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文档简介
人用狂犬病疫苗 地鼠肾细胞 生产流程 生产流程 细胞制备病毒接种病毒收获病毒灭活合并 浓缩 纯化检定分装 及冻干 1 细胞制备 选用12 14日龄地鼠 无菌取肾 剪碎 经胰蛋白酶消化 分散细胞 接种培养瓶 用适宜的培养液进行培养 培养液为含适量灭活小牛血清和乳蛋白水解物的MEM 199或其他适宜培养液 2 病毒接种 接种狂犬病病毒 置适宜温度下培养一定时间后 弃去培养液 用PBS冲洗去除小牛血清 加入适量维持液 置33一35 继续培养 3 病毒收获 经培养适宜时间 收获病毒液 根据细胞生长情况 可多次收获病毒液 5 病毒灭活 病毒收获液按1 4000的比例加入甲醛 置适宜温度下一定时间内灭活病毒 6 合并 浓缩 纯化 同批细胞生产的多次病毒收获液可在严格无菌操作的条件下合并为一批 经超滤或其他适宜方法适当浓缩 经浓缩并检定合格的病毒液以柱色谱或其他适宜的方法纯化 纯化后加入适量人血自蛋白作为稳定剂及一定量硫柳汞作为防腐剂 即为原液 7 原液检定 半成品配制 检定 8 分装 及冻干 工业用冻干机进行冷冻干燥
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