（植物学专业论文）化学发光及共振光散射测定植物多胺的研究.pdf

摘要 多胺 精胺 亚精胺和腐胺 是生物体内广泛存在的直链脂肪族含氮化合物 在 植物的生长发育过程中起着重要作用 直接参与生物体内的多种生理活动 如核酸的 复制 转录和翻译 蛋白质的合成以及稳定膜的结构 是生物体生长和细胞代谢所必 需的痕量活性物质 生物体内多胺的含量与组织的病变 生长发育的水平有直接的关 系 因此发展选择性好 灵敏度高 经济实用的分析多胺的方法一直是人们关注和研 究的热点之一 化学发光分析因为仪器简单 灵敏度高等优点 成为近年来痕量分析十分重要的 领域 本文发现精胺与c u i i 离子结合生成的不饱和配合物对l u m i n n t 1 2 0 2 化学 发光反应具有强烈的催化作用 在一定范围内化学发光强度与精胺的浓度成正比 据 此机理 建立了精胺的液相化学发光测定法 该方法具有操作简单 线性范围宽 灵 敏度高等优点 在最佳实验条件下 测定精胺的线性范围为 1 o 1 0 一1 0 1 0 m o l l 检出限为4 0 t 0 一m o l l 对1 o 1 0 7m o l l 的精胺测定的相对标准偏差 r s d 为5 6 n 5 利用多胺络合溶解c u o h 2 形成多胺一c u 1 1 不饱和配合物的方法 建赢了崮 态c u o h 2 柱测定多胺的流动注射化学发光分析法 与柱后固定化多胺氧化酶化学发 光方法比较 本方法具有灵敏度高 分析速度快 操作简单的特点 测定精胺 亚精 胺和腐胺的检出限分别为0 1 7p m o l 0 3 8p m o l 0 4 4p m o l 对1 o 1 0 m o l l 的三种 多胺测定的r s d 分别为o 6 4 1 1 0 3 3 0 线性范围为 1 0 x 1 0 5 一l 0 1 o 7 m o i l 以甲醇一水 体积比为2 0 8 0 为流动相 用s y m m e t r yc 1 8 反相色谱柱 5g i n 3 9 1 5 0 m m 分离多胺 利用多胺通过c u 0 h 2 柱时会与c u 发生配位反应 生成多 胺 铜配合物 基于该配合物对l u m i n 0 1 h 2 0 2 化学发光反应的催化作用 建立了高效 液相色谱分离化学发光检测测定多胺的新方法 但是虽经多途径条件优化 本文未能 将精胺和亚精胺分开 腐胺有较好的分离 所以本方法可用于检测植物中腐胺的含量 及精胺和亚精胺的总量 检出限为2p m o l 该方法用于苹果和草莓中多胺的测定 取 得了较为满意的结果 此外 我们还利用共振光散射方法研究了多胺与d n a 的相互作用 结果发现精 胺与d n a 结合后能使共振光散射强度大为增强 其散射峰位于3 0 0n m 并且共振光 散射的强度与精胺的浓度呈现良好的线性关系 在测定精胺的线性范围内亚精胺和腐 胺不产生干扰 据此建立了选择性测定精胺的新方法 线性范围为 5 0 x 1 0 一1 0 x 1 0 巧 m o l l 检出限为7 4 x l f f 8m o l l 该方法不需要分离就可以直接溺定精胺的含量 大 大简化了操作过程 缩短了分析时间 该法应用于新几内亚风仙中精胺的测定 得到 满意结果 关键词 多胺 镉 化学发光 共振光散射 r l s d n a s t u d y o nd e t e r m i n a t i o no fp o l y a m i n e sw i t ht h ec h e m i l u m i n e s c e n c e a n dr e s o n a n c e l i g h ts c a t t e r i n gt e c h n i q u e w uq i n h u a s p e c i a l i z e ds u b j e c t b o t a n y d i r e c t e db yp r o f l iz h e n g p i n g p r o f f a n gz h e n g a b s t r a c t p o l y a m i n e s s p e r m i n e s p e r m i d i n e a n d p u t r e s c i n e a r es i m p l e l i n e a r a l i p h a h c c o m p o u n d sp r e s e n t i n gi na l m o s te v e r yc e l l w h i c hp l a yi m p o r t a n tb i o l o g i c a lr o l e si np l a n t g r o w t ha n dd e v e l o p m e n ta n dh a v eb e e ni m p l i c a t e di nm a n yp h y s i o l o g i c a lf u n c t i o n s i n c l u d i n g c e l ld i v i s i o na n d d i f f e r e n t i a t i o n n u c l e i ca c i d s r e p l i c a t i o n t r a n s c r i p t i o n t r a n s l a t i o n s y n t h e s i so fp r o t e i n sa n dm e m b r a n es t a b i l i t y m o r ea t t e n t i o nh a sb e e np a i dt o e x p l o r ea n a l y t i c a lm e t h o d o f p o l y a m i n e sf o rh i g hs e l e c t i v i t y s e n s i t i v i t y r e p e a t a b i l i t ya n d m i n i m u m r u n n i n g c o s t r e s e n ty e a r s t h ec h e m i l u m i n e s c e n c e c l t e c h n i q u eh a sb e c o m ea ne s s e n t i a lt o o li n r o u t i n et r a c ea n a l y s i sb e c a u s eo fi t sh i g hs e n s i t i v i t ya n ds i m p l ei n s t r u m e n t i nt h i st h e s i s i t i sf i r s t l yd i s c o v e r e dt h a ta nu n s a t u r a t e dc o m p l e xo fc u i i a n d p o l y a m i n e sh a sas f f o n g e r c a m l y t i ce f f e c to nl u m i n o l h 2 0 2c h e m i l u m i n e s c e n c er e a c t i o n b a s e do nt h i sm e c h a n i s m a n e wl i q u i d p h a s ea n a l y s i s m e t h o di se s t a b u s h e d b yu s i n g w e a kc h e m i l u m i n e s c e n c e a n a l y z e rf o rd e t e c t i o no fs p e r m i n e a tt h eo p t i m u mc o n d i t i o n s t h ed e t e c t i o nl i m i t i s 4 0 x 1 0 一m o l l t h er e l a t i v es t a n d a r dd e v i a t i o n r s d f o r1 o x l o 7m o l ls p e r m i n ei s5 6 n 5 a n dt h el i n e a rr a n g el o c a t ei n1 0 x 1 0 m o l l 一1 o x l o m o l l c o m p a r e dw i t h t h em e t h o do fd e f i v a t i z a t i o na n df l u o r e s c e n c ed e t e c t i o n t h i sm e t h o di sc h a r a c t e r i z e db y m o r e s e n s i t i v i t y s i m p l eo p e r a t i o na n d w i d e rl i n e a r r a n g e as o l i dc u o h 2c o l u m nc h e m i l u m i n e s c e n c em e t h o dc o m b i n e dw i t hf l o wi n j e c t i o n t e c h n o l o g y f i a c l w a s a l s oe s t a b l i s h e db a s e do nt h ec a t a l y t i ce f f e c to f p o l y a m i n e c u i i c o m p l e x o nl u m i n o l h 2 0 2c h e m i l u m i n e s c e n c er e a c t i o n i nw h i c ht i l eu n s a t u r a t e dc o m p l e x o fc u i i a n d p o l y a m i n e sw a sf o r m e dw h e np o l y a m i n e sf l o wt h r o u g ht h es o l i dc u o h 2 c o l u m n c o m p a r e dw i t ht h es t a b i l i z a t i o ne n z y m a t i cc h e m i l u m i n e s c e h c ed e t e c t i o ns y s t e m t h i sm e t h o dh a st h ea d v a n t a g eo f s i m p l ei n s t r u m e n t a t i o n t i m e s a v i n ga n dm o r es e n s i t i v i t y t h ed e t e c t i o nl i m i t so ft h i sn e wf i a c lm e t h o da r e0 1 7p r n o l 0 3 8p m o l 0 4 4 p m o l f o r s p e r m i n e s p e r m i d i n e p u t r e s c i n e r e s p e c t i v e l y t h er s d f o r1 o x l o m o l ls p e r m i n e s p e r m i d i n e p u t r e s c i n e a r e0 6 4 1 1 0 3 3 0 n 5 r e s p e c t i v e l y u s i n gc h 3 0 h h 2 0 2 0 8 0 v v a sm o b i l ep h a s ea n ds y m m e t r yc 18 5 岬 3 9 15 0 r a m c o l u m na sr e v e r s ep h a s eh p l cc o l u m n an e wh p l c c ld e t e c t o rw a sd e v e l o p e d t od e t e r m i n a t i o np o l y a m i n e s t h i sm e t h o ds h o w st h ea d v a n t a g e so fs i m p l ei n s t r u m e n t g o o ds t a b i l i t ya n dr e p e a t a b i l i t y b u tw e c a nn o ts e p a r a t es p e r m i n ea n ds p e r m i d i n eb yt h i s m e t h o d t h em e t h o dc o u l db eu s e dt oq u a n t i t a t et h ep u t r e s c i n e a n dt h et o t a la m o u n to f s p e r m i n ea n ds p e r m i d i n e t h ed e t e c t i o nl i m i ti s2p m o l a n dt h em e t h o d h a sb e e nu s e df o r d e t e r m i n a t i o no f p o l y a m i n e s i na p p l ea n d s t r a w b e r r ys a m p l e s w i t h s a t i s f a c t o r yr e s u l t s t na d d t i o n t h ei n t e r a c t i o no fp o l y a m i n e sa n dd n aw a sa l s os t u d i e db ym e a n so f r e s o n a n c el i g h ts c a t t e r i n gt e c h n i q u e i ti sf o u n dt h a tt h er e s o n a n c el i g h ts c a t t e r i n go fd n a c a nb eg r e a t l ys t r e n g t h e n e db y s p e r m i n e t h e r e s o n a n c e l i g h ts c a t t e r i n gp e a kl o c a t ea t3 0 0 a ma n dt h ef i g h ti n t e n s i f i e sa r ew e l lp r o p o r t i o n a lt ot h ec o n c e n t r a t i o no fs p e r m i n e i nt h e b a s eo fa b o v e e x p e r i m e n t a n e wm e t h o df o r t h ed e t e r m i n a t i o no fs p e r m i n ew i t hr e s o n a n c e l i g h ts c a r e r i n gt e c h n i q u ei sd e v e l o p e d t h ed e t e c t i o nl i m i t f o rt h i sm e t h o di s7 4 x 1 0 4 m o l la n dt h el i n e a rr a n g el o c a t ei n5 0 1 0 2m o l l n a o h 5 x l o 3m o l l a 1 o x l o 5 m o l f l c u i i 水溶液 蓄l 蓖 图2c a 汹p m 配合物催化l u m l o l 2 啦化学发光体系的化学发光动力学曲线 f i g 2c h e m i l u m i n e s c e n c ei n t e n s r y t i m ep r o f i l e sf o rc u i i s p e r m i n ec o m p l e x 1 u m l n 0 1 5 0 l1 6 8 4 1h a mt t o r i y a m am t s u k a g o s h ik d e t e m a i n a t i o no fas m a l la m o u n to fb i o l o g i c a l c o n s t i t u e n tb yu s eo fc h e m i l u m i n e s c e n c e i t h ef l o w i n j e c t i o no fp r o t e i n j b u l l c h e ms o ej i m 1 9 8 3 5 6 1 3 8 2 1 3 8 7 8 5 j l i z 只l i k a t o n g s ys t u d y o f t h e c a t a l y t i c e f f e c t o f c o p p e r i p r o t e i nc o m p l e x e s o nl u m i n o l h 2 0 2c h e m i l u m i n e s c e n c er e a c t i o na n di t sa n a l y t i c a l a p p l i c a t i o n 加 河北农业大学硕士学位论文 a n a ll e t t 1 9 9 9 3 2 5 9 0 1 9 1 3 8 6 l izp l i ka t o n gsy m i c r o d e t e r m i n a t i o no fp r o t e i nw i t i lt h e 1 10 一p h e n a n t h r o l i n e h 2 0 2 一c e t y l t r i m e t h y l a m m o n i u m b r o m i d e c u i i c h e m i l u m i n e s c e n c es y s t e m j jm i c r o c h e m 1 9 9 8 6 0 2 1 7 2 2 3 8 7 l 李永新 赵丹华 卓淑娟 等 鲁米诺一四磺基锰酞菁一过氧化氢化学发光体系在 蛋白质测定中的应用 j 分析化学 2 0 0 3 3 1 5 6 3 8 8 8 k o e m e fpj n i e m a nt a l u m i n o lc h e m i l u m i n e c e n c eh p l cd e t e c t o rf o ra m i n o a c i d sa n d o t h e r l i g a n d s j m i k r o c h i m a c t a 1 9 8 7 i i 7 9 9 0 8 9 jd o n a l dam n i e m a nta f l o wi n j e c f i o na n dl i q u i dc h r o m a t o g r a p h yd e t e c t o rf o r a m i n oa c i d sb a s e do nap o s t c o l u m nr e a c t i o nw i t hl u m i n o l j a n a lc h e m 1 9 8 5 5 7 1 9 3 6 1 9 4 2 9 0 j 李正平 章竹君 万秀琴 高效液相色谱化学发光检测法测定氨基酸 分析 化学 1 9 9 5 2 3 7 6 8 5 6 9 0 f 9 1 1 战兴兰 李国军 简述流动注射分析 j 中国国境卫生检疫杂质 1 9 9 4 1 7 3 1 0 6 1 0 7 9 2 乐健 刘文英 安登魁 流动注射分析法在生物样品分析中的应用咖 药学进展 1 9 9 6 2 9 2 7 3 7 8 9 3 郑晓红 流动注射分析技术的发展现状 j 仪器仪表与分析监测 2 0 0 2 l 1 5 9 4 z u iov b i r k sjw r e v e r s e dm i c e u a r m e d i a t e dl u m i n o lc h e m i l u m i n e s c e n c e d e t e c t i o no fi r o n i i 1 1 i c o m b i n e dw i t ho n l i n es o l v e n te x t r a c t i o nu s i n gq u i n o l i n 一8 一o l j a n a lc h e m 2 0 0 0 7 2 7 1 6 9 9 1 7 0 3 9 5 n o z a k io k a w a m o t oh d e t e r m i n a t i o no fh y d r o g e np e r o x i d e b ym i c r o f l o w i n j e c t i o n c h e m i l u m i n e s c e n c eu s i n gac o u p l e df l o wc e l lr e a c t o rc h e m i l u m i n o m e t e r j l u m i n e s c e n c e 2 0 0 0 1 5 3 1 3 7 1 4 2 9 6 if a nsh h a r tbtm c k e l v i eid d e t e r m i n a t i o no fh y d r o g e np e r o x i d ei nn a t u r a l w a t e r sb ys t o p p e d f l o wi n j e c t i o na n a l y s i sw i t hc h e m i l u m i n e s c e l l c ed e t e c t i o n j l a b o r a t o r yr o b o t i c sa n da u t o m a t i o n 2 0 0 0 1 2 3 1 4 9 1 5 6 9 7 s a f a v ia k a r i m ima f l o wi n j e c t i o nd e t e r m i n a t i o no fc a t i o n i cs u r f a c t a n t sb yu s i n g n b r o m o s u c c i n i m i d ea n dn c h l o r o s u c c i n i m i d ea sn o wo x i d i z i n ga g e n t sf o rl u m i n o l c h e m i l u m i n e s c e n c e j 1 a n a lc h i ma c t a 2 0 0 2 4 6 8 1 5 3 6 3 9 8 s a r i a h m e t o g l um w h e a t l e yra c a k i c ii e ta 1 f l o w i n j e c t i o na n a l y s i sf o r m o n i t o r i n ga n t i o x i d a me f f e c t so nl u m i n o lc h e m i l u m i n e s c e n c eo fr e a c t i v eo x y g e n s p e c i e s 明 a n a ll e a 2 0 0 3 3 6 4 7 4 9 7 6 5 9 9 j张文艳 周延秀 李峰 等 增强辣根过氧化物酶催化鲁米诺化学发光反应的 新型增强剂四苯硼钠 j 分析化学 1 9 9 8 2 6 1 1 0 0 1 0 2 1 0 0 r o n g e nh ah h o e t e l m a n srmw b u rap e ta 1 c h e m i l u m i n e s c e n c ea n d i m m u n o a s s a y s j 1 jp h a r mb i o m e da n a l 1 9 9 4 1 2 4 3 3 4 6 2 1 0 1 s m i t ht a p o l y a m i n e s j 1 a n nr e vp l a n tp h y s i o l 1 9 8 5 3 6 1 1 7 1 4 3 4 r 化学发光及共振光散射测定植物多胺的研究 1 0 2 jg a l s t o naw s a w h n e yrk p o l y a m i n e si np l a n tp h y s i o l o g y j p l a n tp h y s i o l 1 9 9 0 9 4 4 0 6 4 1 0 1 0 3 j m i n c h i nrf h a n a ugr r a p i da n ds i m p l et e c h n i q u ef o r t h eq u a n t i t i o no f p o l y a m i n e si nb i o l o g i c a ls a m p l e s j jl i qc h r o m a t o g r 1 9 8 4 7 1 3 2 6 0 5 2 6 1 0 1 1 0 4 1 章竹君 吕九如 张新荣 鲁米诺化学发光反应及其在分析化学中的应用 化学试剂 1 9 8 7 9 3 1 4 9 1 5 6 11 0 5 谢光华 一种高灵敏的液相色谱检测器一化学发光检测器 j 分毒厅仪器 1 9 8 8 1 1 7 1 0 6 l 周延秀 朱果逸 液相色谱一化学发光检测法的最新进展 j 色谱 1 9 9 7 1 5 4 2 9 6 3 0 0 1 0 7 1 武竞存 章竹君 吕九如 液相色谱化学发光检测法的新进展f j l 分析化学 1 9 9 4 2 2 3 9 6 4 0 5 1 1 0 8 杭州大学化学系分析化学教研室主编 分析化学手册 第二版 m 化学r 业 出版社 北京 l9 9 7 3 3 4 3 3 9 1 0 9 黄承志 李原芳 李念兵 等 耐尔蓝硫酸盐在核酸分子表面的长距组装及核 酸的三波长共振光散射测定 j 分析化学 1 9 9 9 2 7 1 1 1 2 4 1 1 2 4 7 1 1 0 a h m e do u a m e u ra t a j m i r r i a h iha p o l y a r r d n e d n ai n t e r a c t i o n jb i o l c h e m 2 0 0 4 2 7 9 4 0 4 2 0 4 1 4 2 0 5 4 l i lj 李原芳 黄承志 胡小莉 共振光散射技术的原理及其在生化研究和分析中的 应用 j 分析化学 1 9 9 8 2 6 1 2 1 5 0 8 1 5 1 5 fl12 1l i a n gh s h e n gxc j i a n gzl t h ep h o t o c h e m i c a ls t u d yo fh s aa n db s aw i t h r e s o n a n c es c a t t e r i n ga n df l u o r e s c e n c es p e c t r o s c o p y j c h i n e s ec h e m i c a ll e t t e r s 2 0 0 0 1 1 2 5 1 2 5 4 3 l jzp uka t o n gsy d e t e r m i n a t i o no fn u c l e i ca c i d si na c i d i cm e d i u mb y e n h a n c e dl i g h ts c a t t e r i n go f l a r g ep a r t i c l e s j t a l a n t a 2 0 0 0 5 1 1 6 3 7 0 11 4 p a r k a s hj r o b b l e ejh a g n e wj d e p o l a r i z e dr e s o n a n c el i g h ts c a t t e r i n gb y p o r p h y r i na n dc h l o m p h y uaa g g r e g a t e s j b i o p h y s i c a l 1 9 9 8 7 4 2 0 8 9 2 0 9 9 1 1 5 刘绍璞 刘忠芳 李明 离子缔合物二级散射光谱研究及其分析应用 j 化学 学报 1 9 9 5 5 3 1 1 7 8 1 1 8 4 11 6 c o l l i n g spj g i b b sej s t a r rte r e s o n a n c el i g h ts c a t t e r i n ga n di t sa p p l i c a t i o ni n d e t e r m i n i n gt h es i z e s h a p e a n da g g r e g a t i o nn u m b e rf o rs u p e r m o l e c u l a ra s s e m b l i e s o fc h r o m o p h o r e s j jp h y sc h e mb 1 9 9 9 1 0 3 4 0 8 4 7 4 8 4 8 1 河北农业大学硕士学位论文 在读期间发表的学术论文 1 吴秋华 李正平 方正 鲁米诺化学发光体系应用新进展 j 化学试剂 2 0 0 5 2 7 4 2 1 2 2 1 6 2 吴秋华 李正平 马晶军 等 鲁米诺化学发光测定精胺 j 河北农业大学 学报 自然科学版 2 0 0 4 2 7 6 1 1 2 1 1 5 3 吴秋华 李正平 方正 等 高效液相色谱紫外检测在多胺分析中的应用 j 1 河北大学学报 自然科学版 2 0 0 4 2 4 增刊 1 5 9 1 6 1 4 手春 吴秋华 杨丽华 等 手性酮催化的烯烃不对称环氧化反应 j 有机 化学 2 0 0 4 2 4 4 3 8 0 3 8 5 s c i 摘录 1 5 吴秋华 李正平 方正 高效液相色谱荧光榆测分析生物多胺 j 1 理化榆验 化学分册 已录用 i 6 马晶军 方正 吴秋华等h p l c 法测定芦荟体内芦荟苷 芦荟大黄素含量的研 究 j j 河北农业大学学报 自然科学版 2 0 0 5 2 8 2 5 7 6 0 7 j 吴秋华 李正平 方正 利用共振光散射技术研究d n a 与多胺的相互作用2 2 精胺的选择性测定 待发表 8 l iz h e n g p i n g w uq i u h u a e ta 1 s t u d yo l lc a t a l y t i ce f f e c to fc o p p e r i i a n d p o l y a m i n e sc o m p l e x o n l u m i n o l 3 a m i o p h t h a l h y d r a z i d e 一h 2 0 2 c h e m i l u m i n e s c e n c er e a c t i o na n di t sa n a l y t i c a la p p l i c a t i o n 待发表 第五 黪 捌 编瓣娄 特约顾目卢良恕王 主任委颤刘大群 健夏亨熹 副主任委搅马峙英孙建恒黄金祥 委员 以姓氏笔画为序 马文奇马峙英 王志王颧 王冬梅边秀举 孙建恒孙维连 刘盂军刘国振 宋克敏 李同洲 李存东 杨学举 张立峰 钟秀会 贾青 黄大庄 崔彦宏 滕桂法 许嗥 李建围 杜守军 杨建民 黄仁 韩会 魏建 马跃进 王志刚 申羁兴 划大群 刘树庆 谷子林 李雁呜 杨华生 杨敏生 周大迈 高宝嘉 桑润滋 黄金祥 董金皋 魏国树 主编刘大群 副主编马峙英孙建恒黄金祥 常务 v o l 2 72 0 0 i 盖9 5 9 年创刊 河地农业大学 糕会煳熙 学 星 强 民玉克英张曹贾 录玲魍 河北农业大学学报 女女 m m 女m k 雏潮与土壤肥豺g 葡备 姊 带带讳 摧斟 举艏 蹒 不同撼传类型玉米种子形态结构 发芽特性及才羁互关系的研究 一 王荣焕 刘建凤 丁民伟 等 1 菜园一l 各形态磷库的变化及空间分布 刘建玲 廖文华 张风华 等i 6 j 施肥对油菜产量及其硝酸盐含量的影响 李博文 谢建治 杨华 等 1 2 高寒半干旱地区马铃薯覆膜集肥土壤养分和酶活性动态变化研究 腐檀酸类肥料对银杏叶黄酮含量的影响 天鹰椒氮磷钾高产施肥模型研究 j k 婺鬻粪 程东娟 郭凤台 刘树庆 等 矩 杨云马 薛世川 杜会英 等 2 2 武占会 申书若 王惠英 等 2 d 早实核桃幼树树相指标及其调控的研究 张志华 郝荣庭 高仪 t e k 0 0 2 0 0 1 苹果果实若干性状的花粉直感规律研究 李保国 顾玉红 鄣素平 等 3 4 负载量对鸭梨果实内挥发性物质和氨基酸含量的影响 陈海江 徐继忠 王颉 彳一v 3 8 休瞩期杏花芽若干生理指标变化的研究 适二fa f i p 分析的核桃幼叶d n a 提取方法 温度对北海道黄杨叶片光系统1 1 功能的影胞 申海椿 陈海江 徐继忠 4 1 陈静 王文江 4 4 张卫华 梁海永 张方秋 4 8 大白菜部分单体雄配子发育的观察研究 张胜珍 申书兴 张成合 等 5 2 盐胁迫下钙对孳莓叶片月旨肪酸含量及组成的影响 李青云 葛会波 胡淑明 等 5 6 棉铃虫c y p a 家族基因片段克隆及序列分析 艾颖 邱星辉 何风琴 6 0 高产菊粉酶的黑曲霉菌株产酶酶系分析与研究 张瑞玲 贾英民 于宏伟 g 6 5 刺芹侧耳原生质体诱变育种初报 张渊 王谦 张筱梅 等 6 9 i 植物保护 a 1 s 中国马铃薯疮痂病研究初报 一 赵伟全 杨文香 刘大群 等 7 4 枯草芽孢杆菌b s 一2 0 8 和b s 一2 0 9 菌株在番葡盱面及土壤中定殖能力的研究 杜立新 冯书亮 曹克强 等 7 8 麦茬高度对除草剂控制杂草效果的影响 一 王秀 牛晓颖 8 3 中文核心期i 硼 全国高校优秀学报 囊爱黧 第2 7 卷第6 期 总第1l7 期 一一一一一 一一一 一一一一 耕地质量占补平衡评价方法探讨 以河北省霸州 市为例 农村詹民点城镇化 4 g 性评价方法研究 一 喾黼菌 薹繁 q 搿 崔邢涛 许馥 薛保民 等 8 8 j 张长春 陈英 许缘 等 9 3 不 剂擐柔嫩艾美耳球虫感染对雏鸡红细胞压积和逝沉值的影响 一 一 包永占 史万玉 秦建华 争 9 7 猪卵泡液和胎牛血清对猪小驻卵泡卯母细胞体外成熟的影响 4 卢晟盛 杨秀荥 声克炔 o j 萝出啦逝出 k 避 婺农业信息工程 镕 基于w e b 服务的农业专家系统集成方案研究 一线制技术在节水灌溉测控系统中的应用 啦龇j k 蚺龇始 基础科学i 币婚 节 牛莽搿 王明霞 蒋文科 郭卫 等 1 0 5 j 齐晓娜 钱东平 扬世风 1 0 8 鲁米诺化学发光测定精胺 吴秋华 李正平 马晶军 等 1 1 2 河北农业大学博士生导师简介 王志教授 固补自 2 0 0 4 年总目次 期刊基车参数1 c n l 3 1 0 7 6 s 1 9 5 9 b a 4 1 1 5 出 p t i 1 0 0 0 2 7 2 0 0 4 1 l 封二 2 5 3 3 0 4 第 卷卷终 第2 7 卷第6 期 2 0 0 单tt 川 河北农波 学学报 j o j r n a l 删 a g r i 5 l i k a 卜 髑之 h yo fi j 甄 i 盘奄缔哥 伯旧 15 7 3 2 0 0 4 0 6 0 n 2 7 瑚 鲁米诺化学发光测定精胺 美秋华2 李正平l 2 马晶譬 冯项1 方歪 c j7 叫一j e 农北大学生物无饥化学重点并骑室 河北保定邮10 01 2j 引e 犬学化学与环境科学学院 河北e 定0 7 1 0 h 摘g 铺与精胺形成的1 l 不饱和配合物对l u m 呱 一 化学发光体系确强烈的催化活性 据此罐立r 萄 随 趸敏的测定精胶的化学发光新方法 线址范潮蔓ft 1 一坞一m i 儿 检测隈为4 1 0 叫蚍且 辎对标麓赫蓐 为5 5 5 关键词 鲁米诺 化学发光 精胺 铜 扣图分类号 o6 5 7文献标识码 a d e t e r m i n a t i o ne fs p e r m i n eb yl m r d n o l c h e m i l u m i n e s e e u c ed e t e r m i n a t i o n w uq i u h u 才 l z h e n gp i n 9 1 m a 蛳g i u n l f e n gs h u 0 1 f a n gz h e n 9 k e yl 月b o r a t o r y fb k i n o r g a n i cc h e m s t r y a g r i c u h u r a 1 5 1 i v e r c i t ydh e b e i b a o d i n g0 7 1 0 0 1 二h 一 2c o l l e g eo fc h e m i s t r ya n de n v k o r a n e n t a 5 2 m c e u l l i v e r c i t ydi i d j e i d i n g0 7 1 0 0 1 c i f i n a a b s t l a c t as i t n p l ea n ds e n s i t i v ec h a n i l l u m i l m s c e n em a t h o df o rt h ed e t e r m i n a t i o no fs p e w e i t l cw d e v e l o p e d b a s e do nt h es p e r m i n e c o p p e r 1 1 v a b a t u r a t e dc o m p l e xf o t r n e db yc o p p e la n d c i m l l l e w h i c hh a das t r a n gc a t a l y t i ce f f e c to nt h ea h e m i l m n i a e s c e n e er e a c t i o nb e t w e e nt h ej u n j n o ia n d h y d r o g e np e r o x i d e t h ed e t e c t i o nl i n mi s4 t o m o l lf o r8 p e t r n i n ea n dt h el i n e a rm j 壮f n t c f d s f m1 0 t o1 0 5m o l lt h er e l a t i v es t a r t d a r d e v i a t i o no fs p e r m i n ew a 855 5 k e yw o r d s l u m i n o l c h e m i l u m i n e s c e n c e s p e m 1 i n e a t p e r 精胺是生物代谢过程中产生的生物活性物质 精胺的分析对研究生物代酗过程具有重要的意义 其检测方法主要有紫外检测 荧光检测 电化学梭溅和质潜检测 由于精胺无紫外可见暇收 叉没商枣诬髓 荧光 本身亦无电化学活性 所以人们普遍使用衍生 不汉增加r 分析时间 并且很容易产生二f 扰峰 丽质谮 检测出于设备昂贵应用尚不广泛 金属离子能催化过氧化氧氧化鲁米诺的化学发光反应 丽金属癌子r j 泠 多有机配体组成饱和配台物后 则会抻制该化学发光反应 笔者最新发现 铜 离子t j 精胶组咸水饱 和配位化合物时 对过氧化氢氧化鲁米诺的化学发光反应比铜 离子具有更高的催化活性 本缓验列 骖艟 化 i 应的反应机理进行了深人探讨 建立了静态化学发光分析精胺的新方法 该方法灵敏度商 操作简便 用 样量少 为生物多胺的测定开辟了新的途径 并为简便 高灵敏度的高效液相色潜化学发光捡溯器的研究攫 供r 重要依据 l 材料与方法 1 t 仪器和试剂 b p c i 微弱发光测量仪 中国科学院生物物理研究所 收稿日期 2 0 0 4 0 31 5 作者简介 哭秋华 1 9 6 9 一 女 河北保定人 在读顺士生工程师 主要从事化学发光分析方面的祥究 第6 期 尖秋4 f 等 鲁米诺化学发光测定精披 器求诺 l u m 讯 1 储备液 2 5 1 0 一n o l i l 准蕊称取i 1 0 7gl u m i n o 购自 受耍蛘失j 强i0g n q i 耀琳搿解后转入2 5 0n i l 容量瓶j i 爝匀 定客 艟复 放置 糖蜮 s 辩 麟备液 0 y i 一2 胍 j 准 确称取02 2g 精胺 购自s i g m a 公耐 用水溶解 定容二j1 0 0m 乙容量瓶 4 保存 牛吏用剐逐级稀释 c u 珀0 储备浪00 1 0 二tn l l 也 3 0 h 2 q 化学发光试剂 5 0 1 0 r n 洲i c u 当精胺的浓度小于i 1 0 n ji 4 时 化学发光强度随鞘脖浓度的增大而噌犬 锻凄 i i 5m l 删 化学发 z 强度随精胺浓度的增士粥城小 一 述结果表研c u i j s p 订1 形成的不饱和配合物z f 汜 发 光反应催化活性高于c u 本身 但q 一 1 i 弘n 移戚的 饱剃配合物却没有此催化活性 j 3 条件试验 2 3j 溶液p t 值的影响1 h 值是化学发光体系的 一十 驻要影响因索 试验结果如网 4 所汞 漆液一 值在 i 0 1 范削内 随