温度胁迫对植物膜系统的伤害2.doc

植物生理学综合性实验西南大学植物生理学综合设计实验论文题 目 温度胁迫对植物膜系统的伤害 姓 名 所在学院 专业班级 学 号 摘要: 本实验以小麦幼苗为实验材料，设置不同温度处理（高温、低温、常温），以室温为对照，初步探讨温度胁迫对小麦幼苗膜系统的伤害，实验结果表明：低温处理对膜系统的伤害率为15.38%，MDA含量为5.994umol/g；高温处理对膜系统的伤害率为15.04%，MDA含量为5.827 umol/g；常温处理对膜系统的伤害率为13.65%,MDA含量为3.407 umol/g。低、高温都对植物膜系统造成伤害，且低温伤害较大。关键词：温度胁迫 小麦幼苗 膜系统引言：植物在逆境下遭受伤害时，器官或细胞会产生一系列反应，如：发生细胞膜脂过氧化作用、细胞膜的差别透性改变或丧失等，而温度则是影响植物抗逆性的一个重要因素。小麦是我国重要的粮食作物之一，通过测定温度胁迫对小麦幼苗膜系统的伤害程度，可以为优化小麦生存环境和提高植物抗逆性提供参考。1 材料和方法1.1 实验材料 分别在高温、常温、低温条件下处理的小麦幼苗1.2 实验方法1.2.1 温度胁迫对植物的伤害程度采用电导率法进行测定(1) 处理 取常温下小麦幼苗30株，用镊子除去幼苗上残留的胚乳(种子),先用自来水冲洗，再用无离子水漂洗数次，以除去伤口上的物质。然后以10株为1组，共3组，分别用大头玻璃棒轻轻送入大试管中，再分别置于50的温箱。0-2的冰箱和室温下处理30分钟，取出后，在每个大试管中各加20mL去离子水，在室温下平衡20分钟，其间不断摇动，使外渗物均匀分布在溶液中。(2) 测定 平衡结束后有，摇匀，将电极插入溶液中（不要贴着材料和试管壁）测电导率。(3) 电导率的再测定 将装有样品的3支试管置于沸水浴煮沸10min，以杀死细胞，使其质膜差别透性丧失，再以蒸馏水补加到原来的数量(事前在试管上做好记号)，在室温下平衡20min。然后取出幼苗，摇匀后再测一次电导率。1.2.2 膜脂过氧化作用的水平以MDA含量来反映，采用丙二醛法测定(1) 丙二醛提取 称取去胚乳后洗干净的3种温度下处理过的小麦幼苗各1g，加入 2mL10TCA和少量石英砂，研磨至匀浆，加8mLTCA进一步研磨，匀浆以3000r/min离心10min，上清液为样品提取液.(2) 丙二醛的显色反应和测定 吸取离心的上清液4mL（对照加4mL蒸馏水），加入4mL0.6TBA溶液混匀，于沸水浴上反应15min，迅速于冰水中冷却后取上清液测定532nm、600nm和450nm波长下的消光度。2 结果分析2.1 利用实验中1.2.1所测得的数据和公式：伤害率=(处理电导率煮沸电导率)*100%电导率法测定活体植物根系抗逆性记载表处理电导率（S/cm）伤害率煮死前煮死后5037.625015.04038.925315.38室温36.326613.65结果分析与讨论：当细胞受到逆境条件（50和0）时,细胞膜差别透性就会改变或丧失，导致细胞内的物质（尤其是电解质）大量外渗，导致组织浸泡液的电导率增大，通过测定外液电导率的变化即可反映出质膜受害程度和植物抗性的强弱。从上表可以看出，50和0条件下的伤害率都比常温下高，0条件下伤害率最高。2.2 实验中测得数据(样品在450nm、532nm、600nm波长下的消光值和材料质量)T（）A600A532A450m（g）50C0.0590.1220.2090.992常温0.2350.2960.3990.9980C0.0930.1630.2701.001根据MDA计算公式MDA含量m（mol/g）=6.45（A532-A600）-0.56A450*提取液总体积（ml）*反应液总体积（ml）*1000/鲜材料质量（g）*参加反应的提取液体积（ml）高温（50）试材MDA含量=5.827umol/L低温（0）试材MDA含量=3.407umol/L常温试材MDA含量=5.994umol/L根据实验原理得知：高温和低温时的MDA含量均高于常温时的含量，对植物体均有伤害，低温对植物的伤害更大。3 讨论3 小结本实验通过电导率法测定活体植物根系的抗逆性和对植物细胞膜过氧化作用的测定两组实验来验证温度胁迫