植物组织培养实习报告.doc

植物组织培养实习报告 辽宁工程技术大学 本科生实习报告书 教学单位辽宁工程技术大学专业生物技术班级xx-1班学生姓名徐海冬学号1211040119指导教师李娜 种苗学 （实习报告） 学院班级：集贤学院创新实验123班学号：xx01060214姓名：马晶晶指导老师：杨海芸 xx年1月14日 种苗学实习报告 摘要：此次种苗学实习的主要内容有：了解实验室的规章制度和管理办法以及设备设施、MS培养基的配置以及麻竹芽无性繁殖初代体系建立的具体操作步骤、容器苗移植的具体过程。要求掌握组织培养的操作要求，了解快速繁殖体系建立的指导思想。通过本次实习，同学们接触到很多在课堂上学不到的东西，对植物组织培养的生产发展及经营措施有了切实的认识。 关键词：组织培养，移植，经营 1前言 植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论，近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术。植物的组织培养广义又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织。器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。狭义是指组培指用植物各部分组织，如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。 植物组织培养的特点是： 1、培养条件可以人为控制 组培采用的植物材料完全是在人为提供的培养基和小气候环境条件下进行生长，摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响，且条件均一，对植物生长极为有利，便于稳定地进行周年培养生产。 2、生长周期短，繁殖率高 组培是由于人为控制培养条件，根据不同植物不同部位的不同要求而提供不同的培养条件，因此生长较快。另外，植株也比较小，往往20-30天为一个周期。所以，虽然组培需要一定设备及能源消耗，但由于植物材料能按几何级数繁殖生产，故总体来说成本低廉，且能及时提供规格一致的优质种苗或脱病毒种苗。 3、管理方便，利于工厂化生产和自动化控制 植物组织培养是在一定的场所和环境下，人为提供一定的温度、光照、湿度、营养、激素等条件，极利于高度集约化和高密度工厂化生产，也利于自动化控制生产。它是未来农业工厂化育苗的发展方向。它与盆栽、田间栽培等相比省去了中耕除草、浇水施肥、防治病虫等一系列繁杂劳动，可以大大节省人力、物力及田间种植所需要的土地。 2实习目的与意义 1、掌握基本培养基的配置及灭菌处理。2、掌握离体组织的采集及注意方法。3、掌握组织培养和容器苗移植的操作技术。4、掌握无性繁殖材料管理的注意事项。 3实验过程与内容 3.1MS培养基的配置 3.1.1母液的配置 MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的20倍或200倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。这样每次使用时，取其总量的1/20(50mL)或1/200(5mL)，加水稀释，制成培养液。现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出，供配制时使用。 各种母液配完后，分别用玻璃瓶贮存，并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。 本次实习为节约时间和试机，采用实验室已配好储存的母液进行实验。 3.1.2配制培养液 用量筒从各种母液中分别取出所需的用量：各种母液分别30mL，与各种母液一起放入烧杯中。边加母液边用磁力搅拌器搅拌，使各种母液混合均匀。 配制培养液时应注意：在使用提前配制的母液时，应在量取各种母液之前，轻轻摇动盛放母液的瓶子，如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染，应立即淘汰这种母液，重新进行配制；用量筒或移液管量取培养基母液之前，必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次；量取母液时，最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上，量取1种，划掉1种，以免出错。 3.1.3调pH 将锥形瓶置于磁力搅拌机上，边搅拌边用pH计测量溶液的pH值。若pH偏低则用滴管逐滴加入KOH溶液，最终使溶液pH为5.7，并定容到3000mL。 3.1.3溶化琼脂及高压灭菌 用天平分别称取琼脂27g加入锥形瓶中，并将锥形瓶放入高压蒸汽灭菌锅灭菌。待需要灭菌的物品码放完毕，盖上锅盖。在120下，灭菌20min。灭菌后取出锥形瓶。 3.1.4培养基的分装及灭菌 溶化的培养基应该趁热分装。分装时，将锥形瓶置于磁力搅拌机上边搅拌边分装。先将要用的玻璃试管准备好，设置好分装仪进行分装。注意：在进行分装之前要先对分装仪进行预热，避免培养基堵住胶管造成浪费。分装完成后，盖好盖子再次灭菌，灭菌的步骤同上。 4.1初代繁殖体系的建立 4.1麻竹繁殖材料的获得 本实验所用麻竹材料采于浙江农林大学温室。 采集较长，带节的幼嫩麻竹枝，所采纸条应插入水中保持其生活力。将采集的枝条截成带节的小节，长度约5cm。剥去叶子于托叶鞘，尽量不要伤及幼芽。然后将幼芽置于流水中冲洗2小时，以除去附着的微生物等。 就爱那个冲洗完毕的幼芽放入酒精中浸泡30秒，然后置于次氯酸钠中抽滤10分钟。置于超净工作台上用无菌水冲洗45遍备用。 4.2初代培养 打开超净工作台，用酒精擦拭两遍，将实验用的镊子、剪刀放入高温锅灭菌备用。此时，所有放入超净工作台的东西都要用酒精消毒。 用镊子夹取置于无菌水中的幼芽，剪成1cm长度，然后斜插入培养基中。注意，要使繁殖材料的生态学上端朝上，使繁殖材料能够正常生长。 所有的繁殖材料都插如培养基后，在试管外注明材料的拉丁学名、时间、操作者、代数等信息。最后，将试管置于培养室培养。 5容器苗的移植 5.1容器苗的驯化 将待移植的容器苗从培养室移入驯化室，一周左右再进行移植。容器苗驯化的目的在于提高试管苗对外界环境条件的适应性，提高其光合作用的能力，促使试管苗健壮，最终达到提高试管苗的移栽成活率。驯化的原则应从温度、湿度、光照及有无菌态等环境要素进行，驯化开始数天内，应和培养时的环境条件相似；驯化后期，则要与预计的栽培条件相似从而达到逐步适应的目的。 5.2移苗 首先配置移栽基质，用珍珠岩，蛭石，草炭土或腐殖土比例为1：1：05；也可用砂子：草炭土或腐殖土为1：1。这些介质在使用前应高压灭菌。再加水搅拌至一定湿度，用手捏感觉有水但水不会溢出来的程度为适宜。 植物组织培养课程实习报告茅膏菜的组织培养 课程名称植物组织培养 实习内容茅膏菜的组织培养 指导教师杨爽 系（院）别食品科学学院实习班级xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx报告人xxxxxxxx报告日期xxxx年xx月x日 目录 1.前言3 2.实习项目3 3.实习目的3 4.实习时间安排4 5.实习地点4 6.实习材料及工具5 7.实习内容5 8.实习总结8 一、前言 (1)植物组织培养是指在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。该技术能应用于植物离体快繁、无病毒苗木培育、培育新品种或创制新物种、次生代谢产物生产、植物种质资源的离体保存、人工种子等。而组织培养的实习能够将课本中所学的理论知识应用于实践，开拓我们的视野，扩大我们的知识面，对于提高我们的探究意识和创新、动手操作能力具有很重要的意义。 （2）植物细胞全能性是植物组织培养的理论基础，是指每一个植物细胞带有该植物的全部遗传信息，在适当的条件下可表达出该细胞的所有遗传信息，分化出植物有机体所有不同类型的细胞，形成不同类型的器官甚至胚状体，直至形成完整再生植株。 (3)茅膏菜具有较大的药用价值和研究价值但种子萌发率低，因此可利用种子繁殖获得无菌苗后在进行快繁。 二、实习项目 茅膏菜的组织培养 三、实习目的 （1）复习、巩固和植物组织培养的基本理论和基本知识，同时进一步丰富所学知识； （2）了解茅膏菜的形态、习性、种类、用途的多样性以及它们与环境的关系，激发学习的积极性； （3）理论联系实际，通过自主学习和研究性学习培养独立工作能力和创新意识； （4）重点掌握茅膏菜组织培养的基本操作技术及方法； 四、实习时间安排： （1）xx-11-18、xx-11-24、xx-11-25在图书馆查阅茅膏菜及组织培养的相关资料； （2）xx-12-1至xx-12-2去奇正藏药厂药材种植基地参观，采集茅膏菜种子； （3）xx-12-8至xx-12-13在植物组织培养实验室进行茅膏菜的快速繁殖实验； （4）xx-12-14至xx-12-16撰写实习报告； 五、实习地点 （1）西藏农牧学院图书馆、电子阅览室 （2)奇正藏药厂药材种植基地（奇正藏药厂药材种植基地位于西藏林芝地区，全地区海拔500至7800多米，特殊的地形和气候，使这里各种物种资源十分丰富，而且没有受过污染。该种植基地目前已成功种植西藏高山红牡丹、茅膏菜、波棱瓜、翼首草、独一味、藏麻黄等多种药用植物） (3)西藏农牧学院植物组织培养实验室（植物组织培养实验室具有进行该项技术的完整设备和条件，便于进行茅膏菜的组织培养） 六、实习材料及工具：自封袋、采集箱、三角纸袋、高