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重庆市教委科学技术研究项目计 划 申 报 书花椒籽皮油制备生物柴油的关键技术研究A类2009.01-2010.12重点实验室/学科:废油资源化技术与装备教育部工程中心申报 单位: 重庆工商大学 (公章)郑旭煦(签章)联系电话: 王崇举(签章)重庆市教育委员会制填表说明 填写申报书前,请先查阅重庆市教委科技项目计划管理办法及规定,申报书各项内容,要实事求是,用钢笔或碳素笔逐条认真填写或打印,表述要明确、严谨,字迹要清晰易辩,外来语要同时用原文和中文表述。 申报书为十六开本,复印时用A4复印纸,活页装订,各栏内容空格不够时,请自行加页。 研究项目类别分为三类:类 应用技术研究 类 基础应用基础研究 C类 软科学研究 研究单位和协作单位请填写全称。 项目参加人员应填写实际研究人员。 封面上重点实验室/学科是指项目负责人所在的省级以上的重点实验室或重点学科名称,如项目负责人为非重点实验室/学科学术骨干,此栏可不填报。 1一 立项依据(包括项目的意义,国内外研究现状分析;同类技术的市场需求情况及技术水平现状.)生物柴油是指生物油脂与短链醇在一定的条件下反应得到的脂肪酸酯类物质。与一般石化柴油相比,生物柴油可再生、易降解,燃烧尾气中有害气体和颗粒物的浓度大大降低,且无二氧化硫排放,燃用生物柴油还能缓解温室效应。因此,利用生物油脂生产生物柴油无论在能源领域中还是在环境保护领域中都有着非常重要的意义。生物柴油的生产方法根据其催化方式可分为化学(酸碱)催化法、超临界法、生物酶法1。目前,生物柴油的工业化生产方法主要是碱催化法。碱催化法生产生物柴油速度快且转化率高,但此法在生产过程中产生废碱液,对环境造成污染,且不能处理高酸度的废油脂。酸催化法适用于游离脂肪酸和水分含量高的反应体系,产率高,但甲醇用量大,反应时间长,需要较高的反应温度。超临界醇法2生产生物柴油无需催化剂,反应速率快、转化率高,反应分离可同时进行,但反应需在高温高压的条件下进行,对设备要求相当高且能耗巨大。超临界CO2酶催化法是近年研究的热点3,此方法对温度和压力相对超临界醇法要低得多,且具有超临界催化法的优点,但目前的转化率不高。生物酶法是以脂肪酶为催化剂,催化油脂与短链醇进行酯交换反应。与上述方法相比,生物酶法具有多方面的优势。相对于酸碱催化法,生物酶法对原料品质没有特别要求,不仅可以催化精炼的动植物油,同时也可以催化酸值较高且有一定水分含量的餐饮废油转化成生物柴油;且生物酶法酯交换反应短链醇消耗量较少,产品回收过程简单,无污染排放,适用范围广。与超临界醇法相比,生物酶法又具有反应条件温和、能耗低、对设备要求低等优点。但另一方面,生物酶法制备生物柴油也存在一些缺点,如生产成本高、生产效率低,阻碍了酶法技术在工业生产上应用。国内外很多学者针对这些问题进行了探索性地研究。因此如何提高酶法的生产效率、降低其生产成本成为国内外研究者目前要解决的首要问题。国内外有关提高生物酶法生产效率的措施主要为两个方面,一是针对不同体系选择适当的脂肪酶作催化剂4-6;二是降低底物甲醇和产物甘油对酶的毒性,分别采用叔丁醇稀释甲醇法7、分步添加甲醇法8,9、溶剂洗涤法10,11、底物浸泡法【12,13】、替换酰基受体法【14,15】等方法。降低生物酶法生产成本主要有,降低原料成本,将价格较高的、占生物柴油生产总成本的6075%的植物精制油改为餐饮或工农业废油来生产生物柴油【16-19】,既可变废为宝,创造极大的经济效益,又能减少废油对环境和人们健康的危害;采用脂肪酶或微生物固定化技术【20,21】,增强酶的稳定性,提高酶的多次重复利用率,降低脂肪酶的使用成本。我国是花椒第一生产大国,但目前对花椒的开发利用还不到1/2。已开发的花椒产品(如保鲜花椒、花椒粉、花椒油及花椒精油等)都来自于花椒的果皮,因其风味独特大都被人们作为烹饪的调味品;但占花椒树产出物55%的花椒籽,却因长期未得到合理利用而被废弃填埋或者焚烧。随着重庆花椒种植面积的不断扩大(仅江津市已达80万亩),花椒产量的逐年上升,这一废弃资源将以惊人的速度增长,仅江津市一年就将废弃10万吨以上的花椒籽资源。花椒籽中油脂含量为2731%。花椒籽仁油富含-亚麻酸、亚油酸和油酸,是一种非常好的高营养保健食用植物油;而花椒籽皮油的富含棕榈酸、棕榈油酸、油酸、亚油酸,只因其含有较多的游离脂肪酸、胶质和蜡质,不能作为食用油加以利用,只能废弃或用于工业溶剂。本课题组与重庆江津四面山花椒有限公司联合主持了重庆市科技攻关项目“重庆江津九叶青花椒籽仁油提取、精制工艺及货架保存技术研究”,提出并采用同种溶剂两步浸提工艺分离提取花椒籽皮油和仁油,开展了花椒籽仁油精制、抗氧化性能及货架保存技术等研究,在国内首次解决了花椒籽的皮与仁分离的技术难题,克服了用其它方法提取的花椒籽仁油存在色泽深、酸值高、精制后的花椒籽仁油难以达到食用油标准等缺点,实现了工艺简单、生产成本低、提取率高、仁油质量好等目标,申请了国家发明专利同种溶剂两步浸提法提取花椒籽皮油、仁油工艺(申请号200810070047.X)。目前,本课题组正在研发花椒籽皮油、仁油分离提取中试生产装置,为花椒公司投资上千万元开发花椒籽仁油生产线奠定了坚实基础。鉴于已开展的项目没有解决花椒籽皮油的开发利用,于是我们提出,在重庆市四面山花椒有限责任公司开发利用花椒籽仁油的同时,以副产的花椒籽皮油为生物柴油的廉价原料,以生物酶的筛选和生产工艺的改进为突破口,以提高花椒籽皮油的转化率、降低生物酶的使用成本为目标,努力攻克花椒籽皮油制备生物柴油的关键技术,为有效利用花椒籽皮油这一废弃资源开辟新路,为花椒产业的可持续发展和酶法生产生物柴油的产业化进程贡献力量。1薛建平,唐良华,苏敏等. 生物酶法生产生物柴油的研究进展J. 生物技术. 2008,18(13): 95-972Saka S ,Kusdiana D. Biodiesel fuel from rapeseed oil as prepared in supercritical methanol J . Fuel ,2001,80(2):225-231.3 Knez Z, HabulinM. Compressed gases as alternative enzymatic - reaction solvents: a short review J. J of Supercritical Fluids, 2002,23:29 - 42.4Kaieda M,Samukawa T ,Matsumoto T ,et al . Biodiesel fuel production from plant oil catalyzed by Rhizopus oryzae lipase in a water-containing system without an organic solvent J. Journal of Bioscience and Bioengineering 1999,88:627-631.5 Kamini N R, Iefuji H. Lipase catalyzed methanolysis of vegetable oils in aqueous medium by Cryptococcus spp. S-2J. Process Biochemistry , 2001,37:405-410.6Mohamed M. Soumanou, UWE T. Bornscheuer. Improvement in lipasecat-alyzed synthesis of fatty acid methyl esters from sunflower oil J. Enzyme and Microbial Technology, 2003, 33:97-103.7Li L L, Du W, Liu D H,et al. Lipase-catalyzed transesterification of rapeseed oils for biodiesel production with a novel organic solvent as the reaction mediumJ. Journal of Molecular Catalysis B:Enzymatic, 2006,43:58-62.8Shimada Y, Watanabe Y, Samukawa T, et al. Conversion of vegetable oil to biodiesel using immobilized Candida antarctica lipase J. J. Am. Oil Chem.Soc., 1999,76:789-793.9Watanabe Y, Shimada Y, Sugihara A,et al. Continuous production of biodiesel fuel from vegetable oil using immobilized Candida antarctica lipase J . J.Am. Oil Chem. Soc., 2000, 77:355-360.10Dossat V, Combes D, Marty A. Continuous enzymatic transesterification of high oleic sunflower oil in a packed bed reactor:influence of the glycerol productionJ. Enzyme Microbial Technology, 1999,25:194-200.11吴虹,宗敏华,娄文勇等.无溶剂系统中固定化脂肪酶催化废油脂转酯生产生物柴油J.催化学报,2004,25(11):903-908.12 Samukawa T, Kaieda M, Matsumoto T,et al. Pretreatment of immobilized Candida antarctica lipase for biodiesel fuel production fromplant oil J. Journal of Bioscience and Bioengineering, 2000,90(2):180-183.13Jech-Wei Chen, Wen-Teng Wu. Regeneration of immobilized Candida antarctica lipase for transesterificationJ. Journal of Bioscience and Bioengineering, 2003,95(5):466-469.14Xu Y Y, DuW, Liu D H,et al. A novel enzymatic route for biodiesel production from renewable oils in a solvent-free mediumJ. Biotechnology Letters, 2003,25:1239-1241.15Modi M K, Reddy J R C, Rao B V S K, et al. Lipase - mediated conversion of vegetable oils into biodiesel using ethyl acetate as acyl acceptor J.Bioresource Technology, 2007,98:1260-1264.16Chen G, Ying M, Li W. Enzymatic conversion of waste cooking oils into alternative fuel-biodiesel J. Applied Biochemistry and Biotechnology , 2006,132:911-921.17高静,王芳,谭天伟等. 固定化脂肪酶催化废油合成生物柴油J .化工学报, 2005,56(9): 1727-1730.18Watanabe Y, Shimada Y, Sugihara A, et al. Conversion of degummed soybean oil to biodiesel fuel with immobilized Candida antarctica lipaseJ. Journal of Molecular Catalysis B:Enzymatic, 2002,17:151-155.19Kojima S, Du D, Sato M, et al. Efficient Production of Fatty Acid Methyl Ester from Waste Activated Bleaching Earth Using Diesel Oil as Organic SolventJ. Journal of Bioscience and Bioengineering, 2004,98(6):420-424.20高阳,谭天伟,聂开立等. 大孔树脂固定化脂肪酶及在微水相中催化合成生物柴油的研究J. 生物工程学报,2006,22(1):114-118.21Hama S, Yamaji H, Kaieda M, et al. Efect of fatty acid membrane composition on whole-cell biocatalysts for biodiesel - fuel productionJ . Biochemical Engineering Journal, 2004,21: 155-160.22Lara P V, Park E Y. Potential Application of Waste Activated Bleaching Earth on the Production of Fatty Acid Alkyl Esters Using Candida Cylindracea Lipase in Organic Solvent System J . Enzyme and Microbial Technology, 2004, 34( 3 /4) : 270277.23陈志锋,吴虹,宗敏华.固定化脂肪酶催化高酸废油脂酯交换生产生物柴油J.催化学报2006, 27(2):146150. 二研究方案1、研究目标、主要研究内容和拟解决的关键问题研究目标以花椒产业的废弃油料资源花椒籽皮油为原料,通过对现有的脂肪酶筛选(或改造),对不同酰基受体、不同介质在常压和超临界CO2体系中制备生物柴油的效率、成本、工艺流程和产品后处理进行系统比较,获得廉价高效的酶催化剂及其生产工艺,为花椒籽皮油的开发利用奠定基础。研究内容(1)花椒籽皮油的预处理由于花椒籽皮油含有较多的游离脂肪酸、胶质和蜡质,为避免胶质、蜡质过多吸附在脂肪酶或固定化酶的载体上,阻止酶与底物的接触,需对花椒籽皮油进行脱胶脱蜡处理。(2)酶催化剂的筛选及固定化技术研究已脱胶脱蜡的花椒籽皮油不仅富含棕榈酸、棕榈油酸、油酸、亚油酸,而且含有较多的提取溶剂,需根据皮油的组成和残留的提取溶剂特性,对现有的游离脂肪酶或固定化脂肪酶进行筛选,以获取催化活性高、对短链醇耐受能力强、适宜于花椒籽皮油转化的酶催化剂;研究游离脂肪酶的固定化方法,寻找廉价易得并能很好地维持游离脂肪酶催化活性的载体,降低脂肪酶的使用成本。(3)生产工艺的选择与优化为了降低底物甲醇和产物甘油对酶的毒性,提高生物酶法的生产效率,需比较不同生产工艺,诸如醇分步添加法、释醇法、溶剂洗涤法、底物浸泡法、替换酰基受体法等的优劣,选择并优化工艺条件,并在此基础上,比较常压体系和超临界CO2体系生产生物柴油的转化率、生产成本、工艺流程、产品后处理的差异,从中选择出转化率最高、成本最为低廉、操作简便、产品后处理容易的生产工艺。拟解决的关键问题(1)高效廉价的酶催化剂的筛选是本项目的首要关键技术。花椒籽皮油是富含棕榈酸、棕榈油酸、油酸和亚油酸和少量提取溶剂的特种油脂,如何针对这一特性,在现有的游离脂肪酶或固定化脂肪酶中进行筛选,是本项目需首要解决的关键问题。拟根据文献和预实验结果,选择在提取溶剂存在条件下能有效催化棕榈油转化、且对短链醇耐受能力强、价廉易得的脂肪酶为初始筛选对象,并通过固定化技术对游离脂肪酶进行改造,以期获得高效廉价的生物酶催化剂。(2)选择何种生产工艺也是本项目的关键技术之一。由于底物甲醇和产物甘油对酶的毒害作用是阻碍酶法推广应用的主要瓶颈,因此选用何种操作条件(常压或超临界CO2)、何种酰基受体、何种介质(溶剂),以达到提高酶法的生产效率的目的,是酶法生产生物柴油的关键问题。拟系统比较不同酰基受体、不同的醇添加方式、不同介质(溶剂)分别在常压生物酶法和超临界CO2生物酶法中的生产效率与成本,从中选择适宜的生产工艺。2、主要技术经济指标及创新点主要技术指标:(1)花椒籽皮油的转化率在90%以上;制得的生物柴油达到国内生物柴油生产标准;(2)完成研究论文2-3篇,其中1-2篇被SCI或EI源刊录用;(3)申请发明专利1项。主要经济指标:因选取了花椒加工中的废弃物花椒籽的皮油作原料,原料成本得以大幅度降低;生物柴油的生产采用生物酶催化法,具有无污染、低耗能、使用范围广等优点;力争通过本项目的研究,使得由花椒籽皮油生产的生物柴油成本比0柴油低10%以上。创新点:首次提出利用花椒产业的下脚料花椒籽皮油生产生物柴油,并针对花椒籽皮油的组成特征筛选和改造酶催化剂,系统比较不同操作条件(常压和超临界CO2体系)、不同酰基受体、不同介质对花椒籽皮油的转化率、生产成本、工艺流程、产品后处理的影响,开发花椒籽皮油制备生物柴油的生产工艺,开辟花椒籽皮油的应用领域,提高花椒籽的回收利用价值,针对性、系统性强,具有原始创新性。 3、拟采取的研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析拟采取的研究方法:(1)花椒籽皮油预处理酸法脱胶-冷却结晶脱蜡为减少花椒籽皮油中的胶质、蜡质对生物酶的黏附,拟采用酸法脱胶-冷却结晶脱蜡法对花椒籽皮油进行预处理。首先采用磷酸作助剂,脱除皮油中非水化磷脂,然后用碱液中和刚刚加入的少量酸和油中的游离脂肪酸,将形成的油皂离心分离;最后根据蜡在低温下结晶的原理进行冷却结晶脱蜡。通过对工艺条件的优化,获得适合生物酶催化的花椒籽皮油。(2)酶催化剂的筛选及固定化技术研究拟选择假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)脂肪酶、假丝酵母脂肪酶(Candidia SP.99125)和固定化脂肪酶Novozym 435等为初始筛选对象,以花椒籽皮油的转化率为考察指标,分别在常压体系和超临界CO2体系下,按照文献报道的各种酶适宜的生产条件进行对比实验,筛选高效的酶催化剂;若选择的酶为游离脂肪酶,则采用膜或纤维织物布作为载体制备固定化酶,以提高脂肪酶的活性和使用寿命,降低其使用成本。(3)生产工艺的选择与优化以筛选获得或自制的固定化脂肪酶为催化剂,分别在常压体系和超临界CO2体系下,系统比较不同酰基受体(甲醇、乙醇、正丙醇、乙酸甲酯、乙酸甲酯)、不同短链醇添加方式、以及醇稀释、溶剂洗涤、底物浸泡等方法对提高花椒籽皮油转化率的优劣,选择并优化工艺条件,最后比较常压和超临界CO2体系下的生产成本、工艺流程、产品后处理的差异,确定最佳生产工艺。技术路线:预处理花椒籽皮油酸法脱胶加碱中和水洗离心分离冷却结晶离心分离干燥酶催化剂的筛选与生产工艺的选择优化脱胶脱蜡皮油在常压和超临界CO2体系脂肪酶筛选固定化处理生产工艺选择工艺条件优化常压与超临界CO2对比确定最佳生产工艺实验方案(1)花椒籽皮油的预处理酸法脱胶:花椒籽皮油样品加热到65,加入样品油质量0.2%的浓H3PO4,搅拌20 min;再加入一定量的碱,调节pH 5-6;加样品油质量1015%的热水,搅拌15 min,升温到75,静置一段时间,离心分离出脱胶花椒籽皮油。冷却结晶脱蜡:将脱胶油调温到70左右,然后以一定速度降至25,再以一定的速 度降至7左右,恒温静置一段时间,离心分离,干燥,得脱蜡花椒籽皮油。(2)酶催化剂筛选及固定化技术研究常压体系下脂肪酶的筛选将一定量的花椒籽皮油、醇(或采取分步添加醇方式)或乙酸甲酯、液体介质(有机溶剂、水或磷酸缓冲液等)混合,放入具塞锥形瓶中,置于可自动控温的摇床中,加热至一定温度,加入一定量的游离或固定化脂肪酶开始反应,定时取样,离心后用于气相色谱分析。根据花椒籽皮油转化率的高低,选择常压下适宜的游离或固定化脂肪酶。超临界CO2体系下脂肪酶的筛选将一定量的花椒籽皮油、醇(或采取分步添加醇方式)或乙酸甲酯、缓冲溶液、游离或者固定化脂肪酶混合均匀,放入超临界CO2反应釜中,通入CO2气体,然后在设定的温度和压力下反应,一段时间后缓慢卸压,之后将反应物取出,离心后用于气相色谱分析。根据花椒籽皮油转化率的高低,选择超临界CO2体系下适宜的游离或固定化脂肪酶。游离脂肪酶的固定化技术研究以纺织物膜或纤维织物布为载体,通过吸附法对游离的脂肪酶进行固定化处理。载体先与含有吐温80及PEG6000、明胶的固定剂溶液混合,晾干后与酶溶液充分混匀,室温下晾干待用。(3)生产工艺的选择与优化酰基受体的选择分别在常压体系和超临界CO2的体系中,比较甲醇、乙醇、正丙醇、乙酸甲酯、乙酸甲酯等酰基受体在筛选获得或自制的固定化脂肪酶中的转化率高低,选择转化率最高的酰基受体。醇添加方式的选择在以醇作酰基受体的常压和超临界CO2体系中,考察醇一次添加和分步添加方式对花椒籽皮油转化率的影响,确定醇的添加方式。反应介质的选择在常压和超临界CO2体系中,分别采用释醇法、溶剂洗涤法、底物浸泡法等工艺,考察它们对提高花椒籽皮油转化率的效果,选择适宜的反应介质。常压和超临界CO2体系中工艺条件的优化采用正交试验设计或均匀实验设计法,分别优化常压和超临界CO2体系中制备生物柴油的工艺条件。最佳生产工艺的确定根据优化的工艺条件,综合比较常压体系和超临界CO2体系生产生物柴油时的转化率、生产成本、工艺流程、产品后处理等的差异,确定转化率高、生产成本低、操作简便、产品后处理容易的工艺为最佳生产工艺。可行性分析国内外许多研究者的成果为本项目选用假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)脂肪酶、假丝酵母脂肪酶(Candidia SP.99125)和固定化脂肪酶Novozym 435作初始酶催化剂奠定了坚实基础。例如:2003年Mohamed M等6报道Rhizomucor miehei、Thermomyces lanuginosa 和 Pseudomonas fluorescens脂肪酶在含水量极低的正己烷、异辛烷和柴油等有机溶剂中表现出较高的催化活性;其中 Pseudomonas fluorescens 脂肪酶具有很好的对甲醇的耐受性,能在不添加任何溶剂、醇油比为4.5:1 的条件下高效地进行转酯反应,转化率达90%。2004年Lara P V 等22研究在正己烷中以假丝酵母脂肪酶为催化剂,以正丙醇为底物,反应8h后,棕榈油转化率达96%。2005年高静等17用纺织品吸附法固定化假丝酵母脂肪酶Candidia SP.99125,在石油醚体系中催化废油脂合成了生物柴油。2006年陈志峰等23以乙酸甲酯代替短链醇,用固定化脂肪酶Novozym 435催化高酸废油脂生产生物柴油,并认为它是可望形成简便、高效、低生产成本的生物柴油制备方法。项目组在前期主持的重庆市科技攻关项目“重庆江津九叶青花椒籽仁油提取、精制工艺及货架保存技术研究”中,提出并采用同种溶剂两步浸提法以及超临界CO2法成功实现了花椒籽皮油和仁油的分离,为本项目的开展准备好了原料。项目组成员熟练掌握了超临界CO2萃取的原理和操作技术,为本项目采用超临界CO2酶法制备生物柴油作好了技术准备。同时项目组长期从事微生物发酵和酶工程技术研究,先后主持完成了重庆市自然科学基金项目“餐饮废渣固态发酵生产高蛋白饲料”、“柑橘皮渣发酵生产高蛋白饲料”,并申请了相关发明专利,具有较深厚的酶催化技术的功底。重庆工商大学废油资源化技术与装备教育部工程研究中心、环境与生物工程学院拥有10L/1L的超临界CO2萃取设备以及气相色谱仪(岛津)、高效液相色谱(贝克曼)等检测设备和专门的微生物实验室,为各种生物酶的筛选与分析测试提供了保障。本项目使用的实验方法、分析方法等多为国内外应用多年的经典方法,且项目组成员均已掌握。相信在市教委科技处和我校科研处的正确领导和大力支持下,经过全体课题组成员的共同努力,本项目的研究任务一定能如期圆满完成。4、进度安排2009.12009.6 花椒籽皮油预处理研究,游离或固定化脂肪酶的筛选研究;2009.72009.12 游离脂肪酶的固定化技术研究;2010.12010.6 生产工艺选择与优化研究,最佳生产工艺的确定;2010.72010.12 产品质量标准检验,发表论文,结题验收。三.研究成果应用前景,预期经济、社会效益研究成果将以研究论文和发明专利方式提供,预计完成研究论文2-3篇,其中1-2篇被SCI或EI源刊录用;申请发明专利1项。该项目研制的生物柴油燃料,可在市政或环卫车辆上进行应用试验;并在此基础上申请建立花椒籽皮油生产生物柴油的示范工程,实质推广应用于其它非食用油或餐饮废油,为生物柴油的产业化带来新突破。花椒作为一种重要的香料经济作物,在我国实施农业产业结构调整和退耕还林政策进程中,其种植面积和产量均迅速增加,到2001年,全国花椒种植面积已超过70万hm2,初步形成了陕西的韩城,山东的泰安,四川的金阳、茂汶和汉源,重庆的江津等全国闻名的花椒产业基地。花椒籽(椒目)作为花椒副产物,在我国每年产量近30万吨。以花椒籽皮油为原料,采用生物酶法或超临界CO2生物酶法制备生物柴油,不仅可以解决废弃的花椒籽的回收利用问题,提高花椒籽皮油的利用价值,而且由此生产的生物柴油还可以解决一些能源紧缺问题,给椒农、企业、社会带来较大的经济效益、环境效益和社会效益。四.现有工作基础本项目组在前期主持的重庆市科技攻关“重庆江津九叶青花椒籽仁油提取、精制工艺及货架保存技术研究”中,提出并采用同种溶剂两步浸提法和超临界CO2法成功实现了花椒籽皮油和仁油的分离,并且对花椒籽皮油、仁油进行了成份分析,为本项目的开展准备好了原料;并且熟练掌握了超临界CO2的原理和操作技术,为本项目采用超临界CO2酶法制备生物柴油奠定了技术基础。项目组研究人员具备深厚的微生物发酵和酶工程技术基础,对微生物和酶的筛选以及发酵工艺等方面进行过大量的研究。近几年主持完成了相关的重庆市自然科学基金项目“餐饮废渣固态发酵生产高蛋白饲料”、“柑橘皮渣发酵

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