AKTAbasic层析系统操作入门.doc

AKTAbasic层析系统操作入门为使用户在较短时间内尽快了解AKTA系列层析系统的功能和基本操作，特编写此操作入门。若需进一步了解详细内容，可参阅相应的组件、系统和软件说明书。一 系统组件及系统功能介绍 1 系统组件(1) 泵 Pump系统泵：(system pump)双泵（A、B泵），缓冲液及大体积样品输送。上样泵：(sample pump)样品输送。(2) 阀 Valve七通阀：(INV-907)两个。1. 上样阀(sample valve)，用于上样环切换 (load/inject) 和系统泵清洗时废液管 (waste) 切换； 2. 流向切换阀(flow direction valve)，用于层析柱流向切换 (downflow/upflow)。(4) 其它组件梯度混合器(mixer)、紫外检测仪(UV-900) 。2 系统功能系统功能由上述各组件相互配合，协同工作。(1) 缓冲液pH及梯度配制(a)梯度制备 (Gradient)A、B泵分别放置A、B液，由A、B泵的流速变化产生梯度。(2) 层析柱柱顶连接进样（七通）阀1号口，柱后连接紫外流通池。(3) 上样上样阀上样：将样品储存在样品环(Sample loop)，再由阀门切换将样品带入层析柱；系统泵上样：由系统泵将样品泵入层析柱。(4) 收集 (选购)收集器收集：设置收集体积(Frac size)，可自动按条件收集。二 开机程序1 开启电脑；2 打开AKTAbasic电源；3 启动UNICORN软件，输入用户名( User name) 和密码(Password)，默认用户(default) 密码为 default，待AKTA自检结束后，在system control窗口中显示系统准备就绪 （Instruments are ready) 。三 UUNICORN 软件简介Unicorn软件启动后共有四个窗口，其主要功能分别如下：Main: 1. 系统关闭(Quit Program)和退出、登陆(Log on/off)；2. 系统管理的设定，如用户名、密码、文件和使用权限等设定，系统日志等；3. 文件管理，如文件拷贝、移动、删除及压缩拷贝到磁盘等；4. 方法组编辑(MethodQueues)，将几个方法组合在一起，依次运行。Method Editor: 1.方法编辑；2.缓冲液配方设置（如配方修改或新增配方等）System Control: 1. 系统控制，可以手动控制(Manual)或运行方法(Run Method)； 2. 系统设置，包括Alarms/Special/Monitors/Curves； 3. 运行监测，有四个窗口：Run data/Curves/Flow scheme/Logbook。Evaluation: 结果处理，如积分(intergrate)、移动(shift)、 计算 (Subtract/Add/Multiply/Divide )、 平滑(Smooth)、截取(Cut Curve)、绘制(Creat Curve)、打印(Print)等在每个窗口中均有专家建议(Adviser)和帮助信息(Help)。四 系统控制 (System Contral)1 手动操作 (Manual)1.1 手动操作命令简介(1) Pump 泵Flow: 设定系统泵流速Gradient: 梯度设定PumpWashbasic: 系统泵清洗SystemWash: 使用缓冲液配置功能时，清洗系统(2) Flowpath 流路InjectionValve: 上样阀切换InjectionMark: 插入记号(3) Alarm & Mon 报警、检测WaveLength: 选择监测波长（1-3个）AutoZeroUV: 紫外吸收校零AveragingTime: 计算紫外吸收平均值的间隔时间SetCondScale 0%: 输入0%B时的电导 SetCondScale 100%: 输入100%B时的电导Alarm: 设置压力、紫外、电导、pH等报警限Watch: 监测参数设置，配合方法编辑中的watch功能(4) Frac 收集：（选购）Peak_Frac_Parameters: 计峰收集参数设定FracCollect_900: 分布收集每管体积Frac_Stop_900: 停止分别收集FeedTube: 换管收集Peak_Fraction: 计峰收集每管体积Peak_FracStop: 停止计峰收集OutletFraction: 出口阀每风分段收集每段体积等设置ResetFracNumber: 将当前分布收集的管号计为第一管(5) Others 其它Block: 调用程序块（只在方法运行时可用）Next_breakpoint: 跳到下一程序块（只在方法运行时可用）BufferPrepRecipe: 选择缓冲液配方Set_Mark: 插入提示语End_Timer: 设定结束运行时间Record on/off: 手动运行时开始或结束数据记录1.2 手动操作示例(1) 梯度洗脱设定流速、梯度、柱位、收集方法后即可运行。各命令无先后次序要求。(2) 自动配制缓冲pH及梯度必须最先设定缓冲液配方，然后设定其它参数如流速、pH、梯度等。(3) 记录图谱运行“Record on”命令，开始记录图谱，停止记录则运行“Record off”命令。 1.3 运行监测 （Monitoring a run)在系统运行过程中，系统控制窗口同步显示系统检测的数据及各部件当前状态，共有四个窗口，显示不同内容，可同时打开：Rundata: 运行参数Curves: 数据曲线Flow scheme: 系统流路图Logbook: 运行记录2 方法运行( Run Method)启动方式方法一：从主菜单(main)窗口方法(method)栏中，双击所选方法。方法二：从系统(system control)窗口中，依次点击File、 Run，选择运行方法。方法三：从系统(system control)窗口中，点击运行(Run)键，选择运行方法。五 方法编辑利用 Wizard 编程精灵进行六 数据处理 (Evaluation)1 数据浏览Evaluation窗口中可查看层析结果(Chromatogram_Layout)和程序档案(Documentation)等。2 数据加工最常用有曲线的积分、移动、计算（加减乘除）等：2.1 积分 (integrate)(1)选择IntegratePeak integrate或点击Peak integrate按钮，打开积分窗口；(2)在积分窗口中选择曲线、基线和积分表后，点OK键即可；(3)如果想优化积分结果，则可在积分窗口中选择基线设定、积分范围和参数。2.2 移动 (Shift)多条曲线重叠比较时，可用移动功能，使每条曲线错开适当距离，便于分析。移动可以左右移动，也可上下移动。2.3 相除计算 (Divide)将两条UV曲线相除，可判定吸收峰的纯度：如果一个峰的组分是单一的，则整个峰的相除结果应是恒定值。根据峰的相除值，还可判定峰的成分，因为不同物质的两个波长相除值应是不同的。(1)选择OperationDivide，打开Divide (相除)窗口；(2)选择两条相除的曲线，点OK键，即可；(3)若需优化计算结果，可设定极限范围(Threshold)，也可在计算前用相减(Subtract)功能，消除基线漂移的影响，还可用平滑(Smooth)功能，减小计算结果的波动。2.4 输出报告 (Report and Print)(1)打印当前窗口显示的内容，选择 FilePrint,出现打印窗口，选择打印格式(Print format)，点OK键，即可。(2)按报告形式打印，选择FileReport，再选择报告格式(Format)，点OK键，即