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综合测评(一)实验室守则生物技术概述第一部分微生物的利用(时间:60分钟,满分:100分)一、选择题(每小题3分,共51分)1根据实验室守则,下列做法错误的是()A用试管加热任何东西时,试管口不能朝向任何人B微生物实验必须严格进行无菌操作C若有细菌培养物泼洒出来,应迅速擦拭D用过的培养物都必须经过高压灭菌后再作处理【解析】若有细菌培养物泼洒出来,不能随意擦拭,应该先用纸巾盖起,再用漂白粉溶液使纸巾湿透,放置1520 min,然后用适当的方法清除。【答案】C2下列关于基因工程的叙述,正确的是()A基因工程经常以抗生素抗性基因为目的基因B细菌质粒是基因工程常用的载体C通常用一种限制酶处理含目的基因的DNA,用另一种限制酶处理载体DNAD连接酶的主要功能是将黏性末端碱基之间的氢键连接起来【解析】培育的转基因生物不同,选用的目的基因就不同,不一定以抗生素抗性基因为目的基因。只有用同一种限制酶分别处理含目的基因的DNA和载体,才能切割出互补的黏性末端,才可以用DNA连接酶将目的基因与载体连接起来。连接酶连接的是磷酸二酯键,不能用于连接氢键。【答案】B3下列与生物技术发展历史过程或应用相关的叙述不正确的是()A4世纪葛洪所著抱朴子一书中记有“海藻酒疗瘿”,是利用了海藻中的“碘”治疗甲状腺肿大B7世纪的孙思邈用猪肝治疗雀目,现在看来就是用猪肝中储存的维生素A治疗色盲症C以原核细胞或真核细胞为生物工厂生产产品如人的白细胞介素等,应属现代生物技术D用传统生物技术也可生产出无菌产品如抗体、疫苗、酶等【解析】用猪肝治疗雀目,实际是利用了猪肝中含量较丰富的维生素A治疗维生素A缺乏症“夜盲症”,而不是“色盲症”。【答案】B4获得纯净培养物的关键是()A将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌B接种纯种细菌C适宜条件下培养D防止外来杂菌的入侵【解析】进行微生物培养,获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,为此需做到无菌操作。【答案】D5(2016长沙检测)在划线分离操作中,错误的是()A将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红B将烧红的接种环在火焰旁边冷却C接种环在平板上的划线位置是随机的D在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰【解析】划线时是按一定的区域进行划线。【答案】C6判断以下部位不含有微生物的是()A洗干净的脸上B洗完澡后的皮肤C刷完牙后的口腔D灼烧之后的接种环【解析】用清水洗脸、洗澡、刷牙只是起清洁作用,达不到灭菌效果,只有灼烧过的接种环才是真正无菌的。【答案】D7菌种鉴定的重要依据是()A细菌的大小、形状、颜色B菌落的大小、形状、颜色C有无鞭毛D培养基的不同【解析】不同种类的细菌所形成的菌落在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一定特征,所以,每种细菌在一定条件下所形成的菌落,可以作为鉴定的重要依据。单个的细菌用肉眼是看不见的,故细菌的个体特征不能作为菌种鉴定的依据。【答案】B8LB培养基的物质组成是()A葡萄糖、蛋白质、氯化钠、水B蛋白质、氯化钠、水C蛋白胨、氯化钠、水、酵母提取物D葡萄糖、氯化钠、水、酵母提取物【解析】LB培养基必须满足五大营养成分,即碳源、氮源、水、无机盐及生长因子。C选项中这些成分全齐了。而A项中缺生长因子,B项中缺生长因子,D项中缺氮源。【答案】C9梯度稀释过程中用移液管把菌液从一支试管转移到下一支试管后,要用手指轻压移液管的橡皮头,吹吸三次,其目的是()A增加试管内的溶氧量B使菌液与水充分混匀C使试管中菌液的浓度降低D使细菌的形态结构发生改变【解析】稀释和涂布平板都要将菌液充分混匀。【答案】B10(2016合肥质检)无菌技术包括以下几个方面的叙述,其中错误的是()A使用95%酒精对操作者的手进行消毒B将培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌C为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行D实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触【解析】对操作者的手进行消毒所用酒精浓度最好为70%或75%,而不是95%。【答案】A11有关平板划线操作正确的是()A灼烧接种环后,为避免其他杂菌的干扰,应立即伸入菌液取菌种B划线结束后,为避免实验菌污染环境和感染操作者,必须再次灼烧接种环C在第一次划线前灼烧接种环和每次划线前灼烧接种环的目的相同D划线时最后一区域一定要与第一区域相连,达到首尾相接【解析】此题考查对划线分离法的掌握。A项的操作是错误的,灼烧接种环后要冷却后方能取菌种,以避免温度太高杀死菌种。C项的叙述是错误的,第一次划线前灼烧接种环是为了杀死其他杂菌,保证实验菌的纯净;每次划线前灼烧接种环的目的是为了杀死残留在接种环上的实验菌。D项的操作也是不正确的,首尾不能相连。【答案】B12下列关于灭菌的说法中,不正确的是()A灭菌是杀死一定环境中所有微生物的细胞,不包括芽孢和孢子B对不同的生物材料,应当采取不同的灭菌方法C培养基一般采取高压蒸汽灭菌法D高压蒸汽灭菌法最终使菌体蛋白质凝固变性【解析】灭菌是利用强烈的理化方法,杀死一定环境中所有微生物细胞、芽孢及孢子,针对不同的生物材料,应采取不同的灭菌方法。【答案】A13下列操作与消毒或灭菌无关的是()A接种前用酒精灯火焰灼烧接种环B接种前用酒精擦拭双手C接种在酒精灯火焰旁完成D培养基在冷却到60 时倒平板【解析】A、C选项所述属灭菌,B选项所述属消毒,培养基冷却至60 时倒平板,可防止过低温度时提早凝固,不利于形成固体平板,与消毒或灭菌无关。【答案】D14金黄色葡萄球菌有很强的致病力,可能引起食物中毒。下列实验结束后的做法错误的是()A对接种环进行灼烧处理B带菌培养基须经加热后才能倒掉C带菌培养基须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉D接种后双手须经肥皂洗净,再用75%的酒精棉球擦拭【解析】进行微生物培养后的培养基,无论培养物是否为致病菌,均应经过高压蒸汽灭菌后,方可倒掉。【答案】B15对无菌操作转接培养物的叙述,正确的是()接种环在火焰上灼烧灭菌在火焰旁冷却接种环、并打开棉塞打开棉塞的试管口通过火焰将已冷却的接种环伸入菌液,蘸取一环菌液转移到一装有无菌培养基的三角瓶中将三角瓶口塞上脱脂棉塞接种环进行消毒A BCD【解析】盛有转接培养物的三角瓶上应封以封口膜,若使用棉塞不应用脱脂棉,因脱脂棉易吸水,吸水后容易引起污染,接种环应进行“灭菌”,而不是“消毒”。【答案】D16抗生素可由微生物产生,具有抑菌作用,能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时,先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌,在27 下培养3天,形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病菌(图A),继续在同样条件下培养3天,结果如下图B。分析结果,得出的结论是()甲菌产生了抗生素丁菌的生长被丙菌产生的抗生素抑制乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制丙菌产生的抗生素抑制了乙菌的生长A BCD【解析】乙、丙、丁三种致病菌不会产生抗生素,否则靠近乙、丙、丁的甲菌落不能生长。从图B来看,乙菌的生长被抑制,最可能的原因是甲菌产生了抗生素,此种抗生素只能抑制乙菌的生长,而对丙、丁两种细菌没有影响。选项正确,答案为A。【答案】A17某实验学校的科技小组为了调查小清河(济南段)水中细菌的污染情况进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养菌落、观察计数。下列与此实验相关的叙述正确的是()A培养基中含有的蛋白胨、淀粉、水、无机盐等,其中可为细菌提供氮源的是淀粉B为使该实验结果可靠,有必要同时在另一平板上接种无菌水一同培养C对培养基进行灭菌,应该采用加热煮沸法D为尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于4 冰箱中培养【解析】培养基中可为细菌提供氮源的是蛋白胨而不是淀粉(淀粉中无“N”元素);对培养基灭菌宜采用高压蒸汽灭菌法;为尽快观察到细菌培养结果,应将接种了湖水样品的平板置于37 恒温箱中培养;为使结果可靠,还应同时在另一平板上接种无菌水,作为对照实验,故AD中只有B选项所述正确。【答案】B二、非选择题(共49分)18(9分)下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基的配方。请回答:试剂用量试剂用量牛肉膏5 g琼脂20 g蛋白胨10 g水1 000 mLNaCl5 g(1)培养基的类型很多,但培养基中一般都含有水、碳源、_和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是_。培养基配制完成以后,一般还要调节pH并对培养基进行_处理。(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是_和_。(3)假设培养结束后,发现培养基上菌落连成一片,可能的原因是什么?(列举两项)_。【解析】微生物培养基中一般都含水、无机盐、氮源、碳源,培养基配制完成后,一般还要调节pH,再进行灭菌处理。【答案】(1)氮源牛肉膏和蛋白胨灭菌(2)划线分离法涂布分离法(3)稀释倍数不够,菌液的浓度太高;划线时,划完第一次没有灭菌即接着划第二次;培养过程灭菌不严格,受到微生物的污染(任选两项)19(10分)现已有近20个国家正在进行细菌堆浸冶金。全世界铜的总产量中约有15%是用细菌浸出法生产的。冶铜用的菌种主要是氧化亚铁硫杆菌,这种菌种能氧化辉铜矿(Cu2S)等各种硫化矿获得能量,并产生硫酸和硫酸铁,这两种化合物可作用于辉铜矿(Cu2S),把矿中的铜以硫酸铜形式溶解出来,再用铁置换出铜,生成的硫酸亚铁又可被细菌作为营养物氧化成硫酸铁,如此循环往复,最后从溶液中获取铜。研究人员已初步分离、筛选到能高效产铜的该菌种,实验大致步骤如下图所示,请分析回答问题。(1)分离这种菌种,可在培养基中加入化合物_。(2)筛选高产菌株时,接种到_培养基(按物理性质划分)进行培养,筛选高产菌株的方案是:_。(3)将获得的高产菌株进行进一步纯化培养时,一般用固体培养基,常采用_法进行接种。(4)实验结束时,使用过的培养基应进行灭菌处理才能倒掉,操作时采用_灭菌方法,这样做的目的是_。【解析】由题中所述条件可知:氧化亚铁硫杆菌能氧化辉铜矿等各种硫化矿获得能量,并产生硫酸和硫酸铁,因此分离这种菌种,可在培养基中加入Cu2S。如果筛选此高产菌株,可在液体培养基上培养,测量产铜量。纯化高产菌株时需采用平板划线法进行接种。对培养基灭菌应采用高压蒸汽灭菌法。【答案】(1)Cu2S(2)液体分装成若干瓶等量培养基,接种等量菌种,在相同条件下培养一定时间,测量各瓶中产铜量(3)平板划线(4)高压蒸汽防止环境污染20(10分)(2016杭州检测)下图为“大肠杆菌的培养和分离”实验的基本流程:请回答:(1)配制细菌培养基时通常要加入一定量的氯化钠,其目的是_。(2)培养基和培养器皿常用高压蒸汽灭菌,灭菌后,要待_时才能打开高压蒸汽锅锅盖。倒平板和接种前要用_擦手。大肠杆菌先接种到液体培养基中的目的是_。(3)分离菌群的常用方法有二种,划线分离法与涂布分离法相比,划线分离法的优点是_。(4)划线后在恒温培养箱中培养时,培养皿须倒置:目的是_。(5)下列接种过程中,操作错误的是_。A在酒精灯火焰旁倒平板B取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌C将接种环伸入试管内,先接触菌体多的部位D接种后还要将试管口灭菌加塞(6)实验完成后,接触过细菌的器皿应如何处理?_。【答案】(1)维持一定的渗透压(2)灭菌锅内压力与大气压相同酒精棉球扩大培养大肠杆菌(3)方法简单(4)避免水滴污染培养基(5)C(6)接触过细菌的器皿应作灭菌处理21(10分)(2016温州检测)某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题。(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选目的菌,这种培养基属于_培养基。(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的_,实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是异养_型。(填“需氧”或“厌氧”)(3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量_的培养液,接入新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量_。(两空均填“增加”或“减少”)(4)转为固体培养基时,常采用_和稀释涂布平板的方法进行接种,在前一种方法接种过程中所用的接种工具是_,这种工具在操作时采用的灭菌方法是_。(5)实验结束后,使用过的培养基应该进行_处理才能倒掉,这样做的目的是防止造成_。【解析】本题主要考查选修1生物技术实践有关知识。培养基中加入化合物A的目的是筛选目的菌,这种培养基属于选择培养基。“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的化合物A,因为除了化合物A,缺少氮源和碳源。实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是异养需氧型,振荡可以增加培养液中的溶解氧。培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量减少的培养液,接入新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量增加。如此操作,可以补充营养物质。整个过程中都要注意无菌技术操作,防止杂菌感染。接种用到的方法一般有平板划线法和稀释涂布平板,在前一种方法接种过程中所用的接种工具是接种环,这种工具在操作时采用的灭菌方法是灼烧灭菌。实验结束后,使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉,这样做的目的是防止造成环境污染。从设计实验的角度看,还应设置的一组对照实验来证明是否被杂菌污染。【答案】(1)选择(2)化合物A需氧(3)减少增加(4)平板划线法接种环灼烧灭菌(5)灭菌环境污染22(10分)请回答下列酵母菌有关的问题:(1)从生态系统的成分上看,酵母菌属于_,它的同化作用类型是_。(2)培养酵母菌时,为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行_。(3)酵母菌菌种A能耐高温,但产

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