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革兰氏染色法各种染液的配制实验室诊断 2009-06-20 08:18革兰氏染色法是细菌学中最常用的一种鉴别染色法。 细菌经结晶紫染色，并用碘液媒染后，用95酒精脱色，最后用番红液复染，倘若细菌经结晶紫、碘液染色后不被酒精脱色，仍保持紫兰颜色，则为革兰氏染色阳性；如果细菌被酒精脱色，则可被番红液复染成红色，乃为革兰氏染色阴性。此染色法将细菌分为两大类，可以帮助鉴别细菌及治疗时选择适当的抗菌药物。目的要求 掌握细菌涂片制作及革兰氏染色法的操作技术。材 料 1葡萄球菌和大肠杆菌混合菌液。 2结晶紫染色液。 3革兰氏碘液。 495酒精。 5番红染液。 6载玻片。方 法 一、涂片标本的制备（见实验一） 二、革兰氏染色法 1初染：在上述已固定的涂片上，滴加结晶紫染液，染色1分钟，水洗。 2媒染：滴加革兰氏碘液，作用13分钟，水洗。 3脱色：滴加 95酒精，并频频摇动玻片，至无紫色脱出为止（约20秒），水洗。 4复染：加番红染液，复染半分钟，水洗，用吸水纸印干后，油镜检查。 结果：视野中可以察见两种细菌： 葡萄球菌：紫色、球形、葡萄状排列。 大肠杆菌：红色、杆状、散在排列。【附】革兰氏染色法各种染液的配制 一、结晶紫（ ）染液 结晶紫 2.0g 草酸铵 0.8g 95酒精 20ml 蒸馏水 80ml 先将结晶紫溶于酒精，草酸铵溶于蒸馏水中，然后将两液混合，静置小时使用。此染液稳定，置密闭的棕色瓶中可储存数月。 二、革兰氏碘液 碘 1.0g 碘化钾 2.0g 蒸馏水 300ml先将碘与碘化钾混合，加水少许，略加摇动，待碘完全溶解后再加蒸馏水至定量。三、脱色剂：95酒精四、复染剂：番红（沙黄 ）染液
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