高考生物大二轮总复习 增分策略 专题十二 必考点29基因工程和细胞工程课件.ppt

必考点29基因工程和细胞工程 专题十二现代生物科技专题 依纲排查 1 基因工程的诞生 基因工程的理论基础是什么 2 基因工程的原理 技术及应用 1 基因工程的操作工具是什么 有哪些特点 2 基因工程操作的 四步曲 分别是什么 3 基因工程在农业 医学等方面有哪些应用 3 蛋白质工程 1 蛋白质工程操作的基本原理和设计思路是什么 2 蛋白质工程和基因工程的关系是什么 4 植物组织培养 1 植物组织培养的基本原理和一般操作流程是怎样的 2 植物组织培养有哪些应用 5 动物的细胞培养与体细胞克隆 1 动物细胞培养的基本操作过程和条件分别是什么 2 体细胞克隆的操作流程及应用是什么 6 细胞融合与单克隆抗体 1 单克隆抗体制备的操作流程是怎样的 2 单克隆抗体的特点是什么 有哪些应用 核心提炼夯实基础突破要点 题组突破剖析题型提炼方法 栏目索引 考点整合体系重建 1 理清基因工程3种操作工具的作用与特点 核心提炼 2 掌握获取目的基因的3种途径 1 直接分离 从自然界已有的物种中分离 如从 中获取 2 人工合成目的基因 常用方法如下 化学合成法 已知核苷酸序列的基因 直接利用用化学方法合成 不需要模板 人工合成法 以 为模板 在 作用下人工合成 利用技术扩增 基因文库 较小 dna合成仪 rna 逆转录酶 pcr 3 牢记基因表达载体的构建 1 基因表达载体的组成 目的基因 启动子 终止子 复制原点 2 启动子和终止子 启动子是结合的位点 启动转录 终止子是的位点 标记基因 rna聚合酶 终止转录 3 基因表达载体的构建过程 同一种限制酶切割 dna连接酶 4 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化 显微注射 感受态细胞 5 理清目的基因的检测与鉴定 1 导入检测 杂交技术 使用dna探针 2 表达检测 3 个体生物学水平鉴定 如对转基因作物进行抗虫或抗病等的接种实验 dna分子 分子杂交 抗原 抗体 6 理清植物细胞工程两大技术 全能性 膜的流动性和 植物细胞全能性 愈伤组织 再 分化 杂种细胞 7 理清动物细胞培养的成分 过程及相关酶 1 培养基的特有成分 2 培养过程 原代培养 传代培养 3 制备悬液的酶 动物血清 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 8 完善下面克隆动物培育流程图 细胞质 胚胎移植 细胞核 核移植 9 把握动物细胞融合的原理 方法及应用 1 原理 2 促融方法 灭活的病毒 物理法 化学法 3 应用 制备单克隆抗体 细胞膜的流动性 10 理清单克隆抗体制备的过程 1 基因工程的相关判断 1 携带链霉素抗性基因受体菌的筛选必须通过分子检测 2014 天津 4a 2 转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定必须通过分子检测 2014 天津 4c 3 一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 2007 全国 4a 题组一聚焦基因工程 题组突破 4 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 2010 浙江 2a 5 每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 2011 浙江 6b 6 自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其dna整合到细菌dna上 属于基因工程 2010 大纲全国 5d 7 转抗虫基因的植物 不会导致昆虫群体抗性基因频率增加 2010 江苏 18b 8 重组质粒与探针能进行分子杂交是因为dna分子脱氧核糖和磷酸交替连接 2013 安徽 6c 9 应用dna探针技术 可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达 2011 四川 5d 10 动物的生长激素基因转入植物后不能表达 2010 江苏 18c 2 2015 重庆 6 下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述 正确的是 a 表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mrna反转录获得b 表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原 起 点c 借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来d 启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用 解析人肝细胞不能合成胰岛素 则人肝细胞中不含有胰岛素的mrna 不能通过反转录获得人胰岛素基因 a错误 表达载体的复制启动于复制起点 胰岛素基因的表达启动于启动子 b错误 抗生素抗性基因是标记基因 可用于筛选含胰岛素基因的受体细胞 c正确 启动子在转录过程中起作用 终止密码子在翻译过程中起作用 d错误 答案c 3 2015 全国 40 已知生物体内有一种蛋白质 p 该蛋白质是一种转运蛋白 由305个氨基酸组成 如果将p分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸 240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸 改变后的蛋白质 p1 不但保留p的功能 而且具有了酶的催化活性 回答下列问题 1 从上述资料可知 若要改变蛋白质的功能 可以考虑对蛋白质的 进行改造 解析对蛋白质的氨基酸序列 或结构 进行改造 可达到改变蛋白质功能的目的 氨基酸序列 或结构 其他答案合理也可 2 以p基因序列为基础 获得p1基因的途径有修饰 基因或合成 基因 所获得的基因表达时是遵循中心法则的 中心法则的全部内容包括 的复制 以及遗传信息在不同分子之间的流动 即 解析以p基因序列为基础 获得p1基因 可以对p基因进行修饰改造 也可以用人工方法合成p1基因 中心法则的全部内容包括 即 dna rna的复制 dna rna rna dna rna 蛋白质 或转录 逆转录 翻译 p p1 dna和rna 或遗传物质 dna rna rna dna rna 蛋白质 或转录 逆转录 翻译 3 蛋白质工程也被称为第二代基因工程 其基本途径是从预期蛋白质功能出发 通过 和 进而确定相对应的脱氧核苷酸序列 据此获得基因 再经表达 纯化获得蛋白质 之后还需要对蛋白质的生物 进行鉴定 解析蛋白质工程的基本途径是从预期蛋白质功能出发 通过设计预期的蛋白质结构和推测应有的氨基酸序列 推测相对应的脱氧核苷酸序列 并获取基因 经表达的蛋白质 要对其进行生物功能鉴定 设计预期的蛋白质结构 推测应有的氨基酸序列 功能 4 2013 新课标 40节选 阅读如下资料 材料甲科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中 得到了体型巨大的 超级小鼠 科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草 材料乙t4溶菌酶在温度较高时易失去活性 科学家对编码t4溶菌酶的基因进行改造 使其表达的t4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸 在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键 提高了t4溶菌酶的耐热性 回答下列问题 1 材料甲属于基因工程的范畴 将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用 法 构建基因表达载体常用的工具酶有 和 在培育有些转基因植物时 常用农杆菌转化法 农杆菌的作用是 解析将基因表达载体导入动物受精卵常用的方法是显微注射法 构建基因表达载体常用的工具酶是限制性核酸内切酶和dna连接酶 在培育转基因植物时常用农杆菌转化法 因为农杆菌能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物 显微注射 限制酶 dna连接酶 农杆菌可感染植物 将目的基因转移到受体细胞中 2 材料乙中的技术属于 工程范畴 该工程是指以分子生物学相关理论为基础 通过基因修饰或基因合成 对 进行改造 或制造一种 的技术 在该实例中 引起t4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的 序列发生了改变 解析蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础 通过基因修饰或基因合成 对现有蛋白质进行改造 或制造一种新的蛋白质的技术 该实例中 t4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的氨基酸序列发生了改变 蛋白质 现有的蛋白质 新蛋白质 氨基酸 5 为探究shh基因与角化囊肿发生的相关性 科研人员利用shh基因的非模板链转录合成的rna作为探针 进行分子杂交实验 以检测shh基因在角化囊肿中的表达情况 其基本流程如下图 amp表示氨苄青霉素抗性基因 lacz基因被shh基因插入后不表达 请回答问题 1 重组载体中shh基因转录合成rna探针时 填 需要 或 不需要 启动子 解析重组载体中shh基因表达需要启动子 需要 2 步骤 中 用ca2 处理大肠杆菌 使之成为 细胞 然后导入重组载体 实验中 用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌 未导入质粒的细菌将会死亡 原因是这些细菌不含有 基因 解析大肠杆菌细胞用ca2 处理后就成为感受态细胞 能在添加氨苄青霉素的培养基上生存的细菌含有氨苄青霉素抗性基因 没有氨苄青霉素抗性基因的细菌将会死亡 感受态 amp 或氨苄青霉素抗性或抗性 3 能表达lacz基因的大肠杆菌在含有iptg和x gal的培养基上会形成蓝色菌落 易于识别 根据上述原理可以初步判断 填 蓝色 或 白色 菌落中的大肠杆菌为重组菌 解析能表达lacz基因的大肠杆菌在含有iptg和x gal的培养基上会形成蓝色菌落 而重组菌中lacz基因被shh基因插入后不表达 故重组菌在含有iptg和x gal的培养基上会形成白色菌落 白色 4 将制备的探针加入角化囊肿切片中 探针将与 形成杂交带 进而判断shh基因的转录情况 解析判断shh基因的转录情况 也就是判断shh基因是否转录出mrna shh基因转录的mrna 失分警示 盐酸在实验中的应用 1 使用限制酶的注意点 1 一般用同种限制酶切割载体和目的基因 2 不同的限制酶也能切割出相同的黏性末端 2 dna连接酶 dna聚合酶dna连接酶连接两个dna片段 而dna聚合酶只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上 3 限制酶 dna酶 解旋酶限制酶是切割某种特定的脱氧核苷酸序列 并使两条链在特定的位置断开 dna酶是将dna水解为组成单位 解旋酶是将dna的两条链间的氢键打开形成两条单链 4 启动子 终止子 1 启动子 dna片段 起始密码子 rna 1 终止子 dna片段 终止密码子 rna 6 细胞工程的相关判断 1 产生抗人白细胞介素 8抗体的杂交瘤细胞的筛选必须通过分子检测 2014 天津 4b 2 21三体综合征的诊断必须通过分子检测 2014 天津 4d 3 培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是组织培养 2012 广东 2a 题组二聚焦细胞工程 4 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 2008 全国 5b 5 乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养 2015 江苏 3a 6 培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞 2010 浙江 4a 7 动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体体现了细胞的全能性 2012 江苏 22c 8 体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体 2011 江苏 14b 9 单克隆抗体技术可以用于治疗老年痴呆症 2010 江苏 17c 10 细胞核移植主要在同种动物 同种组织的细胞之间进行 2015 江苏 3b 7 植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可用下图所示图解简单表示 1 培育胚状体利用了 这一项生物技术 胚状体再继续培养 则可培育出完整的植株 这体现了 培养基中除了含有一定的营养外 还必须含有 等植物激素 还需要对培养基进行严格的 解析离体植物细胞通过脱分化形成愈伤组织 通过再分化形成具有根和芽的胚状体 再通过细胞分裂 分化发育成一个完整的植株 该技术称为植物组织培养 其原理为植物细胞的全能性 培养基的成分包括水 无机盐 维生素 氨基酸 蔗糖 植物激素 生长素和细胞分裂素等 等 培养基要求进行严格的灭菌 能性 植物组织培养 植物细胞的全 细胞分裂 灭菌 素 生长素 2 如果愈伤组织是三七叶肉细胞培养产生的 若为了获得三七的细胞产物 则只需要培养到 若为了获得三七的人工种子 则需要培养到 如果愈伤组织是棉花叶肉细胞培养产生的 通过基因工程要获取抗虫棉 目的基因导入棉花愈伤组织细胞常用的方法是 法 解析三七的细胞产物为细胞的代谢产物 将三七叶肉细胞培养到愈伤组织即可 获得人工种子需培养至胚状体 棉花为双子叶植物 导入抗虫基因常用农杆菌转化法 愈伤组织 胚状体 农杆菌转化 3 从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中 必须要经过 无丝分裂 有丝分裂 减数分裂 原代培养 传代培养 植物体细胞杂交 细胞融合 脱分化 再分化解析离体叶肉细胞培养到胚状体的过程中必须经过脱分化和有丝分裂形成愈伤组织 再分化和有丝分裂形成具有根和芽的胚状体 8 甲 乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物 甲含有效成分a 乙含有效成分b 某研究小组拟培育同时含有a和b的新型药用植物 回答下列问题 1 为了培育该新型药用植物 可取甲和乙的叶片 先用 酶和 酶去除细胞壁 获得具有活力的 再用化学诱导剂诱导二者融合 形成的融合细胞进一步培养形成 组织 然后经过 形成完整的杂种植株 这种培育技术称为 解析该新型药用植物是通过植物体细胞杂交技术获得的 要获得有活力的原生质体才能进行体细胞杂交 因此首先用纤维素酶和果胶酶去掉植物的细胞壁 然后用peg化学诱导剂 物理方法 离心 振动等 诱导二者的原生质体融合 然后采用植物组织培养技术获得杂种植株 植物组织培养的主要过程是 先脱分化形成愈伤组织 然后再分化形成植物体 利用了植物细胞的全能性 答案纤维素果胶原生质体愈伤再分化 分化 植物体细胞杂交技术 2 上述杂种植株属于多倍体 多倍体是指 假设甲与乙有性杂交的后代是不育的 而上述杂种植株是可育的 造成这种差异的原因是 解析如果植物甲 乙是两个物种 二者不能通过有性杂交产生可育后代 原因是甲 乙有性杂交所产生的后代在减数分裂过程中同源染色体联会异常 也就是存在着生殖隔离 但植物甲 乙通过植物体细胞杂交技术产生的后代却是可育的 因为在减数分裂过程中同源染色体能完成正 常的联会 产生正常的配子 由于甲 乙都是二倍体 因此 植物体细胞杂交得到的后代是异源多倍体 四倍体 答案体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体在减数分裂过程中 前者染色体联会异常 而后者染色体联会正常 3 这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖 经植物组织培养得到的 等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子 解析人工种子生产不受气候 季节和地域等因素限制 而且可以避免后代发生性状分离等优点 因此 植物细胞工程重要的应用之一是制备人工种子 用到的核心技术是植物组织培养技术 将植物组织培养得到的胚状体 不定芽 顶芽 腋芽等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子 胚状体 不定芽 顶芽 腋芽 9 美国科学家已经在实验室中成功培育出膀胱 并顺利移植到7名患者体内 培育过程如图所示 据图回答下列问题 1 a过程属于细胞工程中的 其培养基与植物组织培养的培养基含有的营养成分的主要不同点是前者含有 解析图中a过程为动物细胞培养过程 动物细胞培养基成分与植物组织培养的培养基含有的营养成分的主要不同点是前者含动物血清 动物细胞培养 动物血清 2 b过程由数万个细胞繁殖到15亿个细胞是 的结果 上述过程中不但需要无菌 无毒的环境 适宜的营养 还需要适宜的 环境 解析动物细胞培养时 不但需要无菌 无毒的环境 适宜的营养 还需要适宜的温度 ph及气体环境 有丝分裂 细胞 分裂 温度和ph 气体 3 新器官与老器官的 重组 选填 是 或 不是 基因重组 因为新器官与老器官的 相同 解析由于新器官与老器官的遗传物质相同 新器官与老器官的 重组 不是基因重组 不是 遗传物质 4 新膀胱 移植后 选填 会 或 不会 成为抗原 因为新老器官具有 蛋白质等物质 解析因为新老器官细胞具有相同的表面抗原等物质 新膀胱 移植后不会成为抗原 不会 相同的 5 除上述方法外 还可将患者的体细胞核移入去核的 中 这是利用体细胞 技术 形成相应的组织 器官 解析利用体细胞核移植技术将患者的体细胞核移入去核的卵母细胞中 重组细胞经培养也可形成相应的组织 器官 卵母细胞 核移植 10 2014 新课标 40 某研究者用抗原 a 分别免疫3只同种小鼠 x y和z 每只小鼠免疫5次 每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价 能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数 结果如下图所示 若要制备杂交瘤细胞 需取免疫后小鼠的b淋巴细胞 染色体数目为40条 并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞 染色体数目为60条 按一定比例加入试管中 再加入聚乙二醇诱导细胞融合 经筛选培养及抗体检测 得到不断分泌抗a抗体的杂交瘤细胞 回答下列问题 1 制备融合所需的b淋巴细胞时 所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上 则小鼠最少需要经过 次免疫后才能有符合要求的 达到要求后的x y z这3只免疫小鼠中 最适合用于制备b淋巴细胞的是 小鼠 理由是 解析据图分析可知 第四次注射后x y