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文档简介
嗜酸性粒细胞直接计数刘明全,1,实验目的:掌握嗜酸性粒细胞计数的原理、方法、实验步骤及注意事项,2,实验方法:显微镜计数法,3,实验原理:用嗜酸性粒细胞稀释液将血液稀释一定倍数,使大部分的红细胞和其他白细胞被破坏并使嗜酸性粒细胞着色。将稀释的细胞悬液滴入血细胞计数板,计数一定体积内的嗜酸性粒细胞数量,经过换算得出每升血液中的嗜酸性粒细胞数量。,4,实验器材:显微镜、改良Neubauer计数板、试管、微量吸管、采血针、1毫升移液管、消毒器具实验试剂:乙醇伊红稀释液实验标本:末梢血,5,实验步骤:用吸取嗜酸性粒细胞稀释液0.38ml于小试管中采集末梢血用微量吸管采血20l,擦去管尖外部余血。将吸管插入小试管稀释液的底部,轻轻放出血液,并吸取上层稀释液清洗吸管23次将试管中的血液与稀释液混匀,放置约15min,待红细胞完全溶解;,6,5.用微量吸管取混匀的细胞悬液10-13微升,充入计数板的2个计数池中,室温静置23min;6.低倍镜下计数2个计数池共计10个大方格内的嗜酸性粒细胞数量;7.计算:嗜酸性粒细胞/L=N1020106/L=N/5109/LN表示平均每个大方格中的细胞数量,7,7.结果报告:嗜酸性粒细胞:X.XX109/L,8,注意事项,各种实验器具须清洁,否则影响细胞着色和计数凡能引起白细胞计数误差的因素,嗜酸性粒细胞计数时均应注意计数应在60min内完成,因时间太长,嗜酸性粒细胞会被逐渐溶解,造成结果偏低;注意与残留的中性粒细胞相区别,以免结果偏高;,9,血液加入稀释液后应立即混匀,否则易至血液凝固和细胞聚集;嗜酸性粒细胞计数最好固定于某一时间,防止日间生理变化。,10,参考范围,(0.050.5)109/L,11,预习,下次课
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