主管检验技师临床检验基础年讲义第三章白细胞检验.doc

白细胞检查【概要】三类五种单核细胞（M）淋巴细胞（L）白细胞计数【定义】指测定单位体积的血液中各种白细胞的总数。【方法】显微镜计数法和血液分析仪计数法【原理】显微镜计数法用白细胞计数稀释液（多为稀乙酸溶液），将血液稀释一定倍数并破坏成熟红细胞后，滴入血细胞计数盘中，在显微镜下计数一定范围内白细胞数，经换算求得每升血液中各种白细胞显微镜计数法和血液分析仪计数法【操作方法】显微镜计数法0.38ml稀释液20l血混匀（棕褐色）充池静置23min计数（低倍镜，四角4个大方格）计算【质量控制】1.经验控制血涂片上WBC分布密度与WBC数量关系（1）与红细胞数比较：红细胞数/白细胞数约为5001000：1。（2）与血涂片白细胞分布密度一致性。血涂片上WBC数/HPWBC（109/L）血涂片上WBC数/HPWBC（109/L）24（47）610（1012）46（79）1012（1318）2.计数误差（1）技术误差：通过熟练操作、仪器校准而减小，甚至避免。（2）固有误差：是计数室内每次血细胞分布不可能完全相同所致的误差。若白细胞数太低（3109/L），可增加计数量（数8个大方格白细胞数）或减低稀释倍数，太高（15109/L），可增加稀释倍数。（3）有核红细胞：正常情况下，外周血中不会出现有核红细胞。若出现大量有核红细胞，其不能被白细胞稀释液破坏，计数时与白细胞一同被计数，使白细胞计数值假性增高。校正公式为：校正后白细胞数/L校正前白细胞数（Y为白细胞分类计数时，100个白细胞中有核红细胞的数量）。【参考值】成人：（410）109/L。新生儿：（1520）109/L。6个月2岁：（1112）109/L。儿童：（512）109/L【临床意义】由于中性粒细胞占白细胞总数的50%70%，所以白细胞计数与中性粒细胞计数的临床意义基本上一致。白细胞分类计数（DC）【检测原理】求得各种白细胞的比值（百分率）；各类白细胞的绝对值（白细胞计数值白细胞分类计数%）。【质量控制】1.影响分类计数准确性因素（1）细胞分布不均：体尾交界最佳，“城垛”式移动。【质量控制】主要因素（2）形态识别差异杆状核和分叶核诊断标准差异；单核细胞和大淋巴细胞鉴别能力差异；染色较差的涂片，嗜碱性粒细胞和中性粒细胞难以区分。2.影响分类计数精确性因素临床上如需观察细胞数量变化作为诊治指标时，应提高细胞计数量，如下表。如表白细胞总数与分类白细胞数的关系白细胞总数（109/L）应分类白细胞数（个）白细胞总数（109/L）应分类白细胞数（个）4501002030300410100304001020200【参考值】成人白细胞分类参考值百分率（%）绝对值（109/L）中性杆状核粒细胞15（0.040.5）中性分叶核粒细胞5070（27）嗜酸性粒细胞0.55（0.020.5）嗜碱性粒细胞01（01）淋巴细胞2040（0.84）单核细胞38（0.120.8）【临床意义】（1）生理性增多：Nsg70%，绝对值7109/L称为增多。2叶核占10%30%，3叶核占40%50%，4叶核占10%20%，5叶核5%。1）年龄变化：新生儿白细胞较高（可达（1530）109/L）。第69d减至与淋巴细胞大致相等，45岁两者基本相等，形成中性粒细胞和淋巴细胞2次交叉变化曲线，到青春期时与成人相同。2）日间变化：在安静、休息时白细胞数较低，在活动、进食后白细胞数较高。早晨较低、下午较高。一日内最高值和最低值可相差1倍。3）运动、疼痛、情绪变化：脑力和体力劳动、冷热水浴、日光或紫外线照射等使白细胞轻度增高。严寒、暴热使白细胞数高达15109/L或更高。剧烈运动、剧痛、情绪激动使白细胞显著增高。4）妊娠与分娩：妊娠超过5个月白细胞可达15109/L以上，妊娠最后1个月波动于（1217）109/L，分娩时白细胞可达34109/L，分娩后25d内恢复正常。5）其他：吸烟者白细胞计数高于非吸烟者30%（包括N、L和M）。中性粒事儿真多淋中6945两交叉安静休息早晨低其它情况均增高（2）病理性增多机体的应激反应，动员骨髓贮备池中的粒细胞释放或边缘池粒细胞进入血液循环，增多白细胞大多为Nsg或Nst。反应性增多四急一严一恶异常增生性增多反应性增多急性感染或炎症（最常见）化脓性球菌、某些杆菌如大肠杆菌和绿脓杆菌等、真菌、放线菌、病毒如流行性出血热、流行性乙型脑炎和狂犬病等、立克次体如斑疹伤寒、螺旋体如钩端螺旋体和梅毒等、寄生虫如肺吸虫等严重的组织损伤或坏死严重外伤、手术创伤、大面积烧伤、冻伤、血管栓塞如心肌梗死和肺梗死等急性溶血、急性失血（内）急性大出血如消化道大量出血、内脏破裂如脾破裂或输卵管妊娠破裂等急性中毒外源性中毒如化学物质、汞、铅、安眠药、昆虫毒、蛇毒、毒蕈等；内源性中毒如尿毒症、糖尿病酮症酸中毒、子痫、内分泌疾病危象等恶性肿瘤如非造血系统恶性肿瘤异常增生性增多为造血干细胞克隆性疾病，造血组织中粒细胞大量增生。见于白血病，如急性白血病以幼稚白血病细胞增多为主，慢性白血病以成熟白血病细胞增高为主，骨髓增殖性疾病如真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化症。（3）中性粒细胞减低：中性粒细胞绝对值低于1.5109/L时，称为粒细胞减低症；低于0.5109/L时，称为粒细胞缺乏症。见于：某些感染，如伤寒、副伤寒、流感等；血液病，如典型的再生障碍性贫血、少数急性白血病；慢性理化损伤，如电离辐射（X线等）、长期服用氯霉素后；自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮（SLE）等；脾功能亢进，如门脉性肝硬化、班替综合征等。嗜碱性粒细胞增多1.增多：外周血嗜碱性粒细胞绝对值超过参考上限（0.05109/L）。（1）过敏性或炎症性疾病：如荨麻疹、溃疡性结肠炎。（2）骨髓增生性疾病：如真性红细胞增多症；原发性骨髓纤维化；慢性粒细胞性白血病。（3）嗜碱性粒细胞白血病：罕见，嗜碱性粒细胞异常增多，达20%以上，且多幼稚型。口诀：过敏炎症骨髓增嗜碱粒白较罕见2.减少见于甲状腺功能亢进、妊娠、放疗、化疗、糖皮质激素治疗、感染急性期。淋巴细胞1.生理性增多：绝对值成人4109/L、儿童7.2109/L、4岁以下9109/L。见于儿童期淋巴细胞生理性增多。2.病理性增多：1）传染性单核细胞增多症：由EB病毒引起的急性或亚急性良性淋巴细胞增多性传染病。2）百日咳：淋巴细胞达30109/L，范围为（870）109/L，以CD4阳性细胞为主。3）肾移植术后：发生排异反应前，淋巴细胞绝对值增高。4）白血病：慢性淋巴细胞性白血病。5）药物：阿司匹林、氟哌啶醇、铅、左旋多巴、苯妥英等。传单百日肾移植淋白药物淋增多淋少放射肾化脓3.减低：见于接触放射线、应用肾上腺皮质激素、促肾上腺皮质激素、严重化脓性感染。单核细胞1.生理性增多：外周血单核细胞绝对值计数超过0.8109/L。儿童较成人稍多，平均为9%，出生后2周婴儿，可达15%或更多，妊娠时生理性增高与N变化相平行。2.病理性增多：见于某些感染（如亚急性感染性心内膜炎、疟疾、黑热病等）、急性感染恢复期、活动性肺结核（如严重的浸润性和粟粒性结核）、某些血液病（如粒细胞缺乏症恢复期、恶性组织细胞病、淋巴瘤）。1）某些感染：WBC达20109/L以上，外周血单核细胞明显增多，达30%以上，以成熟单核细胞为主。2）某些血液病：粒细胞缺乏症恢复期可见单核细胞一过性增多。3）恶性组织细胞病、淋巴瘤、单核细胞性白血病。4）结缔组织病：如类风湿关节炎，系统性红斑狼疮。5）胃肠道疾病：如酒精性肝硬化，溃疡性结肠炎等。嗜酸性粒细胞计数【检测原理】用嗜酸性粒细胞稀释液将血液稀释一定倍数，同时破坏红细胞和大部分白细胞，并将嗜酸性粒细胞着色，然后滴入细胞计数盘中，计数一定范围内嗜酸性粒细胞数，换算求得每升血液中嗜酸性粒细胞数。【操作方法】0.38mlE稀释液20l血混匀充池静置35min计数（低倍镜，两个池，10个大方格）计算【试剂】保护剂乙醇、丙酮、乙二醇。着色剂溴甲酚紫、伊红、固绿等。破坏其他细胞和增强E着色物质碳酸钾、草酸铵。抗凝剂枸橼酸钠、EDTA。防止乙醇和液体挥发剂甘油。【参考值】成人（0.050.5）109/L。【临床意义】1.生理变化（1）年龄变化：5岁以下儿童约为（00.8）109/L；515岁约为（00.5）109/L。（2）日间变化：1d内有波动，白天低，夜间高，上午波动大，下午较恒定，与糖皮质激素脉冲式分泌有关。（3）劳动、寒冷、饥饿、精神刺激：使肾上腺皮质产生肾上腺皮质激素增高，导致嗜酸性粒细胞减低。2.增多成人外周血嗜酸性粒细胞0.5109/L。（1）寄生虫病：寄生虫感染时血中嗜酸性粒细胞增多可达10%以上。如血吸虫、华支睾吸虫、肺吸虫、丝虫、包虫、钩虫等感染时，嗜酸性粒细胞显著增高，嗜酸性粒细胞分类可达90%以上，使用驱虫药后可逐渐恢复正常。（2）变态反应性疾病：如支气管哮喘药物过敏反应、荨麻疹、血管神经性水肿、血清病、异体蛋白过敏、花粉症等。（3）皮肤病：如湿疹、剥脱性皮炎、天疱疮、银屑病等。（4）血液病：如慢性粒细胞白血病（嗜酸性粒细胞常达10%以上）、真性红细胞增多症、多发性骨髓瘤、脾切除后等。（5）某些恶性肿瘤：癌肿伴有嗜酸性粒细胞增高（如肺癌），是嗜酸性粒细胞对白细胞介素5（IL-5）和肿瘤细胞因子的反应。（6）某些传染病：传染病感染期时，嗜酸性粒细胞常减低，在恢复期时，暂时性增高。但猩红热急性期，如乙型溶血性链球菌产生的酶能活化补体成分引起嗜酸性粒细胞增多。（7）高嗜酸性粒细胞综合征：包括伴有肺浸润的嗜酸性粒细胞增多症、过敏性肉芽肿、嗜酸性粒细胞心内膜炎等。3.减低见于长期应用肾上腺皮质激素、某些急性传染病，如伤寒极期。【注意事项】1.时间：嗜酸性粒细胞直接计数最好固定时间，以排除日间生理变化。操作应在3060分钟内完成，否则嗜酸性粒细胞逐渐被破坏或不易辨认，使结果偏低。2.混匀：嗜酸性粒细胞在稀释液中易发生聚集，要及时混匀。又易于破碎，振荡不宜太猛烈。白细胞形态检查【检测原理】血涂片经染色后，在普通光学显微镜下作白细胞形态学观察和分析。常用的染色方法有：瑞氏染色法、吉姆萨染色法、May-Grnwald法、Jenner法、Leishman染色法等。【临床意义】正常白细胞形态细胞类型大小（m）外形细胞核细胞质核形染色质着色颗粒中性杆状核粒细胞1015圆形弯曲呈腊肠样，两端钝圆深紫红色，粗糙淡橘红色量多，细小，均匀布满胞质，浅紫红色中性分叶核粒细胞同上同上分为25叶，以3叶为主同上同上同上嗜酸性粒细胞1116圆形分为2叶，呈眼镜样深紫红色，粗糙淡橘红色最多粗大、圆面均匀，充满胞质，鲜橘红色嗜碱性粒细胞1012圆形核结构不清，分叶不明显粗而不匀淡橘红色最少，大小和分布不均，常覆盖核上，蓝黑色淋巴细胞615圆形或椭圆形圆形或椭圆形，着边深紫红色，粗块状透明淡蓝色小淋巴细胞一般无颗粒，大淋巴细胞可见少量粗大不均匀，深紫红色颗粒单核细胞1020圆形或不规则形不规则形，肾形，马蹄形，或扭曲折叠淡紫红色，细致疏松呈网状淡灰蓝色最多细小，灰尘样紫红色颗粒弥漫分布于胞质中异常白细胞形态1.中性粒细胞异常形态（1）毒性变化：严重传染病、化脓性感染、中毒、恶性肿瘤、大面积烧伤等情况。大小不均中毒颗粒空泡形成杜勒小体退行性变1）大小不均中性粒细胞大小相差悬殊，不均一性增大。2）中毒颗粒中性粒细胞的胞质中出现比正常中性颗粒粗大、大小不等、分布不均的染色较深黑色或紫黑色颗粒。毒性指数：计算中毒颗粒所占中性粒细胞（100个或200个）的百分率。1为极度，0.75为中毒，0.5为中度，0.25为轻度。3）空泡形成中性粒细胞的胞质或胞核可出现1个或数个空泡。细胞发发生脂肪变性或颗粒缺失的结果。4）杜勒小体：中性粒细胞因毒性变化而在胞质中保留的局部嗜碱性区域（源自RNA），呈圆形、梨形或云雾状，染成灰蓝色，直径12m，亦可见于单核细胞。5）退行性变：细胞发生胞体肿大、结构模糊、边缘不清晰、核固缩、核肿胀和核溶解（染色质模糊、疏松）等现象。（2）棒状小体（Auer小体）白细胞胞质中出现呈紫红色细杆状物质，长约16m，1条或数条，称为棒状小体。急性白血病类型急粒（M3）：数条急单：一条急淋：无（3）中性粒细胞核象变化1）核左移:外周血中杆状核粒细胞增多和（或）出现晚幼粒、中幼粒、早幼粒等细胞时（5%）。核左移类型杆状核细胞类型临床意义轻度5%仅有中性杆状核粒细胞感染轻，抵抗力强中度10%杆状核，少量中性晚幼粒、中毒性改变严重感染，抵抗力较强重度25%杆状核，并出现幼稚的粒细胞中性粒细胞型类白血病反应2）核右移中性粒细胞核分叶5叶以上者超过3%，常伴白细胞总数减低，为造血物质缺乏、脱氧核糖核酸减低、骨髓造血功能减退所致。见于营养性巨幼细胞性贫血、恶性贫血、应用抗代谢药物（如阿糖胞苷、6-巯基嘌呤等）、炎症恢复期。在炎症恢复期出现一过性核右移，属正常现象，但进行期突然出现核右移，表示预后不良。（4）巨多分叶核中性粒细胞细胞体积较大，直径l625m，核分叶常在5叶以上，甚至在10叶以上，核染色质疏松。见于巨幼细胞贫血、抗代谢药物治疗后。（5）与遗传因素相关的中性粒细胞畸形2.淋巴细胞的形态异常（1）异形淋巴细胞在淋巴细胞性白血病、病毒感染（如传染性单核细胞增多症、病毒性肺炎、病毒性肝炎、传染性淋巴细胞增多症、流行性腮腺炎、水痘、巨细胞病毒感染）、百日咳、布鲁菌病、梅毒、弓形虫感染、药物反应等情况下，淋巴细胞增生，出现某些形态学变化，称为异型淋巴细胞。异形淋巴细胞型（空泡型）：又称浆细胞型。型（不规则型）：又称单核细胞型。型（幼稚型）：又称幼稚型。（2）放射线损伤后淋巴细胞形态变化：淋巴细胞受电离辐射后出现形态学改变：核固缩，核破碎，双核，卫星核淋巴细胞（胞质中主核旁出现小核）。（3）浆细胞：如外周血出现浆细胞，见于传染性单核细胞增多症、流行性出血热、弓形体病、梅毒、结核病等。异常形态浆细胞有：1）Mott细胞：浆细胞内充满大小不等、直径23m蓝紫色球体，呈桑椹样。见于反应性浆细胞增多症、疟疾、黑热病、多发性骨髓瘤。2）火焰状浆细胞：浆细胞体积大，胞质红染，边缘呈火焰状。见于IgA型骨髓瘤。3）Russell小体：浆细胞内有数目不等、大小不一、直径23m红色小圆球。见于多发性骨髓瘤、伤寒、疟疾、黑热病等。【小结】白细胞计数白细胞分类计数检测原理稀破充二计制片染色油分类质量控制1.经验控制RBC/WBC5001000：124，47；46，79；610，1012；1012，13182.技术误差小三增八血减倍、大于十五增加倍3.校正后白细胞数/L校正前白细胞数100/100+Y1.影响分类计数准确性因素细胞分布不均体尾交界，“城垛”式移动形态识别差异杆分、淋单、碱中2.影响分类计数精确性因素410203050100 100 200 300 400续表白细胞计数白细胞分类计数参考值新生儿6个月2岁儿童成人15201112512410Nsg5070；L2040；M38Nst15；E0.55；B01临床意义过敏炎症骨髓增嗜碱粒白较罕见传单百日肾移植淋白药物淋增多淋少放射肾化脓 中性粒事儿真多粒淋6945两交叉安静休息早晨低其它原因均增高四急一严和一恶中性粒点儿挺低伤了副流再辐氯自身免疫和脾亢【小结】嗜酸性粒细胞计数白细胞形态检测原理稀破充二计制片染色油观察质量控制保护乙丙二醇，着色紫红绿破坏钾草铵，枸橼EDTA来抗凝加点甘油防挥发混匀轻柔，固定时间，1h内要完成嗜酸性粒细胞计数白细胞形态参考值成人（0.050.5）109/L各种白细胞正常形态临床意义嗜酸生来变化多白低夜高下恒定劳寒饥精E减低病多常见虫子变中性粒五毒变，大小不均中毒粒空泡杜勒退行变，核象变化左右移左移杆状幼稚5%，右移5叶以上3%棒状急粒急单中，异林分为病毒感染见传单【习题】白细胞数小于2109/L，采用下列方法中哪项是错误的A.重新采血复查B.取血量20l，改为40lC.可数8个大方格白细胞数结果乘2D.结合分类涂片细胞分布综合判断E.减低稀释倍数正确答案C答案解析可数8个大方格白细胞数结果不用乘2.小三增八血减倍大于十五增加倍白细胞稀释液不能破坏哪一种红细胞A.正常红细胞B.畸形红细胞C.网织红细胞D.有核红细胞E.棘形红细胞正确答案D答案解析白细胞稀释液不能破坏有核红细胞。在生理情况下，小儿白细胞变化曲线中淋巴细胞与中性粒细胞两次交叉时间分别为A.12天，12岁B.23天，23岁C.69天，