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广西师范大学体育学院 2006 届硕士论文韦金亮 i 不同中药提取物对训练小鼠抗氧化清除自由基及作用机制的比较研究不同中药提取物对训练小鼠抗氧化清除自由基及作用机制的比较研究 研究生姓名：韦金亮指导老师：杨永亮 教授 研究方向：体能恢复理论及训练方法 中文摘要中文摘要 提高运动员的运动能力是体育科学与运动医学界长期关注的焦点。运动医学方面己有 用类固醇，生长激素，咖啡因，微量元素等来增强运动能力。但由于西药有效性的局限、 副作用和兴奋剂等问题，长期以来,学者们通过实验研究证明中药具有安全、有效、无毒副 作用的良药，因此，中药的作用得到了进一步的重视。随着自由基医学的兴起，更是赋予 了中医药理研究的新内容。目前已发现中医清除自由基作用的成分包括维生素、类胡箩卜 素、黄酮类、蹂酸、咖啡酸诱导体、木聚糖、皂苷等。这些成分即可以发挥对超氧化阴离 子的直接清除作用， 又可通过调节机体内部的氧化一抗氧化系统， 增强集体的抗氧化能力， 提高在氧化应激状态下保护机体的作用。并且对机体内产生超氧阴离子的系统具有抑制作 用，使机体减轻遭受过氧化损伤。通过不同的运动形式和灌服不同的中药煎剂，研究发现 这些中药煎剂能够提高 sod 酶的活性，降低 mda 的含量，对消除运性疲劳提高运动能力具 有很好的作用。由此可见，中药对氧化-抗氧化系统的双向调节作用，使中药在自由基医 学研究中充满魅力，同时。也在消除疲劳、提高运动能力方面提供了广阔的前景。 目前，有关具有抗氧化、抗疲劳的中药研究报道很多，而且也的确有不少真正的好药， 但是这么多的抗氧化疲劳中药中，哪一种最好呢？为了便于比较研究结果，在统一的实验 条件（包括研究对象、训练摸型、运动方式和运动时间等因素）下，我们从众多的抗氧化、 抗疲劳中药中选出了五种来进行对比实验研究，试图通过研究结果的比较，筛选出较好的 一种中药。更好、更科学更有针对性的发挥中药的作用，为运动员服务。 本实验研究以将 8 周龄的雄性健康小白鼠（昆明种）为实验对象，分别设置了各种中 药的安静组、力竭即刻组、力竭恢复组、安静对照组和运动对照组。第一周训练小鼠先适 应性游泳训练 20 分钟，连续 3 天，第 4- 6 天每天游泳比前一天增加 20 分钟；第二周的 第 1 天开始每天游泳 8o 分钟，连续两周；第四每天游泳 90 分钟；第五周每天负重 4%游 泳至力竭;第六周的第 1-4 天，每天负重 6%游泳至力竭，第五天各即刻组休息一天，而各 恢复组负重 6%游泳至力竭，第六天即刻组在负重 6%力竭运动后立刻处死；恢复组在力竭 运动后经 24 小时恢复后处死，对照组和各安静组同时处死，处理同上。选取小鼠肝组织 中的 sod 活性、mda 含量、肝、肌糖原含量、以及血清的 ck、got、gpt、bun、和 ldh 等指标来对实验动物的运动负荷和抗氧化能力进行测试。观察在统一的实验条件下， 对比各服药组的测试指标变化情况，试图从中筛选出抗氧化清除自由基效果更明显、更突 出的一种中药。 实验结果显示： 5.1 补充五种中药对小鼠食欲无不良影响，各服药组的小鼠生长发育、精神状态良好，排 除了体重对实验其它结果的影响因素。 广西师范大学体育学院 2006 届硕士论文韦金亮 ii 5.2 补充五种中药明显延缓小鼠游泳至力竭时间，从力竭延缓率来看，红景天的功效明显 优于其它四种中药，其功效顺序为：红景天组绞股蓝组银杏叶组葛根组丹参组对 照组。 5.3 补充五种中药红景天组血清 ck 增高的幅度明显小于其它组，红景天恢复组在 24h 后血 清 ck 基本恢复到正常水平。实验结果提示：在统一的实验条件下，红景天在清除过量自由 基，抗脂质过氧化的作用优于其他四种中药。 5.4 补充五种中药提取物各服药组之间血液 bun 浓度降低的幅度呈显著性差异 p0.05； 其 下降幅度的大小依次为：红景天组绞股蓝组银杏叶组葛根组丹参组对照组。 5.5 补充五种中药提取物红景天组的小鼠血清 ldh 的活性升高幅度大于其它四组，并呈显 著性差异 p0.05。其功效顺序为：红景天组绞股蓝组银杏叶组葛根组丹参组 对照组。说明红景天组的无氧代谢能力强于其它组。 5.6 补充五种中药小鼠血清 got、gpt 均明显增高，红景天恢复组与银杏叶恢复组、绞股 蓝恢复组、丹参恢复组、葛根恢复组之间存在显著性差异（pgingko leaf grouproot groupsalvia miltiorrhiza groupin group. 5.3 add selected five chinese medicine shan group serum ck increased significantly less than the range of other groups in the shan group resumed after serum ck 24h basic restoration to normal levels. experimental results presentatio: in a unified experimental conditions, the removal of excessive stress hongjingtian, guo oxidation resistant skin role over the other four chinese medicines. 5.4add selected five chinese medicine extracted fluid between blood embodied the medication group were significantly reduced by a concentration of sex pjiaogulan groupgingko leaf grouproot group salvia miltiorrhiza group in groups. 5.5 add the selected group of five chinese medicine extracted fluid hongjingtian reactive rise of the mouse serum ldh more than the other four groups, and a significant sexual differences pjiaogulan groupgingko leaf grouproot group salvia miltiorrhiza group in groups. note shan group deoxygenated metabolic capacity is better than other groups. 5.6 add selected five chinese medicine mouse serum got, gnp is obviously higher, hongjingtiangroup and the restoration of the restoration of ginkgo leaf group, jiaogulan restore group, salvia miltiorrhiza restore group, the root restore sexual significant differences exist between groups (p0.05) on shan in promoting liver function recovery best results. 5.7 add selected five chinese medicine to enhance mouse liver organizations got, gnp reactive have certain effects, hongjingtian group with gingko leaf, jiaogulan group, salvia miltiorrhiza 广西师范大学体育学院 2006 届硕士论文韦金亮 v group, root group are significant sex differences exist (p0.05), hints, five drugs in the shan organizations got mouse liver, gnp reactive effect on the best. 5.8 chinese medicine can complement selected five organizations to improve mouse liver znsod the reactive, taking hongjingtian extraction fluid group of liver znsod reactive rise compared with the other four chinese medicine extracted fluid significant sexual differences p0.05. experimental results indicate that the uniform conditions of the experiment, hongjingtian extraction fluid strong role in the anti- oxidation other four chinese medicines. 5.9 add selected five chinese medicines liver mda moore named after a marked decline in the concentration. the results showed the group has a clear anti- oxidation written chinese medicine functions, prevents cell membrane oxidation of the skin, the effective protection of mouse liver, thereby improving capacity mouse movement, mouse swimming to try to delay the time and the shan group and other groups with a significant sexual differences p0.05. 5.10 add five different substances to enhance the glycogen content is useful mouse, the mouse is better than a control group glycogen content p0.05. in this five different drugs to the original reserves gan tang shan network for the best effect, compared with other groups of a significant difference p天门冬酸枣当归红人参，单味药对oh -的清除效率为红人参粉剂生地当归 天门冬酸枣仁。平松绿等对柴胡桂枝汤研究结果表明，该汤 12 .5g-12.5mg/ml 剂量依 赖性地清除 o2 -450mg/ ml 还能清除 50%的oh-和过氧化物中间基。胡天喜等研究表明，云 芝糖肽既可清除 o2 -又可清除 h 2o2，绞股蓝和 sod 只能清除 o2 -，cat 和 fdp 只能清除 h 2o2。 广西师范大学体育学院 2006 届硕士毕业论文韦金亮 5 陈玺报道 19 临床研究表明健脾益气方有良好的清除自由基作用，对羚自由基(oh -)和超 氧自由基(o2 -)的清除率分别为 76%和 38%并可提高体 sod 的水平。 已用于临床的脂溶性抗氧化剂 ve、va和胡萝卜素，都能清除自由基和抑制过氧化物生 成。ve为酚类化合物，是最重要的生物自由基清除剂之一，广泛分布在植物特别是油料作 物种子中。植物中还广泛存在着其他酚类天然抗氧化剂如芝麻酚、棉酚，大豆中的染料大 黄酮、大豆黄酮葡萄苷、黄豆苷元以及其他植物所含的类黄酮、香豆素、丁子香酚，还有 香辣调料中的含油树脂或没食子酸等与单宁结构相似的物质。还发现芝麻中的新木聚糖类 似物和按树等植物中的一种鞣花酸、二酮及绿茶中的茶多酚均有很强的抗氧化作用 20。 2.22.2 中药提取物的研究中药提取物的研究 大西基代研究结果表明，艾燃烧生成物的甲醇提取物有自由基清除作用，而且比艾的 甲醇提取物强 21 。研究中药提取物有效成分的作用，如对红景天甙、人参皂甙、淫羊霍 甙、阿魏酸、枸杞多糖、银杏叶提取液、白芍提取物、绞股蓝皂甙、天然植物成分提取液、 葛根素、葛根总黄酮、丹参液的研究。这些物质在使用上已完全不同于传统中医的施治原 则，与西药用法相似。中药单体的化学结构清楚，作用部位与药理机制比前两者容易搞清 楚22， 而且， 我国的一些运动饮料的主要中药添加剂中已用红景天提取物、 绞股蓝提取物， 对这两种中药的研究的频率较多，很早就进行了各方面的研究。银杏叶提取物、丹参提取 物和葛根提取物是比较新的研究，在中医药领域里研究得比较彻底。 2.3 中药抗运动性疲劳的研究前景中药抗运动性疲劳的研究前景 应用中药抗运动性疲劳是运动医学研究的一个热点.中药己成为一种重要的运动营养 补充品. 23 广泛研究单味中药抗运动性疲劳的作用，在中医理论指导下辨证施治，根据不 同的运动性疲劳类型，研制和应用不同的单味中药满足运动员疲劳状态下的生理需求，提 高机体疲劳状态下的调节作用，迅速缓解疲劳，对提高运动训练机能水平和比赛成绩具有 积极的意义. 3、中药与运动饮料的研究进展、中药与运动饮料的研究进展 3.1、运动饮料及其对运动能力的、运动饮料及其对运动能力的影响影响 运动饮料的研制约起始于 20 世纪二十年代，到 1965 年，美国肾脏和电解质研制中心 的罗伯特凯特博士为佛罗里达大学橄榄球队研制的运动饮料引起了人们的重视.被称为 “gatorade饮料。后来.世界各国都相继开展了运动饮料的研制和应用。20 世纪八十年代. 国际上将这类饮料正式称为运动饮料.成为继碳酸饮料、可乐和沙士、发酵乳饮料、果汁饮 料后的第五代饮料.其主要成份是含有糖和电解质.旨在校正体液容量.调节体内电解质和酸 碱平衡.及时补充能量.改善体温调节和调节体内代谢过程等。 运功饮料是针对运动时能量消耗、 机体内环境改变和细饱功能降低.为了补充能量和体 液而研制的.旨在通过刺激饮用和快速吸收来校正体液容量.调节体内电解质和酸碱平衡.及 时补充能量.改善体温调节和体内代谢过程等。运动饮料的主要成分是糖和电解质，其主: 要类型有： （1）为了防止运动中水盐代谢紊乱而配制的含碱性电解质饮料;（2）以补充糖 广西师范大学体育学院 2006 届硕士毕业论文韦金亮 6 和热能为主，供耐力运动员饮用的糖饮料。 3.2、我国运动饮料的研发现状、我国运动饮料的研发现状 运动饮料在我国起始于 1980 年代初.广东健力宝集团以碳酸型运动饮料一度成为功能 饮料市场上最初的先锋和市场领导者.在 1984 年洛杉矶奥运会上八面威风.被誊为“东方 魔水”,并取得了几年后最高销售收入 40 多亿元的可观的业绩 24。但随后跟进市场的一些 如“维力 ， 、 “沙维康” 、 “奥华”等运动饮料只是走了个过场。1995 年风靡世界、占据全 球能量型功能饮料市场份额 50%以上的泰国“红牛”能量饮料来到中国.开始传播能量饮料 的概念.经历了启动期、增长期和稳步发展期.日前正面临着“新飞跃”阶段。在 2003 年 “非典” 对消费市场的刺激下. “红牛” 产品销售持续走红.2004 年上半年销售接近 1 亿罐. 比 2003 年同期增长 60%.预计 2004 年销售将突破 2 亿罐.将接近“红牛”在美国和英国的 销售水平。同时“维体” 、 “魔力 ， 、 “舒跑” 、 “人际动源” 、 “脉动” 、 “激活” 、 “康比特” 、 “尖叫”等各种品牌的运动饮料、维生素饮料等功能饮料如雨后春笋般涌入市场.产品也 得到了消费者的青睐.成为 2003 ,2004 年度饮料工业发展的又一个亮点。说明经过一定时 间的市场培育.功能饮料、运动饮料的市场在中国己经开始全面启动。由此可见.随着我国 人民生活水平的提高、生活节奏的加快.消费收入的增长.现在的消费观念与 1980 年代相 比己不可同日而语了.人们更注重自身的健康.更关注生活质量的提高.人们的需求从生活 物质的基本满足、丰富有余到以健康为本，不仅追求身体的健康.也开始重视心理的健康. 功能饮料的消费观念逐渐走向成熟。因此.适时地开发那些具有增强免疫力、抗疲劳、提 高运动能力等功能的功能饮料.既迎合了现代消费者的消费需求，也符合当今软饮料的发 展方向，预计市场前景广阔 1。 3.3、中药在运动饮料的运用、中药在运动饮料的运用 延缓、 消除运动性疲劳,提高运动能力,是体育工作者最关注的焦点之一.长期以来,学者们 通过实验研究证明中药具有安全、有效、无毒副作用的良药。目前中药在运动饮料的研究 主要有：彭肃惠25等通过以菊花、金银花、山楂、黄芪、大枣为主要原料，配以蜂蜜和砂 糖，利用煎煮的方法，研制出兼具治疗与保健功能的中药复合饮料。感官评定、理化指标 测定、卫生、毒理学试验，动物耐缺氧试验、抗疲劳作用试验和抗衰老实验结果表明:该饮 料能提高机体免疫、抗疲劳、抗窒息和抗衰老能力。鞠国泉 张金良 26，以红花提取液配以 电解质、维生素、糖、香料等研制的运动饮料经动物实验表明具有显著减少运动引起的血 乳酸升高，有消除运动引起的肌肉疲劳，增强耐力和抗缺氧的功效。郑书勤等 27，梅参运 动饮料是以乌梅汁为基质，以绞股蓝皂甙为主要生物活性物质的纯天然植物饮料。通过实 验观察了梅参运动饮料对游泳小鼠及竞走运动员的抗疲劳效果。 结果表明:实验小鼠游泳至 力竭的时间比运动对照组明显延长，且骨骼肌 lpo 含量也明显降低。实验组运动员服用饮 料后血乳酸为 4mmo1/l 时的功率明显高于饮用前及对照组， 且有氧运动后 15 分钟心率恢复 比对照组快。 广西师范大学体育学院 2006 届硕士毕业论文韦金亮 7 4、红景天、绞股蓝等五种中药抗氧化、消除自由基的研究、红景天、绞股蓝等五种中药抗氧化、消除自由基的研究 前人的研究表明， 补充抗氧化剂可提高机体抗氧化能力。 目前有关中药提取物抗氧化、 消除自由基的研究主要有：杨阳等(2000)报道，绞股蓝总皂苷具有对抗力竭运动后自由基 加强的作用，可改善红细胞的运氧能力28。丁莉 29 等发现银杏叶提取物可使小鼠肝组织 sod. gsh- px 活性显著增加，mda 水平下降对防止线粒体及细胞受自由基损伤及时清除 自由基有重大意义；胡景华30在红景天对小鼠抗疲劳作用的研究中，表明红景天有增强血 清 ldh 活力的作用，加速分解乳酸，血乳酸浓度下降，降低耗氧速率，增加供养作用， 明显延长负重小鼠游泳时间，运动耐力得到显著延长和持续，增强肝糖原、肌糖原的储备， 具有明显的抗疲劳作用；孟申等31进行体内实验表明，大白兔经液氮冷冻致脑伤成脑水肿 后，其血清及脑组织中的 sod 活性明显降低，lpo 含量明显上升，静脉注射葛根总黄酮 后，血清、脑组织中 lpo 含量有明显降低，sod 活性明显升高,说明葛根总黄酮具有抗氧 化作用；卢健32等从红细胞自由基代谢的角度对丹参的抗氧化作用进行研究，发现丹参能 明显提高大鼠红细胞超氧化物歧化酶(sod)活性，清除 02-，降低红细胞膜脂质过氧化终产 物丙二醛（mda）含量，保护细胞免受脂质过氧化损伤。另外在我国的一些运动饮料的主 要中药添加剂中已用红景天提取物、绞股蓝提取物、银杏叶提取物、丹参提取物和葛根提 取物等，因此，本实验选用的五种中药具有可比性。 综合各研究结果，可得出以下结论:外源补充抗氧化剂显示了抗氧化的积极作用，但对 于运动员和健身人员，在机体不缺乏的情况下额外补充抗氧化剂对运动成绩、训练效果及 损伤与疲劳恢复等，是否有积极的影响，目前尚缺乏确凿的证据。 5、红景天、绞股蓝等五种中药的研究概况、红景天、绞股蓝等五种中药的研究概况 5.1. 红景天的研究概况红景天的研究概况、 景天科红景天属的植物，有着与人参、刺五加相似的滋补强壮、扶正固本功能，但前 者兴奋作用过强，后者能引起便秘，均不宜久服.而红景天则无上述副作用，在某些方面红 景天优于这两种药物，在国外被视为黄金植物，格外受到重视，还具有益气活血，通脉平 喘的功能，主要用于治疗气虚血瘀，胸痹心痛，中风偏瘫，倦怠气喘等病症。已有的研究 显示，红景天有抗缺氧、抗寒冷、抗疲劳、抗微波辐射等显著功效，而且还具有延缓机体 衰老，防止老年疾病等功效。动物实验也表明，红景天能提高机体耐缺氧能力和抗疲劳能 力，提高抗寒力，降低整体耗氧量，增加小白鼠肝糖元含量，提高大鼠红细胞和肝脏的过 氧化物岐化酶(sod)活性，降低血浆、心肌、脑的过氧化脂质(lpo)含量 33。红景天应用 范围广泛，疗效显著，副作用小，价格便宜，需求量大。 5.1.1 红景天的化学成分红景天的化学成分 红景天已知的化学物质有 40 多种，它们主要是脂肪，蜡，蛋白质，水溶性挥发油，果 胶，谷甾醇，丹宁，苯三酚，间苯三酚，蒽醌，草酸，氢醌，对苯二酚，阿魏酸，儿茶酸， 儿茶酚；香豆素类有香豆素(coumarin)，7 羟基香豆素(umbelliferone)，莨菪亭(scopoletin)； 黄酮类有槲皮素(queretin)，山奈酚(kaempferol)，花色甙(anthoeyan)；甙类有云杉素(picein)， 广西师范大学体育学院 2006 届硕士毕业论文韦金亮 8 茵芋甙(skimmin)，异槲皮甙(isoqueretin)，芦丁甙(rutin)，熊果甙(arbutin)，红景天甙 (salidroside)，黄酮甙，肉桂醇甙等。此外还有有效单体二苯甲基六氢吡啶(pyridrde)，内酯 化合物 rlactone34等。 红景天甙是红景天研究最多的已知有效成分,迄今已报道的近 20 种红景天植物化学研 究结果显示,约有 14 种含红景天甙.其提取分离方法为：将红景天植物根及根茎的酒精提取 物的水溶液经石油醚、氯仿、醋酸乙酯顺次处理后再用正丁醇提取，回收正丁醇得膏状物， 经 al2o3柱层析，用氯仿乙醇洗脱，回收洗脱液得粗结晶，以乙醇二氯乙烷重结晶即得35. 经明海泉改进后,将酒精提取物用水和醇再处理后直接上 al2o3柱层析，使用氯仿乙醇洗脱 和重结晶即得。其合成方法是：酪醇和溴代四乙酰葡萄糖在无水乙醚中以碳酸银为催化剂 生成四乙酰红景天甙后，脱乙酰基即得红景天甙36.,收率 20%，甙元酪醇合成常用酪氨或 对甲氧苯乙酸为原料。 5.1.2 红景天的药理研究红景天的药理研究 5.1.2.1 抗缺氧、抗疲劳作用抗缺氧、抗疲劳作用 明海泉37，将红景天素注射给小鼠(0. 005 ml/ g)，5 min 后放置在密封容器中，其出 现惊厥的时间延长，生存时间延长 1 倍。.赵贺玲等38通过红景天甙对缺氧状态下兔肺动脉 平滑肌细胞增殖和 c- fos, c- myc 原癌基因表达的影响，证实红景天甙可显著抑制缺氧对 pasmc 增殖和 dna 合成的促进作用， 从而可能对缺氧性肺动脉壁增厚和肺动脉高压的发 生与发展起防治作用。急性中、重度低压缺氧后，大鼠血浆内皮素(et)含量明显升高，机 体血液循环系统 no 分泌减少，张慧等39通过观察红景天对急性低压缺氧大鼠内皮素分泌 的干预，发现红景天对机体 et 异常分泌和释放有明显的调控作用，增加 no 的分泌，使 急性低压缺氧导致的机体 no/et 比值下降， 在一定程度上得以恢复。 红景天可以显著提高 在模拟海拔 4 300 m 高度人体 pw c170和无氧阈，降低心率，提高人体低氧劳动能力40。 胡景华41在红景天对小鼠抗疲劳作用的研究中， 表明红景天有增强血清 ldh 活力的作 用，加速分解乳酸，血乳酸浓度下降，降低耗氧速率，增加供养作用，明显延长负重小鼠 游泳时间，运动耐力得到显著延长和持续，增强肝糖原、肌糖原的储备，具有明显的抗疲 劳作用，动物试验结果提示该药能改善心脑等重要脏器组织中的有氧代谢过程，能显著提 高动物肝、心肌糖原的含量及提高动物心、肺组织中心钠素的水平，从而减轻因缺氧导致 的动物脏器损害。明海泉37等给紧张环境下的小鼠注射红景天素 0. 005 ml/ g 后可观察到 兴奋作用，小鼠爬杆试验及负重爬杆试验时，均能显著增加持续时间，提高工作效率。 5.1.2.2 抗病毒、抗肿瘤作用抗病毒、抗肿瘤作用 红景天多糖抗柯萨奇 b5(coxb5)病毒作用在于通过某种机制作用于细胞膜， 阻止病毒 颗粒的吸附。在实验中，病毒对照组细胞表面在电镜下出现破碎与孔洞，而红景天多糖组 与正常细胞形态相似，细胞膜完整无缺损。但红景天多糖对 coxb5 病毒无直接灭活作用 42红景天能提高小鼠士的宁中毒后的生存率(达 50%。能抵抗棒状杆菌毒素。增加服用烈 性毒药氮化钠后的生存率，对抗破伤风类毒素等各种细菌毒素43. 广西师范大学体育学院 2006 届硕士毕业论文韦金亮 9 红景天素能抑制体外培养肝癌细胞(772)和小鼠移植肝癌(h 一 22)的生长繁殖，降低 dna 的合成，增高糖元含量，提高荷瘤小鼠生存质量和延长其生存期。流式细胞仪检测结 果，红景天能阻抑体外培养肝癌细胞于 s 期44。一定剂量的红景天素(5 ug/m 1)对体外培 养的肿瘤细胞(s-180)有抑制作用，而对非瘤细胞不具毒性作用。表明红景天对瘤细胞具有 相对选择作用45。 5.1.2.3 对机体双向调节作用对机体双向调节作用 生物的机体是一个平衡的整体，每一项生物指标都有其稳定的范围，一旦超过了这个 范围，就会有一定的病态表现。双向调节就是使偏高正常指标恢复或趋向于正常。红景天 对于维持机体平衡，进行双向调节有一定的作用。通过遥测动物脑电波观摩表明，使用红 景天能使药物引起的兴奋型或抵制型脑电波恢复正常46。在动物试验中，红景天对肾上腺 素型高血糖有非常显著的抑制作用，又能显著抑制胰岛素的降低血糖的作用，并呈剂量依 赖型。红景天能明显对抗肾上腺素引起的升血压作用和组胺引起的降血压作用。红景天能 明显提高小鼠在高温和寒冷条件下的生存率47。低温条件下，在用红景天组与不用药组的 人体免疫功能比较中，不用药组暴寒 1 0 d, n k 活性、il-2 产生能力、m il-2r 表达水平 低于常温条件，暴寒 24 d 恢复正常，达到自然冷适应;用药组 10 d 已达到正常水平。表明 红景天可增强低温条件下人体抗寒能力，加速冷适应能力的建立48 5.1.2.4 抗不良刺激作用抗不良刺激作用 红景天可对抗 x 线辐射、微波辐射对机体的影响。减少 x 线辐射引起的脾细胞破坏、 外周血畸形红细胞的产生以及心脏和肝脏 lpo 的产生， 显著降低辐射引起的骨髓嗜多染红 细胞微核产生率。电离辐射可使生物体内生成外源性自由基。由于自由基堆积可诱发组织 细胞产生生物大分子自由基，从而使正常的化学结构发生破坏或交联，随结构的破坏或交 联层次的逐步扩展会损伤正常组织细胞的形态和功能的完整性49。经微波辐射后的小鼠， 脑内单胺类递质、脾脏及胸腺内环磷腺苷 camp.淋巴细胞转化率、血清溶血素等出现抵制 性变化，使用红景天可使之恢复正常，具有扶正作用50。 5.1.2.5 抗衰老作用抗衰老作用 尹桂山51等研究发现使用过红景天后的动物，其胸腺指数(即胸腺重/体重)和 igg 含量 增加，大脑皮质、海马和小脑皮质血过氧化脂质(lpo)的形成减少，超氧化物歧化酶(sod) 活性提高，血脂降低，血中 camp 升高。根据目前人们公认的 harman 提出的衰老理论， 随着年龄增长引起的退行性变化是由自由基的副作用引起的，红景天可通过有效清除自由 基达到抗衰老作用。 5.1.2.6 对学习记忆的影响对学习记忆的影响 红景天能增强脑干网状系统的兴奋性，激活皮质感觉运动区、视觉区以及皮层下主要 结构的自发活动电位，增强对光、电刺激应答的电位改变。对喂食红景天根浸液的小鼠脑 组织观察，可看到脑海马区、视上核细胞体积增大，树突伸长，视上核嗜碱性颗粒增多。 这说明红景天可以增强脑的机能，并有可能使其向年轻化的方向转化52。红景天能使小鼠 广西师范大学体育学院 2006 届硕士毕业论文韦金亮 10 在游泳条件下 5-h t 含量正常化，即红景天药物可使已偏离正常水平的中枢神经系统递质 含量得到纠正或达到正常水平53。通过一次性训练，回避性条件反射一跳台试验方法，证 明红景天能对抗宕碱(scpl)引起的记忆障碍和乙醇所致记忆再现障碍54。 5.1.2.7 心血管系统的影响心血管系统的影响 心脏既是一个能量器官，也是除脑以外对缺氧最敏感的器官。心脏工作的能源绝对依 赖其氧的供给。红景天抗缺氧的功效已有共识。张早华等55观察了红景天胶囊对实验性心 肌缺血合并心衰大鼠的影响，在对大鼠颈外静脉插管注人脑垂体后叶素(0.5u/kg)及心得安 (5mg/kg)的实验中，发现心电图出现 st 段抬高、t 波升高、心率加快、qrs 波峰降低等异 常改变。红景天胶囊能有效防止实验动物心电图的上述改变，提示该药对急性心肌缺血合 并心衰有一定的预防作用。 近年来， 随着心钠素(anp)的基础研究和临床研究的不断深人， 人们认识到心脏不仅是 动力器官，而且是重要的内分泌器官。研究发现红景天具有一定的抑制心脏内分泌功能老 化的作用56实验结果显示，老年大鼠心房 anp 基因表达较青年大鼠明显降低，anp 基因 表达的衰退即心脏内分泌功能衰退可能是心脏老化的一项重要标志，也可能是老年易发生 高血压、功能障碍等疾病的因素之一。 段径云等57以垂体后叶素及结扎冠脉主干引起大鼠心肌缺血模型，观察复方红景天片 的药效。结果显示复方红景天片 3.6g/kg, 1.8g/kg 和 0.9g/kg 灌胃给药，明显对抗垂体后叶 素引起的大鼠心肌缺血性 st 段、t 波抬高，明显降低结扎冠脉主干引起的 st 段抬高、减 少缺血面积、降低血清肌酸酶(cpk)乳酸脱氢酶(ldh)水平，明显降低血液粘度和血小板粘 附聚集性，改善大鼠血液流变学状态。 5.1.3 红景天的毒性研究红景天的毒性研究 红景天毒性很小，小鼠皮下注射红景天素 ld 50=28. 6(25.2-32.6) ml/kg，红景天甙给 予 1 000 m g/kg，相当于红景天素 50 ml/kg，亦不引起毒性反应 58。 5.1.4 红景天与运动性疲劳红景天与运动性疲劳 冯慎远等59 、60报道， 甘肃产狭叶红景天能显著提高大鼠游泳耐力， 耐缺氧能力;能使给 药大鼠肝糖元含量、谷胱甘肽过氧化物酶活性显著增高，以适应运动训练时物质代谢的需 要;给耐力训练大鼠红景天，并未引起小脑 purkinj。细胞线粒体数目和体积发生显著变化， 但比不训练不喂药大鼠的线粒体数目和体积显著增加，提示狭叶红景天有双向调节作用. 姜平等61.的实验表明，红景天能提高机体耐缺氧能力和抗疲劳能力，提高抗寒力，降低整 体耗氧量，增加小鼠肝糖元含量，提高大鼠红细胞和肝脏过氧化物岐化酶(sod)活性，降 低血浆、心肌、脑的过氧化脂质(lpo)含量.苏全生等62对人体运动能力的研究表明，红景 天使受试者 pwc170。值和 v02max值显著提高，心率明显低于服药前，动脉血压变化幅度 减少，提示受试者心肌耗氧量降低，心力贮备改善;同时，受试者运动血乳酸值显著减小， 表明该药对改善无氧耐力水平有良性作用.尹绍云等63的研究结果显示，复方红景天 (920402)能明显延长小白鼠在减压低氧条件下(模拟海拔10 000 m)游泳存活时间， 延长20%; 广西师范大学体育学院 2006 届硕士毕业论文韦金亮 11 使其血乳酸含量明显下降， 骨骼肌细胞 atp 含量与线粒体氧化磷酸化(呼吸控制率 rcr. p/ o)明显增高;该复方对低压舱(模拟海拔 4300 m)受试者的 p wc170。提高 13.2%，无氧阈提 高 14.4%，其对高原现场受试者服药后第 1 , 4, 7 天的 p wc170。分别提高 14.0%, 11.0%和 3.9%.可见该复方能从整体上提高机体在减压低氧条件下的运动能力. 5.2 绞股蓝的研究概况绞股蓝的研究概况 绞股蓝 gynostemma pentaphyllum (thunb.) mak.为胡芦科植物绞股蓝的根状茎或全草， 又名七叶胆，绞股蓝全草中含有人参皂甙、i 氨基酸、维生素、低聚糖及铁、钙等人体所 需的多种微量元素，味苦，性寒，无毒。还含有丰富的绞股蓝皂甙、黄酮、多糖、人体必 需的 8 种氨基酸和多种微量元素64 ,65。具有消炎解毒、祛痰止咳、镇静催眠、滋补强身和 降血脂之功效。 5.2.1 绞股蓝的化学成分绞股蓝的化学成分 5.2.1.1 绞股蓝皂甙的研究状况绞股蓝皂甙的研究状况 20 世纪 70 年代以来，国内外学者采用现代分离技术和分析技术对绞股蓝化学成分进 行广泛深人的研究。现已从该植物中分离出 80 多种与人参皂甙类似骨架的达玛烷型绞股 蓝皂甙，其中绞股蓝皂甙一 3 与人参皂甙 rbl 完全相同，绞股蓝皂贰一 4，一 8，一 7 的化 学结构则分别与人参皂甙 rbl,rd,f2 相一致65- 68 5.2.1.2 绞股蓝中粗蛋白的含量绞股蓝中粗蛋白的含量 徐翠凤等69、陈震等70研究证明，在绞股蓝中现已检出 17 种氨基酸，其中人体必需 的 8 种氨基酸，除蛋氨酸和苯丙氨酸的含量稍低外，其它 6 种含量都较高，比例基本符合 人体需要。 5.2.1.3 绞股蓝中矿物质元素的含量绞股蓝中矿物质元素的含量 绞股蓝中常量及微量元素含量因产地而异，这与当地土壤中的矿物质含量相关，但各 地生产的绞股蓝测量结果表明，绞股蓝中含人体所需、增强人体免疫功能、抗肿瘤及抗一 些疾病的锌、铝、铁、铬、硒等微量元素。 5.2.1. 4 绞股蓝其它化学成分的研究绞股蓝其它化学成分的研究 现已检测出绞股蓝中含有黄酮、多糖、有机酸等71 、72。我们已知道大豆异黄酮、枸杞多 糖等具有一定的生理活性，而绞股蓝中的黄酮、多糖等是否具有类似作用的生理活性，还 有待进一步的研究。 5.2.2 绞股蓝的药理学研究绞股蓝的药理学研究 绞股蓝有效成分是多种绞股蓝皂甙(gps)。 绞股蓝皂甙对人体具有强壮、 耐缺氧、 耐高温、 抗疲劳、增强免疫力等多方面作用73。 5.2.2.1 抗衰老、抗诱变作用抗衰老、抗诱变作用 谢龙74等给因患高脂血症而长期服用 gps 的老人，有相当部分感到精神好转，记忆力 加强，食欲增加. gps 还能延长果蝇寿命，使果蝇从卵羽化为成虫的时间缩短，又能延长成 虫期寿命，表明绞股蓝即促进了生长发育，又延缓了衰老过程。其机理复杂多样，但主要 广西师范大学体育学院 2006 届硕士毕业论文韦金亮 12 与其提高 sod 活性，提高肌体免疫力有关75 绞股蓝水煎剂对环磷酞胺所致小鼠骨髓细胞姐妹染色互换（sce）频率增高有对抗作 用。gps 能显著抑制环磷酞胺诱发的小鼠微粒染色体畸变，精子畸变76。以阿地平、柔红 霉素、迭氮化钠、丝裂霉素 c 作为沙门菌诱变菌株因子，观察 gps 的抗诱变作用发现， gps 有较强的抗诱变力且具有明显的量效关系77。 5.2.2.2 提高免疫提高免疫 张永祥78.对皮下注射 gps 发现其脾细胞丝裂原 cona 诱导的增殖反应明显增强，以 10 mg/ kg.d 剂量最显著。 同时对去甲肾上腺素、 皮质酮的观察提示 gps 对免疫反应的影响 与作用于神经内分泌免疫调节网格，进而发挥免疫增强作用具有密切关系 5.2.2.3 神经系统神经系统 绞股蓝能对抗利血平化对动物的抑制作用，改善体温、活动性、体重的明显下降，抑 制海马5一 基吲哚已酸(5 - hiaa) . 5 - ht的比值明显升高， 使利血平化小鼠单胺递质回升。 这提示 gps 可能发展为一种新型抗精神病药79。 5.2.2.4 对心、血管、脑方面的作用对心、血管、脑方面的作用 绞股蓝能对抗氧自由基对心脏的损伤，保持心肌细胞膜的完整性80，改善急性心肌缺 血时心肌舒张功能,还能对抗心肌缺血所致心肌不可逆坏死，使 sod 活性升高，心肌释放 pck 减少81，这些药理作用类似于人参皂甙 gin。绞股蓝水提物能松驰主动脉平滑肌，降 低血压，对自由基损伤免主动脉舒张功能有保护作用82。能明显改善脑血管 ach 舒血管反 应，提高 sod 活性及 no2 - 含量，抑制血管壁丙二醛生成对氧自由基所致，脑血管痉挛具 有保护作用83 绞股蓝对脑血缺血有较好的保护作用，能显著提高头脑细胞对急性缺氧的耐受性，这 可能与其能提高 sod 活性，降低 pla2 活性有关84 、85。 5.2.3 绞股蓝的毒性研究绞股蓝的毒性研究 急性毒性试验绞股蓝皂甙小鼠腹腔注射 ld50 为 755mg/kg。大鼠腹腔注射 lds50 为 1. 85mg/kg；口服给药 log/kg 均无毒性，超过 3ld50 测定限度。 5.2.4 绞股蓝与运动性疲劳绞股蓝与运动性疲劳 方子龙、 谢敏豪等86结合运动训练， 就绞股蓝皂甙(gps)对人体的抗疲劳作用进行了研 究。实验观察到 gps 具有以下功能:(1)降低递增负荷运动后 1 0 min 时的血乳酸水平，减少 运动后乳酸堆积;（2）提高 10 s 平均无氧功率，提高磷酸原系统供能的能力;（3）防止血 清酮/皮质醇比值降低，防止运动性低皋酮/高皮质醇;（4）提高血清 igg 水平，促进免疫功 能，提高机体的抵抗力。 5.3 银杏叶的研究概况银杏叶的研究概况 银杏为银杏科银杏属落叶乔木,为古代孑遗植物,有裸子植物活化石之称。其叶、果实、 种子均有较高的药用价值。两千年前的神农本草经即有记载,种子称白果,功能润肺止 咳;银杏叶镇咳止喘,清热利湿,用于治疗肺痨咳嗽、哮喘等。 广西师范大学体育学院 2006 届硕士毕业论文韦金亮 13 5.3.1 银杏叶的化学成分银杏叶的化学成分 银杏的化学成分很多,国内外学者已鉴定出银杏的种仁含蛋白质 6.4%,脂肪 2.4%,碳水 化合物 36%,钙 10mg%,磷 218mg%,铁 1mg%,胡萝卜素 320g%,核黄素 50g%以及多种氨 基酸。银杏叶的有效成分主要有黄酮甙和二萜内酯两类。银杏叶黄酮甙主要有槲皮素甙、 山奈酚甙及双黄酮类化合物,银杏叶中的双黄酮成分为银杏双黄酮、 异银杏双黄酮及 7- 去甲 基银杏双黄酮。到目前为止,从银杏叶中共提得 6 个萜类化合物:银杏苦内酯 a、b、c、m、 j 和银杏新内酯,它们都具有二萜或半萜结构,银杏内酯分子具有独特的十二碳骨架结构,嵌 有一个叔丁基和 6 个 5 元环,包括一个螺(44)壬烷,一个四氢呋喃环和 3 个内酯环,常用代号 bn52020、bn52021、bn52022、bn52023、bn52024,分别代表银杏内酯 a、b、c、m、 j,其中 bn52021 在银杏中的含量为 0.2%。 这些成分对银杏的抗氧化和清除自由基作用具有 主要贡献。另外还含少量长链酚类、水溶性多糖、聚戊烯醇等。 5.3.2 银杏叶的药理学研究银杏叶的药理学研究 5.3.2.1 对心、脑血管系统的作用对心、脑血管系统的作用 实验发现,用 egb761 处理离体的缺血再灌注心脏,与对照组比较,心肌内抗坏血酸含量 上升,脱氢抗坏血酸下降87.治疗麻醉的心脏缺血再灌注大鼠后血浆及心肌组织中的脂质过 氧化物的产生较对照组明显下降,而 cuzn- sod 水平增高88.周君富等用银杏叶黄酮治疗老 年心绞痛患者,检测治疗前后患者的红细胞 sod 活性,过氧化脂质(e- lpo)含量及血清过氧 化脂质(p- lpo)含量,治疗后患者的 e- sod 平均活性显著高于治疗前,p- lpo 和 e- lpo 平均 含量低于治疗前,并接近正常对照组。由此可见,银杏叶制剂无论在体内外都具有较强的抗 氧化、抗自由基损伤的作用89。 :章家胜等研究银杏叶总黄酮对小鼠脑、心缺氧的保护作用,结果:银杏叶总黄酮在 25 100mg/kg 范围内,能显著降低脑、心组织中 mda 和 no 含量,故其保护作用可能与抑制脂质 过氧化及减少 no 有关 90。.no 能扩张血管,增加器官的血流量,但也有一个不对称电子,也 属于自由基,并可与羟自由基形成细胞毒作用很强的二氧化氮自由基,在缺血缺氧的病理 过程中占有重要地位。 5.3.2.2 银杏叶对肝损伤的保护作用银杏叶对肝损伤的保护作用 杜文华等给大鼠腹腔内注射内毒素致大鼠急性内毒素血症时,肝组织、 肝细胞和肝枯否 氏细胞内、肝枯否氏细胞培养上清液中血小板活化因子(paf)含量显著增高,但肝细胞培养 上清液中 paf 未见明显升高,并见肝组织 mda 明显升高,atp 显著降低。 银杏内酯 b5mg/kg 于攻毒前 15min 注射,可显著提高肝组织 atp 的含量,降低 mda 的水平,但不影响 paf 的升 高。 表明 paf 是内毒素诱导的肝组织损伤、 肝功能障碍的重要介质,银杏内酯 b 可能是 paf 受体拮抗剂91。李薇等应用复方银杏叶冲剂(银杏叶 20g,黄芪、当归、丹参各 8g,黄芩、虎 杖、白花蛇舌草、鳖甲各 5g,冬虫夏草 2g,川芎 4g,)治疗慢性乙型迁延性和活动性肝炎早期 纤维化患者 86 例,疗程 3 个月。结果:超氧化物歧化酶总量(tsod)、锰超氧化物歧化酶 (mnsod)、 脂质过氧化物 mda 治疗前均高于正常值,说明人体感染乙肝病毒