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精选提分练721.(2018青岛检测)利用基因工程技术生产羧酸酯酶(care)制剂的流程如下图所示,下列叙述正确的是()a.过程所需的逆转录酶可取自于抗农药马拉硫磷小菜蛾的任一细胞b.过程利用pcr技术扩增目的基因需使用耐高温的解旋酶和引物对c.过程常用ca2处理大肠杆菌使其成为易于吸收dna的感受态细胞d.过程可利用抗原抗体杂交技术鉴定目的基因是否已导入受体细胞2.下列关于蛋白质工程的说法错误的是()a.蛋白质工程能定向改造蛋白质的结构,使之更加符合人类的需要b.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作,定向改变其结构c.蛋白质工程能产生自然界中不存在的新型蛋白质分子d.蛋白质工程与基因工程密不可分,又称为第二代基因工程3.下列有关限制性核酸内切酶的叙述正确的是()a.用限制性核酸内切酶切割一个dna分子中部,获得一个目的基因时,被水解的磷酸二酯键有2个b.限制性核酸内切酶识别序列越短,则该序列在dna中出现的概率就越大c.catg和ggatcc序列被限制性核酸内切酶切出的黏性末端碱基数不同d.只有用相同的限制性核酸内切酶处理含目的基因的片段和质粒,才能形成重组质粒4.(2018天津一中月考)限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割dna分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶bamh、ecor、hind以及bgl的识别序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶所切割出来的dna片段末端可以互补黏合?其正确的末端互补序列为()a.bamh和ecor;末端互补序列aattb.bamh和hind;末端互补序列gatcc.ecor和hind;末端互补序列aattd.bamh和bgl;末端互补序列gatc5.(2018贵阳模拟)下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述,正确的是()a.表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mrna逆转录获得b.表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点c.借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来d.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用6.北极比目鱼中有抗冻基因,其编码的抗冻蛋白具有1个由11个氨基酸组成的重复序列,该序列重复次数越多,抗冻能力越强。下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图,有关叙述正确的是()a.过程获取的目的基因,可用于基因工程和比目鱼基因组测序b.将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因,可能得不到抗冻性增强的抗冻蛋白c.过程构成的重组质粒缺乏标记基因,需要转入农杆菌才能进行筛选d.应用dna探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在与否及其是否表达7.(2017佛山七校联考)2011年8月,吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出一头携带转入赖氨酸基因的克隆牛犊“织女”,从其乳汁中获得大量的赖氨酸,它的诞生标志着国际克隆技术又取得了一次重大突破。以下与此有关的叙述中,正确的是()a.该题中赖氨酸基因表达载体的受体细胞的性染色体组成可以是xx也可以是xyb.将赖氨酸基因导入牛的卵细胞中,通过组织培养也能形成转基因牛c.人们只在“织女”的乳汁中才能获取赖氨酸,是因为只在转基因牛的乳腺细胞中才有赖氨酸基因d.运用基因工程技术让牛合成大量的赖氨酸,该技术将导致定向变异8.下表为常用的限制性核酸内切酶及其识别序列和切割位点(注:表中y为c或t,r为a或g)。据表分析,可以得到的结论是()限制酶名称识别序列和切割位点限制酶名称识别序列和切割位点bamhggatcckpnggtaccecorgaattcsau3agatchindgtyracsmacccggga.限制酶的切割位点在识别序列的中间b.限制酶切割后都形成黏性末端c.不同限制酶切割后形成的黏性末端都相同d.一种限制酶可能识别多种核苷酸序列9.(2018北京质检)下列技术依据dna分子杂交原理的是()观察dna在细胞中的分布检测目的基因是否整合到受体细胞染色体dna上检测目的基因是否翻译检测目的基因是否进行转录a. b. c. d.10.研究人员将生长激素基因通过质粒导入大肠杆菌细胞,使其表达,产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因:a是抗链霉素基因,b是抗氨苄青霉素基因,且目的基因要插入到基因b中,而大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是()a.导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒b.rna聚合酶是构建该重组质粒必需的工具酶c.可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒d.在含氨苄青霉素的培养基中不能生长,但在含链霉素的培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌11.(2018重庆质检)将苏云金芽孢杆菌bt蛋白的基因导入棉花细胞中,可获得抗棉铃虫的转基因棉,其过程如下图所示(注:农杆菌中ti质粒上只有tdna片段能转移到植物细胞中)。据图回答下列问题。(1)过程需用同种_酶对含bt基因的dna和ti质粒进行酶切。为将过程获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来,应使用_培养基。(2)过程中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养,旨在让_进入棉花细胞;除尽农杆菌后,还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养,目的是_。(3)若过程仅获得大量的根,则应在培养基中增加_以获得芽;部分接种在无激素培养基上的芽也能长根,原因是_。(4)检验转基因棉的抗虫性状,常用方法是_。种植转基因抗虫棉能减少_的使用,以减轻环境污染。12.(2018武汉模拟)图1表示含有目的基因d的dna片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有msp、bamh、mbo、sma4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为ccgg、ggatcc、gatc、cccggg。请回答下列问题:(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由_连接。(2)若用限制酶sma完全切割图1中的dna片段,产生的末端是_末端,其产物长度为_。(3)若图1中虚线方框内的碱基对被ta碱基对替换,那么基因d就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其对应的dna片段,用限制酶sma完全切割,产物中共有_种不同长度的dna片段。(4)若将图2中质粒和目的基因d通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是_。在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加_的培养基进行培养。经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因d不能正确表达,其最可能的原因是_。13.绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒(tmv)基因,可以合成一种抗tmv蛋白,叶片对tmv具有抗感染性。烟草是重要的经济作物,由于tmv的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗tmv的烟草,主要流程如图所示:(1)科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗tmv基因转录的rna,然后合成目的基因。图中过程表示_,获得的dna必须在两侧添加_和_。(2)过程构建重组ti质粒时,必须使用_和_两种工具酶。(3)由图分析,在过程构建的重组ti质粒上应该含有卡那霉素抗性基因作为_,重组ti质粒导入烟草体细胞的方法是_。(4)在过程培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外,还必须添加_,以保证受体细胞能培养成再生植株。(5)过程可采取_的方法,检测植株是否合成了抗tmv蛋白。在个体水平的鉴定过程中,可通过_的方法来确定植株是否具有抗性。答案精析1.c过程表示通过逆转录法合成目的基因,该过程需要逆转录酶,但逆转录酶不是抗农药马拉硫磷小菜蛾提供的,a项错误;过程表示利用pcr技术对目的基因进行扩增,该过程中解旋是通过高温来实现的,不需要解旋酶,b项错误;过程常用ca2处理大肠杆菌使其成为易于吸收dna的感受态细胞,c项正确;标记基因的作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,检测目的基因是否翻译成蛋白质可用抗原抗体杂交法,d项错误。2.b由于基因决定蛋白质,因此,要对蛋白质的结构进行设计改造,最终还必须通过改造基因来完成,而不是直接对蛋白质分子进行操作。3.b用限制性核酸内切酶切割dna分子中部获得一个目的基因时,需剪切2次,水解磷酸二酯键4个,a项错误;限制性核酸内切酶识别序列越短,则该序列在dna中出现的概率就越大,b项正确;catg和ggatcc序列被限制性核酸内切酶切出的黏性末端均有4个碱基,c项错误;切割目的基因和载体并非只能用同一种限制性核酸内切酶,如果不同的限制性核酸内切酶切割dna分子所产生的末端也存在互补关系,则两末端也可连接形成重组质粒,d项错误。4.d限制酶所识别的是特定的碱基序列,并在特定部位进行切割,不同的限制酶识别不同的核苷酸序列并识别不同的切点,黏性末端不同。但不同的黏性末端有时是可以进行拼接的,只要切下的游离碱基互补即可互补黏合,由图示可知,bamh和bgl都可形成黏性末端gatc,故末端互补序列为gatc,d项正确。5.c胰岛素基因只在胰岛b细胞中表达,不在肝细胞中表达,肝细胞中无相应的mrna,无法用逆转录法获得胰岛素基因,a项错误;复制启动于复制原点,胰岛素基因的表达启动于表达载体的启动子序列,b项错误;抗生素抗性基因作为标记基因,作用是鉴定和筛选含有目的基因的受体细胞,c项正确;终止密码子在翻译过程中起作用,d项错误。6.b图中是获取目的基因的过程,获取的目的基因,可用于基因工程,但不能用于比目鱼基因组测序;将多个抗冻基因编码区相连形成的能表达的新基因可能不再是抗冻基因,所以可能得不到抗冻性增强的抗冻蛋白;是基因表达载体的构建过程,基因表达载体通常由启动子、目的基因、终止子和标记基因构成,其中标记基因的作用是筛选重组质粒,利用农杆菌转化法只能将质粒导入受体细胞,不能对重组质粒进行筛选;利用dna探针技术可检测目的基因是否插入染色体dna中及目的基因是否转录出mrna,利用抗原抗体杂交技术检测目的基因是否表达出来。7.d根据题干可知,从“织女”的乳汁中获得大量的赖氨酸,说明基因表达载体的受体细胞是雌性,a错误;在基因工程中,将目的基因导入到动物的受精卵中,b错误;由于将赖氨酸的基因导入动物的受精卵中,因此转基因动物的体细胞中都有赖氨酸基因,但是只在乳腺细胞中表达,c错误;基因工程是人为地将目的基因导入受体细胞,定向地改造生物的遗传性状,d正确。8.d表中信息显示:hind和sma这两种酶的切割位点在识别序列的中间,酶切后形成平口末端,其余限制酶的切割位点在识别序列的两边,酶切后形成黏性末端,a、b项错误;酶具有专一性,不同限制酶切割后形成的黏性末端一般不同,c项错误;由题意“表中y为c或t,r为a或g”可知,一种限制酶可能识别多种核苷酸序列,d项正确。9.c解题流程如下:10.d在构建基因表达载体的操作过程中,用同一种限制酶分别切割含有生长激素基因的外源dna分子和质粒后会产生相同的黏性末端,黏性末端连接时,目的基因和目的基因、目的基因和质粒、质粒和质粒都可能发生连接,所以,导入大肠杆菌的质粒不一定为重组质粒,a项错误;构建该重组质粒必需的工具酶是限制酶和dna连接酶,b项错误;目的基因插入到基因b中后形成重组质粒,其抗氨苄青霉素基因遭到破坏,导入了重组质粒的大肠杆菌对氨苄青霉素不具有抗性,但对链霉素仍具有抗性,因此不能用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒,c项错误;综上分析,在含氨苄青霉素的培养基中不能生长,但在含链霉素的培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌,d项正确。11.(1)限制性核酸内切选择(2)tdna筛选获得含tdna片段的植物细胞(3)细胞分裂素浓度芽顶端合成的生长素向基部运输,促进根的分化(4)投放棉铃虫农药解析(1)切割目的基因和载体应使用同一种限制性核酸内切酶,筛选细菌应使用选择培养基。(2)农杆菌转化法的原理是农杆菌感染植物时,ti质粒上的tdna片段能够转移并整合到植物细胞的染色体dna上。因为tdna上具有卡那霉素抗性基因,所以可用含卡那霉素的培养基筛选出获得tdna片段的植物细胞。(3)植物组织培养过程中,可加入激素调节植物细胞的脱分化和再分化。生长素用量比细胞分裂素用量,比值高时,有利于根的分化、抑制芽的形成;比值低时,有利于芽的分化、抑制根的形成。幼嫩的芽顶端可以产生生长素并向基部运输,促进根的分化,故芽在无激素的培养基中也可以生根。(4)在个体水平上检测抗虫棉时可在抗虫棉上投放害虫来判断其是否具有抗虫的性状;抗虫棉因具有抗虫性状,故可减少农药的使用,以减轻环境污染。12.(1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖(2)平口537 bp、790 bp、661 bp(3)4(4)bamh抗生素b同种限制酶切割形成的末端相同,部分目的基因d与质粒反向连接解析(1)一条脱氧核苷酸链中相邻的两个碱基之间是通过“脱氧核糖磷酸脱氧核糖”相连的,要注意与两条脱氧核苷酸链的相邻碱基之间通过氢键相连进行区分。(2)从sma 的识别序列和酶切位点可见,其切割后产生的是平口末端,图1中dna片段有两个sma 的识别序列,故切割后产生的产物长度为537(5343)bp、790(79633)bp和661(6583)bp三种。(3)图示方框内发生碱基的替换后,形成的d基因失去了1个sma的识别序列,故d基因、d基因用sma完全切割后产物中除原有的3种长度的dna片段外,还增加一种(537790)bp的dna片段。(4)目的基因的两端都有bamh的识别序列,质粒的抗生素a抗性基因上也有bamh 的识别序列,故应选用的限制酶是bamh,此时抗生素b抗性基因作为标记基因,故筛选时培养基中要添加抗
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