选修一微生物的培养复习(三中缪运良).doc

.选修一微生物的培养复习1、根据微生物的相关知识回答下列问题：（1）在分离、纯化菌株之前，先要制作培养基，调节pH在灭菌之 (填“前”或“后”）。在分离目的菌的过程中，通常选用 培养基（按物理性质分类）进行选择培养以增加其浓度。纯化菌株时通常使用的接种工具是 。（2）下表是培养某微生物所用的固体培养基的配方，请回答:成分含量成分含量蛋白胨10.0g乳糖5.0g蔗糖5.0gK2HPO22.0gMgSO47H200.2g琼脂12.0g注：将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL根据培养基的成分分析，所培养微生物的同化作用类型是 。统计饮用水中大肠杆菌数目时， （填“需要”或“不需要”）设置对照；原因是 。若要分离分解尿素的细菌，需将培养基中的 换成 。2、某校实验小组对某种品牌的酸奶中乳酸菌的数量进行了测定。取6支灭菌的试管，分别加入9mL灭菌的生理盐水，标号为B1、B2、B3、B4、B5、B6；吸取1mL酸奶样液加入试管B1中，混合均匀；然后另取一支吸管从B1中吸取1mL溶液，加入B2中，依次类推，最后从试管B6中取0.1mL样液进行涂布计数，涂布三个平板，其菌落数分别为251、265、276个。来源:学#科#网请回答下列问题：（1）培养乳酸菌除了必要的_外，还需在培养基中添加维生素。（2）制备乳酸菌的培养基过程中，对培养皿灭菌的常用方法是_；待平板冷凝后，要将平板倒置，其目的是_。（3）该实验小组对乳酸菌接种所采用的方法是_。根据酸奶样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的_；根据三个平板中菌落数，可推测原酸奶中乳酸菌的浓度为_个/mL，该方法测定的乳酸菌的含量和实际值相比，一般_（填“偏大”或“偏小”）。（4）为了使测量结果更加准确，该实验对照组的设置是_。3、多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物，呈油状液体，污染土壤后，很难清除。研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用，为消除这种污染，科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株。（1）筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品 ，接种到以 为唯一的碳源培养基上，从功能上讲，该培养基属于 。（2）对初步提取到的菌株要进行 ，一般操作方法有两种，如图是 法。（3）若要测定培养液酵母菌的菌体数，可在显微镜下直接计数。若用 法统计菌落数，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间，这样做的目的是 。（4）将1mL酵母菌溶液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57、58，据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为 。4、水污染是全球性的环境问题，微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：（1）下表是筛选出能高效分解PVA的细菌的培养基配方，表中X物质最可能为 。实验中还应设置完全培养液对照组，将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显 （填“多于”或“少于”选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。）成分MgSO4蛋白质X物质水琼脂用量5g10g1000mL7g20g（2）要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用 计数板直接计数。若将100mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0.1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100mL原菌液中有PVA分解菌 个，该方法的测量值与实际值相比一般会 （填“偏大”、“偏小”或“相等”）。（3）要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入 用于鉴别PVA分解菌。若用上述培养基比较不同菌株降解PVA能力的大小，请用简洁的语言写出设计思路： 。5、对十二烷基苯磺酸钠（LAS）是洗涤剂的主要成分，LAS对人体的皮肤、血液、肝脏有一定的危害，LAS不易被生物降解，从而容易造成环境污染。某同学尝试从长期被洗涤剂污染的土壤中筛选出LAS降解菌，并对该菌种进行培养和计数。回答下列问题：（1）该同学从长期被洗涤剂污染的土壤中取样后，将样本置于在以 作为唯一碳源的液体培养基上进行培养，该培养基为 ，其作用是 。（2）经过初步培养后，该同学对获得的LAS降解菌溶液进行梯度稀释，吸取105稀释倍数的降解菌液各0.1mL，分别涂布在三个平板上，一段时间后形成的菌落数依次为20、14、14，该同学以平均菌落数16进行计数。以平均菌落数16进行计数，可求得原菌液中LAS降解菌的浓度为 个/mL。你认为该同学的计数方法是否正确？ （填“正确”或“不正确”），说明理由 。（3）稀释涂布平板法不适宜用于某些食品工业（比如酸奶等）的质量检测，原因是 ，此时应采用 统计细菌的数目。6、为解决塑料袋造成的“白色污染”这一问题，某同学试图从土壤中寻找一种能加速塑料袋自然降解过程的目的菌，以下是该同学从土壤中寻找并筛选目的菌的流程，请回答下列问题：（1）对培养基灭菌常用的方法是 。在接种前需要检测使用的培养基是否被污染，方法是 。（2）号培养基属于 （按功能分）培养基，其作用是使目的菌能“脱颖而出”。如图采用的接种方法为 。号培养基从物理性质来看， （填“能”或“不能”）添加琼脂。（3）该同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为20.4，则每毫升样品中的菌落数是 个。（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL）（4）假设该同学发现培养基上细菌数目过多而连成一片,说出一种可能的原因并提出合理的处理措施。原因: ；措施: 。（5）若空白对照组的一个平板上出现了7个菌落，这种结果说明在此实验中出现了 现象；为获取可靠实验数据，需 。7、（1）制作泡菜是利用乳酸菌在 条件下将糖转化成乳酸，发酵过程中要定期用 法测定亚硝酸盐含量。发酵条件中，影响亚硝酸盐含量的因素有 。（2）某化工厂排出的污水中，含有一种难于分解的有毒化合物A,研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐等配制的培养基，筛选出能高效分解化合物A的细菌（目 的菌）。实验主要步骤如图所示，分析回答问题。筛选“目的菌”：以化合物A为唯一碳源的 培养基中，“目的菌”能生长繁殖，其它微生物不能生长，原因是 。鉴别“目的菌”：选择培养后，把“目的菌”通过 法接种在固体鉴别培养基上分离并鉴别，不同的菌落分解化合物A能力不同，原因是 。实验结束后，使用过的培养基应通过 法灭菌后再倒掉，防止残留的微生物污染环境。8、根据传统发酵技术，人们在家里也可以自制糯米酒。利用所学知识，回答下列有关网题：（1）糯米酒酿造过程中的微生物主要是酵母菌，其代谢类型是 ，发酵的原理是 。（2）酿造糯米酒的适宜温度为 ，若要制作豆腐乳，则应控制温度为 。（3）酿造糯米酒的关键是要密封，原因是 ，但发酵过程中，每隔一段时间要进行排气，否则容易引起爆炸，原因是 。反应的方程式为 。9、近年来市民中流行自酿葡萄酒，但自酿葡萄酒时培养瓶发生爆炸的新闻时有报道。回答下列问题：（1）自酿葡萄酒用的瓶爆炸，原因可能是发酵过程中产生的 过多，导致内部压强过大所致。为避免这种危险的发生，应采取的措施是 。（2）分离和培养酵母菌时，需要进行无菌操作，对耐高温、需要保持干燥的培养皿和金属用具，宜采用 灭菌。将得到的菌株接种到液体培养基中混匀后，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现振荡培养的细菌生长速度更快，究其原因，振荡培养能提高培养液中 的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高 的利用率。在酸性条件下，可用 来检测发酵产物中是否有酒精产生。若要检测所得果酒中活体酵母菌的密度，一般采用 法，但此种方法最终计算得出的菌体数目往往比实际菌体数目少，原因是 。10、常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖，但自然界中的某些酵母可以分解木糖产生酒精，但对酒精的耐受能力较差，科学家们利用人工诱变的技术获得了能利用木糖且对酒精耐受力强的酿酒酵母突变型，请回答下列问题：（1）获得上述突变型酿酒酵母的方法是：人工诱变后，使用_的液体培养基进行选择培养。（2）获得上述突变型酿酒酵母后，需要进行分离纯化，操作步骤如下图：制备以上过程所需的培养基时需要倒平板操作，平板冷凝后需要倒置的原因是_，图乙是图甲过程A纯化培养的结果，接种时划线的顺序是_，图丙是图甲过程C纯化培养的结果，推测接种时主要的操作失误是_。（3）为测定突变型酿酒酵母的活性，用适宜浓度的海藻酸钠溶液将活化的酵母细胞固定化后发酵无菌麦芽汁制酒，实验中当海藻酸钠浓度较低时，细胞活力较低原因是 。若发酵条件符合操作要求。10天后检查发酵液发现麦芽汁几乎无酒味，发酵失败最可能的原因是 。11、近日，在美国斯坦福大学的食物考古学生产、消费和仪式课程上，Liu教授让学生尝试利用大麦、木薯根（富含淀粉）等酿造古中国的啤酒，最终他们酿造了两种不同的啤酒。请回答下列问题：（1）古代酿酒需要的微生物主要是_。方法一“谷物发芽”过程中，有机物的种类和含量变化情况是_，现代酿酒可通过添加“某物质”而省略这一步骤，该“物质”是_（填植物激素）。方法二“将木薯根咀嚼”的主要目的是_。“加热”和“煮沸”都是为了_。（2）酿酒结束后学生对啤酒的酒精含量进行检测，结果发现酒精含量都为12%16%，可能的原因是营养物质减少及_。若学生在实验后想检测有无活菌的存在，可制作固体培养基，用_进行计数，他们最可能的统计结果是_。12、回答与传统发酵技术有关的问题：（1）腐乳的发酵涉及多种微生物的参与,其中起主要作用的是 。在发酵过程中，豆腐能为菌种提供水和 等营养物质，豆腐中的蛋白质被分解成 ，味道鲜美，易于消化吸收，一直受到人们的喜爱。（2）因豆腐含水量的不同，发酵条件的不同以及装罐时加入的辅料的不同，可以制成近百种不同风味的腐乳。例如，制作青方(俗称“臭豆腐”）与红方和糟方的显著区别是 。（3）在制作泡菜时，首先应按照清水与盐的质量比为 的比例配制盐水，将盐水煮沸冷却。泡菜制作过程中，发酵液最终呈酸性的原因是 。（4）若对1升泡菜发酵液中的乳酸菌进行计数，可先对其稀释106倍，再分别取0.lmL菌液涂布到4个平板上，在培养过程中需提供 的条件。待菌落数目稳定时，计数得到4个平板上的菌落数目分别为45、52、58、65，则每升泡菜发酵液中乳酸菌活菌数约为 。13、现代人吃什么都讲究天然，所以目前市场上果汁饮料越来越受到青睐。请回答：（1）果汁饮料的包装瓶上写着105高温瞬时灭菌的意思是，这样做的目的是。（2）自己在家中榨的果汁很容易腐败，而果汁装瓶上写着“不含任何防腐剂，最长保质期为一年”，其中的奥秘是。（3）在果汁加工过程中可添加酶来提高出汁率和清澈度。（4）苹果醋是很受欢迎的饮料之一，其生产过程中利用了的发酵作用，该过程需控制的温度条件是。（5）在传统发酵技术中，果醋的制作往往在果酒制作基础上进行，请用相关反应式表示：。（3分） 14、测定水样是否符合饮用水的卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的总数。大肠杆菌在含有伊红美蓝的固体培养基（EMB培养基）上长出的菌落呈黑色。如图所示，滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样水样中的细菌留在滤膜上将滤膜转移到EMB培养基上培养统计菌落数目。据图回答问题。（1）过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要经过灭菌处理的是_。与过滤有关的操作都要在酒精灯火焰旁进行。（2）待测水样过滤完之后，还有部分细菌吸附在滤杯杯壁上，将这部分细菌也尽可能集中到滤膜上的操作为_。（3）将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于微生物培养中的_操作。从功能上看，EMB培养基属于_培养基。（4）无菌操作下将90ml无菌水加入到10ml待测水样中，这样就将待测水样稀释了_倍，将稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数为45，黑色菌落为5，则1升待测水样中的大肠杆菌数目为_个。（5）若要测定待测水样中酵母菌的数目，应更换上述过滤装置中的滤膜，选择孔径_（填“更大”或“更小”）的滤膜。15、（2017年全国卷I）某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列问题：（1）有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生_。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，原因是_，但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是_（答出两点即可）。（2）为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择_（填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”）作为氮源，不选择其他两组的原因是_。（3）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2 HPO4，其作用有_（答出两点即可）。16、（2017年全国卷II）豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并在32 h内定期取样观测发酵效果。回答下列问题：（1）该实验的自变量是_、_。（2）如果发现发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好，说明该发酵菌是_。（3）如果在实验后，发现32 h内的发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系，则无法确定发酵的最佳时间；若要确定最佳发酵时间，还需要做的事情是_。（4）从大豆到豆豉，大豆中的成分会发生一定的变化，其中，蛋白质转变为_，脂肪转变为_。参考答案：1、（1）前 液体 接种环(或涂布器） （2）异养型 需要 需要判断培养基是否被杂菌污染(或灭菌是否合格） 蛋白胨 尿素2、（1）营养物质 （2）干热灭菌法 防止平板冷凝后，培养皿盖上凝结的水珠落入培养基中造成污染 （3）稀释涂布平板法 菌落数目 2.64109 偏小 （4）另增设一组培养基，接种等量灭菌的无菌水，其他操作均相同3、（1）稀释 多氯联苯 选择培养基（2）纯化 平板划线（3）稀释涂布平板 检验培养基平板灭菌是否成功 （4）5.7l07个/L4、（1）聚乙烯醇（或PVA） 多于 （2）血细胞（血球） 1.6109 偏小 （3）碘 用含相同PVA浓度的上述培养基来培养不同菌株，一定时间后，通过测定白色透明斑的大小（或直径）来确定不同菌株降解PVA能力的大小 5、（1）LAS 选择培养基 初步筛选LAS降解菌，并增大其浓度 （2）1.6107 不正确 应涂布多个稀释倍数的稀释液，以获得菌落数在30-300个的平板 （3）久置的食品容易变质，导致大量目的菌死亡，而稀释涂布平板法只能测活菌数目 显微镜计数法6、（1）高压蒸汽灭菌法 将未接种的培养基在37（或适宜温度）恒温箱中倒置培养一段时间（或12天），观察是否有菌落生成 （2）选择 稀释涂布平板法 不能 （3）1.02106 （4）菌液浓度过高（或稀释倍数不够） 可以通过增大稀释倍数解决（或原因：培养过程中被杂菌污染；措施：严格无菌操作程序。或原因：利用接种针划线时，划下一个区域前没有对接种针灭菌处理；措施：每划一个新的区域前都要对接种针进行灭菌处理）（5）污染 再次配制培养基重新实验7、（1）无氧或密封 比色 盐的用量、温度、时间等（2）选择 “目的菌”能合成分解化合物A的酶平板划线法或稀释涂布平板法 产生分解化合物A的酶数量和活性不同干热灭菌或高压蒸气灭菌8、（1）异养兼性厌氧型 酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳来源:（2）1825 1518（3）酵母菌无氧呼吸才能产生酒精 发酵产生的二氧化碳使容器内压强增大C6H12O6（酶）2C2H5OH+2CO2+能量9、（1）二氧化碳（1分） 定期排气 （2）干热 溶解氧 营养物质（3）重铬酸钾 稀释涂布平板 两个或多个细胞相连时，会被统计成一个菌落10、（1）木糖为碳源且添加一定浓度酒精的（2）防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染 涂布