1 1 1 1 2 提取溶剂 样品中残留农药提取效果的好坏，很大程度上取决于农药的极性和样品基质 的类型。常用作提取剂的有机溶剂有乙腈、甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯等。 乙腈提取法可用于大多数农药的提取，提取液通过添加氯化钠，使乙腈和水分离。 丙酮具有毒性低、易于纯化、挥发性好及价格低廉等优点，它既能萃取极性物质 又能萃取非极性物质。丙酮提取液用氯化钠或硫酸钠饱和后，分配至二氯甲烷、 正己烷或石油醚中，从而可得到对不同化合物有利的分配特性和有机相的快速分 离。乙酸乙酯极性相对丙酮、乙腈要弱，因此其对弱极性农药的提取回收率一般 较好，并且其共提物尤其是色素要显著少于丙酮，减少了净化时的压力l o l 。 1 1 1 1 2 净化方法 1 1 1 1 2 1 液一液分配法 利用待测农药与干扰杂质在两种互不相溶的溶剂中( 通常采用极性溶剂和非 极性溶剂配成溶剂对) 溶解度的差异而达到分离目的的净化方法。 1 1 1 1 2 2 磺化法 样品提取液中的脂肪、腊质等干扰物质与浓硫酸发生磺化反应，从而使农药 与杂质分离的净化方法。 1 1 1 1 2 3 凝结沉淀法 在净化液中加入凝结剂，使溶液中的脂肪、腊质、蛋白质等杂质沉淀析出， 再经离心，达到净化目的的方法。 1 1 1 1 2 4 冷冻法 用低温处理样品提取液，待脂肪、腊质、蛋白质等杂质析出后，在低温条件 下过滤掉杂质。 1 1 1 1 2 5 薄层层析法 采用硅胶、氧化铝等吸附剂铺成薄层，利用吸附剂表面对不同组分吸附能力 的差别达到分离的方法。 1 1 1 1 2 6 吸附柱层析法 利用各组分在吸附剂上吸附解吸附能力的差异而达到分离净化的目的。常用 的吸附剂有硅酸镁、硅胶、活性炭、硅藻土、三氧化二铝等。 1 1 1 1 2 7 离子交换法 利用离子交换剂上的可交换离子与周围介质中被分离的各种离子间的亲和 力不同，经过交换平衡达到分离目的的一种柱色谱法。 1 1 1 1 3 浓缩方法 1 1 1 1 3 1 自然挥发法 将待浓缩的溶液置于室温下，使溶剂自然挥发。此法速度慢，但简便。 1 1 1 1 3 2 吹气法 用干燥空气或氮气吹溶液液面，并水浴加热使溶剂挥发的浓缩方法。此法浓 缩速度较慢，对于易氧化、蒸气压高的农药，不能采用此法。 1 1 1 1 3 3 k d 浓缩器浓缩法 采用k d 浓缩装置进行减压蒸馏浓缩的方法。此法简便，农药不易损失，是 较普遍采用的方法。 1 1 1 1 3 4 真空旋转蒸发法 在减压、加温、旋转条件下蒸馏浓缩的方法。此法浓缩速度快，农药不易损 失，简便，是最常用的理想的浓缩方法。 1 1 1 2 农药残留分析前处理新技术 由于传统的方法使用了大量有毒溶剂，污染环境和威胁操作人员的身体健 康，并且费时费力，已经逐步被其它一些新方法所取代。目前已经广泛应用或报 道的新技术主要有： 1 1 1 2 1 固相萃取( s p e ) 固相萃取技术( s p e ) 是利用固体吸附剂对液体样品中目标化合物与基质和干 扰化合物吸附能力的差异，来分离和富集目标化合物的方法。液体样品通过填充 吸附剂的萃取柱，目标化合物和干扰化合物保留在柱上，首先选用适当溶剂洗脱 吸附在吸附剂上的干扰物，然后再用洗脱剂对目标化合物进行洗脱，收集目标化 合物【l 。固相萃取操作步骤一般包括柱预处理、加样、洗脱干扰组分和回收待 测组分4 部分。s p e 克服了传统的液一液萃取及一般柱层析的缺点，具有节省时间 ( 一般只需5 l o m i n ) 、减少溶剂用量( 所需溶剂只有液一液萃取法的1 0 ) 、 操作安全、回收率高、重现性好、减少杂质引入、便于自动化等特点【1 2 】。s p e 主 要用于液体样品中农药的提取，也可用于预先提取到溶液中的固体样品。柱子的 常用填料有硅酸镁、硅胶、c 1 8 、c 8 、硅藻土、氧化铝等。 1 1 1 2 2 固相微萃取( s p m e ) 固相微萃取( s p m e ) f h b e l a r d i 和p a w l i s z y n 首次提出【l3 1 ，是在固相萃取基 础上发展起来的萃取分离技术，其原理是利用待测物在涂层和样品之间平衡分 配，使待测组分扩散吸附到石英纤维表面的固定相涂层，待吸附平衡后，再与