疾病产生的分子基础本科生PPT课件.ppt

1 第十一章疾病产生的分子基础 汤立军教授 中南大学生命科学学院分子生物学研究中心 2019 12 29 2 人类疾病如白血病 恶性肿瘤 糖尿病 神经退行性疾病 心脑血管 高血压等发生和发展都涉及到有关蛋白质及其复合物的结构 功能和相互作用异常 疾病的本质是蛋白质功能紊乱 基本原理是各种原因引起蛋白质质和量的改变 2019 12 29 3 1 基因结构的改变 2 受细胞调节因素或其它因素影响使基因的表达发生改变 3 外来的致病基因 4 蛋白质翻译后加工及蛋白质降解发生变化 蛋白质功能紊乱的原因各不相同 具有不同分子机制 2019 12 29 4 第一节基因结构改变与疾病第二节细胞间信号异常与疾病第三节细胞内因素与疾病第四节翻译后加工运输障碍与疾病第五节蛋白质降解异常与疾病第六节病原微生物基因引起的疾病第七节疾病分子机制的研究策略 2019 12 29 5 第一节基因结构改变与疾病一 基因突变二 基因突变的遗传学效应三 结构基因变异导致的疾病四 调控序列变异导致基因表达水平变化 2019 12 29 6 一 基因突变的多种类型 点突变是单个碱基的替换缺失是一个或多个核苷酸的丢失插入是一个或多个核苷酸的增加倒位是一段核苷酸序列染色体位置的改变基因突变还分为配子突变与体细胞突变动态突变指串联重复拷贝数随世代的传递而改变 2019 12 29 7 例脆性X综合征 CCG 重复发生在FMR1 脆性X智力低下基因1 的5 非翻译区 拷贝数不稳定 8 50拷贝 正常人 52 200拷贝 携带者 200 1000拷贝 患者 2019 12 29 8 强直性肌营养不良DMPK基因3 非翻译区CTG三核苷酸序列异常重复扩增超过100 正常人为5 40 重复数目与症状严重性相关 Huntington舞蹈病huntington基因内的CAG三核苷酸序列异常重复扩增 亨廷顿病患者35 100个或更多 正常人为11 30 Friedreich共济失调症内含子CAA拷贝数过度增加 2019 12 29 9 1 碱基置换突变 substitutionmutation 二 不同的基因突变引起不同的遗传效应 a 错义突变 missensemutation b 无义突变 nonsensemutation c 同义突变 consensemutation 2019 12 29 10 a 错义突变 missensemutation 指DNA改变后mRNA中相应密码子发生改变 编码另一种氨基酸 使蛋白质中的氨基酸发生改变 有些错义突变不影响蛋白质或酶的生物活性 不表现出明显的表型效应 2019 12 29 11 b 无义突变 nonsensemutation 亮氨酸的密码子UUA 中间的U变为A这样一个碱基变化就会成为 终止密码子 UAA 酪氨酸的密码子是UAC 置换突变使UAC变为密码子UAG后翻译便终止 UAG UGA UAA终止密码子 2019 12 29 12 c 同义突变 synonymousmutation 密码子发生改变 但所编码的氨基酸不变 例如 CUUCUCCUG 亮氨酸 2019 12 29 13 2 缺失或插入突变 deletionorinsertionmutation a 密码子缺失或插入b 移码突变 frame shiftmutation c 整基因或大片段缺失 2019 12 29 14 a 密码子缺失或插入 CTGACTCCTGAGGAGAAGTCTLeuThrProGluGluLysSer CTGACTGAGGAGAAGTCTLeuThrGluGluLysSer CTGACTCCGGAGAAGTCTLeuThrProGluLysSer CCTCCTGAGGAGAAGTCTProProGluGluLysSer 2019 12 29 15 b 移码突变 CTGACTCCTGAGGAGAAGTCTLeuThrProGluGluLysSer TGACTCCTGAGGAGAAGTCT TGACTCCTGAGGAGAAGTCT CTACTCCTGAGGAGAAGTCTCTACTCCTGAGGAGAAGTCTLeuLeuLeuArgArgSer 插入或缺失带来的无义突变 CTGACTCCTGAGGAGAAGTCTLeuThrProGluGluLysSer 2019 12 29 16 3 融合突变 fusionmutation 细胞减数分裂时同源染色体不等交换而致基因间错位配对 产生两种含不同等位基因的染色体 2019 12 29 17 2019 12 29 18 2019 12 29 19 白血病中部分常见的融合基因 2019 12 29 20 4 基因突变影响hnRNA的剪接 基因突变发生在hnRNA的一级结构上特定的剪接位点上 形成新的剪接位点或使正常剪接位点消失 导致hnRNA的剪接错误 产生异常的mRNA 最终产生异常的蛋白表达产物 改变生物性状 2019 12 29 21 真核生物基因的剪接位点 由内含子的5 端 GT 和3 端 AG 及内含子和外显子内的其它调控元件共同决定 2019 12 29 22 例 家族性孤立性生长激素缺乏 型遗传病由于GH 1基因的EXON 上第5nt由G A 破坏一个ESE 使EXON 被跳过 而最终造成编码蛋白缩短 影响功能 2019 12 29 23 转入了人缺陷型的GH 1基因 利用RNAi使导入基因沉默 2007年 2019 12 29 24 2019 12 29 25 三结构基因改变导致蛋白质变化引起疾病 结构基因发生改变会改变蛋白质的一级结构 进而改变蛋白质的理化性质 2019 12 29 26 1 蛋白质结构变化引起的疾病 1 血红蛋白病 hemoglobinopathy 2019 12 29 27 血红蛋白结构 血红蛋白是由4条肽链 两个 和两个 链 组成的 每条肽链都类似于肌红蛋白的肽链 都结合一个血红素 2019 12 29 28 血红蛋白病 镰刀形细胞贫血症 2019 12 29 29 2019 12 29 30 血红蛋白病分子基础 2019 12 29 32 血红蛋白病分子基础 2019 12 29 33 2 家族性高胆固醇血症一种常染色体显性遗传疾病 其特征为低密度脂蛋白 LDL 胆固醇水平明显升高 可出现黄色瘤和动脉硬化症 病因 肝脏表面特异性的LDL 受体数目减少或缺乏 导致肝脏对血循环中LDL 胆固醇的清除能力下降 进而引起血循环中LDL 胆固醇水平升高 2019 12 29 34 LDL受体基因变异 导致其编码蛋白结构异常 功能下降或完全丧失 配体结合结构域 由LDL受体蛋白N端292个氨基酸残基组成 富含半胱氨酸 该结构中有7个由40个氨基酸残基组成的重复序列 天冬 半胱 X 天冬 甘 丝 天冬 谷 每个重复序列中含有6个半胱氨酸残基 全部42个半胱氨酸 2019 12 29 35 2019 12 29 36 2 蛋白质合成量变化引起的疾病 2019 12 29 37 人珠蛋白基因簇及珠蛋白基因结构 2019 12 29 38 珠蛋白基因的表达在时空上受到遗传因素的精确调控 表现为以下特点 组织特异性发育阶段特异性协同性 2019 12 29 39 地贫基因缺失类型 1 2 正常 基本正常 轻度贫血 轻度贫血 0 高度贫血 0 HbBart s综合征 0 0 2019 12 29 40 珠蛋白结构基因突变抑制 珠蛋白合成使 珠蛋白量减少甚至完全缺失 引起 地贫 第17位赖氨酸密码子AAG Lys TAG 发生无义突变 引起 0地贫 珠蛋白基因的编码顺序内插入或缺失1 或 个核苷酸 会使突变点以后的读码框遭到破坏 往往造成 珠蛋白肽链合成提前终止 而引起 0地贫 2019 12 29 41 四 调控序列变异导致基因表达水平变化 顺式作用元件的基因突变 会降低 珠蛋白基因的转录 使 珠蛋白合成减少 引起 地贫 TATA盒 32 C A 30 T C 29 A G 28 A G CAAT盒 101 92 88 87 86等位点的点突变 2019 12 29 42 启动子和外显子1之间大于10kb的缺失 另一种是启动子和外显子1之间大于6kb的缺失 两种突变都使LDL受体基因的表达能力完全丧失 LDL受体启动子变异 2019 12 29 43 一些内含子的变异也会影响蛋白质的合成 使体内相应蛋白质含量减少或缺失 ApoB100基因内含子的第一个碱基会发生G T突变 突变基因转录后生产的hnRNA 会影响ApoB100mRNA的正常剪切 2019 12 29 44 第二节细胞间信号异常导致基因表达异常引起疾病 人体各细胞间通过激素 神经递质 旁分泌信号等保持细胞间的联系 调节彼此的代谢 基因表达也受到细胞间信号的调控 2019 12 29 45 AFP接受异常细胞增殖信号成为肝癌发生的重要因素 胚胎发育过程中 AFP增强子激活 而沉寂子处于抑制状态 胎儿出生后 AFP沉寂子处于活化状态 阻碍增强子的启动效应 在异常细胞增殖信号的作用下 c myc c fos c jun等癌基因表达异常增加 其表达产物与AFP基因顺式作用元件结合 激活AFP基因表达 2019 12 29 46 粉尘刺激 肺支气管上皮 肺泡巨噬细胞 分泌TGF 1 成纤维细胞 促细胞分裂和ECM蛋白基因表达 ECM增加 矽肺发生 尘肺是由于长期吸入大量含游离二氧化硅粉尘引起的以肺纤维化为主要病变的疾病 2019 12 29 47 第三节细胞内因素导致基因表达异常引起疾病 异常的细胞内信号持续高血糖引起的糖尿病心肌病高血糖 DAG PKC ACE Ang 心肌重塑 心肌肥大 2019 12 29 48 异常的DNA甲基化 不同的DNA甲基化模式形成不同的表观遗传特征 hCG5 转录起始区低甲基化 非滋养层细胞hCG 受体结合 cAMP Tumor 2019 12 29 49 ProteinscomplexedwithDNAallowformore open structure canbetranscribed Methylationleadstochangeinchromatinstructure morecondensedstateistranscriptionallyinactive genesare off 2019 12 29 50 第四节翻译后加工运输障碍与疾病 2019 12 29 51 白化Albinism 2019 12 29 52 酪氨酸酶与 型泛素性白化病 酪氨酸酶催化结构域点突变可以使酪氨酸酶的活性降低甚至消失 黑色素合成减少或不能合成 导致 型泛素性白化病 酪氨酸酶催化结构域以外的点突变也能导致色素缺失 蛋白质不能正确折叠 没有正常折叠的酪氨酸酶不能从内质网输出而滞留在内质网 无法完成其成熟及运输过程 2019 12 29 53 蛋白转运异常 酪氨酸酶 P蛋白 高尔基体 黑色素体 P蛋白基因突变 黑色素合成障碍引起 型泛发性白化病 内质网 酪氨酸酶与 型泛素性白化病 2019 12 29 54 第五节蛋白质降解异常与疾病 2019 12 29 55 蛋白质降解途径溶酶体途径 降解细胞吞入的胞外蛋白质泛素 蛋白酶体途径 降解胞内泛素化的蛋白质泛素 ubiquitin Ub E1 特异性泛素激活酶 E2 泛素结合酶 E3 泛素连接酶 蛋白酶体 proteasome 蛋白的降解 2019 12 29 56 2019 12 29 57 泛素 蛋白酶体系统活性被异常抑制或激活均可导致机体紊乱 2004年诺贝尔化学奖 阿龙 切哈诺沃 AaronCiechanover 阿夫拉姆 赫什科 AvramHershko 欧文 罗斯 IrwinRose 2019 12 29 58 高血脂 载脂蛋白的过度降解 泛素 蛋白酶体系统在维持正常载脂蛋白含量中起到重要的作用