x1-1 微生物的利用.doc

一、选择题1用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时()可以用相同的培养基都需要使用接种针进行接种都需要在火焰旁进行接种都可以用来计数活菌A B C D解析平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故错误。答案C2下列关于微生物的培养和分离的叙述中，不正确的是 ()A细菌能在液体培养基中以二分裂方式迅速扩增B噬菌体或大肠杆菌可在蛋白胨培养基中增殖C灭菌的目的是消灭与培养菌竞争的杂菌D稀释涂布法分散细菌得到单菌落的效果更好解析细菌繁殖方式是二分裂方式，噬菌体是没有细胞结构的病毒，需要在活细胞中才能生活，在蛋白胨培养基中不能增殖；灭菌目的是防止杂菌和培养菌发生竞争。答案B3下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是 ()A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上C将实验组和对照组平板倒置，37恒温培养2448小时D确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数解析在细菌计数时，为保证实验结果的准确性，一般选择菌落数在30300的平板进行计数；然后求出平均数，再根据对应的稀释度计算出样品中的细菌数。答案D4下列对灭菌和消毒的理解不正确的是()A灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B消毒和灭菌实质上是完全相同的C接种环用灼烧法灭菌D常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法解析消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)，灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。答案B5用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是()A未接种的选择培养基B未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D接种了的选择培养基解析将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此，用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。对照实验遵循的原则之一是单一变量，所以与选择培养基一样接种、培养。答案C6现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分和含量如下表，用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物，你认为它们适于分离()成分KH2PO4MgSO47H2ONaClCaSO42H2OCaCO3葡萄糖纯淀粉甲培养基0.02 %0.02%0.02%0.01%0.5%0.5%2%乙培养基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%A.甲培养基适于分离自养型自生固氮菌；乙培养基适于分离异养型自生固氮菌B甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离自养型自生固氮菌C甲培养基适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真菌D甲培养基适于分离自养型共生细菌；乙培养基适于分离异养型共生固氮菌解析固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌， 甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物，由此推出该培养基适于分离异养型的自生固氮菌；乙培养基中不含有机碳源，所以可用来分离培养自养型的自生固氮菌。答案B7分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是 ()加尿素不加尿素加琼脂糖不加琼脂糖加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸盐不加硝酸盐ABC D解析分离土壤中分解尿素的细菌，培养基中要有尿素、琼脂糖、葡萄糖，尿素给分解尿素的细菌提供氮源，不加硝酸盐。答案C8下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是()A利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数B接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落C以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少解析接种划线可以将菌体分散，最后得到单个菌体细胞，经过培养可以得到单个菌落；用稀释涂布平板法可以分离微生物也可以对微生物进行计数；在泡菜的腌制过程中，开始亚硝酸盐含量增加，10天后含量开始下降；以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌。答案A二、非选择题9从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样富集培养纯种分离性能测定。(1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从_环境采集。(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择_的培养基，并在_条件下培养。(3)下面两组图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。获得图A效果的接种方法是_，获得图B效果的接种方法是_。(4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行_，接种前要进行_，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在_条件下进行。解析噬盐菌的菌样应从高盐环境采集。微生物产生淀粉酶说明其碳源是淀粉，应选择以淀粉为唯一碳源的培养基，并在高温条件下培养。图A菌落分布较均匀，接种方法是稀释涂布平板法，图B菌落集中呈线状，接种方法是平板划线法。配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整pH，接种前要进行高压蒸汽灭菌，在实验中要注意在无菌条件下进行。答案(1)海滩等高盐(2)以淀粉为唯一碳源高温(3)稀释涂布平板法平板划线法(4)pH调整高压蒸汽灭菌无菌10下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基配方。请回答：试剂牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂水用量5 g10 g5 g20 g1 000 mL(1)培养基的类型有很多，但培养基中一般都含有水、碳源、_和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是_。培养基配制完成以后，一般还要调节pH，并对培养基进行_处理。该培养基从物理性质上分类属于_。(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是_和_。(3)假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是什么？(列举两项)解析培养基中都应含有水、无机盐、碳源、氮源。配制培养基时加入了琼脂，因此该培养基属于固体培养基。培养基配制完成后要调pH和灭菌。牛肉膏、蛋白胨中含碳元素，可作为有机碳源。分离纯化微生物一般用平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法中每次划线前都要将接种环灼烧灭菌，以杀死上次划线时接种环上残留的菌种；采用稀释涂布平板法时稀释度要足够高，否则会使微生物不能分散成单个细胞。答案(1)氮源牛肉膏和蛋白胨灭菌固体培养基(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，划完第一次没有灭菌即接着划第二次；培养过程中灭菌不严格，受到了其他微生物的污染。(任选两个)11现在大力提倡无纸化办公，但是每年仍然不可避免地产生大量的废纸。废纸的主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源乙醇。如图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工艺流程，请回答相关问题： (1)自然界中环节需要的微生物大多分布在_的环境中。将从土壤中获得的微生物培养在以_为唯一碳源、并加入_的培养基上，筛选周围有_的菌落。(2)在如上所述的筛选过程中获得了三个菌落，对它们分别培养，并完成环节，且三种等量酶液中酶的浓度相同，则你认为三种酶液的活性_(一定相同、不一定相同、一定不同)，可以通过_进行定量测定。(3)根据测定结果，环节常选择木霉，则中获得的酶是_酶。(4)生产中可以满足环节的常见菌种是_，为了确保获得产物乙醇，环节要注意_。(5)该技术虽然有广阔的前景，但存在酶的成本高等问题，为了降低成本可利用_等技术使酶能够重复利用。解析(1)富含纤维素的土壤中，含有大量以纤维素为碳源的纤维素分解菌。刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素分解后，复合物无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，通过此方法来筛选纤维素分解菌。(2)酶液中蛋白质的浓度相同，酶的活性不一定相同，可通过分解纤维素后所产生的葡萄糖量是否相等来鉴定其活性是否相同。(3)木霉能产生纤维素酶，可以将纤维素分解。(4)在酒精发酵中常用的微生物是酵母菌，在接种过程中一定要避免杂菌污染。乙醇是酵母菌无氧发酵的产物，发酵过程中一定要保持无氧的环境。(5)可通过固定化酶技术使酶能够反复利用来降低酶的成本。答案(1)富含纤维素(其他答案合理也可，如落叶较多等) 纤维素刚果红透明圈(2)不一定相同 对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖(3)纤维素(4)酵母菌发酵装置的密闭性(或保证无氧条件等)(5)固定化酶12请回答下列与大肠杆菌有关的问题。(1)从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于_；它的同化作用类型是_。(2)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。成 分含 量蛋白胨10.0 g乳糖5.0 g蔗糖5.0 gK2HPO42.0 g显色剂0.2 g琼脂12.0 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL，根据用途划分该培养基属于_培养基(选择、鉴别)。该培养基中的碳源是_。(3)培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和_。为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行_。(4)现有一升水样，用无菌吸管吸取1 mL水样至盛有9 mL无菌水的试管中，依次稀释103稀释度。各取0.1 mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为_。(5)以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是_。A制作果酒 B由果酒制作果醋C制作泡菜 D制作腐乳(6)利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入_。解析(1)大肠杆菌不能制造有机物，必须以现成的有机物来合成组成自身的物质，属于异养型生物，在生态系统中主要分解有机物，属于分解者。(2)根据表中培养基的组成可看出，该培养基中的碳源是乳糖、蔗糖(蛋白胨)，由于在培养基中添加了显色剂，可判断此培养基为鉴别培养基。(3)培养大肠杆菌等微生物时，常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行灭菌。(4)根据公式计算：每升原水样中大肠杆菌数(555657)30.11031035.6108。(5)制作果酒用到的微生物是酵母菌，是真核生物；制作果醋和制作泡菜分别用的微生物是醋酸菌和乳酸菌，二者都是原核生物；制作腐乳用到的微生物是霉菌，属于真核生物；而大肠杆菌属于原核生物。(6)植物组织培养与微生物培养明显不同的就是，组织培养的培养基中还需要加入植物激素，主要是生长素和细胞分裂素，作用是诱导根、芽的分化。答案(1)分解者异养型(2)鉴别乳糖、蔗糖(蛋白胨)(3)稀释涂布平板法灭菌(4)5.6108(5)B、C(6)植物激素(或生长素和细胞分裂素)13植物的秸秆、枝叶等纤维物质是地球上最多的可再生资源，以纤维素类物质生成燃料乙醇的研究越来越受重视。纤维素酶糖化法是目前常用的方法，其操作过程如图所示：(1)该方法中，微生物X与微生物Y不同，微生物Y是_，若从土壤中获得微生物X，请写出分离的流程图。为了鉴别微生物X，培养基的成分为CMCNa、酵母膏、KH2PO4、琼脂、土豆汁等；在该培养基中，CMCNa的作用是_。(2)若经选择，微生物X为木霉，则其内分解纤维素的酶至少包括_三种组分，这三种酶协同作用，将纤维素分解为葡萄糖。(3)在操作过程中，过程需_以保证乙醇的产生。(4)操作发现，糖液浓度过高时，葡萄糖的产生会受到抑制，其原因是_。解析微生物Y能发酵糖液产生乙醇，故微生物Y是酵母菌。鉴别纤维素分解菌的培养基中，CMCNa能被C