（植物学专业论文）野生早樱组织培养及扦插繁殖技术研究.pdf

摘要 野生早樱 m 珊s 材6 砌饴砌v a r 傩c p 砒淞 隶属蔷薇科 r o s a c e a e 樱属 聊姗 为高大落叶乔木 花淡粉红色 具有观赏价值高 适应性强 抗性强的优点 是极具开发 价值的野生樱属资源 本论文开展了野生早樱组织培养和扦插繁殖技术研究 以期摸索出 提高野生早樱繁殖数量和质量的有效途径 为苗木产业化生产 优良种质保存提供理论和 技术支撑 采用嫩枝扦插法 研究了不同生长调节物质 不同扦插基质等对嫩枝插穗生根的促进 效应 研究结果如下 以n a a l 0 0 0 m g l i b a 5 0 0 m g l b a l o o m g l 等比例组合处理插穗基部1 2 h 扦插于 蛭石上 平均生根率最高为7 8 2 平均根数为7 5 条 平均根长为5 6 c m 综合以上技 术组合 野生早樱嫩枝扦插生根率可达7 8 2 移栽成活率达5 0 本研究成果进一步完 善了野生早樱扦插繁殖技术体系 在生产中具有较高的实用价值 采用组培技术手段 探讨了从无菌体系的建立 启动培养 增殖培养 壮苗培养到试 管苗生根移栽的整个过程 主要结论如下 1 以带腋芽茎段为外植体 最佳消毒方式为 7 0 酒精浸泡3 0 s 2 5 n a c l o 消毒 1 5 m 证 o 1 h g c l 2 消毒6 m i n 污染率和死亡率最低 分别为1 6 5 和l o 4 最佳的取 材时间为4 月中旬 2 启动培养采用l 9 3 4 正交试验设计 培养基类型对启动培养影响最大 其次是b a n a a 的影响作用最小 最佳启动培养基为 m s b a l 2 m g l n a a 0 3 m g l 启动率高达 8 4 5 3 增殖培养阶段的最佳培养基为m s b a 0 5 m g l n a a o 1 m g l 3 5 9 l 蔗糖 增殖系 数为4 5 适宜浓度 1 m g l 多效唑具有促进增殖和抑制增高的效应 为了保持一定的 增殖系数 继代次数以6 次为宜 4 壮苗培养采用l 9 3 4 正交试验设计 大量元素对壮苗培养的影响最大 其次为n aa b a 的影响作用最小 最佳壮苗培养基为 3 4 m s b a o 2 m g l n a a0 o l m g l 大量元素 适当降低及低水平的细胞分裂素和生长素配比 有利于壮苗培养 5 生根培养阶段 最适培养基为 1 2 m s n a a o 1 m g l i b a l o m g l 生根率达9 2 5 根条数达8 条 根长6 3 c m 黑暗处理1 4 d 有利于试管苗生根 6 选择健壮的组培苗 先闭瓶炼苗3 d 然后开瓶炼苗5 d 移栽到蛭石 河沙 1 1 基质中 移栽成活率高达9 0 试验中各项指标已达到快速繁育苗木的要求 其技术措施可以满足苗木组培生产的需 要 关键词 野生早樱 组织培养 增殖培养 扦插繁殖 植物生长调节物质 i i a b s t r a c t c p 膦淞s 甜6 鼬晚胁v a r 础c p 船如淞s u b o r d i l l a t e s 也eg e n u so f 嬲淞 r o s a c e a e t h ec o l o r o fn o w e ri sp a l ep i i 墩a sat a l ld e c i d l l o u s 仃e e c p 阳哼z 岱j 甜6 办f 纪砌v a r 伽c p 刀虎力sl l a sa d v 锄 t a g e s o f1 1 i g ho m a m e n t a lv a l u e f l e x i b i l 时 s n d n gr e s i s t a n c e i ti so n eo f 析l dc p 阳s 淞r e s o u r c e sw i t l l e x t r e m e l yl l i g hv a l u e t h et l l e s i sl a u i l c h e dc u t t a g ea n dt i s s u ec u l t u r et e c l u l i q u eo fc p 铘淞s 6 办一 讹砌v a r 卯刀如淞 s o 弱t 0f i l l dt h ee f i f e c t i v ew a yo f i i n p r o v m gm eq u a n t 毋a n dq u a h t o f 船姗s 甜砌f 咖砌v a r 傩c 阴如瑚a 1 1 dp r o v i d i r 曙t l l e o r i c a l 觚dt e c l l l l i c a ls u p p o r tf o rp r o d u c t i o n a n dg e r 玎叩l a s mc o l l s e r v a t i o n u s e ds o f tc u t t a g em e t l l o d t l l e 廿l e s i ss t u d i e d 廿l ep r o m o t i o no fd i 仃e r e mc u t t m gs u b s 仃a t e s p l 锄tg r o w mr e g u l a t o r se t ci i lc u t t i r 培r o o 缅go fs o r o o d t h em a i l lc o n c u l u s i o n sw e r ed 1 a w n a sf o l l o w s r o o t i n gr a t ew a s 7 8 2 f o rs o l fc u 咖go fh a l fw o o d e ds 钯m 仃e a t e d 嘶t 1 11o o o m g ln a a 5 0 0 m 虮i b aa n d10 0 i n g lb af o r3 0m i n u t eo n 位s u b s 仃a t e 诵t l lv e m i c u l i t e r n l ea v e r a g e n u m b e ro fr o o tc o u l dr e a c h7 肌dt h ea v e r a g el e n g mo fr 0 0 tw a s5 6c en t j 血e t e r b a s e do nn l e a b o v et e c l l n o l o g y t l i er o o 衄gr a t eo fq 珊淞s 甜砌以p 砌v a r 傩c p 沈瑚c o u l dr e a c h7 8 2 s u r v i v a lr a t eo f 仃a n s p l a t i n gr e a c h e d5 0 1 kr e s e a r c hr e s u l t s 矗m h e r 呻r 0 v e dc 珊c a g e r e p r o d u c t i o nt e c l 蚵c a ls y s t e m 锄dh a d1 1 i g hp r a c t i c a lv a l u ei nt h ep r o d u c t i o n u s e dt i s s u ec u l t u r et e c h l o l o g y t h j st l l e s i ss t u d i e dt h e h o l ep r o t o c o lo ft i s s u ec u l t l l r e 丘 o m t h ee s t a b l i s h n e n to fg e 皿丘 e es y s t e m i n 血i a t i o nc u l t u r e p r o l i f e 硎o na n ds 仃e n 酊h e m n g s e e d l m gc m n l r et om er a d i c a t i o na j l d 衄1 s p l a n t a t i o n t h ec o n c u l u s i o nw a sm a d ea sf 0 1 l o w s l t a k i n gt h es t e m 谢ma i l l a 哆b u da se x p l a n t m eb e s tw a yo fs t e r i l i z a t i o nw a s7 0 a l c o h o l 3 0 s 2 5 n a c l o 15 m i n 0 1 h g c 12 6 m i n t h ec o n t 锄i n a t e dr a t ea n dd e a t hm t e w e r e1 0 w e 瓯w m c hw e r e16 5 a n d10 4 r e s p e c t i v e l ya 船ri i l o c u l a t a t i o n 1 1 1 eb e s tt i i l l eo f e 缸a c t i o ni st h em i d d l et e n d a yo f a p r i l 2u s e dt l l el 9 3 耳o m l o g o m le x p e 血l e n td e s i g n0 nm ei 血i a t i o nc u l t l 聪 位g r e a t e s te 倍c t w a sm e d i u mt r p e s e c o i l d l yi t a sc y t o k i i l i l lc o i l c e n 仃a t o 玛m es m a l l e s te f r e c t a sn a a t h e o p t i m 啪m e d i 眦 l 阻sm s b a l 2 m g l 时订aa 0 3 m g lf o r 碰t i a t i o ni n d u c t i o n 1 ki i l i t i a t i o n r a t e v a s8 4 5 3o nm ep r o l i f e r a t i v eg r o w t hs t a g e t 1 1 e0 p t i n l 衄m e d i 哪内rb u dp r o l i f 宅硎o nw a s m s e l a o 5 m g l n a a 0 1 m g l s u c r o s e 3 5 9 l p r o l i f e r a t i o nc o e m c i e n t 张s4 5 p a c l o b l l 仃a z 0 1 o fs u i t a b l ec o n c e 曲伽o n 1m g l p l a y e dp r o m o t i n gp r o l i f e r a t i o n 锄di n l l i b i t i n gh e i g h tr o l e s f o rt h es a k eo fk e e p i n gp r o l i f e r a t i o nc o e 伍c i e m s u b c u l t u r et os i xt h l l e sw a ss u i t a b l e 4u s e dt l l e l 9 3 o m l o g o n a le x p e 曲e n td e s i g no ns t r e n g l e i l i n gs e e d l i n gc u l t u r e n l e g r e a t e s te 丘 e c tw a sm 懿se l e m e n to fp r o p o t i o 玛s e c o n d l yi tw 硒n a a t h es m a l l e s te 丑 e c t v a s b a t h eo p t i m u mm e d i u mf o rs 仃e n g t l l e l l i n gs e e d l i n gc u l t u r ew 硒3 4 m s b a 0 2 m g l n a a 0 0 1 m g 几 b o t ha d e q u a t em a s se l e m e n t 觚dt h el o wl e v e lo fc y t o k h l i na n da u 虹n p r o p o n i o n w e r ei 1 1f a v 0 ro fs t r e n 群h e l l i n gs e e d l i i l gc u l t u r e 5t ko p t i m u mm e d i u m v 嬲1 2 m s n a a o 1 m g l i b a1 0 m g lf o rr o o 血g t h er o o t i i l g t t t r a t ec o u l dr e a c h9 2 5 m er o o tn 啪b e rc o u l dr e a c h8 t l l er o o t l e n g t hc o u l dr e a c h6 3 c m f o u r t e e n 1 a y sd a r l 仃e 巾 n e mp r o m o t e dr o o t m go fv i t r os e e d l i n g 6s e l e c t e dh e a t h yv i t l o s e e d l i n g s c l o s m gt l l ec u l t u r eb o t t l ef o r3d a y s t l l e no p e n i n gt l l e c u l t u r eb o t t l ef o r5 d a y sd 谢n g s e e d l i n gt r a i n i n g s u b s t r a t e 州mv e m i c u l i t ea l l ds a n db v1t o1 w a st l l eo p t i m u m t h es u v i v a lr a t eo f 仃a n s p l a m sr e a c h e d9 0 e x p e r i m e n t a li i l d e x e sh a v er e a c h e dt h er e q u i r e m e n to fr a p i dp r o p a g a t i o ns e e d l i l l g t h e t e c l l l l i c a lm e a s u i e sc o m dm e e tp r o d u c t i o ni l e e d s k e yw o r d s 船螂占甜拍f 胞砌v a r 鲫c p 比珊 t i s s u ec u l t u r e p r o l i f e r a t i o nc u l t u r e c u n a g e p r o p a g a t i o n p l a mg r o v t l lr e g u l a t i n gs u b s 协n c e s r o n gd o n g q i n g b o t a i l y s u p e i s e db ya s s o c i a t ep r o f e s s o rw 抽gx i a n r o n g 英文缩写英文名称 m s 冲m b 5 b a k t z t n a a i b a i a a p p 3 3 3 p h l x 缩略词表 l i s to fa b b r e v i a t i o n 中文名称 m u m s k g e s k o o g 1 9 6 2m s 培养基 g a m b o 娼酏c 1 9 6 8 聊m 培养基 b 5 培养基 6 b e n z y l a d m i n o p 嘶n e 6 苄基腺嘌呤 k i n e t i n z e a t i l l 仅 m p h t i l a l e n e a c e t i ca c i d i 1 1 d 0 1 e 3 b u 够r i ca c i d i i l d o l e 3 a c e t i ca c i d p a c l o b u 仃a z o l 激动素 玉米素 萘乙酸 吲哚丁酸 吲哚乙酸 多效唑 h y d y o g e m o nc o n c e n t r a t i o n 酸碱度 氢离子浓度 1 u x v 勒克司 照度单位 学位论文原创性声明 本人郑重声明 所呈交的学位论文 是本人在导师的指导下进行的研究工作 所取得的成果 尽我所知 除文中已经特别注明引用的内容和致谢的地方外 本 论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果 对本文的研究做 出重要贡献的个人和集体 均已在文中以明确方式注明并表示感谢 本人完全意 识到本声明的法律结果由本人承担 学位论文作者c 枞签名 季夸素榭多月铷日 学位论文版权使用授权书 本学位论丈作者完全了解南京林业大学有关保留 使用学位论文的规定 同 意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版 中国科学技术 信息研究所 国家图书馆等 允许论文被查阅和借阅 本人授权南京林业大学 可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索 可以汇编和综合 为学校的科技成果 可以采用影印 缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论 文全部或部分内容 保密口 在 年解密后适用本授权书 本学位论文属于不保密吐 请在以上方框内打 学位论文作者 本人签名 孝冬青 尊导教师 本人签名 砂 郴年 漪每 石月 日 6 月矽日 致谢 本论文是在王贤荣副教授的悉心指导下完成的 从研究立题 试验设计 试验过程到 论文成稿 每一个环节都凝聚着导师的心血和汗水 导师严谨的治学态度 渊博的知识 对事业孜孜以求的精神 谦虚的态度和求实创新 精益求精的科研精神将使我受益终生 三年中 导师在生活和学习上给予了我无私的关心和帮助 值此论文完成之际 特向我的 导师致以崇高的敬意和衷心的感谢 在组培工作过程中 竹类所丁雨龙教授 张春霞副研究员 生理组谢寅峰副教授 陈颖老师给予了我宝贵的建议和指导 马晓红实验员为试验提供了帮助 在此 向他们表 示衷心的感谢 三年的硕士学习生活中 树木组教研室向其柏教授 刘玉莲教授 汤庚国教授 陈听 副教授 袁发银工程师 许晓岗博士 伊贤贵硕士也给予了多方面的帮助 感谢师兄闰道 良博士在收集资料与组培工作开展过程中给予了帮助 感谢师兄伊贤贵硕士 师兄谢春平 硕士在野外取材给予了帮助 感谢师姐时玉娣硕士在图版处理中给予了耐心的指导 在学 习和生活中与樊英鑫硕士 董立格硕士 朱光敏硕士 曹珊珊硕士 徐文斌硕士 路飞硕 士 张琦硕士 张杰硕士 南程慧硕士 李海龙硕士 张红星硕士 纪庆亮硕士及0 5 硕 9 班同学结下了深厚的友谊 对他们在平时给予的关怀与帮助 深表感谢 向参加本论文评阅 答辩的各位专家和教授表示我诚挚的谢意 特别感谢家人在三年的研究生学习生活中给予我的理解 关心与支持 最后 向所有关心和帮助过我的老师 同学 亲人致以最诚挚的谢意和最美好的祝愿 作者 荣冬青 2 0 0 8 年6 月1 6 日于南京林业大学 亩f r吉 翮吾 樱属 c 台 珊淞 植物隶属于蔷薇科 r o s a c e a e 李亚科 p n m o i d e a 为世界著名的 木本观赏花卉 樱属植物有1 5 0 多种 陆玲娣等 2 0 0 3 分布北半球温和地区 亚洲 欧洲至北美洲均有记录 主要种类分布在我国西部和西南部以及日本和朝鲜 俞德浚等 1 9 8 6 吴征镒等 2 0 0 3 是亚热带 温带属 也是温带 亚热带的表征属 本属植物为经 济价值较高的果木和高雅的园林花木 具有广阔的开发利用前景 中国拥有丰富的野生樱花资源 国产樱属植物在4 8 种以上 包括变种及种下等级 远远超过日本等相邻国家 王贤荣 2 0 0 1 但其声誉却远远落后于日本 作为世界著名 的观赏花木 国产樱属资源的开发利用处于落后的状态 野生樱花由于长期自然选择的结 果 其野生性状比日本樱花具有更强的抗病虫能力和适应性 因此野生樱属植物资源具有 巨大的开发潜力 作为观赏价值极高 发展前景良好的樱花类植物 近年来在园林绿化中被频频引用 采用丛植或群植的方法 来构建樱花走廊或建立樱花专类园 形成樱花所特有的景观 我 国作为 世界园林之母 有着丰富的野生资源 拥有世界樱属植物大部分野生种 但长 期以来由于没有足够地对其研究 许多极具观赏价值的樱属植物在山野之中自生自灭 市 场上国内品种单一 除了白瓣樱花应用略广之外 其他品种开发利用均处于相当落后的状 态 园林绿化景区大都还是靠引进日本的樱花品种造景 日本樱花并不适宜我国南方各地 高温高湿的气候条件 即使在气候条件适宜的地区种植病虫害的发生也很严重 而且也不 能完全满足市场的需求 野生早樱 硼螂s 砌以p 砌v a r 础卯胛如珊 为樱属 q 瑚姗 高大落叶乔木 其 花期早 先叶开放 具有伞形花序 花淡粉红色 萼筒奇特 具有很高的绿化和观赏价值 是极具开发应用前景的城市园林 风景区的优良绿化树种 野生早樱是中国分布最广的樱 属植物之一 可在四川及其以东的广大地区生长 包括四川 重庆 湖北 贵州 云南 江西 湖南 福建 安徽 浙江 江苏 山东等区域 对各地环境和气候适应能力都非常 强 目前对野生旱樱不同居群间的形态变异 形态地理分化以及群落特征方面作了一定研 究 王贤荣等 2 0 0 7 但关于其繁殖技术报道甚少 谢利锁 2 0 0 2 因此 本试验开展 了野生早樱的组织培养和扦插繁殖技术的研究 以期摸索出提高野生早樱繁殖数量和质量 的有效途径 为苗木产业化生产 优良种质保存提供技术支撑 这对于野生早樱在生产中 迅速推广应用具有重要的现实意义 同时也为其他木本植物的相关研究提供一些借鉴 第一章文献综述 1 樱属植物繁殖技术的研究进展 繁殖植物是人类从事的一项十分重要的工作 在古代 人类就学会种植各种植物以满 足生活的需要 以及满足饲养动物对食物的需要 特别是在野生植物的引种驯化过程中 繁殖栽培技术是必要的手段 这关系到引种驯化的成败 植物繁殖主要包括有性繁殖和无 性繁殖 有性繁殖即播种繁殖 又称种子繁殖 无性繁殖是指不通过种子而是利用植物的 部分营养器官 如根 茎 叶等 或组织 髓 皮层 叶肉等 乃至细胞和原生质体 在适当 条件下再生形成一个完整植株 传统的无性繁殖方法主要包括扦插 压条 分株 嫁接等 现代的无性繁殖方法还包括组织培养 1 1 樱属植物的种子繁殖 在我国 樱桃栽培已有2 0 0 0 多年的历史 种子繁殖是最简单的繁殖方法 野生类樱 花种子主要以鸟播或自然散播为主要散布方式 来进行更新换代 种子因受自然环境条件 的限制以及种子本身的生理特性 自然条件下发芽率很低 近年来 关于樱属种子休眠研 究有一些报道 刘用生等 1 9 9 5 综述了樱桃 船螂筇p 甜如c p m 淞 种子休眠的原因 及打破休眠的方法 韩明玉等 2 0 0 2 以山桃似明僖妇 淞咖f c 加门口 甘肃桃似聊增出 淞 施凇 p 以s 括 毛桃似噼如岱p p 坶f c 口v 盯 口g 口刀印p 坶 c 口 杏口朋p 行砌c 口v 甜乃弦 括 马哈利樱 桃 c p 阳s 淞聊口办口彪6 为材料 分别用普洛马林 赤霉素 细胞分裂素为处理激素 研究了 不同浓度激素对破除核果类种子休眠的效果 闰道良 2 0 0 5 在钟花樱 膦甜sc p 聊d 眈s v a r c 口垅胛刀甜肠幻 种子储藏方式与发芽率关系的研究中认为 室内贮藏种子风干对种子萌 发有不利影响 干藏4 个月后发芽率为3 9 3 6 个月后下降为1 7 低温湿沙贮藏2 个月后种子发芽率显著提高为9 1 7 可见采收的樱花种子风干后应及时用湿沙低温贮 藏 有助于解除休眠 且有利于保持种子生活力 王艳华等 2 0 0 5 采用聚丙烯酚胺凝胶 电泳技术 测定同工酶及种子内贮存物质的变化 探讨了大山樱 尸尸甜疗甜ss 口孵刀f 翊种子的 休眠机理 得出外种皮机械障碍及种子中存在的发芽抑制物质是导致其休眠的主要原因 在3 4 下层积6 个月处理 种胚中的可溶性糖和可溶性蛋白的含量有增加的趋势 低温 沙藏及激素处理是打破樱属种子休眠提高发芽率的有效途径 这在生产实践中提高种子育 苗成活率和节约成本具有重要意义 种子繁殖具有繁殖系数大 植株根系强健的优点 但后代易出现性状分离现象 丢失 原种的优良性状 不适合大面积播种 h t 哈特曼 1 9 8 1 但在果树栽培和园艺育苗中 对于培育新品种和保护种质资源的多样性来说 种子繁殖是一种重要的繁殖手段 关于野 生早樱的种子繁殖方面的研究还未见报道 1 2 樱属植物的嫁接繁殖 嫁接是一门古老而又新兴的技艺 见诸文字记载的历史就有3 0 0 0 年以上 嫁接是将 两个植株部分结合起来 使两部分形成一个整体 2 个植株成为1 棵植株的生物技术 高 新一等 2 0 0 3 嫁接的优点是容易成功 开花 结实较早 易保持砧木的抗旱 抗病等 特性 桃树似嘲z sp e 坶f 阳 樱桃 r 嬲淞筇p 面c p 邪 s 圆叶樱 船淞聊口办口彪6 毛樱桃 邪淞幻聊p 刀向阳 山樱花 船螂s p 厂 砌口 草原樱 c p r 船淞痧 f f c 咖 等都可 2 以作为观赏樱花的砧木 嫁接方法可采用切接 芽接法 切接宜在春季 其步骤是 在平 地面处截断砧木 选砧木树皮光滑 纹理顺的部分 在皮层内略带木质部垂直下切2 c m 左右 将接穗插入砧木的切口中 使接穗的长斜面至少有一边形成层和砧木的形成层对准 靠紧 然后再用塑料薄膜带自下而上扎紧 芽接宜于夏季进行 新群 2 0 0 1 这样能大 大提高嫁接的成活率 孙敦琴 1 9 9 5 研究认为 樱花以双舌插接最佳 接穗取一年生带 2 3 个芽的枝 最佳嫁接时间为早春砧木刚萌动前后2 3 天内 徐玲娜等 2 0 0 1 对重瓣 樱花的繁育进行了试验 用单瓣樱花和樱桃作对比试验用来选择重瓣樱花的砧木 采用了 芽接法 嫁接时期选在7 8 月份 砧木要和所用接穗枝条粗度基本一致 选择晴天的早 上或下午进行 经观察记录得出 单瓣樱花作砧木嫁接重瓣樱花更为适宜 可见 早春和 夏季均可进行樱花的嫁接 嫁接后能否成活取决于嫁接技术 接穗和砧木的愈合情况以及两种植物之间的亲合关 系 两种植物间的代谢类型越近似 或两者之间的亲缘关系愈近 嫁接成活率就愈大 反 之愈小 1 3 樱属植物的扦插繁殖 扦插法是一项传统的植物无性繁殖技术 远在三 四千年前 我们的祖先就发明了扦 插技术 并不断地加以发展 早在公元前六世纪 诗经 齐风 中即有 折柳樊圃 之 句 说明我国古代早就用柳枝作为菜圃的篱笆 扦插具有简单易行 育苗周期短 繁殖速 度快 不受树种限制 繁殖系数较高 成本低 可以保持母树的优良特性等优点 是传统 的无性繁殖中应用前景最广的一种方法 随着人工合成生长素的研制成功以及对插穗生根 机理的认识 人工喷雾装置和自控温度 湿度 光照等设备的出现 许多难生根树种的扦 插繁殖获得了很大成功 据相关文献 吕明霞 2 0 0 0 曹德韦等 2 0 0 2 付红祥 2 0 0 4 陆小清等 2 0 0 5 王 兆存 2 0 0 5 蔷薇科中有较多植物采用扦插的繁殖方式 在樱属植物中 大多是用扦插 法来繁殖樱桃的优良砧木 如吉塞拉系列 梁会敏 2 0 0 5 考特砧木 左秀霞 2 0 0 6 的扦插繁殖 其目的是获得优良的无性系 这对于结实期长的木本植物来说 有着重要的 意义 优良无性系的遗传增益能超过实生良种的增益 因此 有的林学家预言 将来的林 业是无性系林业 而无性系繁殖的方法 扦插是主要的 近年来 随着樱花在园林中的广泛应用 关于樱花扦插繁殖的报道较多 王贤荣 1 9 9 7 通过试验证实 于秋末冬初采枝 贮藏在湿沙中 来年扦插 有利于提高早樱生根率 这 可能与枝条经冬贮藏后内源抑制物质的减少有关 王永清等 1 9 9 7 在塑料袋内扦插山樱花取得良好效果 田兴旺 2 0 0 2 在山樱花 扦插试验中 采用a b t 生根粉1 号浓度为5 0 m g l 的溶液中浸泡5 8 h 或在浓度为l o o m g l 的溶液中浸泡2 4 h 在扦插后的2 5 d 内 平均生根率在9 5 以上 单株生根最多可达2 0 条 且多数属于皮层生根型 也有愈伤生根型 其移栽成活率在9 0 以上 陆贵巧 1 9 9 8 等人进行樱花荫棚嫩枝扦插试验 采用速蘸法 得出最适宜插穗生 根的n a a 浓度为8 0 0 m g l 生根率达9 8 王小蓉 2 0 0 0 通过对日本晚樱 船淞 s p m 厶砌v a l 肠门疗船c p 船 绿枝扦插生根解剖特性的研究 按王涛 1 9 8 9 对生根类型的 划分 指出 日本晚樱的生根属于诱导生根原始体型 插穗不定根起源于形成层 谢利锁 2 0 0 2 在野生早樱嫩枝扦插的研究中 表明野生早樱6 1 2 d 形成愈伤组织 7 1 5 d 可以形成幼根 生根率可达3 6 4 9 因此 提高和改进野生早樱的扦插技术仍 大有文章可做 段晓梅 2 0 0 3 在塑料小拱棚下进行冬樱花 脚淞c p 膦d 砘s 嫩枝扦插 分别用 不同浓度的i b a n a a a b t l 号处理 促进生根的能力i b a n a a a b t l 号 其中以 i b a5 0 0 0 m g 瓜g 效果最好 生根率达9 7 7 7 而对照组仅为2 7 7 7 通过对珍珠岩 蛭 石 泥炭 素红壤 河砂及珍珠岩 蛭石 素红壤 1 1 2 的混合基质等6 种扦插基质 及苗床扦插和育苗盘扦插的比较 得出扦插繁殖的最佳组合是泥炭或素红壤作扦插基质苗 床扦插 闰道良 2 0 0 3 研究了钟花樱嫩枝扦插繁殖技术 段晓梅 2 0 0 3 对红花高盆樱桃 鲫螂c p 娜d f c 加v 札 幻p 口 进行扦插试验 于4 9 月在塑料小拱棚内软枝扦插 i b a 5 0 0 0m g 瓜g 处理效果最好 生根率达9 5 6 7 通过苗床扦插和育苗盘扦插的比较 认为 前者较好 王振师 2 0 0 5 等人采用钟花樱的组培苗嫩枝 一年生组培苗枝条和大树木质 化的枝条为插穗进行扦插育苗试验 以钟花樱组培苗的嫩枝以及一年生组培苗枝条为插 穗 用i b a 粉剂5 0 0 m g l 处理 扦插在黄心泥基质上 其生根率为9 3 和8 7 以大树 枝萌发的枝条为插穗 生根率也达到5 2 因此 利用钟花樱的组培苗嫩枝 一年生组 培苗枝条和大树枝的嫩枝都可以进行扦插育苗 综上所述 影响樱花扦插生根率的因素很多 如樱花种类 母树年龄 选取插穗的部 位 以及扦插时间 扦插基质 生长素种类 浓度 处理时间 空气湿度等都影响樱花插 穗的生根率 关于植物扦插生根的理论研究 虽然取得了不少进展 但因起步较晚 其与研究植物 光合作用与呼吸作用相比 仍然落后很多 截至目前为止 国内外学者除在解决某些树种 扦插成活方面做了一些试验外 已逐步把研究工作深入到生根的生理方面及解剖方面 在 揭示扦插生根机制上作了不少工作 但从总的方面看 阐明植物扦插生根完整的理论尚未 具备 研究者从扦插生根的解剖学方面的研究 扦插生根的生理生化指标的研究及植物生 长调节物质与生根辅助因子研究三个方面来研究扦插生根难易的影响因子及其相应的物 质基础 1 4 樱属植物的组织培养研究进展 植物组织培养是2 0 世纪初 以植物生理学为基础发展起来的一门新兴技术 1 9 0 2 年 德国著名的植物家g h a b e r l a n d t 提出植物细胞全能性的概念 为植物组织培养技术奠定了 理论基础 1 9 5 8 年r e i n e r t 和s t e w a r d 分别报道 在胡萝卜 d 口材c 5 阳加幻v a l 阳f f 阳 愈 伤组织培养中形成了体细胞胚 这是一种不同于通过芽和根的分化而形成植株的再生方 式 这对植物细胞的全能性给予了科学的证明 也为以后组织培养的迅速发展 奠定了理 论基础 李浚明等 2 0 0 5 经过近半个世纪的发展 组培技术在均一化苗木快速繁殖 无病毒苗培养 遗传育种 突变体的选择和利用 细胞融合和d n a 的重组上显示了突出地位 促进了农林业的跨越 式发展 蔷薇科其他属的观赏植物已有大量离体培养的研究报道 对樱属植物而言 多集中在 4 食用樱桃组织培养及其砧木树种上 d u r h a mr e 1 9 9 2 g a 血d 1 9 9 7 沈惠娟先生 1 9 9 2 在 木本植物组织培养技术 中对部分食用樱桃的组织培养研究作了小结 并以列表形式 列出了部分研究者摸索出的分化和生根培养基配方及外植体再生方式 之后 相继有人对 甜樱桃 删螂伽f 聊 及其矮化砧木的组织培养进行试验 韩文璞 1 9 9 3 李文金等 2 0 0 4 1 但对野生观赏樱花的组织培养技术研究较少 樱属植物组织培养目前包括 芽外 植体的诱导增殖培养 种子外植体的萌发 扩繁 对子叶 叶片等外植体的体细胞胚的诱 导 因此 系统研究观赏樱花类离体培养技术 为充分开发 利用我国樱属野生植物资源 扩大其繁殖系数 应用于生产以及为今后的良种选育提供理论和现实依据 以下概述近年 来樱属组织培养的研究进展 1 4 1 外植体灭菌 外植体的选择是组织培养中一个非常重要的问题 理论上讲植物细胞具有全能性 无 论选用植物的哪一部分作外植体都能诱导成植株 但研究表明不同的植物器官和组织其形 态发生能力不同 d e b e r g hp 1 9 9 2 木本观赏植物组织培养的外植体初分化率一般较低 需要选择生理活性旺盛的春季进行培养 外植体选取的种类要以污染少易启动为原则 通 常选择树木幼年组织 如胚 子叶 实生苗嫩茎 腋芽 幼嫩叶片 根等作为外植体 周 志坚等 1 9 9 4 以大岛樱 c p 砸螂s p 舢肠幻v 札正册疗p s f 口门口 s p e c i o s a 的幼嫩茎段为外 植体 建立了高效消毒的新方法即升汞二次消毒法 成功率达7 7 8 并获得完整植株 王永清等 1 9 9 7 在樱花 船淞s p 甜肠砌 芽外植体的建立中 以带叶原基的芽心作 为外植体 采用低浓度营养盐的培养基 减少了褐化的发生 并获得了再生植株 周素平 等 1 9 9 8 在毛樱桃快繁中 用一年生和二年生母树休眠芽为外植体 发现一年生的休眠 芽的污染率和褐化率均低于二年生母树休眠芽 且生长分化良好 在外植体选择方面做了 有益的尝试 外植体选取的季节 时间 部位不同 污染率相差较大 一般认为在春季 芽即将萌 动时效果最佳 取材的时间 多在晴天中午 因枝条暴露在强烈阳光下 有利于杀菌 而 外植体取材部位在材料中上部的茎段或直接用茎尖较为有利 1 4 2 启动培养 樱属植物茎段培养一般选用当年生幼嫩枝条作外植体 这是因为其分化能力强 分化 苗生长健壮 黄守印等 2 0 0 1 以河北雾灵樱花 船淞s p 甜肠纪 当年生带叶柄茎段 为试材取得了较好的效果 短时间内得到樱花茎段外植体快繁无性系 王光萍等 2 0 0 2 以春季萌发的福建山樱花 傩淞c p 琊d f 把sv a lc 口肌册玎 肠幻 嫩枝为外植体诱导丛生芽 在1 4 m s b a l 0 m g l i b a o 0 1 m g l 的培养基上 其丛生芽的诱导率达8 7 5 樱属植物离体培养的基本培养基 大多采用m s 培养基或改良的m s 培养基 也有少 数种及品种采用其他培养基 生长调节物质在启动培养中起着关键作用 主要表现在生长 调节物质的种类 浓度和激素之间的配比等方面 樱属植物组织培养常用到生长素和细胞 分裂素 生长素的种类主要有i b a i a a n a a 2 4 d 浓度范围一般在0 1 1 o m g l 细胞分裂素多采用b a 0 1 2 om g l k t o 1 2 0m g l 等 植物生长调节物质配比是调控 器官发生的主要方法之一 樱属茎段的启动培养中细胞分裂素和生长素比值过高时 虽可 提高芽的分化率 但生长较差 并易产生畸形叶和节间短的小枝条 当比值过低时 叶 芽的长势虽然较好 但分化率低 闫道良等 2 0 0 6 在钟花樱组织培养再生体系进行研究 中 认为b a n a a 约为1 0 时 对芽的诱导有较好的效果 培养基组合为m s b a1 o m g l n 从0 1m g l 1 4 3 增殖培养 在增殖培养中 影响增殖系数的因素主要有以下几个方面 基本培养基 糖 p h 值 和生长调节物质等 在木本植物组织培养中 常使用m s b 5 和聊m 培养基 根据不同 的材料选用合适的培养基 一般来说m s 培养基含的营养元素均衡适合大部分的植物生 长 大量试验已证明 m s 培养基是最常用的培养基 韩文璞等 2 0 0 0 侯修胜 2 0 0 2 但不同种或品种可能适应的培养基不尽相同 在其他培养基上也有成功的报道 周丽华等 2 0 0 4 蔗糖能支持大多数植物离体培养物生长 一直被作为植物离体培养的碳源而被广 泛应用 但在大规模生产中 也可采用砂糖代替蔗糖 以降低成本 一般认为 组织培养 中蔗糖的适宜浓度为2 4 浓度过高会导致培养渗透压的升高 使生长受阻 p h 值作为一项重要的化学环境因子 其高低反映了培养基的酸碱度 对樱属植物增 殖培养有一定的影响 增殖培养中生长素和细胞分裂素的浓度和配比起着关键性的作用 生长素的浓度一般比启动阶段低 为了缩短继代时间 在非洲菊 g p 柏p 阳胁m p s d 刀f f 席 梦利 2 0 0 0 增殖培养基中交替添加多效唑o 和0 2 m g l 可使芽体增殖系数高且增殖芽 健壮 在钟花樱芽增殖阶段加入一定浓度的g a 3 以促进丛生芽的增殖和伸长 王光萍 等 2 0 0 2 闰道良等 2 0 0 6 1 4 4 壮苗培养 壮苗培养是提高移栽成活率的一项重要措施 此阶段关键在于严格筛选植物生长调节 物质的种类和浓度 一般需降低培养基的生长调节物质含量 以便形成健壮苗 常用的生 长素有i b a n a a 细胞分裂素有b a k t 姚连芳等 2 0 0 1 认为 0 0 4 m g l 的n a a 处理和2 5 0 m g l 的n a h 2 p 0 4 处理均对樱花试管苗的植株生长高度有明显的促进作用 而 唐晓杰等 2 0 0 4 在酸樱桃 尸 甜刀甜sc p 船螂 壮苗培养中 采用不加生长调节物质的m s 培养基 组培苗生长粗壮 叶片增大 浓绿 植株健壮 长势好 因此 壮苗培养一般是 通过低水平生长调节物质 来调控植物体内源激素水平的平衡 从而达到壮苗的目的 壮 苗培养有利于后续阶段的生根和移栽 1 4 5 生根培养 基本培养基中化学物质元素种类与含量的改变 对不定根的发生具有一定的调控作 用 生根培养基大多采用1 2 m s 如大岛樱 p 胛甜s 如即口 f 朋v a l 印d 行幻力p 口 王永清 1 9 9 7 福建山樱花 王光萍 2 0 0 2 紫叶矮樱 尸聊 s c 西把门口 朱志国 2 0 0 5 等 但 在其他培养基也有成功获得不定根的研究 黄守印等 2 0 0 2 以雾灵山野生樱花为材料 在改良m s 培养基上诱导不定根获得成功 蔗糖浓度是生根培养中一个不可忽视的因素 一般在1 3 之间 当浓度在1 5 2 时最适合生根培养 过高或过低均在不同程度上降低生根率 且根长势弱 生根培养的关 键还在于生长素的种类和浓度 i b a n a a 均可用于樱属植物的生根培养 他们的最适 浓度在不同种及品种上显示了不同的结果 周丽华等 2 0 0 4 以绯寒樱 尸厂 刀姗阳历p 口 甜肠幻 6 为试材 在生根培养基1 2 m s i b a 0 5 m g l 蔗糖1 5 9 l 上 生根率达1 0 0 闰道良等 2 0 0 6 经试验得出1 2 m s n a a 0 2 m g l i b ao 6 0 8 m g l 是适宜钟花樱的生根培养基 而吕月良等 2 0 0 6 则认为转入l 2 m s n a a l o m g l i b a 0 2m g l 对福建山樱花生根 效果好 1 4 6 炼苗移栽 试管苗生长在无菌环境下 经炼苗这一阶段才能适应自然环境条件 为提高移栽后试 管苗的成活率 必须缩小试管环境与自然环境之间的差距 尽可能创造适宜试管苗生存的 环境 这就需要在移栽基质 温湿度控制 移栽时间上加以探讨 张继东等 2 0 0 3 研究 了莱阳矮樱桃试管苗的炼苗移栽技术 先闭瓶光培5 7 天 然后开瓶炼苗3 5 天 用3 步 移栽法 成活率达9 5 以上 因此要采取逐步过渡的措施 或者采用逐渐提高辅助光照 的强度的方法 提高试管苗适应外界环境的能力 2 樱属植物的应用价值及目前存在的问题 2 1 樱属植物的应用价值 樱属 船甜s 植物隶属蔷薇科 r o s a c e a e 李亚科 p 姗o i d e a 本属共有1 5 0 多种 分布于北半球温暖地区 亚洲 欧洲至北美洲均有记载 樱属可分为典型樱亚属 p r u n u ss u b g e n c e r a s u s 和矮生樱亚属 p r u n u ss u b g e n m i c r o c e r a s u s 前者为高雅的 木本观赏花卉 樱花类植物树姿洒脱开展 花形美丽 盛开时如玉树琼花 堆云叠雪 甚 是壮观 是优良的园林观赏植物 因此人们常将她种植在建筑物前 草地旁 山坡上 水 池边 孤植 对植 群植都很适宜 后者为经济价值较高的果木 其果实 樱桃 是落叶 树种中成熟最早的一种 被誉为 春果第一枝 其果实中含有大量的营养成分 如蛋白 质 糖 磷 铁 胡萝卜素维生素c 等都比苹果为多 营养价值很高 除供生食外 宜 于加工 制作果酱 果酒 果汁以及罐头等 其花果美丽也适宜作园林绿化观赏树种 樱属植物的木材纹理平滑 具有良好的木材弯曲性能 较低的刚性 中等的强度及抗 震动能力 心材具有抗腐能力 木材供作家具 雕刻 美术工艺品 印刷木版 钢琴及风 琴机件 包装箱等 谢福惠等 1 9 9 0 中国具有丰富的野生樱花资源 其种类远远超过日本等相邻的国家 其分布范围很广 从西南到东北 都有樱花的生长 广大的西南高山地区是中国樱属植物的分布中心 蕴藏 着近3 0 种野生樱花类群 其中很多具有较高的观赏价值 具有较大的开发潜力 王贤荣 等 2 0 0 1 2 2 樱属植物资源利用目前存在的问题 据调查 国内栽培的樱花大多是日本的樱花品种 我国在樱花品种的繁殖技术 培育 技术上仍有许多问题尚未解决 对一些国产优质野生樱花资源缺乏系统的调查及开发利用 研究 目前中国在利用樱属植物资源方面存在以下几个问题 1 乡土资源开发利用方面 在樱属植物资源开发利用中 主要集中在