（内科学专业论文）alox5ap基因多态性与急性冠脉综合征的相关性研究.pdf

位论文的规定 印件和电子版 学位论文的全部 内容或部分内容编入有关数据库进行检索 可以采用影印 缩印或扫 描等复制手段保存和汇编本学位论文 保密口 在 年解密后适用本授权书 本学位论文属于 不保密c 2 o 学位论文作者签名 喜前密 o z 口 1 年 b 月寸i 日 指导教师签名 冬j 珩 1 年6 月3 日 独创性声明 本人郑重声明 所呈交的学位论文 是本人在导师的指导下 独 立进行研究工作所取得的成果 除文中已注明引用的内容以外 本论 文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果 对本文 的研究做出重要贡献的个人和集体 均已在文中以明确方式标明 本 人完全意识到本声明的法律结果由本人承担 学位论文作者签名 兽前么 日期 9 f 年口6 月口毕日 摘要 背景 急性冠脉综合征 a c u t ec o r o n a r ys y n d r o m e a c s 包括不稳定型心绞痛 u n s t a b l e a n g i n ap e c t o r i s u a p s t 段抬高型心肌梗死 s ts e g m e n te l e v a t i o nm y o c a r d i a li n f a r c t i o n s t e m i 和非s t 段抬高型心肌梗死 n o n s ts e g m e n te l e v a t i o nm y o c a r d i a li n f a r c t i o n n s t e m i 其致残率和死亡率均很高 绝大部分是由于在冠脉粥样硬化的基础上发生粥 样斑块破裂或裂隙 形成血栓 阻塞管腔而引起心肌缺血所致 花生四烯酸5 脂氧合酶 激活蛋白 a r a c h i d o n a t e5 1 i p o x y g e n a s ea c t i v a t i n gp r o t e i n a l o x 5 a p 基因位于染色体 1 3 q 1 2 1 3 包含5 个外显子 4 个内含子 长度为3 1 k b 是一个含有4 个标志性单核苷 酸多态性的单倍体 这个基因编码5 脂氧合酶激活蛋白 5 1 i p o x y g e n a s ea c t i v a t i n g p r o t e i n f l a p 2 0 0 4 年 遗传学研究组的h e l g a d o t t i r 等通过全基因组扫描的连锁分析 和关联研究发现a l o x 5 a p 基因的单倍h a p a s g l 3 s 2 5 s g l 3 s 1 1 4 s g l 3 s 8 9 和 s g l3 s 3 2 使冰岛人群心肌梗死 m y o c a r d i a li n f r a c t i o n m i 和缺血性脑卒中 i s c h e m i c s t r o k e i s 的发病风险增加2 倍 将携带h a p am i 患者的白细胞进行体外培养发现 给予钙离子激动剂刺激后自细胞产生的白三烯 1 e u k o t r i e n e l t b 4 明显高与对照组 另一a l o x 5 a p 单倍型h a p b s g l 3 s 3 7 7 s g l 3 s 1 1 4 s g l 3 s 4 1 和s g l 3 s 3 5 与英国 人群的m i 发病危险性相关 但z e e 等却未证实a l o x 5 a p 基因及其单倍型与非冰岛人 群m i 和i s 的相关性 本研究旨在探讨a l o x 5 a p 基因多念性与国人a c s 包括急性 心肌梗死和不稳定心绞痛的可能关系 一 a l o x 5 a p 基因s g l 3 s l l 4 t a 多态性与a c s 的相关性研究 目的 探讨中国苏南地区汉族人群a l o x 5 a p 基因s g l 3 s 1 1 4 t a 多态性分布及其与a c s 的相关性 方法 采用病例 对照研究方法 通过聚合酶链式反应一限制性片段长度多态性 p c r r f l p 检测5 4 5 例a c s 患者 a c s 组 和5 6 7 例非冠心病 c o r o n a r y h e a r td i s e a s e c h d 患者 对照组 a l o x 5 a p 基因s g l 3 s 1 1 4 吖a 多态性 结果 1 a l o x 5 a p 基因s g l 3 s 1 1 4 1 a 多态性在a c s 组和对照组中均存在从 a t 和t t 三 种基因型 两组基因型分布经矛检验均符合h a r d y w e i n b e r g 平衡 胗o 0 5 表明入选 样本具有群体代表性 2 与对照组比较 a c s 组a t 3 7 5 7 4 8 9 9 p o 0 1 5 基因型频率较高 t t 4 8 1 5 坩3 8 1 7 p o 0 3 4 基因型频率较低 a a 1 4 2 8 v s 1 2 8 4 基因型和t 6 6 9 3 坩6 2 6 6 等位基因频率分布差异无统计学意义 尸分别为0 0 5 4 和o 3 3 0 3 将两组进行亚组分析 各亚组分别与对照组比较 结果显示 1 急性心肌梗死 a m i 组a t 3 0 3 0 k s5 6 4 1 p o 0 0 3 基因型频率较高 t t 5 3 3 0 w3 2 5 0 p o 0 1 7 基因型频率较低 a a 1 6 6 7 v 51 3 5 4 基因型和t 6 8 3 3 w6 0 2 6 等位基因频率分布差异无统计学意义 p 分别为0 2 6 3 和0 3 3 1 2 u a p 组a t 基因型频率较高 3 0 3 0 w4 7 1 4 p o 0 4 5 a a 1 6 6 7 1 0 0 0 p o 1 4 6 和t t 5 3 3 3 4 2 8 6 p o 2 9 1 基因型以及t 6 8 3 3 坩6 0 2 6 p o 7 2 7 等位基因频率分布差异无统计学意义 3 a c s 患者男性组和女性组的从 1 3 1 9 凇8 0 2 5 4 1 w1 4 0 4 a t 3 7 5 0 w3 3 6 9 3 7 9 9 w4 5 0 3 和t t 4 9 3l w5 8 2 9 4 6 5 9 k s4 0 9 4 基因型频 率分布差异均无统计学意义 尸均 0 0 5 而男性t 等位基因频率较高 6 8 0 6 谘 8 2 4 2 p o 0 4 6 4 老年a c s 组a t 基因型频率较高 3 8 5 8 v s5 0 9 3 p o 0 4 1 t t 基因型频率 较低 4 8 6 6 w3 5 2 8 p o 0 2 0 a a 1 2 7 6 粥1 3 7 9 基因型和t 6 1 2 2 6 0 7 4 等位基因频率分布无统计学差异 尸分别为0 7 2 2 和0 9 3 1 年轻a c s 组a a 1 6 9 6 1 0 1 1 a t 3 6 0 9 v s5 0 0 0 和t t 4 6 9 6 w3 9 3 9 基因型以及 t 6 5 0 0 坩6 4 2 9 等位基因频率分布差异均无统计学意义 尸分别为0 1 2 7 0 0 7 8 0 3 3 8 和0 9 3 2 4 经多因素回归分析显示 与a l o x 5 a p 基因s g l 3 s 11 4 t a 多态性a c s 及其各亚组对 照组比较显示 a t 和t t 基因型和t 等位基因与a c s 的发病具有显著相关性 p 分别 为0 0 0 1 0 0 0 1 和0 0 3 1 亚组分析显示 a t 和t t 基因型与a m i p 均 o 0 5 对a m i u a p 男性a c s 女性 a c s 老年a c s 以及年轻a c s 等6 个亚组行单因素和多因素l o g i s t i c 分析 结果显示 与对照组相比 a m i 和u a p 组 男性和女性a c s 组以及老年a c s 组和年轻a c s 组 a a g a 和g g 基因型以及g 等位基因频率分布差异均无统计学意义 p 均 o 0 5 与 a c s 的发病风险无明显相关性 尸均 0 0 5 结论 中国苏南地区汉族人群a l o x 5 a p 基因s g l 3 s 8 9 g a 多态性在a c s 组及其各亚 组和各对照组中均存在a a g a 和g g 三种基因型 但与a c s 及其亚组a m i u a p 男性a c s 女性a c s 老年a c s 和年轻a c s 的发病风险均无显著相关性 关键词 急性冠脉综合征 a l o x 5 a p 基因多态性 i i i i v a b s t r a c t b a c k g r o u n d a c u t ec o r o n a r ys y n d r o m e a c s i n c l u d u e su n s t a b l ea n g i n ap e c t o r i s u a p s t s e g m e n te l e v a t i o nm y o c a r d i a li n f a r c t i o n s t e m i a n dn o n s ts e g m e n te l e v a t i o nm y o c a r d i a l i n f a r c t i o n n s t e m i w h i c hd i s a b i l i t ya n dm o r t a l i t yr a t e sa r ev e r yh i g h a c si sm o s t l yd u et o m y o c a r d i a li s c h e m i ac a u s e db yp l a q u er u p t u r eo rf r a c t u r e s ot h a tt h r o m b o s i sa n dl u m i n a l o c c l u s i o nb a s e do nc o r o n a r ya t h e r o s c l e r o s i s t h eh u m a na r a c h i d o n a t e 5 1 i p o x y g e n a s e a c t i v a t i n gp r o t e i n a l o x s a p g e n ei s ah a p l o t y p ew i t hf o u r s i g n a ls i n g l e n u c l e o t i d e p o l y m o r p h i s m s w h i c hi sl o c a t e do nc h r o m o s o m e13 q 12 13t h a tc o n s i s t so ff i v ee x t r o n sa n d f o u ri n t r o n sa n di si n 31k bl e n g t h t h e g e n ee n c o d e s5 1 i p o x y g e n a s e 5 l o a c t i v a t i n g p r o t e i n f l a p i n2 0 0 4 h e l g a d o t t i ri ng e n e t i c ss t u d yo fl i n k a g ea n dc o r r e l a t i o na n a l y s i so f g e n o m e w i d e s c a n p e r f o m e db yh e l g a d o t t i r e t cf o u n dt h a tt h e h a p l o t y p e h a p a s g l 3 s 2 5 s g l 3 s 1 1 4 s g l 3 s 8 9 a n ds g l 3 s 3 2 o f t h ea l o x 5 a p g e n eh a sb e e ns h o w e d t oc o n f e rt w ot i m e sr i s kf o rm y o c a r d i a li n f a r c t i o n m i a n ds t r o k ei nt h ei c e l a n dc r o w d s a n d t h a tl tb 4p r o d u c e db yl e u k o c y t e sw a sm a r k e d l yh i g h e rt h a nt h o s ei nt h ec o n t r o lg r o u p t h r o u g hg i v i n gc a l c i u m i o na g o n i s t st os t i m u l a t e t h el e u k o c y t e s f r o mm ip a t i e n t sc a r r y i n g h a p a c u l t i v a t e d i nv i t r o a n o t h e rh a p l o t y p eh a p b s g l3 s 3 7 7 s g l3 s 11 4 s g l3 s 4 1a n d s g l 3 s 3 5 o ft h ea l o x 5 a pg e n ew a sr e l a t e dw i t hm ii nb r i t i s hp e o p l e b u t z e en o ty e t c o n f i r m e ds u c hg e n e sa n dt h e i rh a p l o t y p eh a dr e l e v a n c ew i t ht h em ia n ds t r o k ei n n o n i c e l a n dp e o p l e t h i ss t u d ya i m st oi n v e s t i g a t et h et h ea s s o c i a t i o nb e t w e e nt h ea l o x 5 a p g e n ep o l y m o r p h i s m sa n da c u t ec o r o n a r ys y n d r o m e i n c l u d i n ga c u t em y o c a r d i a li n f a r c t i o na n d u a p i nt h ec h i n e s eh a np o p u l a t i o no fs u n a nr e g i o n p a r ti a s s o c i a t i o no f a l o x 5 a p g e n es g l 3 s l l 4 t ap o l y m o r p h i s mw i t h a c s o b j e c t i v e t oi n v e s t i g a t et h ed i s t r i b u t i o no fa l o x 5 a pg e n es g l 3 s 11 4 t ap o l y m o r p h i s m a n dt h ea s s o c i a t i o no ft h ea l o x 5 a pg e n es g13s1 14 t ap o l y m o r p h i s mw i t ha c si nt h e c h i n e s eh a np o p u l a t i o no fs u n a nr e g i o n v 一一 江菱叁鲎塑 鲎焦途耋 一一一一 一 一 一一一一一 m e t h o d s t h i ss t u d yw a sc o n d u c t e dw i t hac a s e c o n t r o ld e s i g ni n c l u d i n g5 4 5p a t i e n t sw i t h a c s a c sg r o u p a n d5 6 7c o n t r o ls u b j e c t sw h o w e r ef r e ef r o mc o r o n a r ya r t e r yd i s e a s e c o n t r o l g r o u p a l o x 5 a pg e n es g 13s114 t ap o l y m o r p h i s mw a sd e t e r m i n e db yp o l y m e r a s ec h a i n r e a c t i o na n dr e s t r i c t i o nf r a g m e n tl e n g t hp o l y m o r p h i s ma n a l y s i s r e s u l t s i t h e r ew e r ea a a ta n dt tg e n o t y p e so f t h ea l o x 5 a pg e n es g l 3 s 1 1 4 t a p o l y m o r p h i s m b o t hi na c sg r o u pa n dc o n t r o lg r o u p t h eg e n o t y p ed i s t r i b u t i o no ft h ea c sg r o u pa n dc o n t r o l g r o u pc o n f o r m e dt ot h eh a r d y w e i n b e r gb a l a n c ev i a t e s t p 0 0 5 w h i c hi n d i c a t e st h a tt h e s e l e c t e ds a m p l ei sr e p r e s e n t a t i v e 2 a sc o m p a r e dw i t ht h ec o n t r o lg r o u p t h ef r e q u e n c u e so fa t 3 7 5 7 坩4 8 9 9 p 0 0 15 g e n o t y p ew a sh i g h e r w h i l et t 4 8 1 5 v 83 8 1 7 户o 0 3 4 w a s l o w e r t h e r ew a sn o s i g n i f i c a n ts t a t i s t i c a ld i f f e r e n c eo ft h ef r e q u e n c i e so fa a 14 2 8 谘1 2 8 4 g e n o t y p ea n d t 6 6 9 3 w6 2 6 6 a l l e l ei na c sg r o u p pw a s0 0 5 4a n d0 3 3 0 3 a f t e rs u b g r o u p e db ys e x a g ee t cw ef o u n dt h a ta sc o m p a r e dw i t ht h ec o n t r o lg r o u p 1 t h ef r e q u e n c i e so fa t 3 0 3 0 v s5 6 4 1 p 0 0 0 3 g e n o t y p ew a sh i g h e ra n dt t 5 3 3 0 凇3 2 5 0 p o 0 1 7 g e n o t y p ew a sl o w e rt h a nt h ec o n t r o l s t h e r ew a sn os i g n i f i c a n ts t a t i s t i c a l d i f f e r e n c eo ft h ef r e q u e n c i e so fa a 16 6 7 瑚13 5 4 g e n o t y p e a n dt 6 8 3 3 坩 6 0 2 6 a l l e l ei na m ig r o u p pw a s0 2 6 3a n d 0 3 31 2 a t 3 0 3 0 瑙4 7 1 4 p 0 0 4 5 g e n o t y p ei nu a pw a sh i g h e l t h a nt h ec o n t r o lg r o u p t h e f r e q u e n c i e s o fa a 1 6 6 7 w1 0 0 0 p 0 1 4 6 a n dt t 5 3 3 3 w4 2 8 6 尸 o 2 9 1 g e n o t y p e sa n dt 6 8 3 3 w6 0 2 6 p 0 7 2 7 a l l e l ei nu a pg r o u pw a s n os i g n i f i c a n t s t a t i s t i c a ld i f f e r e n c e 3 t h e r ew a sn os i g n i f i c a n t s t a t i s t i c a ld i f f e r e n c eo ft h ef r e q u e n c i e so fa a 1 3 19 v 5 8 0 2 5 4 1 w1 4 0 4 a t 3 7 5 0 w3 3 6 9 3 7 9 9 坩4 5 0 3 a n dt t 4 9 31 5 8 2 9 4 6 5 9 w4 0 9 4 g e n o t y p e sb e t w e e n m a l ea n df e m a l e g r o u p i na c s p o 0 5 w h i l et 6 8 0 6 坩8 2 4 2 p 0 0 4 6 a l l e l ew a sh i g h e rt h a nt h ec o n t r o lg r o u pi n m a l ep a t i e n t s 4 t h ef r e q u e n c i e so fa t 3 8 5 8 5 0 9 3 p 0 0 4 1 a n dt t 4 8 6 6 w3 5 2 8 k o 0 2 0 w a ss i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n tb e t w e e nt h eo l da c u t ec o r o n a r ys y n d r o m eg r o u pa n dc o n t r o l s t h e p r e v a l e n c eo fa tg e n o t y p e i nc o n t r o ls u b j e c t sw a sl o w e r h o w e v e rt tg e n o t y p ew a s v i h i g h e r t h ef r e q u e n c i e so fa a 12 7 6 谘13 7 9 g e n o t y p ea n dt 6 1 2 2 6 0 7 4 a l l e l e i ne l d e r l yp a t i e n t sw e r en o ts i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n t pw a s0 7 2 2a n d0 9 31 w h i l et h et h e f r e q u e n c i e so fa a 1 6 9 6 v s1 0 11 a t 3 6 0 9 瑚5 0 0 0 a n dt t 4 6 9 6 垤 3 9 3 9 g e n o t y p ea n d t 6 5 0 0 惯6 4 2 9 a l l e l ei nt h ep a t i e n t sw i t hp r e m a t u r ea c sw e r e n o ts i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n t pw a so 12 7 0 0 7 8 0 3 38a n d0 9 3 2r e s p e c t i v e l y 4 a sc o m p a r e dw i t hc o n t r o lg r o u pa n ds u b 圉 0 u p so fa c so fa l o x 5 a p g e n es g l3 s1 14 t a p o l y m o r p h s i m m u l t i v a r i a t el o g i s t i cr e g r e s s i o na n a l y s i si n d i c a t e st h a tt h e r ew a ss i g n i f i c a n t l y c o r r e l a t i o nb e t w e e na ta n d itw i t ha c s pw a s0 0 0 1 0 0 0 1a n d0 0 31 r e s p e c t i v e l y f u r t h e r m o r e s u b g r o u p sa n a l y s i ss h o w e dt h a tt h ef r e q u e n c i e so fa ta n dt tg e n o t y p e pw e r e 0 0 0 0i nb o t h a tg e n o t y pi nu a p p 0 0 0 7 a ta n dt tg e n o t y p e sa n dta l l e l ew i t ha c s o n l yi nm a l eg r o u p pw a s0 0 0 0 0 0 01a n d0 016 r e s p e c t i v e l y a ta n dt tg e n o t y p e sa n dt a l l e l ei ne l d e r l yp a t i e n t s 俨w a s0 0 0 4 0 0 0 1a n d0 0 13 r e s p e c t i v e l y h a ds i g n i c i f a n t l y c o r r e l a t i o nw i t ht h er i s ko f a c s c o n c l u s i o n t h r e eg e n o t y p e si n c l u d i n ga a a ta n dt tg e n o t y p e se x i s ti nt h ea l o x 5 a p g e n es g 13s114 t ab o t hi na c sg r o u pi n c l u d i n gi t ss u b g r o u p sa n dc o n t r o lg r o u p t h e r ew a s s i g n i f i c a n t l ya s s o c i a t i o no ft h es g 13s114 t ap o l y m o r p h i s mo fa l o x 5 a p g e n ew i t hr i s ko f a c s a m i u a p m a l ea c sa n dt h ee l d e r l ya c si nt h ec h i n e s eh a np o p u l a t i o i io fs u n a n r e g i o n w h i c hs u g g e s ta l o x 5 a pg e n es g l3s 114 t ap o l y m o r p h i s mp l a yap o t e n t i a lr o l ei n t h eo r i g i na n dd e v e l o p m e n to f a c s p a r ti i r e l a t i o n s h i pb e t w e e n5 1 i p o x y g e n a s ea c t i v a t i n gp r o t e i ng e n e s g l 3 s 8 9 g a p o l y m o r p h i s ma n da c u t ec o r o n a r ys y n d r o m e o b j e c t i v e t oi n v e s t i g a t et h ed i s t r i b u t i o no fa l o x 5 a pg e n es g 13s 8 9 g ap o l y r n o r p h i s m a n dt h er a l a t i o n s h i pb e t w e e nt h ea l o x 5 a pg e n es g l3 s 8 9 g ap o l y m o r p h i s ma n da c u t e c o r o n a r ys y n d r o m e a c s a m o n gt h ec h i n e s eh a r tp o p u l a t i o no fs u n a nr e g i o n m e t h o d s 4 9 4p a t i e n t sw i t ha c s a c sg r o u p a n d4 7 9c o n t r o ls u b j e c t sw h ow e r ef r e ef r o m c o r o n a r ya r t e r yd i s e a s e c o n t r o lg r o u p w e r er e c r u i t e di n t ot h es t u d y t h es g13s 8 9 g a v l i p o l y m o r p h i s m i na l o x 5 a pg e n ew a sd e t e r m i n e db yp o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o na n d r e s t r i c t i o nf r a g m e n tl e n g t hp o l y m o r p h i s ma n a l y s i s r e s u l t s t h ea a g aa n dg gg e n o t y p eo fs g l3 s 8 9 g ap o l y m o r p h i s mi na l o x 5 a pg e n e e x i s tb o t hi na c sg r o u pa n dc o n t r o lg r o u p t h eg e n o t y p ed i s t r i b u t i o no ft h ea c sg r o u pa n d c o n t r o lg r o u pc o n f o r mt ot h eh a r d y w e i n b e r gb a l a n c ev i a t e s t p o 0 5 w h i c hi n d i c a t e st h a t t h es e l e c t e ds a m p l ei s r e p r e s e n t a t i v e c o m p a r e d w i t ht h ec o n t r o lg r o u p t h e r ew a sn o s t a t i s t i c a ld i f f e r e n c eo ft h ef r e q u e n c i e so fa a g aa n dg gg e n o t y p e 0 2 1 晒0 2 0 5 0 1 v s5 0 6 9 4 7 8 坩9 4 7 4 r e s p e c t i v e l y a n dga l l e l e 9 7 2 9 坩9 7 2 7 i na c sg r o u p p w a so 9 8 3 0 9 7 3 0 9 9 6a n d0 9 8 0r e s p e c t i v e l y m u l t i v a r i a t el o g i s t i cr e g r e s s i o na n a l y s i s i n d i c a t e sg e n d e r a g e s m o k i n g h y p e r t e n s i o n d i a b e t e s t c t g h d l ca n dl d l ct h a tt h e r ew a s n o s i g n i f i c a n t l y c o r r e l a t i o nb e t w e e ns g l 3 s 8 9 g ap o l y m o r p h i s ma a g aa n dg g g e n o t y p e a n dga l l e l ei na l o x 5 a pg e n ea n da c s p 0 0 5 s i n g l e f a c t o ra n a l y s i sa n d m u l t i v a r i a t el o g i s t i cr e g r e s s i o na n a l y s i sf o rf i v es u b g r o u pi n c l u d i n gt h ea m ig r o u p t h eu a p g r o u p g e n d e ra n do l dp a t i e n t sg r o u pi n d i c a t e st h a tt h e r ew a s n os i g n i f i c a n td i f f e r e n c eb e t w e e n t h ea m ig r o u pa n dt h eu a pg r o u pw i t ha g e a n ds e x m a t c h e dc o n t r o l s p 0 0 5 t h e r ew a sn o s i g n i f i c a n td i f f e r e n c eb e t w e e nt w og r o u p so fg e n d e ra n do l dp a t i e n t sw i t ha g e m a t c h e d c o n t r o l si nt h ef r e q u e n c i e so f a a g aa n dg g g e n o t y p e a n dg a l l e l eg e n o t y p e p 0 0 5 c o n c l u s i o n i nt h ec h i n e s eh a np o p u l a t i o no fs u n a nr e g i o n t h r e eg e n o t y p e si n c l u d i n g a a g aa n dg go f a l o x 5 a pg e n es g l3 s 8 9 g ae x i s tb o t hi na c sg r o u pa n dc o n t r o lg r o u p a n dt h e r ea r en oa s s o c i a t i o no ft h ea l o x 5 a pg c n es g l3 s 8 9 g ap o l y m o r p h i s mw i t hr i s k o f a c s a m i u a p m a l ea c s f e m a l ea c s t h ee l d e r l ya c sa n dy o u n ga c s k e y w o r d s a c u t ec o r o n a r ys y n d r o m e a l o x 5 a p g e n ep o l y m o r p h i s m v i i i 目录 第一部分绪论 1 1 国内外研究现状 1 2 研究目的与意义 2 主要研究内容 一2 特色和创新之处 一2 二部分a l o x s a p 基因s g l 3 s i l 4 t a 多态性与急性冠脉综合征的相关性研 究 3 材料与方法 3 结果 7 3 讨论 1 4 4 小结 l5 第三部分a l o x 5 a p 基因s g l 3 s 8 9 g a 多态性与急性冠脉综合征的相关性研 究 1 6 1 材料与方法 1 6 2 结果 1 8 3 讨论 2 4 4d 结 2 5 参考文献 25 综述 30 论著一 38 论著二 4 8 附录一 中英文缩略词表 5 7 附录二 p c r 产物测序图谱 5 9 在读期间的研究成果 6 1 致谢 6 2 第一部分绪论 1 国内外研究现状 急性冠脉综合征 a c u t ec o r o n a r ys 灿o m e a c s 包括不稳定型心绞痛 u n s t a b l e a n g i n a p e c t o r i s u a p s t 段抬高型心肌梗死 s t e l e v a t i o nm y o c a r d i a li n f a r c t i o n s t e m i 和非s t 段抬高型心肌梗死 n o n s t e l e v a t i o nm y o c a r d i a li n f a r c t i o n n s t e m i 其致残 率和死亡率均很高 绝大部分是由于在冠脉粥样硬化的基础上发生粥样斑块破裂或裂 隙 形成血栓 阻塞管腔而引起心肌缺血所致 花生四烯酸5 脂氧合酶激活蛋白 a r a c h i d o n a t e5 一l i p o x y g e n a s ea c t i v a t i n gp r o t e i n a l o x 5 a p 基因编码5 一脂氧合酶 5 一l i p o x y g e n s e 5 l o 激活蛋白 5 l i p o x y g e n a s ea c t i v a t i n gp r o t e i n f l a p f l a p 最 早是从人和鼠的白细胞中分离出来的一种与白三烯 1 e u k o t r i e n e l t 合成抑制剂 m k 8 8 6 有高亲合力的膜蛋白 是5 l o 的结合蛋白 因为其在激活5 l o 的过程中 起重要作用 故命名为f l a p 是炎症介质l t 产生通路的一个调节点 它在l t 生物合 成的最初阶段起重要作用 受白细胞的限制 并可被各种刺激引发 l f l a p 长期存在 于核膜和内质网上 并不直接与5 l o 结合 而是与花生四烯酸结合并把花生四烯酸提 供给5 l o 从而使5 l o 活性全部激活 f l a p 对5 l o 活性所起的作用尚不完全明了 可能包括对5 l o 的固定和底物的转换 f l a p 5 l o 通路的产物l t 有各种促进炎症的 作用 在动脉粥样硬化 a r t h e r o s c l e r o s i s a s 的发生发展中有重要作用 l tb 4 激活 白细胞 引导趋化作用 促进白细胞粘附到血管内皮上 释放髓过氧化酶溶酶体酶 产 生过氧化物阴离子 半胱胺酰l t l tc 4 l td 4 和l te 4 可增加后毛细血管小静脉 通透性 并且能使冠状动脉发生有力的收缩 近来的研究表明f l a p 5 l o 通路能够促 进a s 的发展 m e h r b a n i a n 掣2 发现5 l o 和低密度脂蛋白 1 0 wd e n s i t yl i p o p r o t e i n l d l 受体双敲除的小鼠模型给予高脂饮食后 对其主a s 形成有抵抗作用 a i e l l o 等 3 的研 究显示 在载脂蛋白e a p o l i p o p r o t a i ne a p o e 和l d l 受体纯合缺失的a s 小鼠模型中 l tb 4 受体拮抗剂可减轻a s 的损伤程度 s p a n b r o e k 等 4 的实验结果显示f l a p 和5 l o 在主动脉 冠状动脉和颈动脉粥样斑块损伤部位表达量显著增加 并在粥样硬化的血管 壁发现l t a 水解酶和l t c 合成酶 a l o x 5 a p 基因定位于人类染色体1 3 q 1 2 1 3 p j 是心脑血管病的重要候选基因 与 心肌梗死 m y o c a r d i a li n f a r c t i o n m i 和缺血性脑卒中 i s c h e m i cs t r o k e i s 的发生相 鎏菱盔鲎塑 鲎焦迨塞 关 h e l g a d o t t i r 等于2 0 0 4 年通过全基因组扫描的连锁和关联分析发现 a l o x 5 a p 基因 的单倍型h a p a s g l 3 s 2 5 s g l 3 s i1 4 s g l 3 s 8 9 s g l 3 s 3 2 使冰岛人群m i 和i s 的 发病风险增加2 倍 体外培养携带h a p am i 患者的白细胞发现 给予钙离子激动剂刺 激后白细胞产生的l tb 4 明显高与对照组 另一个a l o x 5 a p 单倍型h a p b s g l 3 s 3 7 7 s g l 3 s 1 1 4 s g l 3 s 4 1 和s g l 3 s 3 5 与英国人群的m i 发病风险相关 6 在苏格兰人群研 究中也证实了h a p a 与i s 有关联 7 1 l o h m u s s a a r 等 8 对欧洲人群的研究显示 i s 患者 a l o x 5 a p 基因s g l 3 s