高考二轮复习 专题九 第1讲 基因工程、细胞工程课件 新人教版.ppt

专题九现代生物科技专题第1讲基因工程 细胞工程 一 基因工程 1 基因工程的工具 1 写出a b过程所需的工具酶 a b 2 质粒载体的基本结构 存在于复制区内 鉴定与筛选重组dna分子 便于外源dna分子的插入 限制酶 限制酶 dna连接酶 复制原点 标记基因 限制酶切割位点 2 基因工程的操作步骤 1 a过程 目的基因的获取 pcr技术扩增 2 b过程 基因表达载体的构建 启动转录 控制需要的特定性状 终止转录 筛选重组细胞 常用方法 基因表达载体的组成 从基因文库中获取 化学方法人工合成 启动子 目的基因 终止子 标记基因 3 c过程 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法 花粉管通道法 基因枪法 4 目的基因的检测与鉴定 分子检测 分子杂交技术 个体生物学水平的鉴定 做抗虫或抗病的接种实验等 常用方法 常用方法 抗原 抗体检测 3 基因工程的应用 提高动物生长速度 改善畜产品的品质 用转基因动物生产药物 用转基因动物作器官移植的供体 抗虫转基因植物 抗病转基因植物 抗逆转基因植物 利用转基因改良植物的品质 1 动物基因工程应用 2 植物基因工程的应用 二 植物组织培养与动物细胞培养的比较 细胞的全能性 细胞增殖 动物血清 脱分化 原代培养 生长素 细胞分裂素 胰蛋白酶 抗生素 co2 作物脱毒 单倍体育种 三 植物体细胞杂交和动物细胞融合 1 若该图为植物体细胞杂交示意图 1 原生质体的制备 a b细胞应用酶解法去除 这种酶是 由此生成的a细胞和b细胞称为原生质体 2 促融方法 过程中 常用的化学试剂是 3 新细胞壁的形成 过程形成的d细胞具有一定的形状 该过程与细胞中的 密切相关 4 杂种植株的培育 利用 技术培养杂种植株依据的原理是 所得杂种植株 可育 或 不可育 细胞壁 纤维素酶和果胶酶 聚乙二醇 高尔基体 植物组织培养 细胞的全能性 可育 2 若该图为动物细胞融合示意图 1 促融方法 与植物体细胞杂交相比 过程中特有的方法是 处理 2 原理 过程的完成依赖于 3 应用 若a细胞为骨髓瘤细胞 b细胞为效应b细胞 那么d细胞称为 细胞 由d细胞连续分裂产生大量细胞的过程 称为 这种细胞既能无限繁殖 又能产生 灭活病毒 细胞膜的流动性 杂交瘤 克隆 单一抗 体 3 若该图为体细胞核移植过程示意图 假设c细胞的细胞核来自于a细胞 1 受体细胞 b细胞 的选择理由 第一 营养物质丰富 能满足早期胚胎发育的需要 第二 体积较大 易于操作 第三 含有使已分化的细胞核恢复分裂能力的物质 2 克隆动物的性状 通过该过程克隆的动物主要性状由 决定 a细胞 1 2013广东高考 t3a 蛋白质工程的第一步应是合成编码目的肽的dna片段 分析 蛋白质工程的第一步应是依据人们所需要的蛋白质的功能设计多肽的分子结构 2 2013浙江高考 t6b 实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程中 对皮肤组织可用胰蛋白酶消化 分析 动物细胞培养过程中 用胰蛋白酶消化组织 使其分散为单个细胞 便于培养 3 2012浙江高考 t6d 将目的基因b直接导入大肠杆菌 然后感染并转入玫瑰细胞 分析 目的基因必须经构建基因表达载体 才能导入受体细胞 否则不能正常表达 4 2012广东高考 t2a 培养草莓脱毒苗所采用的主要技术是组织培养 分析 植物的茎尖一般没有病毒感染 因此可以通过组织培养技术培养茎尖细胞以获得脱毒苗 5 2011浙江高考 t6b 每个重组质粒中至少含有一个限制性核酸内切酶识别位点 分析 质粒作为载体的条件之一就是应含有一至多个限制酶切点 以便于插入目的基因 6 2011四川高考 t5d 应用dna探针技术 可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达 分析 应用dna探针技术 可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其是否转录 但不能检测其是否表达 7 2010江苏高考 t24c 大规模栽培组织培养苗 获取药用成分 分析 植物组织培养技术可以不受季节限制 通过大量培养试管苗实现快速繁殖 可获取药用成分 8 2010浙江高考 t4a 培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞 分析 保留接触抑制的细胞在相互接触时发生接触抑制 不再继续分裂 不会形成多层细胞 热点考向1基因工程的工具及操作过程 典例1 肺细胞中的let 7基因表达减弱 癌基因ras表达增强 会引发肺癌 研究人员利用基因工程技术将let 7基因导入肺癌细胞实现表达增强后 发现肺癌细胞的增殖受到抑制 该基因工程技术基本流程如图1 1 进行过程 时 需要用到等工具酶 2 研究发现 let 7基因能影响癌基因ras的表达 其影响机理如图2 据图分析 可从细胞中提取进行分子杂交 以直接检测1et 7基因是否转录 肺癌细胞增殖受到抑制 可能是由于细胞中 rasmrna ras蛋白 含量减少引起的 3 进行过程 时 需用酶处理贴附在培养皿壁上的细胞 以利于细胞培养 过程常用的方法是 解题探究 1 反转录法合成目的基因的条件 需要的酶 模板 原料 提示 反转录酶 mrna 脱氧核苷酸 2 目的基因的检测与鉴定 检测目的基因是否导入受体细胞的方法 检测目的基因是否转录所使用的基因探针是什么 提示 dna分子杂交技术 基因探针为放射性同位素或荧光标记的目的基因单链 解析 1 构建重组载体时 应用限制性核酸内切酶切开载体并插入目的基因 再用dna连接酶连接为重组载体 2 检测目的基因是否转录 可以从细胞中提取mirna 与基因探针进行分子杂交 let 7基因表达增强 会使ras蛋白翻译受阻 ras蛋白含量减少 使肺癌细胞增殖受到抑制 3 进行细胞培养时 需要用胰蛋白酶处理贴附在培养皿壁上的细胞 将目的基因导入动物细胞常用显微注射法 答案 1 限制性核酸内切酶 dna连接酶 2 mirnaras蛋白 3 胰蛋白显微注射法 总结提升 目的基因的检测与鉴定方法 变式训练 2013 南通模拟 科研人员以抗四环素基因为标记基因 通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的 珠蛋白 治疗鼠的镰刀型细胞贫血症 下列相关实验设计中 不合理的是 a 利用小鼠dna分子通过pcr技术克隆出 珠蛋白基因的编码序列b 用编码序列加启动子 抗四环素基因等元件来构建表达载体c 用ca2 处理大肠杆菌后 将表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中d 用含有四环素的培养基筛选出已经导入 珠蛋白编码序列的大肠杆菌 解析 选c 本题考查基因工程的基本操作程序中的相关知识 通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的 珠蛋白的实验中 可通过pcr技术从小鼠的dna分子中获取目的基因 构建表达载体后 导入大肠杆菌 因为实验以抗四环素基因为标记基因 如果受体大肠杆菌本身就具有四环素抗性 将无法检测大肠杆菌是否获取目的基因 热点考向2基因工程的应用 典例2 基因敲除是根据dna重组原理发展起来的一门新兴技术 通常用设计好的dna片段替代动物细胞内的基因片段 从而达到基因敲除的目的 运用基因敲除技术构建基因敲除动物模型是研究基因功能中较为普遍的一种方法 其基本原理如图所示 请回答下列问题 1 在将目的基因导入受体细胞前 需要构建一个基因表达载体 一个理想的基因表达载体 通常由启动子 终止子 目的基因和等组成 2 如果要获得一只含目的基因的小鼠 则选择的受体细胞通常为 3 上述途径所获得的动物 其后代并非每一个个体都含目的基因 原因是 4 假设通过基因敲除构建了一个非球形红细胞型贫血 型 模型动物 该动物因丙酮酸激酶缺陷或葡萄糖 6 磷酸脱氢酶 g 6 pd 缺陷 使红细胞膜变化引起红细胞自溶现象 但向该动物注射atp后 自溶现象可明显降低 由此可表明 基因对生物性状的控制方式之一是 5 某实验小组向正常小鼠胚胎细胞内导入某 x基因 后 发现靶基因能正常转录形成mrna 但细胞内却不再合成相应蛋白质 其原因最可能是 解题探究 1 等位基因概念的理解 等位基因的根本区别 等位基因产生的根本原因 等位基因位于 提示 脱氧核苷酸排列顺序不同 基因突变 同源染色体的同一位置上 2 理解基因敲除 提示 基因重组 用同源目的基因代替靶基因 研究基因功能 解析 1 一个理想的基因表达载体 通常由启动子 终止子 目的基因和标记基因等组成 2 动物细胞中受精卵的全能性最高 因此常被用作基因表达载体的受体细胞 3 转基因动物为杂合子 在形成生殖细胞时等位基因发生分离 因此有的配子中含目的基因 有的配子中不含目的基因 4 从题干信息中可看出 该基因通过控制酶的合成来控制代谢过程 进而控制生物性状 5 靶基因能正常转录形成mrna 但细胞内却不能合成相应蛋白质 说明转录出来的mrna不能作为模板合成蛋白质 该情况发生在 x基因 导入小鼠胚胎细胞内之后 因此最可能的原因是 x基因 转录出来的mrna与靶基因转录出来的mrna形成了杂交分子 从而抑制其控制合成相应的酶 答案 1 标记基因 2 受精卵 3 转基因动物为杂合子 在形成生殖细胞时等位基因发生分离 4 基因通过控制酶的合成来控制代谢过程 进而控制生物性状 5 x基因 转录形成的mrna与靶基因控制合成的mrna杂交 抑制其控制合成相应的酶 蛋白质 或抑制了目的基因的翻译过程 总结提升 基因工程应用成果误区分析 1 抗虫植物不等于抗病植物 植物病害由病菌或病毒引起 抗虫植物能减少害虫的取食 但不能抵抗病菌或病毒的感染 2 抗虫植物仍需使用一定量农药 抗虫植物一般只针对某种害虫 仍需使用一定量农药 以防止其他害虫的影响 3 抗虫植物不是一劳永逸 害虫会产生针对抗虫植物的抗性 4 乳腺生物反应器 目的基因在转基因动物的所有细胞中均存在 只是在乳腺细胞中特异性表达 只能通过雌性动物生产药物 而膀胱生物反应器则可通过雌雄动物生产 变式训练 组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造 下图是天然土壤农杆菌ti质粒结构示意图 标示了部分基因及部分限制性核酸内切酶作用位点 据图分析正确的是 a 该质粒可以用于转基因动物的培养b 若保证t dna进入水稻细胞后不引起细胞的无限分裂和生长 可以用限制酶 处理c 图中的终止子是终止密码d 用限制酶 和dna连接酶改造后形成的质粒 无法被限制酶 切割 解析 选b 土壤农杆菌可以侵染植物 但不能侵染动物 使用限制酶 处理后 质粒中不再含有控制合成吲哚乙酸和细胞分裂素的基因 不会引起受体细胞的无限分裂和生长 终止密码位于mrna中 质粒的化学成分为dna 用限制酶 和dna连接酶改造后形成的质粒 仍含有一个限制酶 的切点 热点考向3植物细胞工程 典例3 2013 天津高考 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病 野生黑芥具有黑腐病的抗性基因 用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化 并丧失再生能力 再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合 以获得抗黑腐病杂种植株 流程如下图 据图回答下列问题 1 过程 所需的酶是 2 过程 后 在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的 存在 这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志 3 原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压 其作用是 原生质体经过再生 进而分裂和脱分化形成愈伤组织 4 若分析再生植株的染色体变异类型 应剪取再生植株和 植株的根尖 通过 染色和制片等过程制成装片 然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目 5 采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组dna进行pcr扩增 得到两亲本的差异性条带 可用于杂种植株的鉴定 下图是用该引物对双亲及再生植株1 4进行pcr扩增的结果 据图判断 再生植株1 4中一定是杂种植株的有 6 对杂种植株进行接种实验 可筛选出具有高抗性的杂种植株 解题探究 1 细胞壁的成分和作用 植物细胞壁的主要成分 制备原生质体利用酶的性 植物细胞壁的作用 提示 纤维素果胶专一 支持保护 2 染色体观察 能否在显微镜下清晰观察到叶肉细胞的染色体 为什么 观察染色体的实验中常用的染色剂有哪些 属于染色剂 提示 不能 叶肉细胞不再进行分裂 染色体为细丝状 不容易观察 龙胆紫溶液 醋酸洋红液碱性 解析 本题综合考查了植物细胞工程 细胞分裂装片的制作观察 pcr图谱的识别等相关内容 同时也考查了学生识图获取信息的能力 1 过程 表示原生质体的制备 要用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁 2 用于融合的两个细胞 一个是黑芥苗的叶肉细胞 一个是花椰菜的根细胞 其中供体细胞特有的结构是叶绿体 可通过观察叶绿体的有无作为初步筛选杂种细胞的标志 3 原生质体没有细胞壁的保护 需要加入适宜浓度的甘露醇以保证渗透压的稳定 避免原生质体吸水或失水破坏原生质体的完整性 原生质体通过细胞壁再生形成杂种细胞 进而形成愈伤组织 4 分析再生植株染色体变异类型 需要制片观察再生植株细胞染色体和黑芥苗与花椰菜细胞中的染色体 制作装片的基本程序是解离 漂洗 染色 制片 5 根据图谱 花椰菜含有碱基对为300和600的dna片段 黑芥含有碱基对为1000 1300和1500的dna片段 再生植株3只含有长度为300和600的片段 与花椰菜一致 1 2 4既含有花椰菜dna片段 又含有黑芥dna片段 为杂种植株 6 对杂种植株接种黑腐病菌 能正常生长的即为具有高抗性的杂种植株 答案 1 纤维素酶和果胶酶 2 叶绿体 3 保持原生质体完整性细胞壁 4 双亲 或花椰菜和黑芥 解离漂洗 5 1 2 4 6 黑腐病菌 总结提升 细胞观察易混点总结 1 破坏细胞壁的方法 观察有丝分裂 使用15 的盐酸处理3 5分钟 使细胞分散开 植物体细胞杂交 用纤维素酶和果胶酶处理 获得原生质体 2 观察染色体的方法 选材 应选择分生组织细胞 高度分化的细胞染色体呈细丝状 观察不到染色体 处理步骤 均需经解离 漂洗 染色 制片等 且各步骤顺序不能调换 与观察细胞中dna rna的分布相似 观察结果 细胞均为死细胞 解离液和染色剂对细胞均有杀伤作用 变式训练 有关植物组织培养过程中的细胞脱分化的说法 不正确的是 a 已经分化的细胞失去特有的结构和功能而转变成未分化的细胞的过程b 已经分化的细胞转变成为具有分生能力的薄壁细胞 进而形成植物的愈伤组织的过程c 离体的植物组织在一定的培养条件下分化出根和芽的过程d 离体的植物组织在脱分化形成愈伤组织的过程中必须经过有关激素的诱导 解析 选c 离体的植物组织在一定的培养条件下 先脱分化形成植物的愈伤组织 然后再分化出根和芽 形成完整的小植株 而分化出根和芽的过程属于再分化 热点考向4动物细胞工程 典例4 动物细胞体外培养时 通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质 如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果 从该图提供的信息获得的结论 不正确的 a 正常细胞与癌细胞的增殖速率相同b 有无血清对正常细胞培养的影响不同c 培养基中补充血清有助于正常细胞的培养d 培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大 解题探究 1 曲线分析 若研究有无血清对癌细胞培养的影响 应分析哪两条曲线 提示 a b两条曲线 若研究有无血清对正常细胞培养的影响 应分析哪两条曲线 提示 c d两条曲线 若研究无血清对正常细胞与癌细胞的影响 应分析哪两条曲线 提示 b d两条曲线 2 正常细胞与癌细胞的区别 癌细胞中数目较多的细胞器 癌细胞能无限增殖的原因 提示 线粒体 核糖体 癌细胞表面糖蛋白减少 无接触抑制现象 解析 选a 动物细胞培养时通常要在培养基中加入血清 血浆等物质 从图示中可看出癌细胞与正常细胞的增殖速率不同 有血清时正常细胞增殖快 而有无血清对癌细胞的培养影响不大 总结提升 动物细胞培养的特殊条件 1 胰蛋白酶的用法 首先用胰蛋白酶处理幼龄动物的器官或组织 以制备单细胞悬液 培养过程中细胞发生接触抑制时 同样需要用胰蛋白酶使细胞分散开 2 避免杂菌污染的措施 培养液灭菌处理 加入抗生素 定期更换培养液 3 特殊的营养条件 液体培养基 加入动物血清 通入氧气以满足代谢的需要 通入二氧化碳以维持培养液的ph 变式训练 用动植物成体的体细胞进行离体培养 下列叙述正确的是 a 都需要将组织细胞分散为单个细胞b 都须用液体培养基c 都要在无菌条件下进行d 都可体现细胞的全能性 解析 选c 植物组织培养用固体培养基 可以直接培养离体的植物器官 组织或细胞 动物细胞培养必须分散为单个细胞 植物组织培养可得到完整的植物体 体现了细胞的全能性 动物细胞培养获得的是动物细胞或代谢产物 未体现细胞的全能性 植物组织培养和动物细胞培养均需要在无菌条件下进行 蛋白质工程 典例 如图为蛋白质工程操作的基本思路 请据图回答下列问题 1 蛋白质的功能是由其结构决定的 直接决定蛋白质结构多样性的因素有 从根本上说 蛋白质的结构是由决定的 2 通过 过程推测的mrna中的碱基序列是否是唯一的 为什么 3 过程发生的场所分别是 4 蛋白质工程中的目的基因一般通过获得 解题指南 解答本题的关键点是 1 依据题图内容明确蛋白质工程的基本操作流程 2 熟悉细胞的物质和结构基础以及中心法则相关知识 解析 1 蛋白质的结构多样性由组成蛋白质的氨基酸的种类 数目 排列顺序和肽链的空间结构直接决定 从根本上说 蛋白质的结构是由基因 dna 决定的 2 由于一种氨基酸可能对应多种密码子 根据蛋白质的氨基酸序列推测出的mrna中的碱基序列可能有多种 3 肽链的合成场所为核糖体 在内质网和高尔基体中加工成具有一定空间结构的蛋白质 4 蛋白质工程中的目的基因的碱基序列已知 可以通过dna合成仪进行人工合成 答案 1 氨基酸的种类 数目 排列顺序和肽链的空间结构基因 dna 2 不是 因为一种氨基酸可能对应多种密码子 3 核糖体内质网和高尔基体 4 人工合成 总结提升 蛋白质工程与基因工程的比较 变式训练 将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞 可以提高玉米中的赖氨酸含量 更换赖氨酸形成过程中的天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的个别氨基酸 使两种酶的活性提高 也可以提高玉米中的赖氨酸含量 以上两种技术分别属于 a 基因工程基因工程b 蛋白质工程蛋白质工程c 基因工程蛋白质工程d 蛋白质工程基因工程 解析 选c 富含赖氨酸的蛋白质是自然界中已有的蛋白质 基因工程只是把该蛋白质基因从一种生物转入玉米细胞内 并使之合成该蛋白质 更换赖氨酸形成过程中的天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的个别氨基酸 是对自然界已有的蛋白质进行改造 属于蛋白质工程 限制性核酸内切酶 载体 基因表达 载体的构建 目的基因 的检测与鉴定 核移植 植物组织 培养 细胞的全能性 脱分化 再分化 1 2013 茂名模拟 下列有关现代生物技术的叙述中 正确的是 a 限制性核酸内切酶 dna连接酶只存在于微生物中b 培养禽流感病毒时应选用无菌的牛肉汤c 基因工程 细胞工程都能克服远缘杂交不亲和的障碍d 体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体 解析 选c 限制性核酸内切酶 dna连接酶主要存在于微生物中 培养禽流感病毒时应选用活体细胞 基因工程 细胞工程都能克服远缘杂交不亲和的障碍 体细胞杂交技术可用于制备单克隆抗体 细胞核移植技术用于克隆动物 2 某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内 来表达产生生长激素 已知质粒中存在两个抗性基因 a是抗链霉素基因 b是抗氨苄青霉素基因 且目的基因要插入到基因b中 而大肠杆菌不带有任何抗性基因 下列叙述正确的是 a 导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒b rna聚合酶是构建该重组质粒必需的工具酶c 可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒d 在含氨苄青霉素培养基中不能生长 但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌 解析 选d 导入大肠杆菌的质粒可能为普通质粒或重组质粒 rna聚合酶用于转录过程 构建重组质粒需要用到限制性核酸内切酶和dna连接酶 目的基因插入抗氨苄青霉素基因中 使抗氨苄青霉素基因不能正常表达 含重组质粒的大肠杆菌不能在含氨苄青霉素的培养基上生长 3 2013 安徽高考 下图为通过dna分子杂交鉴定含有某特定dna的细菌克隆示意图 下列叙述正确的是 a 根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目b 外源dna必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制c 重组质粒与探针能进行分子杂交是因为dna分子脱氧核糖和磷酸交替连接d 放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定dna的细菌菌落位置 解析 选d 本题主要考查细菌培养和基因工程等有关知识 a项 用取样调查法根据培养皿中菌落数只能估算推测出含有的活菌实际数目 故错误 b项 外源dna必须位于重组质粒的启动子和终止子之间 是转录形成mrna的必要条件而不是复制的必要条件 故错误 c项 dna杂交是通过碱基互补配对完成的 故错误 d项 放射性标记的dna探针能与相应的dna杂交产生放射自显影 而只有特定的dna才与探针相结合 所以可以显示原培养皿中含有特定dna的细菌菌落位置 故正确 4 2013 江苏高考 某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子 为尽快推广种植 可应用多种技术获得大量优质苗 下列技术中不能选用的是 a 利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗b 采用花粉粒组织培养获得单倍体苗c 采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上d 采用幼叶 茎尖等部位的组织进行组织培养 解析 选b 本题考查个体克隆 无性繁殖 a项中 利用茎段扦插诱导生根技术不存在基因重组 可以保留该种珍稀花卉的优良性状 故正确 b项中 花粉粒是减数分裂产生的 经过组织培养形成的单倍体往往比较弱小且高度不育 不能保留该种珍稀花卉的优良性状 故错误 c项中 幼芽嫁接属于无性繁殖 可以保留该种珍稀花卉的优良性状 故正确 d项中 采用幼叶 茎尖等部位的组织进行组织培养 属于无性繁殖 可以保留该种珍稀花卉的优良性状 故正确 5 某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性 准备对某种动物的肝肿瘤细胞 甲 和正常肝细胞 乙 进行动物细胞培养 下列有关说法正确的是 a 在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时 可用胃蛋白酶处理b 细胞培养应在co2培养箱中进行 co2的作用是作为细胞代谢原料c 取正常肝细胞进行培养 细胞可无限增殖d 乙细胞在原代培养过程中 最终会出现停止增殖的现象 解析 选d 胃蛋白酶的最适ph大约为1 5 这一环境下细胞往往会受